检索结果-内蒙古大学图书馆

生物工程学报 2004年第3期20卷 382-388页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅蔡小嫦曾耀英组织移植与免疫教育部重点实验室暨南大学广州510632 暨南大学生物工程研究所广州510632 暨南大学第一附属医院皮肤科广州510632 郑州大学第一附属医院皮肤科郑州450052

细胞毒T淋巴细胞 (CTL)在控制病原体感染以及抗肿瘤过程中发挥重要作用 ,因而特异性CTL的检测相当重要 ;而过去检测CTL的方法都是间接的 ,最近发展起来的四聚体技术则是直接检测抗原特异性CTL的有效而特异的方法 ,成为目前研究T细胞免... 详细信息

细胞毒T淋巴细胞 (CTL)在控制病原体感染以及抗肿瘤过程中发挥重要作用 ,因而特异性CTL的检测相当重要 ;而过去检测CTL的方法都是间接的 ,最近发展起来的四聚体技术则是直接检测抗原特异性CTL的有效而特异的方法 ,成为目前研究T细胞免疫应答的关键技术。报道一种简化的四聚体制备程序 ,利用该程序成功制备加载人巨细胞病毒 (HCMV)抗原肽的HLA_A2四聚体 ,具有特异性结合CTL活性。HLA_A 0 2 0 1重链基因是通过RT_PCR方法从HLA_A2 + 供者白细胞中克隆 ,进而以PCR方法构建在羧基端融合生物素化酶BirA底物肽 (BSP)的HLA_A 0 2 0 1(A2 )重链胞外区原核表达载体 ,A2重组蛋白在大肠杆菌中得到高表达 ,主要以包涵体形式存在。加载抗原肽的可溶性A2单体是A2胞外区在轻链 β2 微球蛋白和HLA_A2限制性HCMVpp6 5 495_50 3抗原肽 (NLVPMVATV ,NLV)存在时通过稀释法复性获得 ,以BirA对其进行生物素化 ,然后以阴离子交换树脂纯化 ,得到的纯化A2_NLV单体与Streptavidin_PE按 4 :0 8比例混合形成四聚体 ,结合程度在 85 %以上 ,流式细胞仪分析显示该四聚体具有与HLA_A2 + 供者的特异性CTL结合活性。总之 ,这种简化的四聚体制备程序 ,不仅有利于该技术的推广 ,为特异性T细胞免疫研究建立必要的技术平台。

关键词：人类白细胞抗原四聚体细胞毒T淋巴细胞包涵体人巨细胞病毒

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心理应激对正常人外周血T淋巴细胞体外活化表面分子表达的作用

引用

中国病理生理杂志 2000年第3期16卷 229-232页

作者：黄柏炎孙荭曾洁铭程云华王曦曾耀英暨南大学生物工程学系广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫中心暨南大学医学院第一附院

目的 :探讨心理应激增加对感染的易感性的细胞和分子免疫学机理。方法 :采用双荧光染色流式细胞分析法对 2 0名健康大学生志愿者 (男女各半 )在应激前后进行外周血淋巴细胞免疫表型及T细胞体外丝裂原刺激早期活化抗原表达分析。连续一... 详细信息

目的 :探讨心理应激增加对感染的易感性的细胞和分子免疫学机理。方法 :采用双荧光染色流式细胞分析法对 2 0名健康大学生志愿者 (男女各半 )在应激前后进行外周血淋巴细胞免疫表型及T细胞体外丝裂原刺激早期活化抗原表达分析。连续一周期末考试被设定为心理应激。结果 :免疫表型分析显示 ,应激前后CD2、CD3、CD4、CD8、CD19、CD2 0、CD16、CD5 6等淋巴细胞的表面分子阳性的细胞的百分比的差异无统计学显著性 ;与应激前的结果相比 ,应激后的T细胞在体外培养条件下多克隆刺激剂活化后CD6 9的表达明显降低 ,植物血凝素 (phytohemagglutinin ,PHA)组CD6 9+ CD3+ /CD3+ 的百分率由应激前的 2 8.1± 4.1降低到应激后的 17.6± 3.8,佛波醇酯 (phorbol 12 ,13-dibutyrate ,PDB)组CD6 9+ CD3+ /CD3+ 的百分率由应激前的 80 .7± 6 .8降至应激后的 6 5 8± 7.9,而在没有刺激剂作用的条件下 ,T细胞CD6 9表达率应激前后的差别无显著。结论 :应激对免疫系统的影响并不在于改变外周血淋巴细胞各亚群的比例的层面上 ;心理应激能降低健康人T细胞体外活化的反应性 ,这可能与心理应激个体对感染的易感性增加有关。

关键词：抗原 CD69 心理应激 T细胞

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不同DNA倍体鼻咽癌的CT特征

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中华放射学杂志 1997年第7期31卷 449-453页

