检索结果-内蒙古大学图书馆

暨南大学学报（自然科学与医学版） 2004年第4期25卷 413-419页

作者：何贤辉徐丽慧曾耀英刘毅蔡小嫦暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学第一附属医院皮肤科广东广州510632

目的 :克隆HLA -A 0 2 0 7(A2 )重链基因 ,构建在羧基端融合生物素化酶BirA底物肽(BirAsubstratepeptide ,BSP)的A2重链胞外区原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法 :以RT-PCR方法从HLA -A2 + 供者白细胞中克隆A2基因并进行DNA测... 详细信息

目的 :克隆HLA -A 0 2 0 7(A2 )重链基因 ,构建在羧基端融合生物素化酶BirA底物肽(BirAsubstratepeptide ,BSP)的A2重链胞外区原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法 :以RT-PCR方法从HLA -A2 + 供者白细胞中克隆A2基因并进行DNA测序 ,并以PCR方法构建在羧基端融合BSP的A2重链胞外区表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表达。结果 :从 31名HLA -A2 + 供者白细胞中克隆到的基因经DNA测序显示 ,只有从供者 2得到的基因是HLA -A 0 2 0 7。将编码该基因编码重链胞外区 1- 2 75的序列和编码BSP的序列融合 ,构建融合蛋白表达载体 ,并以测序验证。融合蛋白在BL2 1(ED3)中获得高效表达 ,产物相对分子质量为 35 0 0 0 ,约占菌体总蛋白的 30 % ,主要存在于包涵体中 ,对包涵体进行洗涤后得到纯度为 80 %的重组蛋白。结论 :成功克隆HLA -A 0 2 0 7基因。

关键词：人类白细胞抗原 cDNA克隆融合蛋白包涵体

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荨麻疹患者外周血嗜碱性粒细胞表面CD63表达的研究

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实用皮肤病学杂志 2008年第2期1卷 82-83,78页

作者：李振肇静娴蔡小嫦邓列华深圳市龙岗区人民医院皮肤科深圳518116 暨南大学组织移植与免疫中心暨南大学附属第一医院皮肤科

目的观察荨麻疹患者外周血中活化的嗜碱性粒细胞表面表达CD63的数量,探讨嗜碱性粒细胞的活化程度,为临床检测提供新方法。方法用屋尘螨浸液作划破试验,筛选敏感的荨麻疹患者。用CD63-FITC等抗体标记嗜碱性粒细胞,流式细胞技术检测CD63... 详细信息

目的观察荨麻疹患者外周血中活化的嗜碱性粒细胞表面表达CD63的数量,探讨嗜碱性粒细胞的活化程度,为临床检测提供新方法。方法用屋尘螨浸液作划破试验,筛选敏感的荨麻疹患者。用CD63-FITC等抗体标记嗜碱性粒细胞,流式细胞技术检测CD63的表达情况。结果急、慢性患者活化嗜碱性粒细胞百分率分别为33.77～15.75%、11.66～5.25%,与正常人比较均有显著差异(P<0.05);经变应原刺激后,急、慢性患者活化嗜碱性粒细胞百分率分别为60.25～18.88%、22.22～7.89%,急、慢性患者活化前、活化后也均存在明显差异(P<0.05),而且急性患者活化程度更高(P<0.05)。结论通过测定嗜碱性粒细胞表达CD63可能有助于过敏的诊断。

关键词：荨麻疹嗜碱性粒细胞 CD63 流式细胞术

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雷公藤多甙和FK506滴眼防治大鼠角膜移植免疫排斥反应的比较

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国际眼科杂志 2009年第3期9卷 440-443页

作者：邓宏伟陈建苏李辰姚晓明赵松滨狄静芳暨南大学附属深圳眼科医院中国广东省深圳市518001 暨南大学医学院眼科中国广东省广州市510632 暨南大学医学院组织移植免疫中心中国广东省广州市510632

