检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞钙离子转运蛋白兰尼碱受体3与ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块形成的关系

中国病理生理杂志 2012年第9期28卷 1686-1689页

作者：冯利霞葛长江吕树铮孙海梅季凤清霍勇首都医科大学附属北京安贞医院心内科北京市心肺血管疾病研究所北京100029 首都医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室北京100069 北京大学第一医院心内科北京100034

目的:观察细胞钙离子转运蛋白兰尼碱受体3(ryanodine receptor 3,RYR3)在动脉粥样硬化斑块形成过程中的改变,探讨两者的相关性。方法:选取6周龄雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠及野生型C57BL/6J小鼠,高脂饲喂20、27和33周后,在各个... 详细信息

目的:观察细胞钙离子转运蛋白兰尼碱受体3(ryanodine receptor 3,RYR3)在动脉粥样硬化斑块形成过程中的改变,探讨两者的相关性。方法:选取6周龄雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠及野生型C57BL/6J小鼠,高脂饲喂20、27和33周后,在各个时点处死动物取主动脉根部制作连续切片。(1)HE染色,观察组织形态学的变化,计算机图像分析仪测量斑块面积和血管管腔面积,计算校正斑块面积(斑块面积/血管管腔面积)。(2)免疫组织化学染色,计算机图像分析仪测定不同周龄小鼠细胞钙离子转运蛋白RYR3表达变化。结果:与同周龄对照组小鼠相比,ApoE-/-小鼠体内RYR3表达显著减少(P<0.05),随着ApoE-/-小鼠周龄的增加,RYR3的表达明显减少,且与斑块面积/血管管腔面积呈负相关(r=-0.652,P<0.01)。结论:细胞钙离子转运蛋白RYR3参与动脉粥样硬化的病理过程,且与动脉粥样硬化斑块的形成密切相关。

关键词：兰尼碱受体3 载脂蛋白E 动脉粥样硬化

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梅毒螺旋体Gpd-IL-2融合基因原核表达重组体的构建、表达及免疫活性的初步研究

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中南医学科学杂志 2012年第2期40卷 131-135页

作者：赵飞骏张晓红余坚刘双全曾铁兵张跃军吴移谋南华大学医学院病原生物学研究所湖南衡阳421001 南华大学医学院组织学与胚胎学教研室南华大学附属第一医院

目的以梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白基因Gpd及细胞因子佐剂IL-2为目的基因,融合构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2,表达鉴定并进行免疫活性的初步分析,为进一步开展Tp疫苗动物实验打下基础。方法定向克隆构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2... 详细信息

目的以梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白基因Gpd及细胞因子佐剂IL-2为目的基因,融合构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2,表达鉴定并进行免疫活性的初步分析,为进一步开展Tp疫苗动物实验打下基础。方法定向克隆构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2进行诱导表达;Ni亲和层析纯化重组融合蛋白后,Western blot检测其免疫反应性;免疫新西兰兔评价重组蛋白的免疫原性。结果成功构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2,表达鉴定及纯化获得相对分子量约为60 kDa的融合蛋白;Western blot检测其能与梅毒阳性血清发生特异性结合,说明两融合基因之间的表达相互没受到太大影响;纯化的Gpd-IL-2重组蛋白免疫新西兰兔能诱导其产生特异性免疫应答,ELISA检测免疫血清中特异性抗体滴度在1∶6 400以上。结论 Gpd-IL-2融合基因重组蛋白具有良好的免疫活性,这为进一步开展Tp疫苗动物实验条件的优化打下一定的基础。

关键词：梅毒螺旋体 Gpd IL-2 融合表达免疫原性

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食管鳞状细胞癌TE-13细胞线粒体DNA及细胞凋亡检测

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郑州大学学报（医学版） 2012年第3期47卷 281-283页

作者：刘宗文冯付明王亚莉杨建萍庞霞王峰郭凤玲郑国香闫俊宇张功员陈奎生郑州大学第二附属医院肿瘤科郑州450014 郑州大学第一附属医院病理科河南省肿瘤病理重点实验室郑州450052 新乡医学院生理学与神经生物学教研室新乡453100 郑州大学第一附属医院肿瘤科郑州450052 河南省中医院内科郑州450002 郑州幼儿师范学校郑州450000 郑州大学外语学院郑州450001 郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450001

