检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2011年第2期32卷 194-198,208页

作者：丁晖潘运龙覃莉陈茜暨南大学附属第一医院普外科广东广州510630 暨南大学医学院组织与胚胎学教研室广东广州510632 暨南大学理工学院化学系广东广州510632

目的：利用原子力显微镜（AFM）在单细胞水平分析正常人脐静脉内皮细胞的形貌特征和机械性质,为了解内皮细胞结构与功能的关系奠定基础。方法：新鲜人脐静脉内灌注质量分数为0.25%胰蛋白酶消化,获得人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,M199培... 详细信息

目的：利用原子力显微镜（AFM）在单细胞水平分析正常人脐静脉内皮细胞的形貌特征和机械性质,为了解内皮细胞结构与功能的关系奠定基础。方法：新鲜人脐静脉内灌注质量分数为0.25%胰蛋白酶消化,获得人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,M199培养基进行培养,免疫细胞化学检测内皮细胞第Ⅷ因子的表达。将体外培养的HUVECs用质量分数为4%多聚甲醛固定,空气中干燥后用原子力显微镜进行观察。结果：HUVECs体外生长3~4d后可铺满单层,细胞呈长梭形,蛋白水平高表达第Ⅷ因子。细胞周期显示77.7%细胞处于G1期。AFM形貌图显示细胞呈长梭形,长径是45~55μm、短径是23~28μm、高度是280-400 nm。AFM分析细胞膜表面超微结构的几何参数,高低差（Rp-v）是（150.40±11.26）nm,均方根粗糙度（Rq）是（36.17±5.58）nm,平均粗糙度（Ra）是（26.80±5.54）nm,平均高度（M eantH t）是（144.2±13.35）nm。利用AFM高空间分辨率的力位移曲线测量系统,测出细胞膜表面的黏附力约为800 pN,硬度是（1.12±0.24）mN/m。结论：AFM能对内皮细胞表面的超微结构进行成像并提供准确而客观的信息,有助于加深对内皮细胞结构与功能关系的理解。

关键词：人脐静脉内皮细胞原子力显微镜形貌机械性质

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无功能垂体腺瘤与正常垂体中microRNAs的差异表达

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中山大学学报（医学科学版） 2011年第1期32卷 26-30页

作者：肖伟伟毛志钢周静罗斌王海军朱永红中山大学中山医学院组织学与胚胎学教研室广东广州510080 中山大学附属第一医院神经外科广东广州510080 中山大学中山医学院法医学系广东广州510080

【目的】检测微小分子RNA(microRNA,miRNA)在无功能垂体腺瘤(NFA)和正常垂体(NP)组织中的差异表达,探讨微小分子RNA在垂体腺瘤发生发展过程中的作用。【方法】收集6例NFA和6例NP,应用miRCURYTM LNA基因芯片技术分析差异表达的miRNA,并... 详细信息

【目的】检测微小分子RNA(microRNA,miRNA)在无功能垂体腺瘤(NFA)和正常垂体(NP)组织中的差异表达,探讨微小分子RNA在垂体腺瘤发生发展过程中的作用。【方法】收集6例NFA和6例NP,应用miRCURYTM LNA基因芯片技术分析差异表达的miRNA,并应用荧光定量PCR对部分差异表达的miRNA进行验证。【结果】与正常标本相比,肿瘤标本中miR-124、-141、-200c、-223、-297、-299-5p、-32、-340、-378、-491-3p、-519d、-525-5p、-550、-551a、-574-5p、-583、-662、-768-3p、-885-5p、-890等20个miRNAs显著上调(上调到>2.0倍),miR-125b-1、-132、-17、-192、-193a-3p、-193a-5p、-21、-302c、-30b、-31、-376b、-490-5p、-542-3p、-567、-622、-637、-654-3p、-658等18个miRNAs明显下调(下调到0.5倍以下)。一些差异表达的miRNA参与细胞的增殖和凋亡过程,提示它们的变化可能与垂体腺瘤的发生发展有关。【结论】miRNAs表达的变化可能参与无功能垂体腺瘤的发生,而miRNAs靶基因的确立可以为无功能垂体腺瘤的发生机制提供新的理论依据。

关键词： microRNA 无功能垂体腺瘤垂体基因芯片差异表达 Bcl-2

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人Wnt10b基因真核表达载体的构建及表达鉴定

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汕头大学医学院学报 2011年第4期24卷 196-199,F0002页

