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中国药学杂志 2014年第4期49卷 275-278页

作者：覃芳敏孟令杰袁红娥张英周光雄暨南大学药学院中药及天然药物研究所中药和天然药物药效物质基础与新药研究广东省高校重点实验室广州510623

目的研究水栀子（Gardenia jasminoides ***）的化学成分。方法采用醇渗漉和液液萃取等方法提取，硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20柱色谱、HPLC等分离技术提取分离其化学成分，利用MS、NMR等光谱技术鉴定化合物结构。结果得到了10个化合... 详细信息

目的研究水栀子（Gardenia jasminoides ***）的化学成分。方法采用醇渗漉和液液萃取等方法提取，硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20柱色谱、HPLC等分离技术提取分离其化学成分，利用MS、NMR等光谱技术鉴定化合物结构。结果得到了10个化合物，其中7个环烯醚萜类化合物，分别为京尼平苷（1）、6α-去乙酰车叶草苷酸甲酯（2）、6β-去乙酰车叶草苷酸甲酯（3）、6α-甲氧基去乙酰车叶草苷酸甲酯（4）、6β-甲氧基去乙酰车叶草苷酸甲酯（5）、2＇-coumaroyl mussaenosidic acids（6）、6＇＇-O-trans-p—sinapoylgenipin genitiobioside（7）；2个奎宁酸类化合物，分别为3，5-di-O-caffeoyl-4-O-（3-hydroxyl-3一methyl）glutaroylquinic acid（8）、methyl3，5-di—caffeoyl-4—O-（3-hydroxy-3-methyl）-glutaroylquinate（9）；1个黄酮类化合物，为quercetin一3—O-β-D-glucopyranoside（10）。结论化合物3～10为首次从该植物中分离得到。

关键词：栀子属水栀子环烯醚萜奎宁酸槲皮素

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齐墩果酸对3T3-L1脂肪细胞分化及糖脂代谢的影响

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中药材 2011年第4期34卷 588-592页

作者：赵晶晶魏明吕艳青叶春玲张晓琦王英叶文才暨南大学药学院药理学教研室广东广州510632 暨南大学药学院中药及天然药物研究所暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

目的：观察齐墩果酸（oleanolic acid,OA）对脂肪细胞分化和糖脂代谢的影响并探讨其机制。方法：在诱导脂肪分化时用OA干预,油红O染色后,通过比色法分析脂肪细胞的分化程度。采用葡萄糖氧化酶法检测OA对脂肪细胞葡萄糖消耗的影响;采用... 详细信息

目的：观察齐墩果酸（oleanolic acid,OA）对脂肪细胞分化和糖脂代谢的影响并探讨其机制。方法：在诱导脂肪分化时用OA干预,油红O染色后,通过比色法分析脂肪细胞的分化程度。采用葡萄糖氧化酶法检测OA对脂肪细胞葡萄糖消耗的影响;采用酶联免疫吸附法检测上清液中的游离脂肪酸浓度;采用RT-PCR法检测脂肪细胞PPAR-γ和GLUT-4 mRNA的表达。结果：与溶媒对照组比较,OA能显著增加脂肪细胞葡萄糖消耗量（P〈0.05或P〈0.01）,在1~30μmol/L浓度范围时,其作用随着剂量增加显著增强;OA能促进前脂肪细胞的分化,在3~30μmol/L浓度范围内,OA组油红O染液光密度值均显著高于溶媒对照组（P〈0.05或P〈0.01）。同时,OA还能减少游离脂肪酸的产生,其30μmol/L剂量时游离脂肪酸的含量只有溶媒对照组的47.2%,显著低于溶媒对照组（P〈0.01）。与溶媒对照组比较,30μmol/L OA能显著增加脂肪细胞PPAR-γ及GLUT-4 mRNA的表达（P〈0.05）。结论：OA能促进脂肪细胞分化和葡萄糖的消耗,减少游离脂肪酸的产生,其机制可能与上调脂肪细胞PPAR-γ和GLUT-4 mRNA的表达、增加脂肪细胞对胰岛素的敏感性有关。

