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第九届全国免疫学学术大会

作者：王欣玉胡峻岩金真伊陈少华杨力建卢育洪朱康儿吴秀丽李扬秋暨南大学医学院血液病研究所暨南大学附属第一医院血液科暨南大学再生医学教育部重点实验室

研究背景及目的:急性淋巴细胞白血病(ALL)具有高度的异质性,不同患者的疗效和预后具有较大的不同。寻找新的与成人ALL预后相关的基因靶标对于指导临床分层治疗以及探讨新的白血病靶向治疗靶点有着重要意义。新近报道HLA-G抗原表达水平... 详细信息

研究背景及目的:急性淋巴细胞白血病(ALL)具有高度的异质性,不同患者的疗效和预后具有较大的不同。寻找新的与成人ALL预后相关的基因靶标对于指导临床分层治疗以及探讨新的白血病靶向治疗靶点有着重要意义。新近报道HLA-G抗原表达水平与慢性B淋巴细胞白血病预后明显相关,且其临床敏感度较ZAP-70、CD38更高。我们的前期研究也发现急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者膜结合型HLA-G1基因高表达组复发率高

关键词：淋巴细胞白血病免疫调节 HLA-G 外周血

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HLA-G基因及免疫调节相关分子在急性B淋巴细胞白血病患者外周血中...

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：王欣玉胡峻岩金真伊陈少华杨力建卢育洪朱康儿吴秀丽李扬秋暨南大学医学院血液病研究所暨南大学附属第一医院血液科暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室

研究背景及目的:急性淋巴细胞白血病(ALL)具有高度的异质性,不同患者的疗效和预后具有较大的不同.寻找新的与成人ALL预后相关的基因靶标对于指导临床分层治疗以及探讨新的白血病靶向治疗靶点有着重要意义.新近报道HLA-G抗原表达水平与慢...

研究背景及目的:急性淋巴细胞白血病(ALL)具有高度的异质性,不同患者的疗效和预后具有较大的不同.寻找新的与成人ALL预后相关的基因靶标对于指导临床分层治疗以及探讨新的白血病靶向治疗靶点有着重要意义.新近报道HLA-G抗原表达水平与慢性B淋巴细胞白血病预后明显相关,且其临床敏感度较ZAP-70、CD38更高.我们的前期研究也发现急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者膜结合型HLA-G1基因高表达组复发率高于低表达组.最近的研究发现HLA-G能够诱导生成新型的调节性T细胞,并可能影响TH17/调节性T细胞的平衡,然而其免疫调节相关机制尚不明确.因此,我们首先定量分析了初发初治、难治复发以及临床缓解的B-ALL患者外周血中HLA-G基因及免疫调节相关分子(IL-17A、IL-23、RORc、RORa、t-bet、FOXP3、GATA-3和CD25)的表达水平.

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CML病人T细胞中TCRζ3'-UTR核苷酸多态性改变特点

CML病人T细胞中TCRζ3'-UTR核苷酸多态性改变特点

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：李琰朱康儿方苏廖紫薇郭理杏陈少华杨力建罗更新李萡李扬秋暨南大学附属医院血液科广州510632 再生医学教育部重点实验室暨南大学广州510632 暨南大学血液病研究所广州510632 暨南大学附属医院血液科广州510632 暨南大学血液病研究所广州510632 暨南大学血液病研究所广州510632

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急性髓系白血病中eIF4E高表达与疾病进展相关

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中国实验血液学杂志 2013年第2期21卷 296-299页

作者：蒋引娣卢育洪陈少华朱康儿张学利郁志钟隽张涛罗更新陈洁潘焕玉李琰秦恋岸李扬秋暨南大学附属第一医院血液科医学院血液病研究所再生医学教育部重点实验室广东广州510632

本研究检测未治疗、未缓解/复发及缓解期间急性髓系白血病(AML)和其他良性血液病患者骨髓细胞中eIF4E基因表达水平并分析其与疾病进展的关系。采用SYBR Green I荧光定量PCR和相对定量分析法检测30例AML患者(M2型6例,M3型5例,M4型8例,M5... 详细信息