作者：纪影畅蔡湘娜林常敏李宇汕头大学医学院第一附属医院整形外科汕头大学医学院组织学与胚胎学教研室广东汕头515041

目的:利用基因工程技术构建人Wnt10b基因的pEGFP-N1-Wnt10b真核表达载体,观察其在COS-7细胞中的表达。方法:以pUC19-Wnt10b为模板,PCR扩增人Wnt10b基因的cDNA编码区序列,扩增产物和pEGFP-N1载体双酶切,T4 DNA连接酶连接,构建pEGFP-N1-Wn... 详细信息

目的:利用基因工程技术构建人Wnt10b基因的pEGFP-N1-Wnt10b真核表达载体,观察其在COS-7细胞中的表达。方法:以pUC19-Wnt10b为模板,PCR扩增人Wnt10b基因的cDNA编码区序列,扩增产物和pEGFP-N1载体双酶切,T4 DNA连接酶连接,构建pEGFP-N1-Wnt10b,酶切和测序鉴定该载体;LipofectamineTM2000将该载体转染入COS-7中,Western blot和免疫细胞化学检测COS-7 Wnt10b蛋白表达。结果:PCR扩增出的人Wnt10b基因cDNA正确克隆到pEGFP-N1载体,成功构建了pEGFP-N1-Wnt10b;将其转染入COS-7,COS-7 Wnt10b蛋白表达明显增高。结论:成功构建了人pEGFP-N1-Wnt10b,这为进一步研究Wnt10b基因功能奠定了前期基础。

关键词： Wnt10b基因载体 COS-7细胞基因表达

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系统性红斑狼疮患者外周血CD4^+ CD25^(high) Treg上PD-1分子的表达分析

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蚌埠医学院学报 2011年第11期36卷 1184-1186页

作者：王元元陈晓蓉刘铜唐洁谢长好安徽医科大学组织学与胚胎学教研室安徽合肥230032 蚌埠医学院组织学与胚胎学教研室安徽蚌埠233030 感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院风湿免疫科安徽蚌埠233004

目的:检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血CD4+CD25highTreg及其程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)分子的表达,探讨Treg和PD-1表达在SLE中的意义。方法:流式细胞仪检测SLE患者组、正常对照组外周血CD4+T细胞中的CD4+CD25highTreg和CD4+CD25lowT细胞的比例,及其PD-1分子的表达率。结果:CD4+CD25highTreg在SLE患者组外周血中CD4+T细胞的比例(0.63±0.31)%与正常对照组(2.07±0.74)%相比明显降低(P<0.05),该亚群细胞上PD-1+的百分率(24.99±18.65)%与对照组(6.97±1.92)%相比显著增高(P<0.05);CD4+CD25lowT细胞的百分率(13.40±8.47)%及其PD-1+的百分率(2.70±3.06)%与正常对照组(20.16±11.89)%和(0.43±0.36)%相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:外周血CD4+CD25highTreg数量下降及其PD-1分子表达上调可能在SLE中有重要意义。

关键词：红斑狼疮,系统性调节性T细胞程序性死亡受体-1

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Cx43基因敲除减轻LPS腹腔注射后胶质细胞的活化和脑内炎症反应

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解剖科学进展 2011年第4期17卷 343-346,350页

作者：禹红梅韩笑宁张朝东中国医科大学附属第一医院神经内科辽宁沈阳110001 沈阳医学院组织学与胚胎学教研室辽宁沈阳110036

目的考察缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)基因敲除对脂多糖(lipopolysacchiride,LPS)腹腔注射后胶质细胞的活化和脑内炎症反应的影响。方法采用腹腔LPS注射方法制作外周免疫激活小胶质细胞模型,实验动物共分为4组。Cx43基因敲除小鼠LP... 详细信息

目的考察缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)基因敲除对脂多糖(lipopolysacchiride,LPS)腹腔注射后胶质细胞的活化和脑内炎症反应的影响。方法采用腹腔LPS注射方法制作外周免疫激活小胶质细胞模型,实验动物共分为4组。Cx43基因敲除小鼠LPS腹腔注射组(Cx43KO-LPS组),Cx43基因敲除小鼠生理盐水对照组(Cx43 KO-NS组),野生小鼠LPS腹腔注射组(WT-LPS组)和野生小鼠生理盐水对照组(WT-NS组)。通过免疫荧光染色的方法观察小胶质细胞(Iba1)和星形胶质细胞(GFAP),通过Western blot方法考察脑内炎症介质IL-1β的变化。结果免疫荧光染色结果提示,Iba1和GFAP的荧光光密度在Cx43 KO-LPS组显著高于Cx43 KO-NS组,WT-LPS组显著高于WT-NS组,WT-LPS组显著高于Cx43KO-LPS组。IL-lβ水平在腹腔注射LPS的2组均高于2个生理盐水对照组,但在WT-LPS组具有最高的表达。结论 Cx43基因敲除能够减轻LPS腹腔注射后脑内炎症介质IL-1β的表达升高,减轻小胶质细胞和星形胶质细胞的活化。