关键词：齐墩果酸 3T3-L1脂肪细胞细胞分化糖脂代谢

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槟榔的化学成分

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2014年第1期35卷 56-60页

作者：牟肖男杨文强王文婧刘国张晓琦叶文才暨南大学药学院中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

应用硅胶柱、ODS柱、Sephadex LH-20柱等色谱方法对槟榔种子的体积分数95%乙醇提取物石油醚及乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,根据理化性质与波谱数据鉴定化合物的结构,分别为:表儿茶素(1),原花青素B1(2),原花青素B2(3),原花青素B7(4),ep... 详细信息

应用硅胶柱、ODS柱、Sephadex LH-20柱等色谱方法对槟榔种子的体积分数95%乙醇提取物石油醚及乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,根据理化性质与波谱数据鉴定化合物的结构,分别为:表儿茶素(1),原花青素B1(2),原花青素B2(3),原花青素B7(4),epicatechin-(4β→8)-epicatechin-(4β→8)-catechin(5),epicatechin-(4β→6)-epicatechin-(4β→8)-catechin(6),金色酰胺醇酯(7),aurantiamide(8),neoechinulin A(9),echinulin(10).其中,化合物6~10为首次从该植物中分离得到.对分离得到的聚合鞣质类化合物1~6进行了初步的体外抗病毒活性测试.

关键词：槟榔化学成分原花青素

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淫羊藿总黄酮苷在家兔肠菌中的代谢及葡萄糖酸内酯对其肠菌代谢的抑制作用(英文)

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中国天然药物 2011年第6期9卷 461-465页

作者：姚志红刘明艳戴毅张依秦子飞屠凤娟姚新生暨南大学药学院广州510632 中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广州510632 沈阳药科大学中药学院沈阳110016

目的:考察淫羊藿总黄酮苷在家兔肠菌中的代谢以及葡萄糖酸内酯对肠菌代谢的抑制作用,旨在帮助揭示淫羊藿总黄酮苷在家兔体内的代谢途径和预防激素性骨坏死作用的物质基础。方法:淫羊藿总黄酮苷与家兔肠菌液经37℃厌氧温孵培养后,在不同... 详细信息

目的:考察淫羊藿总黄酮苷在家兔肠菌中的代谢以及葡萄糖酸内酯对肠菌代谢的抑制作用,旨在帮助揭示淫羊藿总黄酮苷在家兔体内的代谢途径和预防激素性骨坏死作用的物质基础。方法:淫羊藿总黄酮苷与家兔肠菌液经37℃厌氧温孵培养后,在不同时间点经水饱和的乙酸乙酯萃取,并对加入不同浓度(8,12和16mg·mL-1)的葡萄糖酸内酯对淫羊藿总黄酮苷经家兔肠菌代谢的抑制情况进行考察。采用ODS柱和乙腈-水(各含0.1%的甲酸)的流动相梯度洗脱,检测波长为335nm。结果:淫羊藿总黄酮苷在家兔肠菌液中温孵2h时被代谢成淫羊藿次苷Ⅱ,在温孵8h时被代谢成淫羊藿素;葡萄糖酸内酯能够浓度依赖性地抑制家兔肠菌对淫羊藿总黄酮苷的代谢。结论:淫羊藿总黄酮苷能被家兔肠道菌群迅速水解成淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿素;当葡萄糖酸内酯的浓度为16mg·mL-1时,则能完全抑制家兔肠菌对淫羊藿总黄酮苷的代谢。

关键词：淫羊藿总黄酮苷抗骨坏死活性家兔肠菌代谢葡萄糖酸内酯抑制作用

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人锰超氧化物歧化酶hSOD2-Q46K突变体的表达与功能分析

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2017年第3期38卷 205-213页

作者：谢珺牛得伟李艳冰高可高辉李帅广沈良华王峰暨南大学药学院基因组药物研究所广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