作者：李恒国夏潮涌李启权陈金城广州暨南大学医学院附属医院医学影像科广州暨南大学组织移植和免疫实验中心

目的：从ＣＴ上探讨不同ＤＮＡ倍体的鼻咽癌（ＮＰＣ）的发展规律。材料与方法：搜集４６例ＮＰＣ，采用流式细胞仪（ＦＣＭ）对癌细胞核ＤＮＡ进行检测，发现二倍体肿瘤（ＤＴ）６例，近二倍体肿瘤（ｎＤＴ）１３例，非整倍体肿瘤（Ａ... 详细信息

目的：从ＣＴ上探讨不同ＤＮＡ倍体的鼻咽癌（ＮＰＣ）的发展规律。材料与方法：搜集４６例ＮＰＣ，采用流式细胞仪（ＦＣＭ）对癌细胞核ＤＮＡ进行检测，发现二倍体肿瘤（ＤＴ）６例，近二倍体肿瘤（ｎＤＴ）１３例，非整倍体肿瘤（ＡＴ）２７例，将它们的ＣＴ所见进行比较分析。结果：ＤＴ较ｎＤＴ和ＡＴ更易形成鼻咽腔肿块，６例ＤＴ无一例颅底骨质破坏，以鼻咽腔生长为主；ｎＤＴ和ＡＴ较ＤＴ更倾向于向深部浸润生长，并且破坏颅底骨质机率较高；从ＣＴ所表现的生长方式上看，ｎＤＴ与ＡＴ相似；ＤＴ、ｎＤＴ和ＡＴ的ＮＰＣ颈部淋巴结转移率无差别。结论：ＮＰＣ在ＣＴ所表现的以鼻咽腔生长为主者，其恶性程度较以深部浸润生长为主者要低。

关键词：鼻咽肿瘤 CT DNA倍体

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甘草甜素抑制小鼠接触性超敏反应的实验研究

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中国病理生理杂志 2006年第4期22卷 656-659页

作者：施军曾耀英蔡小嫦曾祥凤易敏丛林暨南大学附属第一医院皮肤科广东广州510632 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632

目的:探讨甘草甜素(GL)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠接触性超敏反应(CHS)的抑制效果。方法:BALB/c小鼠分为GL1(11mg/kg)组、GL2(22mg/kg)组、GL3(44mg/kg)组、生理盐水(NS)组和地塞米松(DXM)组5组;利用DNFB诱发小鼠右耳CHS,各组于-1d至5... 详细信息

目的:探讨甘草甜素(GL)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠接触性超敏反应(CHS)的抑制效果。方法:BALB/c小鼠分为GL1(11mg/kg)组、GL2(22mg/kg)组、GL3(44mg/kg)组、生理盐水(NS)组和地塞米松(DXM)组5组;利用DNFB诱发小鼠右耳CHS,各组于-1d至5d每天腹腔注射0·2mL上述不同剂量药物(溶于生理盐水)。以耳厚度差、耳重量差及右耳病理变化,观察GL对小鼠CHS的抑制效果;同时计算胸腺指数、脾指数,了解GL对CHS小鼠免疫系统的影响。结果:3个剂量组GL和DXM均可明显抑制CHS小鼠右耳厚度及重量的增加,与NS组间差异显著(P<0·01),同时亦可明显抑制右耳组织水肿和炎细胞浸润。3种剂量GL均可减低CHS小鼠胸腺重量,与NS组间有统计学差异(P<0·05),而对脾脏重量无明显影响;DXM可显著降低CHS小鼠胸腺和脾脏重量。结论:甘草甜素可明显抑制DNFB诱发的小鼠接触性超敏反应。

关键词：甘草皮炎,接触性二硝基氟苯胸腺脾

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不同DNA倍体鼻咽癌的CT的特征

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中华放射学杂志 1997年第7期31卷 449-453页

目的:从CT上探讨不同DNA倍体的鼻咽癌(NPC)的发展规律.材料与方法:搜集46例NPC,采用流式细胞仪(FCM)对癌细胞核DNA进行检测,发现二倍体肿瘤(DT)6例,近二倍体肿瘤(NDT)13例,非整倍体肿瘤(AT)27例,将它们的CT所见进行比较分析.结果:DT较ND... 详细信息

目的:从CT上探讨不同DNA倍体的鼻咽癌(NPC)的发展规律.材料与方法:搜集46例NPC,采用流式细胞仪(FCM)对癌细胞核DNA进行检测,发现二倍体肿瘤(DT)6例,近二倍体肿瘤(NDT)13例,非整倍体肿瘤(AT)27例,将它们的CT所见进行比较分析.结果:DT较NDT和AT更易形成鼻咽腔肿块,6例DT无一例颅底骨质破坏,以鼻咽腔生长为主;NDT和AT较DT更倾向于向深部浸润生长,并且破坏颅