关键词：缝隙连接蛋白43 基因敲除小胶质细胞脂多糖小鼠

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纳米金与VEGF_(165)分子作用的原子力显微镜研究

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中国病理生理杂志 2010年第12期26卷 2295-2300页

作者：潘运龙邱思远覃莉王存川丁晖程欣杜彬暨南大学附属第一医院普外科广东广州510630 暨南大学医学院组织与胚胎学教研室广东广州510630 暨南大学附属第一医院病理科广东广州510630

目的:用原子力显微镜(AFM)从分子水平、可视化角度研究纳米金(GNP)与血管内皮生长因子(VEGF165)的分子作用。方法:GNP与VEGF165作用前后,用AFM表征粒子大小和形貌,光谱学检测GNP紫外吸收光谱变化,粒径分析仪检测粒径分布变化;用VEGF165... 详细信息

目的:用原子力显微镜(AFM)从分子水平、可视化角度研究纳米金(GNP)与血管内皮生长因子(VEGF165)的分子作用。方法:GNP与VEGF165作用前后,用AFM表征粒子大小和形貌,光谱学检测GNP紫外吸收光谱变化,粒径分析仪检测粒径分布变化;用VEGF165刺激无血清培养液的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖,在GNP干预前后,用AFM观察HUVECs细胞表面超微结构变化。MTT法观察纳米金对HUVECs增殖的影响。结果:GNP与VEGF165作用后,其吸收峰发生红移;粒径分析表明GNP粒径的主要分布从20 nm变成30 nm;AFM表征下,单个GNP粒径22.05 nm±1.52 nm,呈椭圆形,边界清晰,加入VEGF165后,平均粒径变成33.91 nm±2.61 nm,边界模糊,形状不甚规则,表明GNP与VEGF165结合;在AFM观察到VEGF165作用的HUVECs细胞出现伪足、细胞膜孔洞、细胞膜颗粒化和细胞连接增多等表现,而GNP可以明显抑制这一现象,MTT法表明GNP抑制VEGF165介导的HUVECs增殖。结论:GNP可与VEGF165通过化学键连接,形成以GNP为核、VEGF165为壳的GNP-VEGF165复合物,使VEGF165与其受体结合的位点失活或被阻断,抑制VEGF165的信号转导,从而抑制HUVECs增殖。

关键词：纳米金血管内皮生长因子原子力显微镜人脐静脉内皮细胞

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癌-睾丸抗原与卵巢癌

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中国妇幼保健 2010年第21期25卷 3053-3055页

作者：黄巍范蓉谢小薰广西中医学院第一附属医院妇科广西南宁530023 广西中医学院组织学与胚胎学教研室广西医科大学组织学与胚胎学教研室

卵巢癌患者病死率居妇科肿瘤之首,近年来其发病率有上升趋势。卵巢癌患者总体5年生存率约为45%,不同期别的患者其预后差异很大：Ⅰ期或Ⅱ期的卵巢癌患者5年生存率可达70%～90%,而且术后无需化疗;但Ⅲ期或Ⅳ期的卵巢癌患者，其5年生存率... 详细信息

卵巢癌患者病死率居妇科肿瘤之首,近年来其发病率有上升趋势。卵巢癌患者总体5年生存率约为45%,不同期别的患者其预后差异很大：Ⅰ期或Ⅱ期的卵巢癌患者5年生存率可达70%～90%,而且术后无需化疗;但Ⅲ期或Ⅳ期的卵巢癌患者，其5年生存率仅为20％。由于卵巢癌的早期诊断率低，超过70％的卵巢癌患者在就诊时已处于Ⅲ期或Ⅳ期，

关键词：卵巢癌患者癌-睾丸抗原 5年生存率早期诊断率妇科肿瘤预后差异病死率发病率

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干细胞迁移机理的近场扫描光学显微术研究

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分析测试学报 2010年第6期29卷 548-552页

作者：陈家楠潘运龙丁晖覃莉蔡继业暨南大学生命科学技术学院生物纳米技术实验室广东广州510632 暨南大学附属第一医院普外科广东广州510632 暨南大学医学院组织胚胎学教研室广东广州510632

将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移。应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical m... 详细信息

