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两种前处理方法对LC-MS/MS测定家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物基质效应的影响

分析测试学报 2011年第9期30卷 1006-1012页

作者：刘明艳姚志红张依戴毅秦子飞姚新生暨南大学药学院中药及天然药物研究所广东广州510632 中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

考察了两种前处理方法对采用液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS)测定家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物时基质效应的影响。家兔空白血清分别以乙酸乙酯液-液萃取和C18小柱固相萃取,提取前、后各自加入一定浓度的4种淫羊藿黄酮类化合物的混... 详细信息

考察了两种前处理方法对采用液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS)测定家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物时基质效应的影响。家兔空白血清分别以乙酸乙酯液-液萃取和C18小柱固相萃取,提取前、后各自加入一定浓度的4种淫羊藿黄酮类化合物的混合对照品溶液(淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅰ、淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿素),评价家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物的LC-MS/MS测定结果的绝对基质效应、提取回收率和方法过程效率。研究发现,以乙酸乙酯液-液萃取法进行样品前处理后,家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物的绝对基质效应大于100%,提取回收率和方法过程效率均较高且稳定;以C18小柱固相萃取法进行样品前处理后,家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物的绝对基质效应低于100%,提取回收率和方法过程效率均较低且不稳定。因此,采用乙酸乙酯液-液萃取法进行样品前处理,不仅可以增加LC-MS/MS测定家兔血清中淫羊藿黄酮类化合物的离子化效率,且对淫羊藿黄酮类化合物的提取回收率更高且稳定,适合作为样品前处理方法用于淫羊藿总黄酮苷在家兔体内的药代动力学研究。

关键词： LC-MS/MS 基质效应淫羊藿黄酮家兔血清液-液萃取法固相萃取法

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应用胚胎干细胞试验模型对碱性成纤维细胞生长因子发育毒性的初步评价

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中国药理学通报 2012年第3期28卷 347-351页

作者：许华邓淑琴何清苏本金江海香黄亚东暨南大学药学院广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632 医药生物技术研究开发中心广东广州510632

目的利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价bFGF的发育毒性。方法体外培养小鼠胚胎干细胞(ESC),通过形态学观察、碱性磷酸酶染色和RT-PCR方法进行ESC未分化鉴定;MTT法检测不同浓度bFGF对ESC和3T3细胞的毒性,RT-PCR半定量分析法检测b... 详细信息

目的利用小鼠胚胎干细胞试验(EST)模型,初步评价bFGF的发育毒性。方法体外培养小鼠胚胎干细胞(ESC),通过形态学观察、碱性磷酸酶染色和RT-PCR方法进行ESC未分化鉴定;MTT法检测不同浓度bFGF对ESC和3T3细胞的毒性,RT-PCR半定量分析法检测bFGF对未分化基因Sox-2表达的影响。结果 bFGF对ESC和3T3的半数抑制浓度和ESC的半数抑制分化浓度分别为IC50ESC=15.2 mg.L-1,IC50 3T3=24.2 mg.L-1,ID50 ESC=1.7 mg.L-1。结论 bFGF发育毒性的判定为弱胚胎毒性。

关键词：小鼠胚胎干细胞胚胎干细胞试验模型碱性成纤维细胞生长因子 Sox-2胚胎毒性发育毒性

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超高效液相色谱法同时测定肿节风中6个成分的含量

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分析测试学报 2016年第6期35卷 641-647页

作者：姚志红王其意韦卓纯龚海标林培戴毅姚新生暨南大学药学院中药及天然药物研究所广东广州510632 中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

建立了同时测定肿节风中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸、异嗪皮啶6个成分含量的超高效液相色谱方法。采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离,以乙腈-水(各含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗... 详细信息

建立了同时测定肿节风中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸、异嗪皮啶6个成分含量的超高效液相色谱方法。采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离,以乙腈-水(各含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^(-1),检测波长330 nm,柱温35℃;以异嗪皮啶为参照物,计算其与其余5种目标物的相对校正因子,并考察了不同色谱仪、色谱柱、流动相、流速、柱温对相对校正因子重现性的影响;通过相对校正因子计算各成分的含量,实现一测多评,同时采用外标法测定肿节风中各成分的量,并对一测多评计算值与外标法实测值进行配对t检验。肿节风中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸、异嗪皮啶分别在0.522 0~26.09,1.482~74.13,0.591 0~29.49,0.632 5~31.29,2.612~130.5,0.970 4~48.73μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999 7),仪器精密度、方法重复性、样品稳定性的相对标准偏差(RSD)均不大于1.9%,平均加标回收率为98.6%~101.5%,RSD(n=6)不大于1.9%。所建立的相对校正因子重现性良好,外标法实测值与一测多评法计算值无显著性差异(P>0.05),均可用于肿节风中5个咖啡酰类和1个香豆素类成分的同时定量测定。