目的:构建人锰超氧化物歧化酶(hSOD2)-Q46K突变体,简化获得hSOD2突变体的步骤,探讨hSOD2结构与功能的关系.方法:通过聚合酶链式反应(PCR)体外定点突变技术将hSOD2的46位Q氨基酸突变为K氨基酸,经测序鉴定正确后将p ET15b-hSOD2-Q46K突变... 详细信息

目的:构建人锰超氧化物歧化酶(hSOD2)-Q46K突变体,简化获得hSOD2突变体的步骤,探讨hSOD2结构与功能的关系.方法:通过聚合酶链式反应(PCR)体外定点突变技术将hSOD2的46位Q氨基酸突变为K氨基酸,经测序鉴定正确后将p ET15b-hSOD2-Q46K突变体重组质粒转化Rosetta-gami大肠杆菌,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表达.利用SWISS-MODEL Workspace对hSOD2-Q46K突变体进行同源建模,利用Swiss-Pdb-Viewer软件对建模结果进行分析.利用Ni-NTA亲和层析纯化目的蛋白后用超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒检测目的蛋白的SOD活力.利用浓度为0.1 mmol/L百草枯(PQ)压力下生长情况测定表达hSOD2-Q46K和hSOD2蛋白的Rosetta-gami大肠杆菌的抗氧化能力.结果:测序结果表明46位密码子已由CAG突变为AAG.经过IPTG诱导后野生型和突变体均能表达出大小约为25 k Da的蛋白.SOD活性检测表明hSOD2-Q46K突变体的活力为899 U/mg,比野生型蛋白活性下降了65.4%.三维结构分析显示,突变点周围氨基酸间氢键被部分打破.结论:成功构建hSOD2-Q46K突变体并成功得到了纯化的突变体蛋白,hSOD2-Q46K的SOD活力比野生型降低了65.4%,且百草枯压力下表达hSOD2-Q46K蛋白的大肠杆菌A600达到0.84,而野生型蛋白的大肠杆菌A600达到1.14.这可能是因为突变点与周围氨基酸间氢键打破,突变点周围失去了原来的稳定结构,底物通道入口处氨基酸排列疏散,影响电子在氨基酸间的传递,影响静电导向机制,从而阻碍氧自由基在底物通道的通行,使hSOD2的催化活力下降.

关键词：锰超氧化物歧化酶表达超氧化物歧化酶活性突变体

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靶向抗肿瘤药N-(N’-苄氧羰基甘氨酰脯氨酰)丙卡巴肼(Z-GP-Pcb)的环境友好合成及其透过血脑屏障活性评价

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有机化学 2020年第2期40卷 536-540页

作者：张潮刘志军李艳冰何业谱林晓洪陈河如暨南大学药学院中药及天然药物研究所广州510632 广州药本君安医药科技股份有限公司广州510663 广东省中药药效物质基础及创新药物研究重点实验室广州510632

利用靶向策略设计了抗肿瘤药物N-(N’-苄氧羰基甘氨酰脯氨酰)丙卡巴肼(Z-GP-Pcb),发展了3步法合成丙卡巴肼(Pcb).首先以4-甲基苯甲醛为原料,经二溴异氰脲酸(DBI)转化为N-异丙基-4-甲基苯酰胺.该化合物经2-碘酰基苯甲酸(IBX)直接氧化为N... 详细信息

利用靶向策略设计了抗肿瘤药物N-(N’-苄氧羰基甘氨酰脯氨酰)丙卡巴肼(Z-GP-Pcb),发展了3步法合成丙卡巴肼(Pcb).首先以4-甲基苯甲醛为原料,经二溴异氰脲酸(DBI)转化为N-异丙基-4-甲基苯酰胺.该化合物经2-碘酰基苯甲酸(IBX)直接氧化为N-异丙基-4-甲酰基苯酰胺,随后还原胺化得Pcb.最后与N-苄氧羰基甘氨酰脯氨酸缩合得Z-GP-Pcb,总收率49.9%.另外,本研究还建立了体外平行人造膜渗透测血脑屏障(PAMPA-BBB)方法评价Z-GP-Pcb透过血脑屏障(BBB)活性,发现其透膜常数(Pe)为(19.22±4.25)×10^-6cm·s^-1,大于母药Pcb[(11.14±1.34))×10^-6cm·s^-1],具有较高的透过BBB活性.

