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2023年全国心血管药理学学术会议

作者：郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室

细胞膜L型钙通道(L-Type Calcium Channel,LTCC)是一种在细胞膜上发挥重要作用的蛋白通道,它对细胞内钙离子的进出起着关键的调控作用。然而,我们在研究LTCC的过程中发现了一个现象,即LTCC的电流会在膜片钳记录过程中逐渐减小,这一现象... 详细信息

细胞膜L型钙通道(L-Type Calcium Channel,LTCC)是一种在细胞膜上发挥重要作用的蛋白通道,它对细胞内钙离子的进出起着关键的调控作用。然而,我们在研究LTCC的过程中发现了一个现象,即LTCC的电流会在膜片钳记录过程中逐渐减小,这一现象被称为"run-down"。

关键词：钙通道心血管疾病 run-down 靶向药物分子机制

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豚鼠心室肌细胞中镁离子对L型钙通道易化与失活作用

豚鼠心室肌细胞中镁离子对L型钙通道易化与失活作用

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中国生理学会张锡钧基金会第十三届全国青年优秀生理学学术论文交流及评奖会议、中国生理学会第十一届全国青年生理学工作者学术会议

作者：赵美眯李卓郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室

本实验拟研究细胞内镁离子对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的调节机制。采用膜片钳单通道记录模式,记录不同细胞内镁离子浓度(intracellular Mgconcentration,[Mg])下,L型钙通道的单通道电流。结果发现,细胞内存在1.4 uM钙调蛋白（calmodulin... 详细信息

本实验拟研究细胞内镁离子对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的调节机制。采用膜片钳单通道记录模式,记录不同细胞内镁离子浓度(intracellular Mgconcentration,[Mg])下,L型钙通道的单通道电流。结果发现,细胞内存在1.4 uM钙调蛋白（calmodulin,CaM）和3 mM ATP的情况下,当游离[Mg]为0,10,10,10,10,和10M时,钙通道活性分别恢复至细胞贴附模式的44%,117%,202%,181%,147%和20%,呈现"钟形"的浓度依赖性曲线。并且

关键词：钙通道心室肌细胞镁离子失活作用

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细胞内因子介导的钙通道调节新机制

细胞内因子介导的钙通道调节新机制

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中国药理学会第九次全国会员代表大会暨全国药理学术会议

作者：郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室

钙离子通道在心脏节律性活动、腺体分泌及突触间信息传递等方面起着非常重要的作用。钙离子通道受细胞膜?肾上腺素受体、蛋白激酶 A、蛋白激酶 C、钙调蛋白激酶Ⅱ及细胞内钙等多种因素的调节。通过对心肌细胞钙通道“run-down”现象的研... 详细信息

钙离子通道在心脏节律性活动、腺体分泌及突触间信息传递等方面起着非常重要的作用。钙离子通道受细胞膜?肾上腺素受体、蛋白激酶 A、蛋白激酶 C、钙调蛋白激酶Ⅱ及细胞内钙等多种因素的调节。通过对心肌细胞钙通道“run-down”现象的研究,发现其基本活性的维持需要某些细胞内因子的存在,提出了细胞内因子介导的钙通道调节新机制的假说。“run-down”指在膜片钳 cell- attached 记录方式中,钙通道的活性可以维持很长时间,而在 whole-cell 等记录方式中,当细胞膜内侧接触人工基本生理液体后,钙通道活性则降低甚至消失的现象。牛心组织的粗提取液可以使已“run- down”的心肌 L 型钙通道的活性恢复至“run-down”前的80%以上,且其中相对分子量约为200 kD 的组分(P 组分)也有活性恢复作用,然而,其效能仅约为粗提液的10%。当 P 组分与相对分子量＞200 kD 的组分(H 组分)及 ATP 组合时,效能可提高至＞80%,尽管 H 组分本身没有明显的通道活性恢复作用。P 组分的有效成分为 calpain 的内源性阻滞药 calpastatin,且其 calpain 阻滞作用和钙通道活化作用是由其不同的功能领域担当的。关于 H 组分的有效成分目前尚不清楚。研究发现此细胞内因子介导的钙通道调节机制与钙调蛋白激酶Ⅱ的钙通道调节机制间有着复杂而又密切的联系。“run-down”现象可能与缺血性心脏病时心律失常的发生有关。阐明此机制对全面了解钙通道的功能调节和相关疾病的发生机制并发现新的治疗靶点都有着重要的理论和实际意义。

关键词：细胞内因子钙离子通道心肌细胞

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Ca_V1.2和钙调蛋白在自发性遗传性癫痫大鼠小脑中的异常表达

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解剖科学进展 2013年第1期19卷 27-31页

作者：马丽华吕昕瞳刘雅静徐晓雪闵冬雨程晓茜杨春宇蔡际群郭凤中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110001

目的研究自发性遗传性癫痫大鼠(Tremor,TRM)小脑组织中CaV1.2与钙调蛋白(Calmodulin,CaM)蛋白表达与共定位情况。方法应用Westernblot技术检测CaV1.2与CaM蛋白表达,应用免疫荧光技术定位CaV1.2与CaM蛋白的分布,应用激光共聚焦显微镜检测... 详细信息

