检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医科大学学报 2017年第3期46卷 223-226,237页

作者：孙德日胡慧媛朱悦中国医科大学附属第四医院骨科沈阳110032 中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110122 中国医科大学附属第一医院骨科沈阳110001

目的建立一种损伤更小、存活率更高、适用范围更广的改良的脊髓半横断损伤大鼠模型。方法将20只雌性SpragueDawley大鼠随机分为常规脊髓半横断模型组和改良脊髓半横断模型组,分别采用常规和改良的脊髓半横断法制备大鼠脊髓损伤模型,分... 详细信息

目的建立一种损伤更小、存活率更高、适用范围更广的改良的脊髓半横断损伤大鼠模型。方法将20只雌性SpragueDawley大鼠随机分为常规脊髓半横断模型组和改良脊髓半横断模型组,分别采用常规和改良的脊髓半横断法制备大鼠脊髓损伤模型,分别于术后1 d、3 d、1周和2周通过Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)运动功能学评分评价大鼠后肢运动功能的恢复情况,并结合手术时间、术中出血量、术中脊髓后正中线定位以及二次手术显露脊髓的成功率等主要参数,比较2组间的差异。结果改良脊髓半横断模型组较常规脊髓半横断模型组手术时间更短,术中出血量明显减少,BBB运动功能学评分更优,术中脊髓后正中线定位更准确,二次手术显露脊髓的成功率更高。在改良的脊髓半横断模型基础上,成功建立了脊髓瘢痕组织移植模型,成功率可达70%以上。结论改良的脊髓半横断模型在手术时间、术中出血量、运动功能学评分、术中脊髓后正中线定位及二次手术显露脊髓方面均表现出明显优势,更适用于脊髓损伤研究,尤其是非急性期脊髓损伤研究。

关键词：脊髓损伤大鼠模型改良

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钙调蛋白镁结合位点突变体载体的构建、表达纯化及鉴定

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中国医科大学学报 2016年第5期45卷 394-397页

作者：赵美眯李卓邵冬雪梁洪玥晏珊封瑞孙雪菲郭凤郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110122

目的构建钙调蛋白3种镁离子结合位点突变体的质粒载体,并进行表达纯化及鉴定,为深入研究钙调蛋白的生物学功能奠定基础。方法利用钙调蛋白cDNA进行点突变,制备3种镁离子结合位点突变的cDNA。将突变后的cDNA分别插入pGEX-6P-3载体,制备... 详细信息

目的构建钙调蛋白3种镁离子结合位点突变体的质粒载体,并进行表达纯化及鉴定,为深入研究钙调蛋白的生物学功能奠定基础。方法利用钙调蛋白cDNA进行点突变,制备3种镁离子结合位点突变的cDNA。将突变后的cDNA分别插入pGEX-6P-3载体,制备钙调蛋白突变体载体质粒。质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,培养大肠杆菌,并诱导GST融合蛋白表达。利用Glutathione-Sepharose 4B珠子和PreScission蛋白酶分离纯化蛋白。结果酶切鉴定和DNA测序证实成功构建钙调蛋白突变体质粒;表达纯化得到的钙调蛋白突变体经电泳图鉴定纯度较高,浓度约1.0mg/mL。结论本研究成功构建了钙调蛋白镁结合位点突变体融合蛋白原核表达质粒,分离纯化可获得较高浓度较高纯度的钙调蛋白突变体。

关键词：钙调蛋白突变体融合蛋白 pGEX-6P-3

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PBL结合网络教学平台在医学机能实验课中的应用

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解剖科学进展 2017年第6期23卷 656-657页

作者：陈航赵美眯郑晓娇王洋中国医科大学基础医学院机能实验中心辽宁沈阳110122 中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122

基于问题的学习（problem based learning，PBL），是指教师在教学过程中，以务实问题为导向，通过学生小组讨论的方式，来达到自主学习的目的。其特点是：以学生为中心问题讨论替代教师为中心的知识传授，注重学生综合分析能力的培养... 详细信息

