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中国药理学通报 2015年第6期31卷 780-784页

作者：陈刚领徐岚溪赵欢吴晓莹柴玲玲曾冬琳吴琪中国药科大学中药学院中药药理教研室江苏南京211198 中国药科大学中药学院生药学研究室江苏南京211198

目的探讨肢体后适应(limb remote ischemic postconditioning,LRIP)对急性高糖状态下大鼠脑缺血/再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的保护作用,并初步阐明其机制。方法大鼠腹腔注射50%葡萄糖(6 m L·kg-1)造成急性高血... 详细信息

目的探讨肢体后适应(limb remote ischemic postconditioning,LRIP)对急性高糖状态下大鼠脑缺血/再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)的保护作用,并初步阐明其机制。方法大鼠腹腔注射50%葡萄糖(6 m L·kg-1)造成急性高血糖模型,采用线栓法复制大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,将大脑中动脉栓塞1.5 h后再灌注,且同时刻给LRIP组大鼠LRIP操作,将大鼠左后肢股动脉夹闭5 min/再通5 min(此为1个循环),连续3个循环。再灌注2 h后,检测各组大鼠行为学指标,摘眼球取血,测定血清中一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力;取全脑切片后氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyhetrazolium chloride,TTC)染色检测脑梗死面积。结果 LRIP能改善急性高血糖状态下脑IRI大鼠的行为学评分,升高血清中NO浓度及SOD活力,能减小脑梗死面积,以上指标LRIP组与IRI模型组比较差异均具有显著性(P<0.05)。结论 LRIP对急性高血糖状态大鼠的脑IRI有保护作用,该作用部分通过升高血清SOD活力及NO水平实现。

关键词：肢体后适应急性高血糖缺血/再灌注超氧化物歧化酶一氧化氮大鼠

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银杏内酯A对大鼠全脑缺血／再灌注损伤的影响及其机制研究

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徐州医学院学报 2016年第6期36卷 364-366页

作者：袁凤刚郝艳玲张春辛陈永刚徐州医科大学实验动物中心江苏徐州221004 徐州医科大学基础医学院机能学实验中心徐州医科大学生药学院药学教研室徐州市中心医院临床药学部江苏徐州221009

目的探讨银杏内酯A对全脑缺血／再灌注大鼠脑组织损伤的保护作用及其相关机制。方法采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺血／再灌注模型。将大鼠随机分为假手术组（sham组）、缺血／再灌注组（I／R组）和缺血／再灌注给药组（GA组）。观察... 详细信息

目的探讨银杏内酯A对全脑缺血／再灌注大鼠脑组织损伤的保护作用及其相关机制。方法采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺血／再灌注模型。将大鼠随机分为假手术组（sham组）、缺血／再灌注组（I／R组）和缺血／再灌注给药组（GA组）。观察银杏内酯A对各组大鼠神经功能缺损评分（NDS）、脑梗死面积、脑组织内超氧化物歧化酶（SOD）活力及丙二醛（MDA）含量的影响。结果全脑缺血／再灌注6h后，银杏内酯A能明显降低大鼠NDS分值，减少脑梗死面积，降低脑组织内MDA含量，同时提高SOD活性。结论银杏内酯A能显著改善大鼠全脑缺血／再灌注后的脑神经功能，减轻缺血／再灌注对大鼠脑组织的损害，具有一定的脑保护作用。

关键词：银杏内酯A 全脑缺血/再灌注损伤超氧化物歧化酶丙二醛

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HPLC法测定二仙汤提取物中抗骨质疏松有效成分的含量

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中国药房 2015年第15期26卷 2122-2125页

作者：许红涛李媛何勇静袁婷婷张乃丹张巧艳福建中医药大学药学院福州350108 第二军医大学药学院生药学教研室上海200433

目的：建立测定二仙汤提取物中抗骨质疏松有效成分淫羊藿黄酮、盐酸小檗碱和知母皂苷含量的方法。方法：淫羊藿苷和盐酸小檗碱采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil C18,流动相分别为甲醇-1%醋酸（60∶40,V/V）和甲醇-乙腈-0.3%三乙胺... 详细信息

目的：建立测定二仙汤提取物中抗骨质疏松有效成分淫羊藿黄酮、盐酸小檗碱和知母皂苷含量的方法。方法：淫羊藿苷和盐酸小檗碱采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil C18,流动相分别为甲醇-1%醋酸（60∶40,V/V）和甲醇-乙腈-0.3%三乙胺水溶液（20∶10∶70,V/V/V,磷酸调节p H=4.0）,检测波长分别为270 nm和340 nm,柱温分别为30℃和25℃,进样量均为20μl,流速均为1.0 ml/min。知母皂苷采用紫外-可见分光光度法测定,皂苷类成分用盐酸水解后,以菝葜皂苷元为对照品,与香草醛显色后,在（590±2）nm波长下检测。结果：淫羊藿苷、盐酸小檗碱、知母皂苷质量浓度分别在40.00-90.00、5.00-35.00、8.00-40.00μg/ml范围内具有良好的线性关系（r=0.999 8、0.999 9、0.999 5）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均〈2%;平均加样回收率分别为101.43%、99.55%、101.30%,RSD分别为1.26%、1.93%、1.55%（n=6）。结论：本方法简便、重复性和稳定性良好,适用于二仙汤提取物的质量控制。