目的研究自发性遗传性癫痫大鼠(Tremor,TRM)小脑组织中CaV1.2与钙调蛋白(Calmodulin,CaM)蛋白表达与共定位情况。方法应用Westernblot技术检测CaV1.2与CaM蛋白表达,应用免疫荧光技术定位CaV1.2与CaM蛋白的分布,应用激光共聚焦显微镜检测[Ca2+]。结果 TRM大鼠小脑内CaV1.2的蛋白表达低于正常iWistar大鼠(P<0.05),而CaM的蛋白表达高于正常Wistar大鼠(P<0.05);荧光定位显示CaV1.2与CaM共定位的阳性细胞比率较之正常组表达降低(P<0.01)。与正常的Wistar大鼠相比,急性分离的TRM大鼠小脑神经元中[Ca2+]明显增强。结论 TRM大鼠小脑内CaV1.2和CaM蛋白表达异常可能是癫痫的发病机制之一。

关键词：钙调蛋白遗传性癫痫电压门控性钙通道小脑大鼠

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网络PBL在药物毒理学教学中的应用及实践体会

网络PBL在药物毒理学教学中的应用及实践体会

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第八次全国药理学教学学术会议

作者：郝丽英郭凤封瑞胡慧媛赵金生赵美眯孙雪菲蔡际群中国医科大学药学院药物毒理学教研室

药物毒理学是临床药学专业的特色课程之一,其知识贯穿制药、药物安全性评价,新药审批,临床合理用药及不良反应监测的全过程。通过药物毒理学教学可以培养学生的专业意识及责任感。然而,药物毒理学涉及知识面广,内容繁琐、学生普遍反应... 详细信息

药物毒理学是临床药学专业的特色课程之一,其知识贯穿制药、药物安全性评价,新药审批,临床合理用药及不良反应监测的全过程。通过药物毒理学教学可以培养学生的专业意识及责任感。然而,药物毒理学涉及知识面广,内容繁琐、学生普遍反应难学。同时,教学和学习

关键词：临床药师临床药学专业 PBL 实践体会教学中的应用

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豚鼠钙调蛋白2基因编码区及3'端非编码区序列分析

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解剖科学进展 2015年第1期21卷 10-13页

作者：封瑞刘彦胡慧媛郭凤赵美眯赵金生郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122

目的比较分析豚鼠CaM2基因编码区及3'端非编码区序列,获得丰富的豚鼠CaM2基因生物遗传学信息。方法基因测序获得豚鼠CaM2基因编码区及3'端非编码区序列,通过genebank数据库获得不同种属CaM核苷酸序列,采用DNASTAR软件对CaM2不... 详细信息

目的比较分析豚鼠CaM2基因编码区及3'端非编码区序列,获得丰富的豚鼠CaM2基因生物遗传学信息。方法基因测序获得豚鼠CaM2基因编码区及3'端非编码区序列,通过genebank数据库获得不同种属CaM核苷酸序列,采用DNASTAR软件对CaM2不同部位序列进行多序列的比较分析。结果豚鼠CaM2基因编码区与人、小鼠和大鼠的同源率分别为96.7%、91.4%和90.5%,与人、小鼠、大鼠的CaMl和CaM3基因编码区序列的同源率在80%-85%之间。豚鼠CaM2基因3'端非编码区序列与人、小鼠和大鼠的同源率分别为94.2%、93.3%和90.0%,与人、小鼠、大鼠的CaM3基因3'端非编码区序列的同源率分别为26.8%、29.2%和25.9%,与CaMl的同源率在25%-63%之间。结论豚鼠CaM2基因编码区具有种属和亚型较高同源性特征,而CaM2基因3'端非编码区虽在不同种属中具有很高同源性,但在不同种属与其它亚型比对中同源性较低。

关键词：钙调蛋白豚鼠序列分析同源性

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ERK1/2信号通路和氧化应激参与异丙肾上腺素诱导的H9c2心肌细胞肥厚

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解剖科学进展 2023年第2期29卷 113-115页

作者：郑曦张晨阳郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122

目的探究ERK1/2信号通路和氧化应激在异丙肾上腺素(Isoprenaline,ISO)诱导的H9c2心肌细胞肥厚中的作用。方法将H9c2心肌细胞随机分为四组,以美托洛尔(Metoprolol)作为治疗药物,分别为正常(Control)组、正常对照(Control+Metoprolol)组... 详细信息

目的探究ERK1/2信号通路和氧化应激在异丙肾上腺素(Isoprenaline,ISO)诱导的H9c2心肌细胞肥厚中的作用。方法将H9c2心肌细胞随机分为四组,以美托洛尔(Metoprolol)作为治疗药物,分别为正常(Control)组、正常对照(Control+Metoprolol)组、心肌肥厚(ISO)组、Metoprolol治疗(ISO+Metoprolol)组。提取各组H9c2心肌细胞蛋白,用细胞膜荧光染色探针对H9c2心肌细胞形态学进行观察,荧光探针DCFH-DA检测活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)含量,Western blot检测ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达。结果与Control组相比,ISO组中心肌细胞表面积出现明显的增大,ROS含量显著升高,p-ERK1/2蛋白表达也显著升高,Control+Metoprolol组则没有明显变化。与ISO组相比,ISO+Metoprolol组中心肌细胞表面积减小,同时ROS含量降低,p-ERK1/2蛋白表达也降低。持续性给予ISO刺激,导致ROS积累增加,进而激活ERK1/2信号通路。结论Metoprolol抑制氧化应激和ERK1/2信号通路,从而改善心肌肥厚。