基于问题的学习（problem based learning，PBL），是指教师在教学过程中，以务实问题为导向，通过学生小组讨论的方式，来达到自主学习的目的。其特点是：以学生为中心问题讨论替代教师为中心的知识传授，注重学生综合分析能力的培养，是从“知识传授型”教学向“能力培养型”教育的转变。近几年，以PBL教学法为主的教学改革一直应用在各个学科教学工作中，并取得了较好的成果。

关键词：网络教学平台 PBL教学法医学机能实验课应用以学生为中心综合分析能力自主学习知识传授

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注射异丙肾上腺素建立大鼠心肌肥厚模型

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中国医科大学学报 2017年第5期46卷 406-408,412页

作者：赵美眯李卓杨艳张翀翯陈思充曾晓荣郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110122 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室、四川省心血管疾病防治协同创新中心四川泸州646000

目的采用异丙肾上腺素诱导心肌肥厚,建立大鼠模型,并研究该动物模型的基本特性。方法大鼠背部皮下注射剂量为5 mg/kg的异丙肾上腺素,每日1次,连续注射14 d。结果模型组大鼠的全心重/体质量,左心室重/体质量均明显增加。模型组大鼠血清... 详细信息

目的采用异丙肾上腺素诱导心肌肥厚,建立大鼠模型,并研究该动物模型的基本特性。方法大鼠背部皮下注射剂量为5 mg/kg的异丙肾上腺素,每日1次,连续注射14 d。结果模型组大鼠的全心重/体质量,左心室重/体质量均明显增加。模型组大鼠血清中羟脯氨酸(HYP)含量显著增加。模型组大鼠心肌组织中总超氧化物歧化酶(SOD)含量与对照组相比显著降低,而丙二醛(MDA)含量明显升高。结论皮下注射异丙肾上腺素14 d,可成功诱导大鼠心肌肥厚模型,为深入研究心肌肥厚的确切机制奠定基础。

关键词：心肌肥厚异丙肾上腺素动物模型

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番石榴叶总三萜改善糖尿病周围神经病变

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中成药 2016年第5期38卷 961-966页

作者：叶开和王小康吕艳青魏崧丞李秀存张晓琦叶春玲暨南大学药学院药理学教研室广东广州510632 暨南大学中药及天然药物研究所广东广州510632

目的观察番石榴叶总三萜(TTPGL)对糖尿病大鼠周围神经病变(DPN)的改善作用,并探讨其作用机制。方法采用高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。将糖尿病大鼠随机分为6组,石榴叶总三萜低、中、高剂量组[30、60、120 mg/(... 详细信息

目的观察番石榴叶总三萜(TTPGL)对糖尿病大鼠周围神经病变(DPN)的改善作用,并探讨其作用机制。方法采用高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。将糖尿病大鼠随机分为6组,石榴叶总三萜低、中、高剂量组[30、60、120 mg/(kg·d)],正常组,模型组和罗格列酮组。测定坐骨神经运动传导速度(MCV)并对组织HE染色;利用RT-PCR检测坐骨神经组织肿瘤坏死因子-α(Tnfa),白细胞介素-6(Il6)和一氧化氮合酶(i NOS)mRNA的表达量;印迹法检测蛋白激酶B(AKT)、核转录因子κB激酶抑制因子IKKα、p65及其各自磷酸化蛋白表达。结果与模型组比较,石榴叶总三萜(120 mg/kg)组显著地改善了坐骨神经的神经病变(P<0.05);石榴叶总三萜显著性抑制各炎症因子mRNA的表达(P<0.05),并显著下调p-AKT/AKT、p-IKKα/IKKα、p-p65/p65的表达(P<0.01或P<0.05)。结论石榴叶总三萜具有显著改善DPN的作用,其机制可能通过下调NF-κB介导的信号通路,从而减少炎症介质产生。

关键词：番石榴叶总三萜糖尿病周围神经病变炎性介质 NF-κB通路

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番石榴叶总三萜改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗

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中国病理生理杂志 2016年第2期32卷 314-320页

作者：李秀存马锦锦赵晶晶叶开和吕艳青王小康魏崧丞张晓琦叶春玲暨南大学药学院药理学教研室广东广州510632 广东省妇幼保健院药学部广东广州511400 暨南大学中药与天然药物研究所广东广州510632