关键词：二仙汤提取物淫羊藿苷盐酸小檗碱知母皂苷高效液相色谱法紫外-可见分光光度法含量测定

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淫羊藿苷促SD大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化作用的实验研究

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中国中西医结合杂志 2015年第7期35卷 839-846页

作者：傅淑平杨丽洪浩偶晨张荣华南京中医药大学针药结合重点实验室南京210023 暨南大学药学院中药教研室广州510632

目的观察淫羊藿苷促SD大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）骨向分化的作用特点。方法（1）采用机械分离及全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,氨基安替吡啉测酚法检测不同浓度的淫羊藿苷在第3、6、9、12... 详细信息

目的观察淫羊藿苷促SD大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）骨向分化的作用特点。方法（1）采用机械分离及全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,氨基安替吡啉测酚法检测不同浓度的淫羊藿苷在第3、6、9、12、15、18、21天对细胞上清液中碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性的影响,采用茜素红染色法检测各浓度组BMSCs矿化情况,观察不同浓度的淫羊藿苷促BMSCs骨向分化的作用。（2）将BMSCs细胞分为空白对照组、成骨诱导组及淫羊藿苷组（0.5μg/m L）,在培养第7、14、21天检测各组细胞上清ALP活性,并于第14及21天分别检测各组细胞ALP阳性染色率与矿化结节数,同时采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）法检测3个不同时间点各组细胞中核心结合蛋白因子（Runt-related transcripition factor-2,Runx2）及骨钙素（Osteocalcin）mRNA的表达水平。结果（1）0.05~5.0μg/m L淫羊藿苷均可明显提高细胞上清液中ALP活性,其中0.2~2.0μg/m L浓度组细胞结节数亦明显增加（P〈0.01）。（2）淫羊藿苷促BMSCs骨向分化时,Runx2 mRNA表达水平及ALP活性均先升后降;Osteocalcin mRNA表达水平则持续上升（P〈0.01）;与成骨诱导组比较,作用14天后,淫羊藿苷组ALP活性及ALP阳性染色率均明显提高（P〈0.05,P〈0.01）。结论淫羊藿苷通过上调Runx2基因的表达,促使BMSCs向成骨细胞分化,并通过增加细胞ALP分泌及Osteocalcin基因的表达,促进细胞矿化的发生,从而促使新生成骨细胞的成熟。

关键词：淫羊藿苷骨髓间充质干细胞骨向分化核心结合蛋白因子骨钙素

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仙茅苯甲酸酯类酚苷对维甲酸致大鼠骨质疏松症的影响

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中国药学杂志 2015年第15期50卷 1319-1323页

作者：许红涛李媛王寅何勇静袁婷婷张乃丹张巧艳第二军医大学药学院生药学教研室上海200433 福建中医药大学药学院福州350108 中国人民解放军第455医院上海200052

目的探讨仙茅苯甲酸酯类酚苷对维甲酸致大鼠骨质疏松症的作用。方法 3月龄SD雌性大鼠灌胃给予70 mg·kg-1·d-1的维甲酸造模2周,造模结束后给予雌二醇(E2,1 mg·kg-1)、淫羊藿总黄酮(TF,100 mg·kg-1)、仙茅苯甲酸酯类... 详细信息

目的探讨仙茅苯甲酸酯类酚苷对维甲酸致大鼠骨质疏松症的作用。方法 3月龄SD雌性大鼠灌胃给予70 mg·kg-1·d-1的维甲酸造模2周,造模结束后给予雌二醇(E2,1 mg·kg-1)、淫羊藿总黄酮(TF,100 mg·kg-1)、仙茅苯甲酸酯类总酚苷(COP,6,18和54 mg·kg-1)、仙茅乙醇提取物(COE,3 000 mg·kg-1)4周。利用双能X线骨密度仪测右侧股骨的骨密度;全自动生化分析仪测定血清和尿液中Ca、P、肌酐(creatinine,Cr)含量及碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的活性。以Elisa试剂盒测定血清中骨钙素(BGP)和脱氧吡啶啉(DPD)的水平。结果 SD雌性大鼠灌胃给予70mg·kg-1·d-1的维甲酸2周可显著降低大鼠股骨的骨密度,增加尿液中Ca与肌酐的比值和血清抗酒石酸酸性磷酸酶的活性。雌二醇、淫羊藿总黄酮和仙茅苯甲酸酯类总酚苷不仅可显著增加维甲酸骨质疏松大鼠的骨密度,降低尿液中Ca与肌酐的比值和抗酒石酸酸性磷酸酶活性,抑制骨吸收;还可调节维甲酸模型大鼠血清中骨钙素的水平,增加碱性磷酸酶的活性,促进骨形成。结论仙茅苯甲酸酯类酚苷可通过抑制骨吸收、增加骨形成减少维甲酸骨质疏松大鼠的骨丢失。