目的:观察雷公藤多甙(tripterygiitotorum,TⅡ)及FK506滴眼液局部应用对大鼠角膜移植免疫排斥反应的影响。方法:建立大鼠角膜移植模型,随机按局部滴用药物分组成A,B,C组,用裂隙灯记录及比较各组移植排斥指数,并比较角膜排斥发生时间。... 详细信息

目的:观察雷公藤多甙(tripterygiitotorum,TⅡ)及FK506滴眼液局部应用对大鼠角膜移植免疫排斥反应的影响。方法:建立大鼠角膜移植模型,随机按局部滴用药物分组成A,B,C组,用裂隙灯记录及比较各组移植排斥指数,并比较角膜排斥发生时间。分别于术后15d及30d行常规病理学检查。并通过免疫组化检查CD25,CD5+4在角膜植片基质中的表达。结果:0.3g/LTⅡ及0.5g/LFK506抑制角膜移植免疫排斥反应的效应均有效,两者相比效果无显著性差异。HE染色及免疫组化分析可见15d时各有效组角膜植片厚度基本正常,基质中仅有少量CD25,CD5+4阳性细胞表达、淋巴细胞浸润,新生血管少见。结论:TⅡ与FK506疗效近似。具有抑制高危角膜移植免疫排斥反应发生的临床应用价值。

关键词：雷公藤多甙(TII) 角膜移植移植物排斥

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CD40配体-受体载体介导的CpG ODN靶向脐血B淋巴细胞的特异传递及其免疫效应(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第5期13卷 974-978页

作者：曾慧兰蒋建伟郑梅珍古晨韩新爱曾耀英狄静芳严玉霞暨南大学附属第一医院广东省广州市510632 暨南大学医学院生化教研室广东省广州市510632 中山大学中山医学院临床医学系广东省广州市510632 暨南大学组织移植与免疫研究中心广东省广州市510632

背景:CpG寡核苷酸是一种高效低毒的免疫佐剂,在许多疾病的基因治疗中具有广阔的应用价值,但存在种属和细胞特异性,细胞摄取率低,易被酶降解,成为临床应用的障碍。目的:拟验证CpG寡核苷酸通过CD40配体-受体载体系统对脐血B淋巴细胞特异... 详细信息

背景:CpG寡核苷酸是一种高效低毒的免疫佐剂,在许多疾病的基因治疗中具有广阔的应用价值,但存在种属和细胞特异性,细胞摄取率低,易被酶降解,成为临床应用的障碍。目的:拟验证CpG寡核苷酸通过CD40配体-受体载体系统对脐血B淋巴细胞特异靶向传递及其免疫效应的增强作用。设计、时间及地点:观察对比实验,于2004-04/2007-10在广州暨南大学附属第一医院血液科、儿科完成。材料:取健康新生儿的肝素抗凝新鲜脐血,事先征得父母知情同意并获医院伦理委员会审核批准。方法:制备CD40配体-碳二亚胺-多聚左旋赖氨酸-CpG寡核苷酸交联复合物,与脐血单个核细胞共培养。分别于24,48,72,96h应用流式细胞仪检测单个核细胞对FAM标记CpG寡核苷酸的摄取率及平均摄入强度;培养96h后用直接免疫荧光标记法标记CD19,CD20,CD22单抗,以流式细胞仪检测阳性表达率;细胞悬液加入96孔板,3组分别加入CD40配体-碳二亚胺-多聚左旋赖氨酸-CpG寡核苷酸、单纯CpG寡核苷酸及ddH2O,培养92h,以四甲基偶氮唑盐比色法测细胞增殖能力;以酶联免疫吸附法测以上3组细胞培养上清IgG水平。主要观察指标:单个核细胞对CpG寡核苷酸的摄取率及平均摄入强度,淋巴细胞亚群的表达,细胞增殖能力,培养上清IgG水平。结果:与单纯CpG寡核苷酸未交联组相比,单个核细胞对交联复合物摄取率更高(>98%),达摄取峰值时间更早。共培养后CD19+,CD22+,CD20+细胞表达升高,细胞增殖量及上清IgG水平均高于对照组(P<0.05)。结论:CD40配体-受体载体系统有助于CpG寡核苷酸特异高效的B细胞靶向投递,并增强其免疫效应。

