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广东省医学会第十七次血液病学学术会议

作者：何甘霖王春燕谭获李扬秋广州医科大学附属第一医院暨南大学医学院血液病研究所

本研究针对弥漫大B细胞淋巴瘤患者的TCR亚家族中的vβ亚家族谱系分布及其克隆性，探讨其与淋巴瘤的临床表现、预后及T细胞亚群的关系。对本组14例弥漫大B细胞型非霍奇金淋巴瘤患者，测定外周血TCR Vα/Vβ克隆增生性T细胞的特点和CDR3...

本研究针对弥漫大B细胞淋巴瘤患者的TCR亚家族中的vβ亚家族谱系分布及其克隆性，探讨其与淋巴瘤的临床表现、预后及T细胞亚群的关系。对本组14例弥漫大B细胞型非霍奇金淋巴瘤患者，测定外周血TCR Vα/Vβ克隆增生性T细胞的特点和CDR3序列，进行多方面的分析。研究内容与方法：利用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测14例DLBCL患者外周血单个核细胞中24个TCR Vβ基因表达情况;阳性产物经荧光素标记和基因扫描分析TCR V β亚家族基因的互补决定区3(CDR3)，以检测T细胞克隆性。

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T细胞免疫负调控因子A20在SLE中的表达特点

T细胞免疫负调控因子A20在SLE中的表达特点

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广东省医学会第十七次血液病学学术会议

作者：张帆王旭朱丽花陈少华杨力建李扬秋暨南大学血液病研究所广州510632 广东药学院生命科学与生物制药学院广州510006 暨南大学:再生医学教育部重点实验室广州510632 暨南大学血液病研究所广州510632 第一附属医院血风湿科广东广州510632 暨南大学血液病研究所广州510632 暨南大学血液病研究所广州510632 暨南大学:再生医学教育部重点实验室广州510632

研究背景和目的：A20也称为肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导蛋白3(TNFAIP3)，具有肿瘤抑制因子和炎症信号传导的中心调节因子-NF-κ B抑制因子双重功能.它在天然免疫和过继性免疫调节中发挥了重要作用.A20缺失与炎症介导的自身免疫性疾病和...

研究背景和目的：A20也称为肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导蛋白3(TNFAIP3)，具有肿瘤抑制因子和炎症信号传导的中心调节因子-NF-κ B抑制因子双重功能.它在天然免疫和过继性免疫调节中发挥了重要作用.A20缺失与炎症介导的自身免疫性疾病和淋巴细胞肿瘤的发生发展关系密切.本研究主要分析系统性红斑狼疮(SLE)中A20及其靶基因NF-κB的表达特点.方法：采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量分析法检测21例SLE患者(其中合并硬皮症2例，合并类风湿关节炎1例，合并淋巴瘤1例，无合并症17例)及31例健康人外周血单个核细胞(PBMC)中A20和NFκB基因的表达情况.

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T细胞-急性淋巴细胞白血病分子遗传学改变和靶向治疗新进展：第54届美国血液学会年会报道

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白血病．淋巴瘤 2013年第1期22卷 1-3,7页

作者：李扬秋谭获暨南大学医学院血液病研究所暨南大学再生医学教育部重点实验室广州510632 广州医学院第一附属医院肿瘤血液中心

T细胞一急性淋巴细胞白血病（T-ALL）恶性程度高、预后差。随着对T-ALL发生发展过程中癌基因和抑癌基因等遗传学改变特点及其相关分子机制研究的不断深化，对确定该病的治疗反应和预后的生物标志物很有帮助，对临床诊治也有重要指导意... 详细信息

T细胞一急性淋巴细胞白血病（T-ALL）恶性程度高、预后差。随着对T-ALL发生发展过程中癌基因和抑癌基因等遗传学改变特点及其相关分子机制研究的不断深化，对确定该病的治疗反应和预后的生物标志物很有帮助，对临床诊治也有重要指导意义。现主要介绍2012年第54届美国血液学会（ASH）年会有关早期前T细胞一急性淋巴细胞白血病的特点、TAL1和NOTCH1相关基因的分子改变特点及其靶向抑制效应的新进展。