目的:检测人食管鳞状细胞癌TE-13细胞中线粒体DNA(mtDNA)与细胞凋亡的发生情况及可能的关系。方法:TE-13细胞分为2组:溴化乙啶(EB)处理组在细胞培养液中加入50mg/LEB,未处理组常规培养;在培养第4、8和12天分别利用半定量RT-PCR检测2组细... 详细信息

目的:检测人食管鳞状细胞癌TE-13细胞中线粒体DNA(mtDNA)与细胞凋亡的发生情况及可能的关系。方法:TE-13细胞分为2组:溴化乙啶(EB)处理组在细胞培养液中加入50mg/LEB,未处理组常规培养;在培养第4、8和12天分别利用半定量RT-PCR检测2组细胞mtDNA的表达,利用流式细胞术检测细胞的凋亡情况。结果:EB处理组的第4天和第8天mtDNA的表达量分别为(0.467±0.031)和(0.197±0.015),到第12天mtDNA已完全丢失,未处理组分别为(0.660±0.046)、(0.673±0.031)和(0.653±0.021),差异有统计学意义(F组间=1133.878,F时间=109.058,F交互=104.597;P<0.001)。流式细胞术检测结果显示,EB处理组凋亡细胞百分比高于未处理组(F组间=2773.035,F时间=407.652,F交互=406.641;P<0.001)。结论:抑制TE-13细胞中mtDNA的复制可能会促进细胞凋亡。

关键词：食管肿瘤鳞状细胞癌 TE-13细胞线粒体DNA 凋亡

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女性髋骨闭孔解剖学测量及意义

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现代生物医学进展 2012年第32期12卷 6218-6220,6217页

作者：郑素娟王岐本郑林丰伍校琼朱武蔡维君中南大学基础医学院组织学与胚胎学系湖南长沙410013 河南省登封市人民医院河南郑州452470 湘南学院人体解剖学教研室湖南郴州423000 上海交通大学附属第一人民医院上海200080 中南大学基础医学院人体解剖学与神经生物学系湖南长沙410013

目的:测量闭孔与周围骨性标志间的距离关系,积累相关应用解剖学数据。方法:选取完整女性髋骨49例(其中左侧20例,右侧29例),用游标卡尺、圆规和直尺测量闭孔与与周围骨性标志间的距离。结果:测得左、右侧闭孔前后结节、闭孔最长径、尿道... 详细信息

目的:测量闭孔与周围骨性标志间的距离关系,积累相关应用解剖学数据。方法:选取完整女性髋骨49例(其中左侧20例,右侧29例),用游标卡尺、圆规和直尺测量闭孔与与周围骨性标志间的距离。结果:测得左、右侧闭孔前后结节、闭孔最长径、尿道括约肌附着点至耻骨结节、尿道括约肌附着点至坐骨结节中点、坐骨结节中点至闭孔、坐耻弓长、坐耻弓中点宽、耻骨结节至闭孔前结节、耻骨结节至髂耻隆起、坐骨结节中点至坐骨棘的距离分别为31.8±3.6 mm和31.5±4.2 mm、45.7±3.9 mm和46.9±3.9mm、60.5±5.6 mm和54.9±6.0 mm、58.4±8.5 mm和61.7±6.3 mm、32.7±1.9 mm和32.8±3.6 mm、45.6±5.6 mm和46.7±4.0mm、13.1±2.7 mm和12.8±2.8 mm、40.6±4.3 mm和38.8±6.5 mm、49.6±4.0 mm和47.8±4.8 mm、42.9±4.4 mm和41.9±7.0mm,左右侧差异无统计学意义(P>0.05)。结论:闭孔解剖学测量资料可为相关疾病诊治及妇科和盆会阴部手术提供一定的解剖学依据。

关键词：髋骨闭孔解剖学测量女性

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小鼠实验性自身免疫脑脊髓炎模型中T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子一3的表达及临床意义分析

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解剖学杂志 2011年第6期34卷 774-777页

作者：刘页玲尹春华朱清仙井冈山大学医学院解剖学与组织学胚胎学教研室吉安343000 2南昌大学第一附属医院妇产科南昌大学医学院组织学与胚胎学教研室南昌330006

目的：分析小鼠实验性自身免疫脑脊髓炎（EAE）模型中神经系统及引流淋巴结T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子（Tim-3）的表达，同时监测阻断该分子功能后对EAE小鼠临床评分的影响。方法：建立小鼠EAE模型，在规定时间点处死小鼠后获取脑部组... 详细信息