关键词： CD40配体 CPG寡核苷酸 B淋巴细胞靶向投递

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补阳还五汤预处理大鼠对其脑死亡后肝脏的保护作用

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中华实验外科杂志 2009年第8期26卷 1081-1081页

作者：刘嘉雯陈洁曾慧兰曾耀英苏泽轩暨南大学附属第一医院泌尿外科/器官移植科广州510630 暨南大学附属第一医院血液科广州510630 暨南大学附属第一医院组织移植与免疫中心广州510630

脑死亡供体器官移植后易发生急慢性排斥反应，移植前改善脑死亡供体器官质量是获得移植物长期存活和功能的关键^[1]。本研究旨在观察补阳还五汤（BYHWT）预处理大鼠对其脑死亡后肝脏炎症细胞因子、p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）磷酸化... 详细信息

脑死亡供体器官移植后易发生急慢性排斥反应，移植前改善脑死亡供体器官质量是获得移植物长期存活和功能的关键^[1]。本研究旨在观察补阳还五汤（BYHWT）预处理大鼠对其脑死亡后肝脏炎症细胞因子、p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）磷酸化和反应性氧族（ROS）的变化，探讨其对肝脏的保护机制。

关键词：补阳还五汤脑死亡预处理保护作用肝脏 p38丝裂原活化蛋白激酶大鼠慢性排斥反应

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自然杀伤细胞对异基因骨髓移植中移植排斥和造血及免疫重建的影响(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第49期14卷 9303-9306页

作者：杨志刚熊丹曾耀英梁亮李庆华吴国才广东医学院附属医院血液科广东省湛江市524001 暨南大学组织移植与免疫研究中心广东省广州市510632

背景:近几年,自然杀伤细胞与异基因骨髓移植的关系备受关注。目的:探讨自然杀伤细胞在小鼠异基因骨髓移植中对移植排斥、造血及免疫重建的影响。方法:以C57BL/6(H-2b)小鼠为供鼠、BALB/c(H-2d)小鼠为受鼠,分别在致死剂量和非致死剂量(≤... 详细信息

背景:近几年,自然杀伤细胞与异基因骨髓移植的关系备受关注。目的:探讨自然杀伤细胞在小鼠异基因骨髓移植中对移植排斥、造血及免疫重建的影响。方法:以C57BL/6(H-2b)小鼠为供鼠、BALB/c(H-2d)小鼠为受鼠,分别在致死剂量和非致死剂量(≤7.0Gy)全身照射的预处理条件下进行异基因骨髓移植,移植同时输注供鼠外周T细胞和(或)自然杀伤细胞。结果与结论:在致死剂量全身照射的移植中,输注自然杀伤细胞与不输注自然杀伤细胞的移植组比较,存活率显著增高;白细胞计数、CD19+细胞表达及骨髓CD34+细胞计数恢复快;H-2Kb+细胞的表达水平高。移植后28d,输注自然杀伤细胞组CD3+细胞表达水平明显低于不输注自然杀伤细胞组,60d两组比较差异无显著性意义(P>0.05)。在非致死剂量全身照射的移植中,移植30d,异基因骨髓组H-2Kb+细胞表达百分率明显下降,60d已下降至移植前水平;而输注高浓度和低浓度自然杀伤细胞的两组在移植后60d仍能检测到80%以上的H-2Kb+细胞表达。提示,在小鼠异基因骨髓移植中,同种异基因反应性自然杀伤细胞可以抑制移植排斥,提高造血干细胞的植入水平,促进造血及免疫重建并增加移植受鼠的生存率。

关键词：自然杀伤细胞天然骨髓移植全身照射同种异基因反应性

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不同浓度外源性内皮素1刺激大鼠脑皮质神经元增加释放一氧化氮:首次国内实验直接证实

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中国临床康复 2005年第21期9卷 92-94页

作者：徐安定谭泽峰谭少华狄静芳曾子华郑仕富暨南大学附属第一医院神经内科广东省广州市510632 暨南大学生命科学技术学院组织与移植免疫实验中心广东省广州市510632 暨南大学医学院病理学教研室广东省广州市510632