关键词： T细胞一急性淋巴细胞白血病基因突变缺失基因过表达靶向治疗预后美国血液学会年会

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改良PCR-RFLP方法快速鉴别常见致病念珠菌

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临床皮肤科杂志 2013年第11期42卷 646-648页

作者：王淼淼张晓利吕雪莲蔡晴葛一平沈永年吕桂霞刘维达中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏南京210042 苏州大学第一附属医院皮肤科江苏苏州215006 暨南大学临床医学博士后流动站广东广州510632 大连皮肤病医院辽宁大连116021

目的:建立快速准确鉴别常见致病念珠菌菌落的PCR-限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)方法。方法:结合直接菌落PCR检测技术,使用通用引物扩增6种念珠菌(包括白念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和季也蒙念珠菌)IT... 详细信息

目的:建立快速准确鉴别常见致病念珠菌菌落的PCR-限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)方法。方法:结合直接菌落PCR检测技术,使用通用引物扩增6种念珠菌(包括白念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和季也蒙念珠菌)ITS1-ITS2区。分别用HhaⅠ、HaeⅢ、HinfⅠ、MspⅠ和Hpy F10Ⅵ等5种内切酶对PCR产物进行酶切,建立以菌落PCR为基础的RFLP方法,然后对30株临床株进行PCR-RFLP图谱分析。结果:应用MspⅠ进行酶切反应,6种念珠菌的酶切带型有明显差异,易于鉴别。结论:通过直接菌落PCR检测技术,使用MspⅠ进行酶切,可以经1次反应,简便快速鉴别出常见的6种致病念珠菌,为临床念珠菌感染的快速准确诊断赢得时间。

关键词：念珠菌菌落PCR 限制性内切酶片段长度多态性

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木通皂苷D通过丝裂原活化蛋白激酶信号通路促进大鼠骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞

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中国病理生理杂志 2012年第8期28卷 1455-1460页

作者：张云辉刘成成祝爱珍陈小宇刘革修何冬梅谭广销暨南大学附属第一医院校门诊部广东广州510632 暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632

目的:探讨木通皂苷D(ASD)是否促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为成骨细胞及其机制。方法:分离培养大鼠BMSCs;观察ASD对其向成骨细胞分化的影响以及p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580和细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD... 详细信息

目的:探讨木通皂苷D(ASD)是否促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为成骨细胞及其机制。方法:分离培养大鼠BMSCs;观察ASD对其向成骨细胞分化的影响以及p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580和细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD098059的干预作用;检测BMSCs分化过程中碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素(OC)含量;实时荧光定量PCR检测护骨素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA的表达;Western blotting法检测p38 MAPK和ERK活性水平。结果:ASD处理后第9 d,成骨性分化标志物OPG mRNA表达量明显增高,RANKL mRNA的表达量明显降低,同时显著提高BMSCs分化为成骨细胞的ALP活性和OC的表达,而且p38 MAPK和ERK活性也显著增加。SB203580和PD098059则显著抑制ASD的成骨作用。结论:ASD在体外具有促进大鼠BMSCs向成骨细胞分化的作用,这一作用与MAPK途径的p38 MAPK和ERK蛋白有关。

关键词：木通皂苷D 间充质干细胞成骨细胞分化信号通路

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胎鼠间充质干细胞移植缓解小鼠体力疲劳的研究

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中国病理生理杂志 2012年第9期28卷 1705-1708页

作者：刘成成祝爱珍周艳华刘革修何冬梅谭广销陈卓铭暨南大学医学院血液病研究所广东广州510632 暨南大学附属第一医院康复科广东广州510632

目的:观察胎鼠间充质干细胞(MSCs)缓解体力疲劳的作用,探讨其改善肌无力患者或者中老年体弱者生活质量的意义。方法:取孕13.5 d的BALB/c胎鼠,分离纯化得到胎鼠MSCs。6月龄BALB/c雌性小鼠随机分为安静对照组、单纯运动组和MSCs+运动组。M... 详细信息