本研究检测未治疗、未缓解/复发及缓解期间急性髓系白血病(AML)和其他良性血液病患者骨髓细胞中eIF4E基因表达水平并分析其与疾病进展的关系。采用SYBR Green I荧光定量PCR和相对定量分析法检测30例AML患者(M2型6例,M3型5例,M4型8例,M5型10例,M6型1例),11例AML化疗后完全缓解患者和20例非肿瘤性血液病患者骨髓单个核细胞的eIF4E表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2-△Ct×100%计算eIF4E基因表达水平。结果表明:AML未治疗及未缓解/复发组患者骨髓细胞eIF4E表达水平(7.098±5.544)%明显高于非肿瘤患者(0.248±0.163)%(P<0.01)和化疗后完全缓解患者(0.964±0.312)%(P<0.01),各AML亚型之间不存在统计学差异,尽管M4、M5亚型的表达水平相对较高。非白血病患者与缓解患者比较,eIF4E表达水平不存在显著性差异。结论:eIF4E基因在急性髓系白血病细胞中出现高表达,并随着疾病的缓解而明显降低,因此eIF4E有可能作为监测白血病进展的一项参数。

关键词： eIF4E基因实时定量PCR 急性髓系白血病

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多发性骨髓瘤患者外周血单个核细胞c-Cbl和Cbl-b基因表达下调

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第8期29卷 842-845页

作者：方苏郭翔宇冷秀秀李萡牛宇哲陈少华杨力建李扬秋暨南大学血液病研究所广东广州510632 第四军医大学学员七队陕西西安710032 暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632

目的研究多发性骨髓瘤（MM）患者外周血单个核细胞（PBMC）中c-Cbl和Cbl-b基因表达情况。方法收集23例MM患者和22例健康人PBMC, 利用SYBR-Green 实时荧光定量PCR方法检测MM患者和健康人PBMC中c-Cbl和Cbl-b基因相对表达水平; 利用RT-PC... 详细信息

目的研究多发性骨髓瘤（MM）患者外周血单个核细胞（PBMC）中c-Cbl和Cbl-b基因表达情况。方法收集23例MM患者和22例健康人PBMC, 利用SYBR-Green 实时荧光定量PCR方法检测MM患者和健康人PBMC中c-Cbl和Cbl-b基因相对表达水平; 利用RT-PCR方法分别扩增MM患者和健康人c-Cbl基因第7-10外显子, 并对PCR产物进行序列分析。结果MM组c-Cbl表达水平（中位数0.798%）, 与健康对照组c-Cbl表达水平（中位数2.443%）相比, 显著降低（P〈0.05）; Cbl-b表达水平（中位数0.714%）与健康对照组Cbl-b表达水平（中位数2.179%）比较, 也显著降低（P〈0.05﹚。在2例MM患者中检测到c-Cbl基因第7-10外显子存在2个大小不同的片段： 483 bp和148 bp, 分别为野生型c-Cbl和删除突变的c-Cbl基因, 所有PCR产物测序后均未发现突变。结论 MM患者PBMC中c-Cbl和Cbl-b基因表达下调。

关键词：多发性骨髓瘤 c-Cbl Cbl-b 荧光定量PCR RT-PCR

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MALT1基因2种转录本在正常人和B细胞白血病患者中的表达特点

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中国病理生理杂志 2013年第6期29卷 1124-1128,1132页

作者：王旭张帆徐艳吴秀丽陈少华杨力建李萡卢育洪李扬秋暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学第一附属医院血液科广东广州510632

目的:比较正常人和B细胞白血病患者外周血中黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤转位基因1(MALT1)2种异构体的分布和表达差异。方法:根据MALT1基因的结构特点,设计2对引物,通过建立2种转录本的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分析8例B细胞急性... 详细信息

