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全国第十一次生化与分子药理学学术会议

作者：郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳 110001

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壬基苯酚对细胞膜L-型钙离子通道电流特性的影响

壬基苯酚对细胞膜L-型钙离子通道电流特性的影响

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2009年中国微生物生态学年会

作者：朱彤高青华杨磊赵美眯郝丽英东北大学环境生物研究室中国沈阳110004 中国医科大学基础医学院生理学教研室中国沈阳110001 中国医科大学药学院药物毒理学教研室中国沈阳110001

目的：观察环境激素壬基苯酚(Nonylphenol，NP)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响。方法：应用酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞;应用全细胞膜片钳方法记录NP对单个心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的影响。结果：1)NP(10-6mol·... 详细信息

目的：观察环境激素壬基苯酚(Nonylphenol，NP)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响。方法：应用酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞;应用全细胞膜片钳方法记录NP对单个心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的影响。结果：1)NP(10-6mol·L-1、10-5mol·L-1)使ICa-L峰值电流密度从-3.2±1.5 ***-1减少到-1.6±0.8pA·pF-1(P<0.01)及-1.4±0.7 pA·pF-1(P<0.01);2)NP(10-6mol·L-1、10-5mol·L-1)可抑制不同膜电位下的ICa-L，且10-5mol·L-1 NP比10-6mol·L-1 NP抑制的程度更加明显;3)NP(10-6mol·L-1、10-5mol·L-1)对ICa-L激活动力学曲线无明显影响。结论：NP可剂量依赖性抑制豚鼠心室肌细胞ICa-L。

关键词：壬基苯酚心室肌细胞 L-型钙电流钙离子通道膜片钳

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钙调蛋白激酶在L型钙通道“run-down”现象发生及恢复过程中的作用

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中国药理通讯 2009年第2期26卷 11-11页

作者：赵美眯郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室 110001

目的；研究钙调蛋白激酶（CaMKⅡ）在钙通道“run-down”现象发生及恢复过程中的作用机制。方法：用酶分离单个豚鼠心室肌细胞，利用膜片钳单通道技术，在细胞膜面内向外的模式下，诱发L型钙通道“run-down”现象。制备活性钙调蛋白激酶... 详细信息

目的；研究钙调蛋白激酶（CaMKⅡ）在钙通道“run-down”现象发生及恢复过程中的作用机制。方法：用酶分离单个豚鼠心室肌细胞，利用膜片钳单通道技术，在细胞膜面内向外的模式下，诱发L型钙通道“run-down”现象。制备活性钙调蛋白激酶（CaMKⅡ αT286D），记录并分析它在L型钙通道“run—down”现象中的影响。结果：在细胞膜面内向外的钳制模式下1分钟后，细胞内液中加入CaMK ⅡαT286D（1-30μM），仅使钙通道活性恢复2-10％。但发现CaMKⅡ αT286D可消除CaM对钙通道“run-down”现象恢复作用的时间依存性。在CaMKⅡ αT286D和CaM共同存在条件下，记录到第5分钟的钙通道活性（158．1±62．2％）几乎等同于第1分钟的（148．4±55．5％）。制备CT-1，即含豚鼠Cav1．2通道蛋白C末端1509．1789氨基酸的一个GST融合蛋白。Pull-down实验结果显示，CT-1经CaMKⅡ αT286D处理后，CaM的亲和力高于未经磷酸化或去磷酸化处理的亲和力。结论：CaMKⅡ介导的L型钙通道磷酸化调节了CaM对钙通道的亲和力，延长了CaM对钙通道“run-down”现象恢复作用时间，是“run-down”现象的一个重要调节因子。

关键词：钙调蛋白激酶 L型钙通道恢复过程 Pull-down CaMKⅡ 膜片钳单通道技术钙通道活性 GST融合蛋白

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钙调蛋白在钙通道钙依赖性易化与失活机制中的作用

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中国药理通讯 2009年第2期26卷 41-41页

作者：郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110001

电压门控钙通道受钙依赖性易化和失活两种相互对立的反馈机制的调节。研究表明此调节机制的失衡与心律失常等的发病机制密切相关。目前认为不同浓度的钙离子，通过作为钙感受器的钙调蛋白（calmodulin，CaM）的介导，分别引发钙依赖性... 详细信息