关键词：药物合成丙卡巴肼药物设计靶向抗肿瘤成纤维细胞激活蛋白α

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重组人锰超氧化物歧化酶的胃蛋白酶酶解特性及其稳定性

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中国生物制品学杂志 2013年第10期26卷 1426-1429页

作者：张自德张玉波吴秋红张光王峰暨南大学药学院基因组药物研究所广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

目的探讨重组人锰超氧化物歧化酶(rhMn-SOD)的胃蛋白酶酶解特性及其稳定性。方法在37℃条件下,用模拟胃液(0.084 mol/L HCl,35 mmol/L NaCl,pH 2.0,4 000 U胃蛋白酶)处理rhMn-SOD不同时间,SDS-PAGE分析酶解效果;使用总SOD测定试剂盒检测... 详细信息

目的探讨重组人锰超氧化物歧化酶(rhMn-SOD)的胃蛋白酶酶解特性及其稳定性。方法在37℃条件下,用模拟胃液(0.084 mol/L HCl,35 mmol/L NaCl,pH 2.0,4 000 U胃蛋白酶)处理rhMn-SOD不同时间,SDS-PAGE分析酶解效果;使用总SOD测定试剂盒检测rhMn-SOD在不同温度(25、37、45、55、65、75℃)下保存不同时间(10、20、30、40、50、60 min)、不同pH(4.0～10.0)、不同化合物(氯仿、甘油、DMSO、10%SDS、β-巯基乙醇、苯酚、30%H2O2)处理后及日光和紫外照射后的相对活力。结果 rhMn-SOD在模拟胃液中处理2 min即可完全酶解。在25～55℃范围内,rhMn-SOD具有较好的热稳定性,在65～75℃范围内,rhMn-SOD的热稳定性较差;在pH 6.0～8.0范围内,rhMn-SOD具有较好的稳定性;rhMn-SOD对甘油和氯仿不敏感,经DMSO、SDS处理后,活力大幅下降,经β-巯基乙醇、苯酚、30%H2O2处理后,基本失活;rhMn-SOD经日光和紫外照射3 h,活力基本不变。结论分析了rhMnSOD的胃蛋白酶酶解特性、热稳定性、pH稳定性、对不同化合物的敏感性以及光稳定性,为其广泛应用于化妆品、药品、食品添加剂等领域奠定了基础。

关键词：超氧化物歧化酶胃蛋白酶蛋白酶解稳定性酶活力

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积雪草酸改善小鼠脂肪细胞胰岛素抵抗的机制研究

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中国病理生理杂志 2013年第7期29卷 1313-1317页

作者：刘清霞叶开和王婧茹叶春玲黄仪张晓琦叶文才暨南大学药学院药理学教研室广东广州510632 暨南大学药学院中药及天然药物研究所中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632

目的:观察番石榴叶三萜化合物积雪草酸对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化以及胰岛素抵抗脂肪细胞糖脂代谢的影响并探讨其作用机制。方法:MTT法检测药物对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;油红O染色法观察药物对其分化的影响。地塞米松诱导... 详细信息