目的:比较正常人和B细胞白血病患者外周血中黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤转位基因1(MALT1)2种异构体的分布和表达差异。方法:根据MALT1基因的结构特点,设计2对引物,通过建立2种转录本的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分析8例B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)、8例B细胞慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)和8例正常人的外周血单个核细胞(PBMC)中MALT1的表达情况。实时定量PCR分析各组样本的MALT1 mRNA表达水平。结果:所有样本中均能得到所预期的PCR产物,其中第1对引物可以扩增出2条片段,分别为MALT1转录本1(包含第5、6、7、8、9外显子)和MALT1转录本2(包含第5、6、8、9外显子),第2对引物只能扩增出1条包含转录本1的片段,所有PCR产物均通过核苷酸序列分析证实。MALT1 2种转录本均在外周血中有表达,并且MALT1转录本2表达水平高于转录本1。通过灰度分析发现,在B-ALL中,MALT1转录本1的灰度与正常人相比显著增高(P<0.05),而MALT1转录本2显著降低(P<0.05);在B-CLL中,MALT1 2种转录本的灰度与正常人相比无显著差异(P>0.05)。此外,B-ALL中,MALT1 mRNA表达水平(中位数:1.253)低于正常人(中位数:1.976)(P=0.05);而B-CLL中,MALT1 mRNA的表达水平与正常人相比无显著差异(P>0.05)。结论:MALT1 2种转录本均表达于正常和B细胞白血病样本中,但B-ALL中两者的表达水平有所差异,同时,B-ALL的MALT1 mRNA表达水平也有所降低。B-ALL中MALT1基因表达的异常可能影响MALT1信号通路而与疾病的发生发展相关。

关键词：黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤转位基因1 转录本白血病 B细胞基因表达

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MALT1-A20-NF-κB信号分子在MM中的表达特点

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2013年第4期34卷 373-377页

作者：王旭徐玲张帆徐艳吴秀丽杨力建陈少华李萡卢育洪李扬秋暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学血液病研究所广东广州510632 暨南大学第一附属医院血液科广东广州510632

目的:了解多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1)、A20与核转录因子κB(NF-κB)基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR和相对定量分析法检测20例MM患者(Ⅰ期7例,Ⅱ期3例,Ⅲ期10例)及21例健... 详细信息

目的:了解多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1)、A20与核转录因子κB(NF-κB)基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR和相对定量分析法检测20例MM患者(Ⅰ期7例,Ⅱ期3例,Ⅲ期10例)及21例健康人外周血单个核细胞(PBMC)中MALT1、A20和NF-κB基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2m)作为内参;采用相对定量公式:α^(-△Ct)×100%,分别计算MALT1、A20和NF-κB基因的表达水平。结果:MM患者PBMC中的MALT1和A20基因的表达水平较健康人都有明显的降低(P=0.000),而MM中NF-κB基因的表达水平较正常人有所升高,但无统计学差异(P>0.05)。在健康人组,MALT1和NF-κB的表达水平呈现正相关(P=0.001,r=0.666),而在MM组,MALT1、A20与NF-κB 3种基因均不存在明显相关性。同时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者MALT1基因的表达量较健康人明显降低(P<0.05),A20基因的表达量较健康人明显降低(P<0.01),而Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者MALT1、A20和NF-κB之间的表达情况均无统计学差异。结论:当MALT1-A20介导的细胞免疫和炎症的信号通路发生异常改变时,可能与MM的发生发展有着密切关系。

关键词：多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤(MM) 黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1) A20 NF-κB 基因表达

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髓性白血病的免疫调节和细胞免疫治疗研究进展

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2013年第6期34卷 571-576页

作者：李扬秋陈少华査显丰暨南大学再生医学教育部重点实验室广东广州510630 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学暨南大学附属第一医院临床检验中心广东广州510630

T细胞免疫状态与白血病病人抗白血病效应息息相关,在髓性白血病中,随着病情进展T细胞功能抑制更为明显。近年来,对于不同疾病不同阶段以及同种异型造血干细胞移植后复发病人,已形成了一些免疫治疗的新措施。本文主要介绍新近一些针对髓... 详细信息

T细胞免疫状态与白血病病人抗白血病效应息息相关,在髓性白血病中,随着病情进展T细胞功能抑制更为明显。近年来,对于不同疾病不同阶段以及同种异型造血干细胞移植后复发病人,已形成了一些免疫治疗的新措施。本文主要介绍新近一些针对髓性白血病的特异免疫治疗包括过继性细胞免疫治疗以及可能的免疫调节治疗的研究进展。

关键词：急性髓性白血病慢性粒细胞性白血病细胞毒T细胞免疫抑制免疫治疗

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B-ALL患者外周血γδT细胞TCR亚家族谱系分布和增殖特点