目的：观察番石榴叶总三萜（TTPGL）对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗（IR）的改善作用,并探讨其可能的作用机制。方法：培养3T3-L1前脂肪细胞并诱导其分化,给予TTPGL（0.3、1、3、10μg/L）,并设溶媒（0.1%DMSO）组、阳性药正钒酸钠（Van,10... 详细信息

目的：观察番石榴叶总三萜（TTPGL）对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗（IR）的改善作用,并探讨其可能的作用机制。方法：培养3T3-L1前脂肪细胞并诱导其分化,给予TTPGL（0.3、1、3、10μg/L）,并设溶媒（0.1%DMSO）组、阳性药正钒酸钠（Van,10μmol/L）组、正常对照（control）组和模型（model）组,药物作用48 h。MTT法检测药物对前脂肪细胞活力的影响,油红O染色法观察其对细胞分化的影响。建立IR模型后,药物处理48 h,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法（GOD-POD）检测IR脂肪细胞上清液中葡萄糖消耗量;比色法检测游离脂肪酸（FFA）水平;ELISA法检测脂肪因子分泌水平;real-time PCR检测IR脂肪细胞蛋白酪氨酸激酶1B（PTP1B）的mRNA表达量;Western blot检测磷酸化胰岛素受体底物1/胰岛素受体底物1（p-IRS-1/IRS-1）和磷酸化蛋白激酶B/蛋白激酶B（p-Akt/Akt）的蛋白水平。结果：与溶媒组比较,TTPGL显著提高了前脂肪细胞的活力并抑制其分化（P〈0.01）。与IR溶媒组比较,无论在基础状态下还是胰岛素刺激状态下,TTPGL（1-10μg/L）均显著地促进了IR脂肪细胞葡萄糖消耗（P〈0.01）;TTPGL（0.3～3μg/L）显著抑制FFA的产生（P〈0.01）。与模型组比较,TTPGL（0.3和3μg/L）显著增加IR脂肪细胞脂联素的分泌（P〈0.05）并抑制TNF-α的分泌（P〈0.01）,TTPGL（3μg/L）对抵抗素的分泌有显著抑制作用（P〈0.05）,对瘦素分泌无显著作用;TTPGL（3μg/L）显著下调IR脂肪细胞PTP1B的mRNA表达（P〈0.01）;TTPGL（3μg/L）极显著上调p-IRS-1/IRS-1的水平;TTPGL（0.3和3μg/L）显著上调p-Akt/Akt的蛋白水平（P〈0.05）。结论：TTPGL具有显著改善3T3-L1脂肪细胞IR的作用,其作用机制可能与TTPGL下调了IR脂肪细胞PTP1B mRNA的表达、同时上调p-IRS-1/IRS-1和p-Akt/Akt的蛋白水平有关。

关键词：番石榴叶总三萜胰岛素抵抗蛋白酪氨激酶1B 胰岛素受体底物1 蛋白激酶B

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电压门控钠离子通道Na_v1.1与癫痫

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解剖科学进展 2016年第1期22卷 95-98页

作者：余晓芬王千慧郭凤中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122

癫痫的发生与电压门控钠通道基因突变密切相关,涉及到电压门控性钠通道亚型以NaV1.1亚型的基因突变最为重要。编码电压门控钠离子通道NaV1.1亚型的SCN1A基因突变可改变钠离子通道电生理功能,如电流-电压曲线的移动、电流幅度增加、失活... 详细信息

癫痫的发生与电压门控钠通道基因突变密切相关,涉及到电压门控性钠通道亚型以NaV1.1亚型的基因突变最为重要。编码电压门控钠离子通道NaV1.1亚型的SCN1A基因突变可改变钠离子通道电生理功能,如电流-电压曲线的移动、电流幅度增加、失活减慢等,使得神经元的兴奋性增加,造成神经元发生高频高幅的异常放电波,进而导致遗传性癫痫伴热性惊厥附加症、Dravet综合征、颞叶癫痫等多种癫痫病理类型。