关键词：鼻咽肿瘤 CT DNA倍体

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螺杂环单羰基姜黄素类似物的合成、晶体结构与抗肿瘤活性研究

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有机化学 2014年第8期34卷 1573-1581页

作者：吴建章翁碧霞仇佩虹蔡志坚范蕾应士龙张秀华吴晓萍梁广温州医科大学药学院化学生物学研究中心温州325035 温州医科大学附属第一医院药剂科温州325000 暨南大学组织移植与免疫实验中心广州510632

为了发现新型姜黄素类抗肿瘤先导化合物,通过1,3-偶极环加成反应合成了14个螺杂环单羰基姜黄素类似物.该反应利用无需加催化剂的"一锅煮"方法合成,具有环境友好的优点.所有化合物结构经ESI-MS、ESI-HRMS和1H NMR确认,通过X衍... 详细信息

为了发现新型姜黄素类抗肿瘤先导化合物,通过1,3-偶极环加成反应合成了14个螺杂环单羰基姜黄素类似物.该反应利用无需加催化剂的"一锅煮"方法合成,具有环境友好的优点.所有化合物结构经ESI-MS、ESI-HRMS和1H NMR确认,通过X衍射确证B6的晶体结构为单斜晶系,该类化合物的合成具有良好的区域选择性和立体选择性.通过噻唑兰(MTT)法测定所有化合物对人胃癌细胞SGC-7901、神经胶质瘤细胞U251、人大细胞肺癌细胞株NCI-H460的增殖抑制活性,部分化合物表现出了较好的活性.其中B1、B6、B7和B11对三种肿瘤细胞均表现出较好的抗肿瘤活性,而对正常人肝细胞HL-7702显示了相对较低的细胞毒性.化合物B1和B7均能明显诱导凋亡相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase3)和多聚ADP-核糖聚合酶(PARP)的活化,诱导肿瘤细胞发生凋亡.所合成的螺杂环单羰基姜黄素类似物为新型的抗肿瘤化合物,该类化合物可能在靶向抗肿瘤药物研发方面具有较好的研究前景.

关键词：单羰基姜黄素类似物螺杂环抗肿瘤合成

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婴儿肠道不同部位T细胞亚群及其表面分子检测--婴儿肠道HIV-感染和复制的可能性分析

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现代免疫学 2008年第6期28卷 496-501页

作者：黄秀艳曾耀英刘钧澄唐先高陈洁张志崇佘锦标王辉暨南大学组织移植与免疫中心广州510632 中山大学附属第一医院小儿外科广州510080 暨南大学附属第一医院器官移植中心广州510632 深圳市东湖医院肝病研究所深圳518020

通过对婴儿外周血(PB)、肠系膜淋巴结(MLN)和肠上皮内(IE)来源淋巴细胞的比较性研究,以分析婴儿肠道HIV-1感染容许性和HIV-1复制支持性的细胞与分子基础。分离婴儿外周血单个核细胞(PBMC),肠系膜淋巴结淋巴细胞(MLNL)和肠上皮间淋巴细胞... 详细信息

通过对婴儿外周血(PB)、肠系膜淋巴结(MLN)和肠上皮内(IE)来源淋巴细胞的比较性研究,以分析婴儿肠道HIV-1感染容许性和HIV-1复制支持性的细胞与分子基础。分离婴儿外周血单个核细胞(PBMC),肠系膜淋巴结淋巴细胞(MLNL)和肠上皮间淋巴细胞(iIEL),制备单细胞悬液,运用流式细胞术结合荧光抗体染色技术:(1)检测不同部位的CD3+T细胞中CD4+辅助性T细胞和CD8+杀伤性T细胞比例;(2)检测不同部位的CD4+T细胞CCR5和CXCR4以及CD69和HLA-DR的表达水平。结果发现:(1)iIEL中的CD4+辅助性T细胞占CD3+T细胞的比例明显低于PBMC和MLNL,而CD8+杀伤性T细胞占CD3+T细胞的比例明显高于PBMC和MLNL;(2)iIEL中CD4+T细胞CCR5和CXCR4以及CD69和HLA-DR的表达水平均明显高于PBMC和MLNL。结果表明:婴儿iIEL中CD4+T淋巴细胞与PBMC和MLNL的CD4+T淋巴细胞相比较,高表达HIV-1入胞共受体CCR5和CXCR4,提示iIEL更易被HIV-1感染;iIEL中CD4+T淋巴细胞高表达细胞活化标记分子CD69和HLA-DR,说明其更有利于HIV-1复制,这种高基础活化率可能与其不断接触小肠来源的食物和共生菌抗原有关。由此可见,婴儿肠道具有了HIV-1感染容许性和HIV-1复制支持性的细胞和分子基础,因此成了HIV-1最易感的解剖部位,这可能是围产期HIV感染的婴儿病毒载量明显高于成年人,且病情进展也比成年人快的原因。