关键词：肿节风超高效液相色谱法外标法一测多评法定量分析咖啡酰类成分香豆素类成分

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黄连非生物碱类化学成分研究

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中国中药杂志 2012年第9期37卷 1241-1244页

作者：陈亮王磊张庆文张声源叶文才暨南大学药学院中药及天然药物研究所&中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632 澳门大学中华医药研究院澳门999078

目的:对黄连中非生物碱类化学成分进行分离和鉴定。方法:利用各种色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和NMR,MS等波谱技术鉴定化合物的结构。结果:从黄连乙醇提取物中分离鉴定了13个化合物,包括7个木脂素,3个简单苯丙素,2个黄酮,1个酚酸... 详细信息

目的:对黄连中非生物碱类化学成分进行分离和鉴定。方法:利用各种色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和NMR,MS等波谱技术鉴定化合物的结构。结果:从黄连乙醇提取物中分离鉴定了13个化合物,包括7个木脂素,3个简单苯丙素,2个黄酮,1个酚酸,分别为erythro-guaiacylglycerol-8-O-4'-(coniferyl alcohol)ether(1),threo-guaiacylglycerol-8-O-4'-(coniferyl al-cohol)ether(2),(+)-松脂醇[(+)-pinoresinol,3],(+)-5'-甲氧基松脂素[(+)-medioresinol,4],(+)-落叶松树脂醇[(+)-lar-iciresinol,5],(+)-5'-甲氧基落叶松树脂醇[(+)-5'-methoxylariciresinol,6],(+)-异落叶松树脂醇[(+)-isolariciresinol,7],绿原酸(chlorogenic acid,8),阿魏酸(ferulic acid,9),Z-咖啡酸硬脂醇酯(Z-octadecyl caffeate,10),鼠李素(rhamnetin,11),汉黄芩素(wogonin,12),香草酸(vanillic acid,13)。结论:化合物1,2,4,6,10～13为首次从黄连属植物中分离得到。

关键词：黄连化学成分木脂素黄酮

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川芎嗪硝酮衍生物在脑缺血模型大鼠脑中浓度

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中国临床药理学杂志 2011年第6期27卷 446-449+453页

作者：黎赛李沙陈海南孙业伟张高小王兴立蒋杰赵文王玉强暨南大学药学院新药研究所暨南大学药学院药剂学教研室暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室暨南大学药学院实验技术中心

目的考察脑缺血模型大鼠与正常大鼠脑组织中(2-N-叔丁基硝酮)-3,5,6-三甲基吡嗪(TBN)的浓度差异。方法用线栓法,建立大脑中动脉栓塞脑缺血大鼠模型,按不同剂量或在不同再灌注时间后给药,用HPLC方法测定脑组织中TBN浓度。结果以不同剂量... 详细信息

目的考察脑缺血模型大鼠与正常大鼠脑组织中(2-N-叔丁基硝酮)-3,5,6-三甲基吡嗪(TBN)的浓度差异。方法用线栓法,建立大脑中动脉栓塞脑缺血大鼠模型,按不同剂量或在不同再灌注时间后给药,用HPLC方法测定脑组织中TBN浓度。结果以不同剂量、在不同再灌注时间后给药,TBN在模型大鼠脑中的浓度均基本高于正常大鼠。模型鼠脑中TBN浓度随剂量增加而增大,两者呈良好的线性关系。于不同再灌注时间后给药,对脑中TBN浓度影响明显。结论在脑缺血再灌注后,TBN能更有效地透过大鼠血脑屏障,产生更高的脑药浓度。

关键词：川芎嗪硝酮衍生物脑缺血脑组织浓度高效液相色谱法

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新型1,2-二取代肼的设计合成及抗癌活性初步研究

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有机化学 2024年第6期44卷 1870-1883页

作者：胡健灵张超朱文达何业谱彭姝羚陈振强李明月刘志军陈河如暨南大学药学院中药及天然药物研究所中药现代化与创新药物研究国际合作联合实验室广州510632 广州药本君安医药科技股份有限公司广州510663 暨南大学广东省中药药效物质基础及创新药物研究重点实验室广州510632 暨南大学生物活性分子与成药性优化全国重点实验室广州510632