目的:观察胎鼠间充质干细胞(MSCs)缓解体力疲劳的作用,探讨其改善肌无力患者或者中老年体弱者生活质量的意义。方法:取孕13.5 d的BALB/c胎鼠,分离纯化得到胎鼠MSCs。6月龄BALB/c雌性小鼠随机分为安静对照组、单纯运动组和MSCs+运动组。MSCs+运动组尾静脉输注第5代MSCs,其余2组输注同体积生理盐水。24 h后进行负重游泳试验,测定血尿素氮(BUN)、血乳酸、肝糖原和肌糖原,以及肝、肌肉、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,心脏超声检查评价心功能。结果:(1)原代细胞呈梭形、多角形,散在、集落式分布;第5代细胞均匀平行排列或者漩涡状排列,表达CD44和CD105,不表达CD34和CD45,能向成骨细胞或脂肪细胞分化,具备MSCs基本特点。(2)MSCs缓解体力疲劳作用:MSCs+运动组与单纯运动组比较,负重游泳时间明显延长,BUN和血乳酸水平降低,肝糖原和肌糖原储备增加,肝脏和肌肉组织SOD活性升高,MDA水平降低,以上差异均显著(P<0.05)。(3)心功能增强:MSCs+运动组与单纯运动组比较,每搏输出量、心输出量和左室舒张期容积均增加。结论:胎鼠间充质干细胞移植具有缓解小鼠体力疲劳作用。

关键词：间充质干细胞移植疲劳负重游泳试验心功能

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TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病病人T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点

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免疫学杂志 2012年第9期28卷 825-828页

作者：史丽陈少华杨力建吴秀丽李萡卢育洪郁志沈琦闫小娟李扬秋暨南大学医学院血液病研究所广州510632 暨南大学医学院第一附属医院血液科广州510632 暨南大学医学院再生医学教育部重点实验室广州510632

目的了解TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)病人外周血T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点。方法采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测10例TCRζ缺陷的AML病人外周血CD3+T细胞中Zap-70... 详细信息

目的了解TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)病人外周血T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点。方法采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测10例TCRζ缺陷的AML病人外周血CD3+T细胞中Zap-70、Elf-1和FcεR Iγ基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,10例健康成人作为对照;采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算Zap-70、Elf-1和FcεR Iγ基因的表达水平。结果 TCRζ缺陷的AML病人外周血T细胞中Elf-1基因的表达水平(中位数8.526%)明显低于健康对照组(中位数33.237%)(P<0.001),而FcεR Iγ基因的表达水平(中位数2.571%)则高于健康对照组(中位数0.958%)(P=0.019),Zap-70基因在两组中的表达水平没有显著性差异,但均与TCRζ基因的表达水平呈正相关。结论 TCRζ缺陷的AML病人T细胞中Elf-1基因的低表达可能是导致AML病人TCRζ基因缺陷性表达的原因之一,而FcεR Iγ基因的高表达则可能是在一定程度上缓解了TCRζ基因缺陷性表达所带来的T细胞免疫异常。

关键词： TCRζ缺陷急性髓细胞白血病 Elf-1 Zap-70 FcεR Iγ

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B-NHL患者TCRγ/δ亚家族T细胞的分布和增殖特点

B-NHL患者TCRγ/δ亚家族T细胞的分布和增殖特点

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第十五届全国临床肿瘤学大会暨2012年CSCO学术年会

作者：王亮郭良君徐萌陈少华查显丰李萡李扬秋 510630 暨南大学附属第一医院肿瘤科 510630 暨南大学附属第一医院肿瘤科 510630 暨南大学血液病研究所

越来越多的研究发现γδ+T细胞在抗肿瘤免疫中也发挥重要作用,本文旨在进一步了解B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血、淋巴结和骨髓中TCR Vγ和Vδ亚家族T细胞的分布和克隆性增殖情况.应用RT-PCR扩增4例B-NHL患者外周血、骨髓(3例... 详细信息

越来越多的研究发现γδ+T细胞在抗肿瘤免疫中也发挥重要作用,本文旨在进一步了解B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血、淋巴结和骨髓中TCR Vγ和Vδ亚家族T细胞的分布和克隆性增殖情况.应用RT-PCR扩增4例B-NHL患者外周血、骨髓(3例)和淋巴结(3例)单个核细胞中3个TCR Vγ和8个TCR Vδ亚家族基因的互补决定区3(CDR3),了解TCR Vγ和TCR Vδ亚家族T细胞的分布;PCR阳性产物进一步经基因扫描分析CDR3长度,明确其克隆性增殖状态.