目的:观察不同浓度内皮素1刺激大脑皮质神经元增加释放一氧化氮的作用。方法:实验于2002-03/2003-02在暨南大学医学院病理教研室、生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心实验室进行。①取新生SD大鼠大脑皮质细胞,神经元体外原代培养至... 详细信息

目的:观察不同浓度内皮素1刺激大脑皮质神经元增加释放一氧化氮的作用。方法:实验于2002-03/2003-02在暨南大学医学院病理教研室、生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心实验室进行。①取新生SD大鼠大脑皮质细胞,神经元体外原代培养至第7天,以10,100nmol的内皮素1刺激神经元,对照组加入等体积磷酸盐缓冲液,以硝酸还原酶法测定间接反映一氧化氮的含量,检验内皮素1对神经元释放一氧化氮的累积效应。分别检测加药前、加药后30min,6h培养基中的一氧化氮浓度。②将培养的神经元分成5组,对照组,10nmol/L内皮素1组、10nmol/L内皮素1+3μmol/L选择性内皮素受体A抗拮剂BQ123组、10nmol/L内皮素1+3μmol/L选择性内皮素受体B抗拮剂BQ788组、10nmol/L内皮素1+3μmol/L非特异性内皮素受体抗拮剂PD145065组。测定加药后6h各培养液中一氧化氮浓度。结果:①10nmol/L,100nmol/L内皮素1组在加药后30min一氧化氮浓度与对照组基本一致,加药后6h培养液中一氧化氮浓度高于对照组(P<0.05)。②10nmol/L内皮素1组和100nmol/L内皮素1组在加药30min和6h时一氧化氮浓度基本一致(P>0.05)。③不同内皮素受体拮抗剂对外源性内皮素1刺激神经元释放一氧化氮的影响:10nmol/L内皮素1组、10nmol/L内皮素1+3μmol/L选择性内皮素受体A抗拮剂BQ123组一氧化氮浓度高于对照组(P<0.05)。10nmol/L内皮素1+3μmol/L选择性内皮素受体B抗拮剂BQ788组、10nmol/L内皮素1+3μmol/L非特异性内皮素受体抗拮剂PD145065组明显低于10nmol/L内皮素1组(P<0.01)。结论:10nmol/L和100nmol/L内皮素1对培养液中一氧化氮的影响基本接近,提示内皮素1对皮质培养神经元释放一氧化氮增加的作用在10～100nmol/L间无剂效关系。选择性内皮素受体B抗拮剂BQ788或非特异性内皮素受体抗拮剂PD145065可完全阻断内皮素1刺激神经元释放一氧化氮的作用,选择性内皮素受体A抗拮剂BQ123对内皮素1刺激神经元释放一氧化氮无影响,提示内皮素1是通过内皮素受体B刺激神经元释放一氧化氮。

关键词：神经元内皮缩血管肽1 一氧化氮受体,内皮缩血管肽/拮抗剂和抑制剂细胞,培养的

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黄芪注射液对刀豆蛋白诱导的小鼠肝脏损伤的保护作用

中华实用中西医杂志

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中华实用中西医杂志 2005年第20期18卷 1287-1289页

作者：侯敬申潘运龙覃莉赵莉暨南大学附属第一医院暨南大学医学院组胚教研室暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广州510632

目的:观察免疫损伤模型组与实验组小鼠外周血中T细胞亚群的变化情况,探讨黄芪注射液对小鼠肝脏损伤的保护作用.方法实验组小鼠每天腹腔注射黄芪注射液400μl,正常组与模型组小鼠每天给予等剂量的生理盐水.第7天在给药1小时后,模型组与... 详细信息