目的:观察番石榴叶三萜化合物积雪草酸对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化以及胰岛素抵抗脂肪细胞糖脂代谢的影响并探讨其作用机制。方法:MTT法检测药物对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;油红O染色法观察药物对其分化的影响。地塞米松诱导建立脂肪细胞胰岛素抵抗模型,药物干预后采用葡萄糖氧化酶法检测培养液中葡萄糖消耗量;比色法检测游离脂肪酸浓度;ELISA法检测脂联素水平;Western blotting法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)蛋白表达的变化。结果:与溶媒对照组相比,积雪草酸在10～100μmol/L时能显著促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,但明显抑制其分化(P<0.05或P<0.01);在30和100μmol/L时,无论是基础状态还是胰岛素刺激状态,均能显著增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖的消耗,减少游离脂肪酸的产生(P<0.05);其对胰岛素抵抗脂肪细胞的脂联素分泌和PPARγ蛋白表达无明显影响(P>0.05),但能显著下调PTP1B蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:积雪草酸能显著改善脂肪细胞胰岛素抵抗,增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖的消耗和减少游离脂肪酸的产生,其机制可能是其下调胰岛素信号转导的负性调节因子PTP1B的表达,增强胰岛素信号转导,从而改善胰岛素抵抗。

关键词：番石榴叶三萜化合物积雪草酸 3T3-L1前脂肪细胞胰岛素抵抗过氧化物酶体增殖物激活受体γ 蛋白酪氨酸磷酸酶1B

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京尼平及其衍生物的研究进展

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2013年第5期34卷 564-570页

作者：陈河如罗军黄照杨健暨南大学药学院中药及天然药物研究所广东广州510632 暨南大学广东省中药药效物质基础及创新药物研究重点实验室广东广州510632

京尼平及其糖苷是杜仲和栀子的主要药效成分.研究表明,京尼平及其糖苷具有保肝利胆、镇痛、解毒以及改善学习和增强性行为等作用.本研究对京尼平及其衍生物在抗老年痴呆、生物交联剂、抗血栓、降血糖和抗肿瘤作用等方面的研究进展进行综述.

关键词：京尼平京尼平苷杜仲栀子药理作用

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三萜皂苷Saxifragifolin D抑制人肝癌耐药细胞HepG2/ADM生长并诱导细胞凋亡作用研究

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中国药理学通报 2012年第1期28卷 34-38页

作者：石俊敏张冬梅姚楠冯国培王英栗原博叶文才暨南大学中药及天然药物研究所广东广州510632 暨南大学中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室广东广州510632 香港中文大学医学院生物化学系香港

目的研究Saxifragifolin D(SD)对人肝癌耐药细胞HepG2/ADM的生长抑制及诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察SD对HepG2/ADM细胞的增殖抑制作用,应用流式细胞仪分析SD对细胞周期的影响,AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测凋亡细胞比率,JC-1染色观察S... 详细信息

目的研究Saxifragifolin D(SD)对人肝癌耐药细胞HepG2/ADM的生长抑制及诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察SD对HepG2/ADM细胞的增殖抑制作用,应用流式细胞仪分析SD对细胞周期的影响,AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测凋亡细胞比率,JC-1染色观察SD对细胞内线粒体膜电位的影响,Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-9,caspase-3和PARP的激活及c-Raf,MEK和ERK蛋白的表达和磷酸化水平。结果 SD可以明显抑制人肝癌耐药细胞HepG2/ADM的增殖。细胞周期检测发现SD诱导细胞产生亚二倍体凋亡峰,同时细胞凋亡率也由对照组的5.3%增加到34.8%和47.8%。线粒体膜电位检测结果显示SD导致细胞内线粒体膜电位的明显降低。Western blot检测结果表明caspase-9,caspase-3被激活,PARP被剪切活化,cytochrome C由线粒体释放至胞质,c-Raf、MEK和ERK蛋白的磷酸化水平降低。结论 SD可以抑制人肝癌耐药细胞HepG2/ADM增殖并诱导其凋亡,作用机制可能与线粒体功能障碍及抑制c-Raf/MEK/ERK通路的活化有关。

关键词： Saxifragifolin D HepG2/ADM细胞细胞凋亡 caspase活化线粒体功能障碍 c-Raf/MEK/ERK

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