关键词：仙茅苯甲酸酯类酚苷维甲酸骨质疏松

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产甘油三油酸酯的薏苡内生真菌Gibberella moniliformis AH13发酵培养基的筛选

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植物资源与环境学报 2015年第3期24卷 118-120页

作者：文先程诺韩婷陈贵林贾敏秦路平内蒙古大学生命科学学院内蒙古呼和浩特010021 第二军医大学药学院生药学教研室上海200433

薏苡（Coix lacryma-jobi Linn.）为禾本科（Poaceae）薏苡属（Coix Linn.）1年生草本植物,其干燥成熟种仁为薏苡仁,药食兼用;薏苡仁中粗蛋白含量13%~14%,脂类含量2%~8%,且富含薏苡仁酯。

关键词：薏苡内生真菌 Gibberella moniliformis AH13 甘油三油酸酯培养基筛选

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番石榴酸抗H_2O_2诱导的INS-1胰岛β细胞氧化损伤作用及其机制分析

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中国药学杂志 2015年第3期50卷 233-238页

作者：王婧茹叶开和吕艳青魏崧丞张晓琦叶文才叶春玲暨南大学药学院药理学教研室广州510632 瑞典卡罗林斯卡医学院瑞典斯德哥尔摩17177 暨南大学中药与天然药物研究所广州510632

目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对INS-1胰岛β细胞氧化损伤的作用。方法培养INS-1胰岛β细胞,给予番石榴酸0.3、1、3、10、30 nmol·L-1,并设空白对照组、溶媒对照组及阳性药组,药物作用时间均为48 h。650μmol·L-1H2O2... 详细信息

目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对INS-1胰岛β细胞氧化损伤的作用。方法培养INS-1胰岛β细胞,给予番石榴酸0.3、1、3、10、30 nmol·L-1,并设空白对照组、溶媒对照组及阳性药组,药物作用时间均为48 h。650μmol·L-1H2O2干预细胞2 h建立氧化损伤模型,用四甲基偶氮唑蓝法检测药物对INS-1β细胞氧化损伤的保护作用,用核染色法观察细胞核变化,用流式细胞术检测药物对细胞活性氧生成的作用,用双染-流式细胞术检测药物对细胞凋亡的保护作用。结果与氧化损伤模型组比较,低剂量的番石榴酸(0.3、1 nmol·L-1)能显著保护INS-1β细胞活力(P<0.05或P<0.01);核染色结果显示,与氧化损伤模型组相比,低浓度番石榴酸(0.3 nmol·L-1)作用下,细胞荧光强度较弱。0.3、1、3 nmol·L-1番石榴酸均能十分显著地降低二氯荧光黄(DCF)荧光强度(P<0.01),即减少细胞内活性氧的产生。0.3 nmol·L-1番石榴酸能显著抵抗细胞凋亡的发生(P<0.05)。结论番石榴酸能对抗INS-1细胞氧化损伤,可能与其抑制细胞内活性氧的产生、对抗细胞凋亡有关。

关键词：番石榴酸 INS-1胰岛β细胞氧化损伤

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氯通道在阿霉素诱导鼻咽癌细胞凋亡中的作用

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中国药理学通报 2015年第9期31卷 1249-1253页

作者：刘梅罗海林嘉伟魏燕李媛刘善文孟龙邹丽莉朱林燕王立伟陈丽新萍乡市人民医院药学部江西萍乡337055 暨南大学医学院药理学系湖南医药学院生理学教研室湖南怀化418000 暨南大学医学院生理学系广东广州510632 暨南大学国际学院

目的研究氯离子通道在阿霉素诱导的低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡及凋亡性容积减小中的作用。方法采用全细胞膜片钳技术记录氯电流,流式细胞术检测细胞凋亡,活细胞图像分析法检测细胞容积变化。结果 (1)阿霉素诱导CNE-2Z细胞凋亡;(2)阿霉... 详细信息