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免疫学杂志 2013年第2期29卷 147-151页

作者：胡峻岩吴秀丽陈少华杨力建李萡王亮李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广州510632 广州医学院第三附属医院急诊科 510150 暨南大学第一附属医院肿瘤科广州510632 再生医学教育部重点实验室

目的了解急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血T细胞的T细胞受体(TCR)Vγ和Vδ亚家族的T细胞谱系分布和克隆性增殖情况。方法利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测14例B-ALL患者外周血单个核细胞中3个TCR Vγ和8个TCR Vδ亚家族基... 详细信息

目的了解急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血T细胞的T细胞受体(TCR)Vγ和Vδ亚家族的T细胞谱系分布和克隆性增殖情况。方法利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测14例B-ALL患者外周血单个核细胞中3个TCR Vγ和8个TCR Vδ亚家族基因谱系的分布情况;进一步经荧光素标记和基因扫描分析TCR Vγ和TCR Vδ亚家族基因的互补决定区3(CDR3),以检测T细胞克隆性。10例健康成人外周血作为对照。结果 B-ALL患者外周血中TCR Vγ亚家族表达率降低,其中VγII亚家族表达率降低与健康对照组的差异具有统计学意义(P=0.006)。B-ALL患者外周血中Vδ1(57.1%)、Vδ2(42.9%)和Vδ3(14.3%)亚家族表达率均低于健康对照组,且差异有统计学意义(P=0.024,0.006,0.001)。此外,在B-ALL患者外周血中可以检测到在健康人中未检测到的Vδ4(14.3%)和Vδ5(14.3%)亚家族;且Vδ6(28.6%)、Vδ7(21.4%,)和Vδ8(35.7%)亚家族表达率也高于健康对照组。B-ALL患者外周血中存在克隆性增殖的Vγ和Vδ亚家族T细胞,其中,Vδ8亚家族T细胞寡克隆增殖的发生频率最高(35.7%),其次为Vδ6(28.6%)和Vδ7(21.4%)亚家族T细胞。结论 B-ALL患者外周血TCR Vγ和TCR Vδ亚家族T细胞出现限制性表达和克隆性增殖,其中高频率出现的寡克隆性增殖的Vδ亚家族T细胞可能与体内存在的白血病抗原相关。

关键词：急性B淋巴细胞白血病 γδT细胞 T细胞受体基因扫描克隆性

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PML-RARα245与hGM-CSF双基因DNA疫苗的构建与表达

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江苏医药 2013年第8期39卷 878-881,F0002页

作者：胡刚周羽竝岑东芝杨力建陈少华李扬秋惠东县人民医院内二科广东省516300 暨南大学医学院血液病研究所暨南大学医学院生化教研室暨南大学再生医学教育部重点实验室

目的采用长度为245bp的急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因片段构建新的PML-RARα与hGM-CSF真核双表达载体。方法用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增长度为245bp的PML-RARα基因片段,PCR技术从pORF-hGM-CSF质粒中扩增出hGM-CSF基因,... 详细信息

目的采用长度为245bp的急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因片段构建新的PML-RARα与hGM-CSF真核双表达载体。方法用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增长度为245bp的PML-RARα基因片段,PCR技术从pORF-hGM-CSF质粒中扩增出hGM-CSF基因,分别将两基因片段连接到pIRES质粒的多克隆位点A和B中,构建真核双表达载体。用酶切和序列分析方法验证所构建载体的正确性。将重组质粒转染K562细胞,利用RT-PCR和点杂交技术检测重组质粒在真核细胞中的转录和翻译情况。结果双酶切结果证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα基因片段及hGM-CSF基因,序列分析证明重组质粒中插入片段的碱基序列完全正确。该重组质粒能够在真核细胞中正常转录和翻译。结论成功构建了含有PML-RARα245及hGM-CSF的双表达载体,为筛选合适的抗原片段用于构建治疗急性早幼粒细胞白血病的PML-RARαDNA疫苗提供重要资料。

关键词： PML-RARα融合基因 hGM-CSF基因急性早幼粒细胞白血病 DNA疫苗

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