关键词： ISO ERK1/2 氧化应激 ROS 心肌肥厚美托洛尔

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癫痫电压门控性钙通道辅助亚基的研究进展

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解剖科学进展 2015年第6期21卷 670-673页

作者：张钰汇郝丽英郭凤中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110001

电压门控性钙通道结构和功能的变化引发外钙内流,而过度的钙内流引起神经元异常放电。因此,电压门控性钙通道作为神经元兴奋性的关键因素,在癫痫这种神经元异常放电疾病中发挥重要作用。β、α_2δ和γ作为其辅助亚基,可调节癫痫中神经... 详细信息

电压门控性钙通道结构和功能的变化引发外钙内流,而过度的钙内流引起神经元异常放电。因此,电压门控性钙通道作为神经元兴奋性的关键因素,在癫痫这种神经元异常放电疾病中发挥重要作用。β、α_2δ和γ作为其辅助亚基,可调节癫痫中神经元电压门控性钙通道的活性、靶向定位、表达密度等通道特性。本文对于电压门控性钙通道辅助亚基β、α_2δ在癫痫发病中的作用作一概述。

关键词：异常放电神经元兴奋性钙通道神经元细胞钙离子内流抗癫痫药物慢性脑部疾病靶向定位神经病理性疼痛神经系统疾病

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CSL与CaV 1.2钙通道N末端的相互结合作用

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解剖科学进展 2020年第6期26卷 622-625,629页

作者：薛迎春张峰慧雷帅周诗晏珊严玲邵冬雪苏敬阳胡慧媛郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122

目的探讨钙蛋白酶抑素结构域L(CSL)与CaV1.2钙通道N末端(NT)之间的相互结合作用。方法利用I-TASSER同源建模服务器,对豚鼠CaV 1.2钙通道N末端和人源CSL蛋白进行同源建模,利用MOE软件预测CSL和NT蛋白之间的结合,并采用GST pull-down实验... 详细信息

目的探讨钙蛋白酶抑素结构域L(CSL)与CaV1.2钙通道N末端(NT)之间的相互结合作用。方法利用I-TASSER同源建模服务器,对豚鼠CaV 1.2钙通道N末端和人源CSL蛋白进行同源建模,利用MOE软件预测CSL和NT蛋白之间的结合,并采用GST pull-down实验研究CSL和NT蛋白的结合特点。结果与MOE软件预测出CSL和NT蛋白可以结合,且在NT蛋白上存在两个结合位点;Pull-down实验进一步证实二者可以直接结合,且该结合具有CSL浓度依赖性。结论 CSL可以与NT蛋白结合,为进一步揭示CaV1.2钙通道的调节机制奠定了基础。

关键词： CaV1.2钙通道钙蛋白酶抑素 MOE GST pull-down

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生理周期对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

生理周期对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：封瑞印丹丹胡慧媛高青华孙瑞康丹阳张勇张正孙宇王红梅郭凤赵美眯郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室

目的检测生理周期对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及Ca MKⅡ蛋白表达的变化,探讨雌激素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与Ca MKⅡ信号通路的关系。方法实验共分7组,雄性大鼠3组,分别Control组、Male组以及Male+E2组,雌性大鼠4组,... 详细信息

目的检测生理周期对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及Ca MKⅡ蛋白表达的变化,探讨雌激素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与Ca MKⅡ信号通路的关系。方法实验共分7组,雄性大鼠3组,分别Control组、Male组以及Male+E2组,雌性大鼠4组,分为PE组(动情前期,动情期)、PE+E2组、MD组(动情后期,间期)和MD+E2组。观察各组心率(HR),测定灌流液中LDH和CK漏出量。Western blot方法检测不同生理周期Ca MKⅡ蛋白表达的改变。结果实验结果表明,与MD组比较,MD+E2组再灌注期间的HR明显升高(P<0.05),CK的漏出量减少(P<0.05),LDH的漏出量显著减少(P<0.05),与PE组比较,PE+E2组再灌注期间的HR、LDH、CK的漏出量均无明显改变。与对照组比较,MD组心肌梗死面积最大,MD+E2梗死面积下降(P<0.05)。与对照组比较,MD组P-Ca MKⅡ蛋白水平升高(P<0.05),而总Ca MKⅡ蛋白表达不变,P-Ca MKⅡ与Ca MKⅡ的比值增高;与MD组比较,MD+E2组的P-Ca MKⅡ蛋白表达下降(P<0.05)。结论雌激素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用可能与Ca MKⅡ信号传导通路相关。

关键词：缺血再灌注损伤生理周期雌激素信号通路

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