设计合成了13个新型1,2-二取代肼,其中包括10个2-芳基-1-(4-(N-异丙基)氨甲酰基)苄肼(9a~9j)、2个2-芳甲基-1-(4-(N-异丙基)氨甲酰基)苄肼(13a~13b)以及2-对甲基苯甲酰基-1-(4-(N-异丙基)氨甲酰基)苄肼(14).噻唑蓝法(MTT)检测发现,目标... 详细信息

设计合成了13个新型1,2-二取代肼,其中包括10个2-芳基-1-(4-(N-异丙基)氨甲酰基)苄肼(9a~9j)、2个2-芳甲基-1-(4-(N-异丙基)氨甲酰基)苄肼(13a~13b)以及2-对甲基苯甲酰基-1-(4-(N-异丙基)氨甲酰基)苄肼(14).噻唑蓝法(MTT)检测发现,目标化合物对大鼠脑胶质瘤细胞(C6)、小鼠黑色素瘤复苏细胞(K1735)、人肝癌细胞(HepG-2)、人结肠癌细胞(SW620)、人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)和人恶性黑色素瘤(A357)共六株肿瘤细胞大致显示出比阳性对照药丙卡巴肼(Pcb)更好的抗肿瘤活性.Pcb对小鼠黑色素瘤细胞(B16)敏感,在孵育48 h条件下,2-(4-甲氧基)苯基-1-(4-(N-异丙基)氨甲酰基)苄肼(9a)、2-(6-甲氧基-2-基)萘基-1-(4-(N-异丙基)氨甲酰基)苄肼(9b)和2-(3-溴)苯基-1-(4-(N-异丙基)氨甲酰基)苄肼(9i)均表现出比Pcb更强的抗癌活性;9a对除C6和SW620外的其它五株肿瘤细胞展现出最强的抗癌活性,其中,对MDA-MB-231细胞的IC50值为(10.8±0.9)μmol/L;13b对C6的抑制活性最强,IC50值为(15.9±3.1)μmol/L;9e则对SW620的抑制活性最高,IC50值为(62.7±1.4)μmol/L.对于化合物9a~9j,当芳基Ar上的取代基为吸电子效应基团时,通常处于间位比处于对位的抗癌活性要高(9g>9f,9i>9h);而当取代基为供电子效应的基团时,就没有这样的规律性;对于SW620而言,芳环上有弱的供电子诱导效应取代基对提高增殖抑制活性有利.化合物9a、9b、13a和13b对小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)的增殖抑制活性较高,尤其是化合物9a和13a,在孵育48 h条件下IC50值分别为(24.9±1.2)和(13.9±1.7)μmol/L.

关键词： 1,2-二取代肼抗肿瘤烷化剂前药药物设计合成

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川芎嗪硝酮衍生物在大鼠体内的组织分布研究

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中国临床药理学杂志 2011年第1期27卷 42-45页

作者：李沙王磊陈海南李晓飞马志国赵文蒋杰王玉强暨南大学药学院药剂学教研室暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室暨南大学药学院实验技术中心暨南大学药学院新药研究所

目的对正常大鼠体内川芎嗪(TMP)硝酮衍生物:(2-N-叔丁基硝酮)-3,5,6-三甲基吡嗪(2-[[(1,1-dimethylethyl)oxidoimino]methyl]-3,5,6-trimethylpyrazine,TBN)的组织分布进行研究。方法用Purospher C18柱(4.6mm×150.0 mm,5μm),以甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾水溶液(45∶55,pH3)为流动相,检测波长为295 nm,建立大鼠血浆及组织内TBN含量分析的HPLC-UV方法,用于组织分布研究。结果静脉(80 ***-1)给药后,TBN在各种组织的AUC0-360在2.48～13.74 ***.g-1,从高到低依次为:血浆>肺>肾>肝>脾>脑>心;MRT0-360在129.50～161.95 min,由长到短依次为:肺>脾>肾>脑>肝>心>血浆。结论本研究建立的HPLC方法专属性强、简便、快速、准确;用此法得知,TBN静脉给药后,可快速分布于各组织中,包括脑组织。