目的：分析小鼠实验性自身免疫脑脊髓炎（EAE）模型中神经系统及引流淋巴结T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子（Tim-3）的表达，同时监测阻断该分子功能后对EAE小鼠临床评分的影响。方法：建立小鼠EAE模型，在规定时间点处死小鼠后获取脑部组织及免疫部位引流淋巴结。应用RT-PCR检测脑组织中Tim-3mRNA水平且使用流式细胞术检测引流淋巴结Tim-3阳性细胞。另外，EAE模型构建后分别使用Tim-3封闭抗体或PBS给予治疗，记录实验组及对照组小鼠临床评分。结果：与正常小鼠相比，EAE模型中脑组织Tim-3mRNA表达增高，且引流淋巴结中Tim-3阳性的细胞数也增多。此外，使用Tim-3封闭抗体治疗的小鼠和PBS治疗的相比，明显加重EAE小鼠临床症状。结论：Tim-3分子通路在EAE模型中表达增高，该分子有望成为EAE模型新的治疗靶点。

关键词：实验性自身免疫脑脊髓炎 T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子一3 脑引流淋巴结临床评分

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结肠癌VEGF、p53和CerbB-2蛋白联合表达与肝肺转移的关系

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实用医学杂志 2011年第9期27卷 1593-1595页

作者：丁晖潘运龙覃莉施宏词暨南大学附属第一医院普外科广州市510632 暨南大学医学院组织与胚胎学教研室广州市510632

目的:探讨结肠癌组织中VEGF、p53和CerbB-2蛋白表达与肝肺转移的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法,联合检测100例结肠腺癌组织中VEGF、p53和CerbB-2蛋白的表达。结合临床资料计算100例结肠癌发生肝肺转移的病例数。首先将1个蛋白表达... 详细信息

目的:探讨结肠癌组织中VEGF、p53和CerbB-2蛋白表达与肝肺转移的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法,联合检测100例结肠腺癌组织中VEGF、p53和CerbB-2蛋白的表达。结合临床资料计算100例结肠癌发生肝肺转移的病例数。首先将1个蛋白表达阳性与阴性时患者肝、肺转移率进行比较。其次把2个和3个蛋白表达阳性患者分为A组,2个和3个蛋白表达阴性患者分为B组,将A组与B组患者的肝、肺转移率进行比较。结果:结肠癌中VEGF、p53和CerbB-2蛋白的阳性表达率分别是62.0%、74.0%和36.0%。VEGF、p53和CerbB-2单个蛋白阳性表达者肝转移率分别是51.6%、45.9%和72.2%;肺转移率分别是25.8%、24.3%和33.3%,均高于VEGF、p53和CerbB-2单个蛋白阴性表达者肝、肺转移率(P<0.01)。A组患者肝、肺转移率为52.4%和31.0%,比B组患者的肝、肺转移率22.4%和8.6%明显增高(P<0.01)。结论:VEGF、p53和CerbB-2蛋白在结肠癌中的表达与结肠癌肝肺转移密切相关,可能与3种蛋白协同作用促进结肠癌细胞增殖及肿瘤血管生成有关。

关键词：结肠肿瘤 VEGF p53 CerbB-2 肝转移肺转移

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纳米金抑制Ang-2和RGS-5表达导致裸鼠肝癌血管正常化

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中国病理生理杂志 2011年第12期27卷 2247-2252页

作者：傅岳武潘运龙覃莉孙立刘英梅暨南大学附属第一医院普外科广东广州510632 暨南大学医学院组织学与胚胎学教研室广东广州510632 暨南大学医学院中医系广东广州510632 中山大学附属孙逸仙纪念医院心内科广东广州510120

目的:观察纳米金在一定时间窗内,对裸鼠H22肝癌组织中血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)、G蛋白信号调节蛋白-5(RGS-5)表达及肝癌血管正常化的影响。方法:6周龄BALB/c裸鼠48只,从右腋皮下注入H22肝癌细胞,肿瘤形成约3～4 mm大小... 详细信息