将内皮细胞生长因子(VEGF)置于甲基纤维素碟中形成VEGF的浓度梯度分布,并将人脐带间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)于此浓度梯度中培养,观察VEGF能否诱导MSCs定向迁移。应用近场扫描光学显微术(Near-field scanning optical microscopy,NSOM)同时获取了VEGF诱导前后的MSCs的形貌和光学信息。结果表明,近场光学图观测到形貌图上所没有的黑色斑点,分析认为这些黑斑为细胞的黏着斑。近场光学图显示经过VEGF诱导后细胞的黏着斑数量明显增加。同时,对诱导前后干细胞的骨架蛋白进行免疫荧光标记并用共聚焦显微镜进行观察,结果表明细胞骨架由诱导前的无序状态转变为诱导后的有序状态,说明诱导后的干细胞处于迁移状态。光学超微结构图则显示了诱导后干细胞表面的光学细节比诱导前细胞大量增加,出现了大量直径约200 nm的光斑,这是由于细胞表面大量分泌黏附分子等蛋白分子引起的,这些结果为VEGF能够诱导MSCs进行定向迁移提供了实验依据和可视化证明。也表明NSOM不但能提供高分辨的光学分辨率,还可提供生物细胞精细结构的更深层次的光学信息。

关键词：近场光学显微镜间充质干细胞黏着斑

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大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶基因型与其耐药性

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郑州大学学报（医学版） 2010年第5期45卷 738-740页

作者：张志坚张傅山张钦宪郑州大学第三附属医院检聆科郑州450052 郑州大学第一附属医院检验科郑州450052 郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450001

目的:明确产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌基因型与耐药性的关系。方法:收集郑州大学第一附属医院、第三附属医院检验科细菌室2007年至2008年分离的产酶大肠埃希菌138株,采用PCR及DNA测序分析明确ESBLs型别及其分布模式,采用E-tes... 详细信息

目的:明确产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌基因型与耐药性的关系。方法:收集郑州大学第一附属医院、第三附属医院检验科细菌室2007年至2008年分离的产酶大肠埃希菌138株,采用PCR及DNA测序分析明确ESBLs型别及其分布模式,采用E-test法测定菌株的最小抑菌质量浓度(MIC)。结果:各菌株均含有1～5ESBLs基因型分布模式;不同模式菌株均对青霉素类、头孢一代、二代及三代中头孢噻肟和头孢曲松耐药(MIC≥256mg/L),对头孢他啶表现为体外试验敏感(MIC≤4mg/L),对四代头孢菌素头孢吡肟表现不一(MIC值分别为32、48、48、16和64mg/L)。对阿米卡星、亚胺培南及碳青酶烯类抗菌素稳定敏感(MIC分别为≤12和0.25mg/L)。携带不同ESBLs型别菌株抗药活性相同。结论:多种耐药机制可存在于同一产酶菌株中。

关键词：大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶基因型耐药性

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SHV型超广谱β-内酰胺酶的表达及其抗药活性

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郑州大学学报（医学版） 2010年第5期45卷 735-737页

作者：郭小兵张志坚阎志勇张钦宪郑州大学第一附属医院检验科郑州450052 郑州大学第三附属医院检验科郑州450052 郑州大学基础医学院人体解剖学教研室郑州450001 郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室郑州450001

目的:原核表达SHV型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)并分析其抗药活性。方法:收集2006年至2007年郑州大学第一附属医院分离ESBLs大肠埃希菌46株,采用PCR克隆目的基因,采用基因重组技术构建pET28a-SHV质粒,采用JM109大肠埃希菌作为宿主菌进行ES... 详细信息

目的:原核表达SHV型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)并分析其抗药活性。方法:收集2006年至2007年郑州大学第一附属医院分离ESBLs大肠埃希菌46株,采用PCR克隆目的基因,采用基因重组技术构建pET28a-SHV质粒,采用JM109大肠埃希菌作为宿主菌进行ESBLs的表达,采用液体稀释法检测其最小抑菌质量浓度(MIC)。结果:pET28a-SHV质粒PCR扩增条带在约900bp位置处,其序列分析结果正确;头孢噻肟与头孢噻肟/克拉维酸抑菌环直径差>5mm;pET28a-SHV质粒转化子对头孢唑啉、庆大霉素及阿米卡星耐药(MIC均>6mg/L),对氨曲南、左氧氟沙星中介耐药(MIC分别为16及8mg/L),对广谱青霉素和三代头孢菌素体外敏感,对药物酶抑制剂及亚胺培南稳定敏感。结论:SHV型ESBLs表达成功,转化子对抗菌药物体外敏感率较高。

关键词： SHV 超广谱β-内酰胺酶抗药活性

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