关键词： B细胞性非霍奇金淋巴瘤病例分析临床病理细胞增殖

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急性B淋巴细胞白血病患者外周血高表达ZAP-70与HLA-G基因及其临床意义

急性B淋巴细胞白血病患者外周血高表达ZAP-70与HLA-G基因及其临床...

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中华医学会第十二次全国血液学学术会议

作者：吴秀丽陈少华杨力建李扬秋卢育洪朱康儿暨南大学医学院血液病研究所广州 510632 暨南大学附属第一医院广州 510600

目的：通过定量分析初发未治急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者以及难治复发B-ALL患者ZAP-70基因和HLA-G基因的表达水平，了解ZAP-70与HLA-G在B-ALL中的表达情况，方法：收集经细胞形态学、组织化学染色及流式细胞术免疫学分型确诊的15例... 详细信息

目的：通过定量分析初发未治急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者以及难治复发B-ALL患者ZAP-70基因和HLA-G基因的表达水平，了解ZAP-70与HLA-G在B-ALL中的表达情况，方法：收集经细胞形态学、组织化学染色及流式细胞术免疫学分型确诊的15例初发B-ALL和8例难治复发的B-ALL患者的外周血样本，采用实时定量RT-PCR分析ZAP-70基因和膜结合型HLA-G1基因的表达水平。

关键词：急性B淋巴细胞白血病外周血 HLA-G基因免疫学分型

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急性B淋巴细胞白血病患者外周血高表达ZAP-70与HLA-G基因及其临床意义

急性B淋巴细胞白血病患者外周血高表达ZAP-70与HLA-G基因及其临床...

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第八届全国免疫学学术大会

作者：吴秀丽陈少华卢育洪朱康儿杨力建李扬秋暨南大学医学院血液病研究所暨南大学附属第一医院暨南大学再生医学教育部重点实验室

研究背景及目的:急性淋巴细胞白血病(ALL)具有高度的异质性,不同患者的疗效和预后具有较大的不同。寻找新的与成人ALL预后相关的基因靶标对于指导临床分层治疗以及探讨新的白血病靶向治疗靶点有着重要意义。目前Zeta链相关蛋白70(ZAP-70... 详细信息

研究背景及目的:急性淋巴细胞白血病(ALL)具有高度的异质性,不同患者的疗效和预后具有较大的不同。寻找新的与成人ALL预后相关的基因靶标对于指导临床分层治疗以及探讨新的白血病靶向治疗靶点有着重要意义。目前Zeta链相关蛋白70(ZAP-70)被认为是慢性B淋巴细胞白血病(B-CLL)的重要独立预后指标,高表达ZAP70则预后差;而最近发现HLA-G抗原表达水平也与B-CLL预后明显相关,且其临床敏感度较ZAP-70、CD38更高。但ZAP-70与HLA-G的表达在ALL发病中的作用尚不明确。为了了解ZAP70与HLA-G在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)中的表达情况,我们首先定量分析了初发初治B-ALL患者以及难治复发B-ALL患者ZAP70基因和HLA-G基因的表达水平。方法:收集经细胞形态学、组织化学染色及流式细胞术免疫学分型确诊的15例初发B-ALL和8例难治复发的B-ALL患者的外周血样本,采用实时定量 RT-PCR分析ZAP-70基因和膜结合型HLAG1基因的表达水平。结果:初发B-ALL和难治复发B-ALL中,ZAP-70基因的mRNA相对表达量(2.56±2.62%,1.52±1.77%)均高于正常人ZAP-70基因的mRNA相对表达量(0.26±0.24%)(P=0.0004,0.0034)。两者的膜结合型HLA-G1基因的mRNA相对表达量(0.45±0.28%,0.54±0.59%)亦高于正常对照组(0.19±0.21%)(P=0.0035,0.0192)。初发与难治组ZAP-70和HLA-G1基因表达水平比较无明显统计学差异。对初发B-ALL患者随访显示ZAP-70基因和HLA-G1基因高表达组复发率高于低表达组。B-ALL中ZAP-70基因与膜结合型HLA-G1基因的表达水平呈正相关(r=0.915,P=0.000)。结论:B-ALL患者ZAP-70和HLA-G1基因表达水平均显著增高,且两者高表达水平可能影响B-ALL的预后。

关键词：急性B淋巴细胞白血病 ZAP70 HLA-G

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