目的:观察纳米金在一定时间窗内,对裸鼠H22肝癌组织中血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)、G蛋白信号调节蛋白-5(RGS-5)表达及肝癌血管正常化的影响。方法:6周龄BALB/c裸鼠48只,从右腋皮下注入H22肝癌细胞,肿瘤形成约3～4 mm大小,随机分为对照组(12只,注入生理盐水)和实验组(36只)。实验组从肿瘤周围及瘤内注入纳米金溶液0.2 mL(浓度为500 nmol/L),每天1次;连续给药3 d、7 d、11d后,分批处死12只,取肿瘤标本,用免疫化学染色法检测Ang-1、Ang-2及RGS-5的表达,并用电镜观察肿瘤血管壁周细胞形态。结果:(1)Ang-1在纳米金治疗后第3 d、第7 d及第11 d阳性率分别为16.7%、50.0%和16.7%,均高于对照组(8.3%),差异显著(P<0.05);其中实验组第7 d时Ang-1阳性率最高,与其在第3 d、第11d时比较,差异显著(P<0.05)。Ang-2在纳米金治疗后第3 d、第7 d及第11 d阳性率分别为33.3%、16.7%和41.7%,均低于对照组(58.3%),差异显著(P<0.05);其中Ang-2在第7 d时阳性率最低,与其在第3 d、第11 d时比较,显著差异(P<0.05)。(2)RGS-5在纳米金治疗后第3 d、第7 d和第11 d阳性率分别为33.3%、16.7%和50.0%,其中第7 d阳性率最低;低于对照组(50.0%)及第3 d、第11 d实验组,差异显著(P<0.05)。(3)不成熟周细胞覆盖率在纳米金治疗后第7 d时最低,为19.6%±4.3%,低于对照组(64.8%±11.7%)及第3 d(32.5%±7.9%)、第11 d(41.2%±9.1%)实验组,差异显著(P<0.05)。电镜观察见实验组裸鼠在纳米金治疗后第7 d血管外壁周细胞形态多数趋于正常,完整覆盖内皮细胞;而对照组周细胞形态大小不一、结构不完整,对内皮细胞覆盖少。结论:纳米金在其用药7 d时间窗内,能最大限度地通过抑制Ang-2和RGS-5在裸鼠肝癌组织中的过度表达,减少不成熟周细胞对新生血管的覆盖,使裸鼠肝癌血管正常化。

关键词：纳米金 G蛋白信号调节蛋白-5 血管生成素-2 血管正常化肝肿瘤

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纳米金对表阿霉素的增敏作用

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中华实验外科杂志 2011年第4期28卷 533-535页

作者：潘运龙赵晓旭覃莉杜彬吕荣钊蔡继业暨南大学附属第一医院普外科广州510632 暨南大学医学院组织胚胎学教研室暨南大学医学院病理学教研室暨南大学生命科学技术学院纳米生物技术实验室

目的观察纳米金对表阿霉素在抑制HepG2细胞增殖中如何发挥增敏作用。方法实验组分为纳米金预处理组和单纯表阿霉素组。常规消化HepG2细胞后种板，各组分别加入2μg/L的纳米金溶液和无血清培养液100μl，于设定的时间点（30、60、120和24... 详细信息

目的观察纳米金对表阿霉素在抑制HepG2细胞增殖中如何发挥增敏作用。方法实验组分为纳米金预处理组和单纯表阿霉素组。常规消化HepG2细胞后种板，各组分别加入2μg/L的纳米金溶液和无血清培养液100μl，于设定的时间点（30、60、120和240min）加入1mg／L的表阿霉素溶液100山，继续培养24h后噻唑蓝（MTT）比色法检测两组药物对HepG2细胞的增殖抑制作用；紫外．可见分光光度计（uV—Vis）检测各组HepG2细胞内积聚的表阿霉素量；原子力显微镜（AFM）观察HepG2细胞表面形态及超微结构变化。结果纳米金预处理组各时间点HepG2细胞增殖抑制率[（50．53±1．38）％、（51．83±0．47）％、（48．66±2．21）％、（43．55±1．01）％]均明显高于对应的单纯表阿霉素组[（37．24±3．49）％、（39．42±2．28）％、（34．98±2．27）％、（28．92±3．80）％]，P值〈0．01；纳米金预处理组（60min）表阿霉素在HepG2细胞内积聚的量最多，为（4．01±0．14）p,g；AFM检测到纳米金预处理组HepG2细胞膜内陷，粗糙度增加，表面孔径增大，细胞核的饱满程度减少。结论纳米金可通过增加表阿霉素在HepG2细胞内的积聚量来发挥增敏作用，纳米金预处理60rain对表阿霉素的增敏作用最大。