关键词： Na_v1.1 颞叶癫痫基因突变热性惊厥异常放电钠离子通道电压曲线癫痫病电流幅度肌阵挛性癫痫

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MicroRNA与心血管疾病关系的研究

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生理科学进展 2015年第5期46卷 365-370页

作者：杨丽胡慧媛郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110122

MircroRNA(miRNA)是长度约为22个核苷酸的内源性非编码微小RNA,广泛存在于真核生物中。不同物种之间,miRNA序列高度保守。miRNA调控基因转录后水平的表达,因而在多种生物学过程以及许多疾病的发生发展中起着重要作用。近年来的大量研究... 详细信息

MircroRNA(miRNA)是长度约为22个核苷酸的内源性非编码微小RNA,广泛存在于真核生物中。不同物种之间,miRNA序列高度保守。miRNA调控基因转录后水平的表达,因而在多种生物学过程以及许多疾病的发生发展中起着重要作用。近年来的大量研究证实,miRNA广泛参与心脏发育和心血管疾病的发生发展,其中包括心肌肥厚、心肌纤维化、心肌坏死、心律失常、动脉粥样硬化、冠心病、高血压等。本文结合国内外关于miRNA在心血管疾病方面的研究做一概述。

关键词：心血管疾病研究进展

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钙蛋白酶抑制蛋白在神经系统疾病中的研究进展

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中华医学杂志 2015年第19期95卷 1550-1552页

作者：赵雪郝丽英郭凤中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110001

钙蛋白酶抑制蛋白（calpastatin，CAST）是钙蛋白酶（calpain，CAPN）的一种内源性和特异性抑制蛋白。它可以识别CAPN与Ca^2＋结合引起的构象变化并与之特异结合，起负向调控作用。CAST参与众多生理和病理变化的信号转导过程，与神经系... 详细信息

钙蛋白酶抑制蛋白（calpastatin，CAST）是钙蛋白酶（calpain，CAPN）的一种内源性和特异性抑制蛋白。它可以识别CAPN与Ca^2＋结合引起的构象变化并与之特异结合，起负向调控作用。CAST参与众多生理和病理变化的信号转导过程，与神经系统各种疾病密切相关。近年来CAST在神经系统疾病中的作用受到广泛关注，其与神经系统疾病的发病机制紧密相关，现对该方面研究最新进展作一综述。

关键词：钙蛋白酶抑制蛋白神经系统疾病 Ca^2+ 特异结合构象变化 CAPN 调控作用信号转导

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超声破碎法联合应用DTT提取纯化Ca_V1.2钙通道CT3蛋白

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解剖科学进展 2016年第6期22卷 602-605页

作者：苏敬阳封瑞吕力婷邵冬雪李墨方涵田魏贵贵孙雪菲郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110122 东北大学机械工程与自动化学院环境机械研究所沈阳110004

目的探讨心肌Ca_V1.2钙通道CT3蛋白片段提取与纯化的方法。方法将CT3的cDNA插入pG EX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL-21感受态细胞,大量培养并利用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导CT3的GST融合蛋白表达,并采用超声破碎法进行分离纯... 详细信息

目的探讨心肌Ca_V1.2钙通道CT3蛋白片段提取与纯化的方法。方法将CT3的cDNA插入pG EX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL-21感受态细胞,大量培养并利用异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导CT3的GST融合蛋白表达,并采用超声破碎法进行分离纯化,在10mmol/L二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol,DTT)存在的情况下,PreScission蛋白酶切除GST标签,凝胶电泳鉴定CT3蛋白,检测蛋白纯度和相对分子质量。结果 SDSPAGE结果显示,超声破碎法可以纯化得到GST-CT3融合蛋白,且单纯应用PreScission蛋白酶酶切GST-CT3,得到的CT3蛋白片段浓度较低,而采用PreS cission蛋白酶联合应用DTT则可以成功提取纯化出浓度较高的CT3蛋白片段。结论超声破碎法联合应用DTT与PreScission蛋白酶能够提取纯化出高浓度和纯度的CT3蛋白片段,为深入研究CT3的生物学功能奠定了基础。

关键词： DTT CT3 融合蛋白提取纯化超声破碎法

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