关键词：川芎嗪硝酮衍生物组织分布高效液相色谱法

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博落回非生物碱类化学成分研究

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中药材 2016年第3期39卷 559-561页

作者：邹惠亮付书娜张杨梅李聆莉张英刘百联周光雄暨南大学药学院中药及天然药物研究所/中药和天然药物药效物质基础与新药研究广东省高校重点实验室广东广州510632

目的：研究博落回的化学成分。方法：利用硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20柱等色谱分离技术分离其非生物碱成分,利用MS、NMR等光谱技术鉴定化合物结构。结果：从博落回中分离鉴定了11个非生物碱类化合物,分别为：3-（3,4-二羟基）苯基丙... 详细信息

目的：研究博落回的化学成分。方法：利用硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20柱等色谱分离技术分离其非生物碱成分,利用MS、NMR等光谱技术鉴定化合物结构。结果：从博落回中分离鉴定了11个非生物碱类化合物,分别为：3-（3,4-二羟基）苯基丙酸甲酯（1）、阿魏酸（2）、正二十八烷醇（3）、丁香酸（4）、对羟基苯甲酸（5）、对香豆酸（6）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（7）、N-p-香豆酰酪胺（8）、10-eicosenoic acid（9）、β-谷甾醇（10）、胡萝卜苷（11）。结论：其中,化合物1、3~9为首次从该植物中分离得到。

关键词：博落回非生物碱类化学成分

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大叶紫珠苯丙素类衍生物研究

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天然产物研究与开发 2014年第6期26卷 871-875页

作者：孟令杰覃芳敏袁红娥程淼邹惠亮周光雄暨南大学药学院中药及天然药物研究所中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广州510632

采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱层析等色谱技术,从大叶紫珠70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到10个苯丙素类衍生物。通过波谱分析并与文献数据对照方法,将其分别鉴定为蛇菰宁（1）、（7R,8S）-脱氢松柏醇-8,5＇-脱氢松柏醛-9-O-... 详细信息

采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱层析等色谱技术,从大叶紫珠70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到10个苯丙素类衍生物。通过波谱分析并与文献数据对照方法,将其分别鉴定为蛇菰宁（1）、（7R,8S）-脱氢松柏醇-8,5＇-脱氢松柏醛-9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（2）、连翘苷B（3）、alyssonoside（4）、天人草甙B（5）、阿克苷（6）、马蒂罗苷（7）、异阿克苷（8）、车前草甙C（9）和异马蒂罗苷（10）。其中,化合物3-10均为首次从该植物中分离得到。

关键词：马鞭草科大叶紫珠苯丙素类衍生物化学成分

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博落回的生物碱成分及细胞毒活性研究

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中国中药杂志 2015年第3期40卷 458-462页

作者：邹惠亮李红玉余绍福程淼周兴栋张英刘百联周光雄暨南大学药学院中药及天然药物研究所中药和天然药物药效物质基础与新药研究广东省高校重点实验室广东广州510632

目的：研究博落回Macleayacordata的生物碱成分及其抗肿瘤活性。方法：采用乙醇提取和液液萃取等方法提取，硅胶，反相ODS，SephadexLH-20柱色谱，HPLC等分离技术分离其生物碱成分，利用Ms，NMR等光谱技术鉴定化合物结构，采用MTT法测... 详细信息

目的：研究博落回Macleayacordata的生物碱成分及其抗肿瘤活性。方法：采用乙醇提取和液液萃取等方法提取，硅胶，反相ODS，SephadexLH-20柱色谱，HPLC等分离技术分离其生物碱成分，利用Ms，NMR等光谱技术鉴定化合物结构，采用MTT法测定化合物对MCF-7及SF-268肿瘤细胞株的细胞毒活性。结果：从博落回中分离鉴定了12种生物碱，分别为macle—karpineE（1），6-丙酮基二氢白屈菜红碱（2），岩黄连灵碱（3），6-丙酮基二氢血根碱（4），O—methylzanthoxyline（5），6-甲氧基二氢血根碱（6），spallidamine（7），6-羟基二氢白屈菜红碱（8），arnotianamida（9），二氢血根碱（10），原阿片碱（11），别隐品碱（12）。结论：化合物1，3，7—9为首次从该植物中分离得到，化合物5为新天然产物。药理实验表明，化合物6对MCF-7及SF-268细胞株具有显著的细胞毒活性，Ic，。值分别为0．61，0．54μmol·L-1。

关键词：博落回化学成分生物碱细胞毒活性

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