电压门控钙通道受钙依赖性易化和失活两种相互对立的反馈机制的调节。研究表明此调节机制的失衡与心律失常等的发病机制密切相关。目前认为不同浓度的钙离子，通过作为钙感受器的钙调蛋白（calmodulin，CaM）的介导，分别引发钙依赖性易化和失活。然而，同一分子CaM如何介导易化和失活两个相对立的过程，其具体机制尚不明确。本研究采用膜片钳单通道的膜内向外记录技术观察了豚鼠心室肌L型钙通道的钙依赖性易化与失活过程，并观察了不同浓度的CaM和[Ca2＋]对此过程的影响。结果表明：在100nM[Ca2＋]下，CaM（0．1-14μM）对钙通道活性的影响呈先增高后降低的过程，浓度依赖性曲线为钟型，而不是S型。随着钙离子浓度的增加，此钟型曲线向左侧（即低CaM浓度侧）移动。然而，如果钙通道活性发生“run-down”现象而消失后，CaM对钙通道活性的“钟型”调节作用及钙依赖性易化与失活也同时消失。钙调蛋白激酶Ⅱ的存在可以使钙通道恢复对钙离子和CaM调节的感受性。上述结果提示钙通道钙依赖性易化与失活是一个复杂的过程，钙通道同时存在钙依赖性和CaM依赖性易化和失活过程，而这些过程是在钙通道磷酸化的基础上进行的。

关键词：电压门控钙通道钙调蛋白激酶Ⅱ 钙依赖性失活机制易化浓度依赖性钙通道活性钙离子浓度

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mGluR1在自发性癫痫大鼠海马中的表达

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中国药理学通报 2008年第9期24卷 1143-1146页

作者：王清华杨丹蔡际群孙凤中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110001

目的检测自发性癫痫大鼠海马中mGluR1的表达情况。方法RT-PCR技术检测鼠海马中mGluR1基因的表达;利用免疫组化和Western blot方法检测鼠海马中mGluR1总蛋白的表达。结果自发性癫痫大鼠海马中mGluR1基因总水平下降(P0.05),mGluR1阳性的... 详细信息

目的检测自发性癫痫大鼠海马中mGluR1的表达情况。方法RT-PCR技术检测鼠海马中mGluR1基因的表达;利用免疫组化和Western blot方法检测鼠海马中mGluR1总蛋白的表达。结果自发性癫痫大鼠海马中mGluR1基因总水平下降(P<0.05),免疫组化显示海马DG区和CA3区的mGluR1蛋白表达均下降(P<0.05),CA1区无变化(P>0.05),mGluR1阳性的神经细胞其密度较正常鼠增强;Western blot检测mGluR1蛋白总量下降(P<0.05)。结论自发性癫痫大鼠海马中总mGluR1表达下调,单一细胞表达增强。

关键词： mGluR1 RT—PCR 免疫组化 Western blot 自发性癫痫大鼠

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非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用(英文)

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中国病理生理杂志 2008年第3期24卷 552-557页

作者：许华海广范许虹向继洲暨南大学药学院毒理学教研室广东广州510632 新乡医学院药学院药理学教研室河南新乡453003 华中科技大学同济医学院湖北武汉430030

目的:探讨非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子(nm-haFGF)对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响。方法:摘除大鼠左侧肾脏,随即夹毕大鼠右侧肾动脉60 min,24 h后松开动脉夹,建立肾缺血再灌注损伤模型。再灌注后5 min后,经舌静脉注射不同剂量的nm... 详细信息

目的:探讨非促分裂型人酸性成纤维细胞生长因子(nm-haFGF)对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响。方法:摘除大鼠左侧肾脏,随即夹毕大鼠右侧肾动脉60 min,24 h后松开动脉夹,建立肾缺血再灌注损伤模型。再灌注后5 min后,经舌静脉注射不同剂量的nm-haFGF,并用haFGF作为对照。24 h后取大鼠肾组织、血液和尿液,检测肾脏组织和血液中SOD、MDA以及血液和尿液中BUM、Cr的变化,并进行肾组织病理学检测。结果:缺血再灌注24 h后,nm-haFGF所有剂量组和haFGF组血清SOD活性明显高于模型组,MDA含量明显低于模型组,而血清和尿BUN和Cr含量均明显低于模型组;肾组织SOD活性在nm-haFGF 20μg/kg和40μg/kg剂量组和haF-GF组明显升高而MDA含量明显降低。组织学检查结果显示,nm-haFGF可明显减轻缺血再灌注引起的肾组织水肿,肾小管刷状缘脱落和细胞坏死。结论:nm-haFGF可拮抗肾缺血再灌注引起的损伤。

关键词：成纤维细胞生长因子2 再灌注损伤肾

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自发性癫痫大鼠海马区谷氨酸转运体GLAST表达下调

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大连医科大学学报 2008年第1期30卷 5-7,21页

作者：屠达宇蔡际群姚维凡郭凤中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110001

[目的]通过对照实验探讨自发性癫痫大鼠(spontaneously epilepsy rats,SER)与正常Wistar大鼠海马区胶质细胞型谷氨酸转运体GLAST蛋白的表达情况,以期发现其与遗传性癫痫发病的关系。[方法]利用聚合酶链反应(PCR)扩增SER的特异性基因片段... 详细信息