关键词：纳米金表阿霉素增敏作用

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睾丸组织中ACRBP的表达及启动子CpG位点的甲基化分析

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山东医药 2011年第47期51卷 21-23页

作者：黄巍范蓉李希圣郭文文罗彬宋慧肖绍文谢小薰广西中医学院第一附属医院南宁530023 广西医科大学组织学与胚胎学教研室

目的了解人睾丸组织中ACRBP的表达及其启动子CpG位点的甲基化状态,为探讨该基因表达机制奠定基础。方法运用免疫组化法研究睾丸组织中目的蛋白定位;结合生物信息学分析该基因启动子CpG位点序列;通过Bisulfite PCR测序法(BSP)分析目的基... 详细信息

目的了解人睾丸组织中ACRBP的表达及其启动子CpG位点的甲基化状态,为探讨该基因表达机制奠定基础。方法运用免疫组化法研究睾丸组织中目的蛋白定位;结合生物信息学分析该基因启动子CpG位点序列;通过Bisulfite PCR测序法(BSP)分析目的基因CpG位点的甲基化状态。结果免疫组化显示精子与精子细胞及部分的精原细胞和精母细胞表达目的蛋白。对ACRBP启动子序列(转录起始点-127～+110 bp)进行BSP扩增测序,发现该区域共有24个CpG位点,其中仅有3个出现甲基化,其甲基化频率为1.67%。结论生精小管中ACRBP蛋白呈区域性的阳性反应,可能与生精小管内精子发生的不同步性有关;ACRBP启动子CpG位点低甲基化可能与该基因表达的机制有关。

关键词：肿瘤—睾丸抗原睾丸 CpG位点甲基化

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5-氟尿嘧啶-纳米金复合体抑制HepG2细胞的增殖

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实用医学杂志 2011年第10期27卷 1725-1728页

作者：陈祖强潘运龙覃莉赵晓旭暨南大学附属第一医院药学部广州市510632 暨南大学附属第一医院普外科广州市510632 暨南大学医学院组织胚胎学教研室广州市510632

目的:5-氟尿嘧啶-纳米金复合体(5-fluorouracil-gold nanoconjugate,5-FU-GNP)的合成及其对HepG2细胞增殖抑制作用的观察。方法:采用化学合成法制备5-FU-GNP,并通过荧光淬灭实验和动态激光散射仪对其进行鉴定。细胞实验分为5-FU处理组、... 详细信息

目的:5-氟尿嘧啶-纳米金复合体(5-fluorouracil-gold nanoconjugate,5-FU-GNP)的合成及其对HepG2细胞增殖抑制作用的观察。方法:采用化学合成法制备5-FU-GNP,并通过荧光淬灭实验和动态激光散射仪对其进行鉴定。细胞实验分为5-FU处理组、5-FU-GNP处理组和空白对照组。将HepG2细胞种于放有盖玻片的6孔板,培养24h后各组分别加入1.25mg/mL的5-FU溶液、1.25mg/mL的5-FU-GNP溶液和无血清培养液2mL,继续培养24h后固定,原子力显微镜(AFM)观察药物对HepG2细胞的增殖抑制作用;MTT比色法检测各组HepG2细胞增殖抑制率。结果:5-FU(2.5mg/mL)的荧光强度为23620.7±752.9,5-FU-GNP(2.5mg/mL)荧光强度为1909.0±283.9(P<0.01);GNP粒径为(13.20±1.15)nm,5-FU-GNP粒径为(21.67±3.64)nm(P<0.05)。AFM观察到药物处理后HepG2细胞膜内陷,粗糙度增加,表面孔径增大,出现较大的孔洞,以5-FU-GNP处理组变化更为明显。MTT比色法结果显示5-FU-GNP处理组HepG2细胞增殖抑制率为(52.07±1.07)%,明显高于5-FU处理组:(36.78±3.24)%(P<0.01)。结论:本实验成功合成了5-FU-GNP,原子力显微镜及MTT检测结果证实其较单纯5-FU对HepG2细胞有更强的增殖抑制作用。

关键词：氟尿嘧啶纳米金 HepG2细胞原子力显微镜

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