目的:T细胞在机体的适应性免疫反应中发挥至关重要的作用。基于前期研究发现再生障碍性贫血(AA)患者外周血中参与T细胞活化的信号分子表达异常,如上调的T细胞活化共刺激信号分子CD28。目前T细胞膜表面的共刺激信号分子大致分为2大类:免疫球蛋白超家族和肿瘤坏死因子受体超家族成员,前者包括CD28和ICOS等,而后者主要有OX40,4-1BB(CD137),CD27,CD30和HVEM等。为了进一步了解AA患者异常T细胞活化的特点,本研究将分析AA患者中其他6个参与T细胞活化正向调控的信号分子(CD137,HVEM,CD27,GITR,ICOS,OX40)表达情况。方法:分别收集再生障碍性贫血患者和健康志愿者肝素抗凝外周血标本38例和46例,按常规方法分离外周血单个核细胞(PBMC)。应用TRIzol试剂盒提取已分离PBMC的RNA后并应用随机引物和反转录酶试剂反转录合成cDNA。利用SYBR Green I荧光定量PCR分别检测AA患者和健康人外周血PBMC的CD137,HVEM,CD27,GITR,ICOS和OX40基因表达情况,以β2微球蛋白基因作为内参,根据相对定量公式(2)计算AA患者与健康人上述T细胞活化共刺激信号分子表达情况,并用SPSS软件进行统计学分析。结果:AA患者和健康人CD137,GITR的表达水平基本一致,AA患者中位数分别为0.0084和0.0029,健康人中位数分别为0.0086和0.0026。AA患者HVEM的表达(中位数:0.346)高于健康人HVEM的表达(中位数:0.329,P=0.733),AA患者ICOS的表达(中位数:0.151)高于健康人GITR的表达(中位数:0.099,P=0.094)。AA患者CD27的表达(中位数:0.534)显著高于健康人CD27的表达(中位数:0.159,P=0.000),AA患者OX40的表达(中位数:0.015)显著高于健康人OX40的表达(中位数:0.009,P=0.011)。结论:本研究率先分析了AA患者中多个T细胞活化共刺激信号分子的表达情况,发现AA患者T细胞异常活化可能与CD27和OX40升高有关。
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