关键词： HIV病 CD4+T细胞肠上皮间淋巴细胞免疫过度活化

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IDO-EGFP表达载体的构建及其在人软骨细胞中的表达

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免疫学杂志 2004年第3期20卷 172-176页

作者：何贤辉徐丽慧刘毅江逊蔡小嫦曾耀英暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学第一附属医院皮肤科广东广州510632

目的　克隆人吲哚胺双加氧酶 (IDO)基因并构建IDO与增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)融合蛋白哺乳动物细胞表达载体。方法　利用RT PCR方法从人白细胞克隆IDO基因并构建IDO EGFP融合蛋白表达载体。通过细胞核转染仪将表达载体转入人软骨细胞... 详细信息

目的　克隆人吲哚胺双加氧酶 (IDO)基因并构建IDO与增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)融合蛋白哺乳动物细胞表达载体。方法　利用RT PCR方法从人白细胞克隆IDO基因并构建IDO EGFP融合蛋白表达载体。通过细胞核转染仪将表达载体转入人软骨细胞进行瞬时表达 ,以共聚焦显微镜对表达的绿色荧光进行分析。结果　从活化的人白细胞中克隆到IDO基因编码区全长 ,并构建了IDO EGFP融合蛋白表达载体。以该表达载体转染原代人软骨细胞 ,表达的融合蛋白较均匀地分布于整个细胞。结论　成功构建了IDO EGFP哺乳动物细胞表达载体。

关键词：吲哚胺双加氧酶绿色荧光蛋白融合蛋白软骨细胞共聚焦显微术

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人表皮组织蛋白质组双向电泳技术的建立

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2007年第6期28卷 581-584页

作者：聂燕芳曾耀英刘钧澄吴晓萍暨南大学组织移植与免疫中心广东广州510632 中山大学附属第一医院小儿外科广东广州510080

目的：建立和优化人表皮组织蛋白质组双向电泳技术，为后续的皮肤蛋白质组学研究奠定基础。方法：组织匀浆法制备表皮组织总蛋白，采用固相pH梯度胶条进行双向电泳，凝胶银染后用PDQuest7．4软件对电泳图谱进行分析。结果：人表皮组织... 详细信息

目的：建立和优化人表皮组织蛋白质组双向电泳技术，为后续的皮肤蛋白质组学研究奠定基础。方法：组织匀浆法制备表皮组织总蛋白，采用固相pH梯度胶条进行双向电泳，凝胶银染后用PDQuest7．4软件对电泳图谱进行分析。结果：人表皮组织蛋白质组在7cm pH5～8 IPG胶条的最佳上样量为200μg，平均蛋白斑点数为414±19，平均匹配斑点数为346±31，匹配率达83．6％。结论：通过优化双向电泳条件，获得了分辨率高、重复性好的人表皮组织蛋白质组双向电泳图谱。

关键词：表皮组织双向电泳蛋白质组

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小鼠异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病模型的建立

引用

中国病理生理杂志 2004年第10期20卷 1947-1949页

作者：杨志刚曾耀英王青王通曾蕙兰暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室广东广州510632 暨南大学第一附属医院血液科广东广州510632

目的 :建立稳定可靠的小鼠异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病 (GVHD)模型 ;为异基因骨髓移植中GVHD研究提供理想的实验参照。方法 :以C5 7BL/6 (H - 2 b)小鼠为供鼠、BALB/c(H - 2 d)小鼠为受鼠 ,在移植物中混合不同比例的供鼠外周淋巴... 详细信息

目的 :建立稳定可靠的小鼠异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病 (GVHD)模型 ;为异基因骨髓移植中GVHD研究提供理想的实验参照。方法 :以C5 7BL/6 (H - 2 b)小鼠为供鼠、BALB/c(H - 2 d)小鼠为受鼠 ,在移植物中混合不同比例的供鼠外周淋巴细胞以引起不同程度的GVHD。根据临床表现、存活期及病理检查等判断GVHD程度。结果 :单纯异基因骨髓组只有部分小鼠出现急性GVHD ,2 0 %的小鼠长期存活 (超过 12 0d) ,无急性GVHD表现 ;混合不同比例外周淋巴细胞的异基因骨髓移植小鼠出现GVHD的时间和程度均有差异 ,其中骨髓与外周淋巴细胞 1∶1混合组小鼠全部在移植后 5 - 14d出现典型的弓背体位 ,存活期 6 - 2 4d ,临床和病理均可在相对集中的时间内观察到典型的急性GVHD改变。结论 :以供鼠骨髓与外周淋巴细胞 1∶1混合进行的异基因骨髓移植 ,10 0 %引出致死性的急性GVHD。

关键词：小鼠骨髓移植移植物抗宿主病动物模型

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