目的:观察免疫损伤模型组与实验组小鼠外周血中T细胞亚群的变化情况,探讨黄芪注射液对小鼠肝脏损伤的保护作用.方法实验组小鼠每天腹腔注射黄芪注射液400μl,正常组与模型组小鼠每天给予等剂量的生理盐水.第7天在给药1小时后,模型组与实验组小鼠分别经尾静脉注射刀豆蛋白,正常组小鼠则给予等剂量的生理盐水.8小时后检测各组动物外周血中CD4+T、CD8+T细胞以及CD4+/CD25+T细胞所占比例,检测血浆转氨酶水平,制备肝脏病理标本,进行HE染色.结果尾静脉注射8小时后,实验组小鼠外周血的CD4+所占T细胞比例较模型组有所升高(P<0.05),但仍低于正常组水平(P>0.05);而CD8+T细胞的比例则无明显变化(P＞0.05).实验组ALT、AST水平明显低于模型组(P<0.05).实验组汇管区淋巴细胞浸润明显减少.结论黄芪注射液对刀豆蛋白诱导的小鼠肝损伤有确切的保护作用.

关键词：刀豆蛋白A 黄芪注射液肝损伤 CD4+ T细胞

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返流性痛病淋巴细胞经活化后CD69,CD71和HLA―DR表达及其意义

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中国现代医学杂志 1999年第10期9卷 4-5页

目的:探讨返流性肾病的发病与免疫致病的关系.方法:通过全血体外培养法,对12例返充性肾病患儿中血淋巴细胞体外活化,并用流式细胞仪测定淋巴细胞活性化抗原CD69,CD71和HLA－DR.结果:在分裂原PDB或PHA刺激下,正常组淋巴细胞与CONTROL组对... 详细信息

目的:探讨返流性肾病的发病与免疫致病的关系.方法:通过全血体外培养法,对12例返充性肾病患儿中血淋巴细胞体外活化,并用流式细胞仪测定淋巴细胞活性化抗原CD69,CD71和HLA－DR.结果:在分裂原PDB或PHA刺激下,正常组淋巴细胞与CONTROL组对比,CD69+、CD71+、HLA－DR+显著增殖(P〈0.05),返流性肾病组则无明显差异(P〉0.05,CD69除外).结论:返流性肾病存在细

关键词：返流性肾病淋巴细胞活化流式细胞术 CD69 CD71

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组蛋白去乙酰化酶在间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化过程中的表达及HDAC11的作用

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中国生物化学与分子生物学报 2015年第12期31卷 1330-1336页

作者：黄晓迪王奎栋季秋虹颜民季煜华季菊玲暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心广州510632 南通大学附属医院神经内科江苏南通226001 南通大学医学院病理系江苏南通226001

组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)通过调节组蛋白乙酰化修饰参与调控基因表达.研究发现多种HDAC参与成脂分化,但其机制尚不清楚.本研究探讨间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化过程中HDAC的表达变化及其对成脂分化的影响.本研究... 详细信息

组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)通过调节组蛋白乙酰化修饰参与调控基因表达.研究发现多种HDAC参与成脂分化,但其机制尚不清楚.本研究探讨间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化过程中HDAC的表达变化及其对成脂分化的影响.本研究首先建立了C3H10T1/2体外成脂分化的模型,并以油红O染色鉴定成功诱导成脂分化.PCR检测C3H10T1/2细胞成脂分化过程中11种HDAC的变化趋势,发现成脂分化过程中,HDAC1、2、5、9和10的m RNA表达量下降,而HDAC3、6、8和11的m RNA表达量明显上升,其中HDAC11上升最为显著.进一步通过RNA干扰沉默HDAC11表达,PCR检测成脂分化的关键转录因子PPARγ2和成脂标志物Perilipin、Adipoq的m RNA表达量下降,但Fabp4表达变化不明显.油红O染色结果表明,诱导C3H10T1/2成脂分化过程中,干扰HDAC11表达,胞浆内脂滴形成数量减少,成脂分化受到抑制.实验结果提示,C3H10T1/2细胞成脂分化伴随着多种HDAC表达的变化,其中HDAC11的增加最显著,干扰HDAC11的表达可以抑制C3H10T1/2细胞的成脂分化.

关键词：间充质干细胞成脂分化组蛋白去乙酰化酶

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