[目的]通过对照实验探讨自发性癫痫大鼠(spontaneously epilepsy rats,SER)与正常Wistar大鼠海马区胶质细胞型谷氨酸转运体GLAST蛋白的表达情况,以期发现其与遗传性癫痫发病的关系。[方法]利用聚合酶链反应(PCR)扩增SER的特异性基因片段,筛选出SER;利用免疫荧光定位GLAST蛋白的表达,并应用免疫组织化学技术,检测GLAST蛋白在SER及正常Wistar大鼠海马内的表达情况。[结果]GLAST蛋白在SER海马的齿状回(DG)表达与正常Wistar大鼠相比明显减少(GLAST的表达为Wistar:52.67±11.5,SER:39.39±9.48,P<0.05),在海马CA1和CA3区表达差异无显著性意义(CA1区为Wistar:48.56±10.6,SER:45.84±7.20;CA3区为Wistar:43.29±10.6,SER:36.73±6.50,P>0.05)。[结论]SER自发性癫痫可能与海马DG区GLAST蛋白表达下降有关;GLAST表达下降可能是由SER基因位点的突变引起的。

关键词：自发性癫痫大鼠 SER 海马谷氨酸转运体 GLAST

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网络PBL平台建设及其在药理学教学中的应用

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中国药理通讯 2009年第4期26卷 37-37页

作者：郝丽英胡慧媛封瑞赵金生陈再兴杨雄陈金宝蔡际群中国医科大学药学院药物毒理学教研室中国医科大学网络教育中心沈阳110001

在药理学PBL教学中我们发现文献参考资料的获得是影响PBL应用的“瓶颈”问题之一。随着互联网技术的迅速进步和普及率的大幅度提高，我校开始大规模的使用电脑网络，并大力地进行光盘数据库等电子图书馆的建设，利用网络查找资料、进行... 详细信息

在药理学PBL教学中我们发现文献参考资料的获得是影响PBL应用的“瓶颈”问题之一。随着互联网技术的迅速进步和普及率的大幅度提高，我校开始大规模的使用电脑网络，并大力地进行光盘数据库等电子图书馆的建设，利用网络查找资料、进行交流已经十分便捷。同时，为了解决PBL教学中时间和空间的限制及师资力量不足，并方便学生讨论时查找资料，

关键词： PBL教学药理学教学电脑网络互联网技术电子图书馆光盘数据库师资力量学生讨论

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M受体-G蛋白信号转导途径研究进展

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国际药学研究杂志 2008年第2期35卷 87-91页

作者：孙科郭政东中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110001

毒蕈碱乙酰胆碱受体(mAChR)是G蛋白偶联受体超家族中的一员,具有该家族特征性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白(G protein)是一类具有GTP酶活性的蛋白质,由α、β和γ三个亚基构成。mAChR可以与G蛋白偶联,引起GTP与α亚基结合,导致Gα... 详细信息

毒蕈碱乙酰胆碱受体(mAChR)是G蛋白偶联受体超家族中的一员,具有该家族特征性的结构和信号转导方式。GTP结合蛋白(G protein)是一类具有GTP酶活性的蛋白质,由α、β和γ三个亚基构成。mAChR可以与G蛋白偶联,引起GTP与α亚基结合,导致Gα与Gβγ分离。近年来发现,不但Gα-GTP可以调节效应分子,Gβγ也可以调节许多效应分子如腺苷酸环化酶、磷脂酶C、K+通道、Ca2+通道、MAPK和受体激酶等,介导一系列的生物学效应,在信号转导过程中发挥重要的作用。

关键词：受体毒蕈碱 GTP结合蛋白信号转导效应分子

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自发性癫痫大鼠海马Ⅰ型与Ⅲ型钠通道α亚基表达上调

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中国药理学通报 2007年第1期23卷 23-27页

作者：郭凤于娜蔡际群屠达宇金戈中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110001

目的通过对照实验探讨自发性癫痫大鼠(SER)与野生型正常大鼠(WTC)海马Ⅰ型和Ⅲ型电压门控性钠通道α亚基mRNA与蛋白的表达情况。方法发现SER癫痫大发作后即刻提取海马组织总RNA,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)表达α1与α3亚基mRNA;... 详细信息

目的通过对照实验探讨自发性癫痫大鼠(SER)与野生型正常大鼠(WTC)海马Ⅰ型和Ⅲ型电压门控性钠通道α亚基mRNA与蛋白的表达情况。方法发现SER癫痫大发作后即刻提取海马组织总RNA,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)表达α1与α3亚基mRNA;应用免疫荧光与免疫组化定位与表达α1亚基蛋白与α3亚基ⅢN蛋白。结果SER海马Ⅰ型与Ⅲ型钠通道α亚基mRNA表达高于WTC(P<0·01);SER海马Ⅰ型钠通道α亚基蛋白表达高于WTC(P<0·01);α3亚基ⅢN型蛋白在SER成鼠有表达,而WTC成鼠无表达。结论SER脑内海马Ⅰ型与Ⅲ型电压门控性钠通道α亚基表达上调,可能是神经元高兴奋性的原因或癫痫发作的继发表现。

关键词：电压门控性钠通道癫痫亚基自发性癫痫大鼠

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