目的研究氯离子通道在阿霉素诱导的低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞凋亡及凋亡性容积减小中的作用。方法采用全细胞膜片钳技术记录氯电流,流式细胞术检测细胞凋亡,活细胞图像分析法检测细胞容积变化。结果 (1)阿霉素诱导CNE-2Z细胞凋亡;(2)阿霉素诱导CNE-2Z细胞发生凋亡性容积减小,细胞外灌流阿霉素2 h,细胞容积减小约10%;(3)阿霉素可激活氯通道,产生一个有较明显外向优势的氯电流;(4)氯通道阻断剂5-nitro-2-(3-phenylpropylamino)-benzoate(NPPB)明显抑制阿霉素诱导的凋亡性容积减小、细胞凋亡和氯电流。结论阿霉素可通过激活氯通道而诱导细胞凋亡,氯通道在阿霉素诱导的鼻咽癌细胞凋亡中发挥重要作用。

关键词：阿霉素鼻咽肿瘤氯通道膜片钳技术凋亡凋亡性容积减小

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用RP-HPLC法测定天目地黄中梓醇和毛蕊花糖苷的含量

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药学服务与研究 2015年第4期15卷 273-276页

作者：蒙雄裕徐良李华强王亮郑承剑秦路平宁夏医科大学药学院生药学教研室银川750004 第二军医大学药学院生药学教研室上海200433 浙江天目山国家级自然保护区管理局科研宣教科杭州311300 上海师范大学生命与环境科学学院植物学教研室上海200234

目的:建立RP-HPLC法测定天目地黄中梓醇与毛蕊花糖苷的含量,分析两种成分在天目地黄中的动态积累规律,为其资源开发和质量标准建立提供参考依据。方法:采用甲醇回流提取法进行提取,用RP-HPLC法测定不同发育阶段新鲜药材块根与全草中梓... 详细信息

目的:建立RP-HPLC法测定天目地黄中梓醇与毛蕊花糖苷的含量,分析两种成分在天目地黄中的动态积累规律,为其资源开发和质量标准建立提供参考依据。方法:采用甲醇回流提取法进行提取,用RP-HPLC法测定不同发育阶段新鲜药材块根与全草中梓醇和毛蕊花糖苷的含量。结果:梓醇和毛蕊花糖苷在天目地黄块根和全草中含量有显著差异,其中梓醇主要分布于块根,在5月份成长期含量最高(3.42%);而毛蕊花糖苷主要分布在全草,于6月份开花结实期含量较高(0.47%)。结论:本研究初步探索了天目地黄中有效成分的动态积累规律,为该药材资源的合理利用提供了科学依据。

关键词：天目地黄梓醇毛蕊花糖苷含量测定色谱法,高效液相

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莲心碱对乳腺癌细胞MDA-MB-231自噬功能的影响

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第三军医大学学报 2015年第7期37卷 629-633页

作者：周静李国兵郑怡银涛高宁第三军医大学药学院生药学教研室重庆400038 广州军区疾病预防控制中心广州510507

目的观察莲心碱作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231后,自噬表型的变化,初步论证莲心碱对乳腺癌细胞MDA-MB-231自噬功能的调控作用。方法透射电子显微镜观察莲心碱处理后MDAMB-231的亚细胞结构变化,激光共聚焦显微镜观察p EGFP-LC3或ptf LC3(mRF... 详细信息

目的观察莲心碱作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231后,自噬表型的变化,初步论证莲心碱对乳腺癌细胞MDA-MB-231自噬功能的调控作用。方法透射电子显微镜观察莲心碱处理后MDAMB-231的亚细胞结构变化,激光共聚焦显微镜观察p EGFP-LC3或ptf LC3(mRFP-EGFP-LC3)转染后自噬小体的形成和自噬流的变化,Western blot检测自噬相关蛋白LC3B,SQSTM1/p62,Beclin1的表达,以及论证自噬流的变化。结果透射电镜显示,与对照组比较,莲心碱处理后MDA-MB-231细胞内有较多自噬空泡出现,部分分裂的线粒体,但未见到高密度的嗜锇性的自噬溶酶体结构;EGFP-LC3转染后,莲心碱组自噬体数量显著多于对照组(P<0.01);Western blot检测到自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ,SQSTM1/p62表达呈现量效性和时效性的增多[20μmol/L组或24 h组与对照组比较(P<0.01)],Beclin1未见显著变化[20μmol/L组与对照组比较(P>0.05)];mRFP-EGFP-LC3转染后,对照组可见少量自噬体和自噬溶酶体,莲心碱和Bafilomycin A1处理组均可见大量自噬体结构,未见显著自噬溶酶体结构;Western blot证实莲心碱处理后增多的LC3B-Ⅱ不受Bafilomycin A1预处理的影响[莲心碱组LC3B-Ⅱ,SQSTM1/p62蛋白水平与Bafilomycin A1预处理加莲心碱组比较(P>0.05)]。结论莲心碱抑制自噬小体成熟,阻断乳腺癌细胞MDA-MB-231自噬降解作用。

关键词：乳腺癌 MDA-MB-231 莲心碱自噬

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