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通腑泄热法中药通过线粒体DNA/Toll样受体9/微小RNA-223通路抑制肝脏缺血再灌注损伤

中华实验外科杂志 2022年第3期39卷 459-463页

作者：苑伟毛本亮孙楠楠严林黄秀凤龚家权郝定盈裴捷王百林暨南大学附属广州市红十字会医院普通外科广州510220 贵州医科大学临床医学院贵阳550004 东莞市东南部中心医院普通外科 523710

目的探讨通腑泄热法中药通过线粒体DNA(mtDNA)/Toll样受体9(TLR9)/微小RNA(miR)-223通路抑制肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的作用。方法随机数字法将80只健康无特定病原体(SPF)级SD大鼠分成通路正常组(NP组)、通路激活组(AP组)、通路正常中... 详细信息

目的探讨通腑泄热法中药通过线粒体DNA(mtDNA)/Toll样受体9(TLR9)/微小RNA(miR)-223通路抑制肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的作用。方法随机数字法将80只健康无特定病原体(SPF)级SD大鼠分成通路正常组(NP组)、通路激活组(AP组)、通路正常中药组(NPT组)、通路激活中药组(APT组)4组,"通路激活"指在大鼠HIRI建模麻醉后采用TLR9激活剂50μg/只腹腔注射激活mtDNA/TLR9/miR-223通路,"通路正常"则腹腔注射对应剂量生理盐水;"中药"指手术处理前3 d以通腑泄热法中药按照5 ml/只/次剂量,每日2次给大鼠灌胃。每组20只,均建立肝脏HIRI模型,以分组要求施加不同干预后分别于再灌注后24、48 h两个时间点采集血清及肝组织标本,并进行相关生化指标、病理、蛋白质印迹法(Western blot)及聚合酶链反应(PCR)检测。采用多因素方差分析。结果"通路激活"及"中药干预"均是术后血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)变化的影响因素。通路激活可促进术后血清中ALT、AST、LDH升高,AP组大鼠术后24 h血清ALT、AST、LDH高于NP组[ALT:(962.34±42.35)U/L比(747.33±40.04)U/L,F=11.446,P<0.05;AST:(1421.58±93.25)U/L比(1041.87±48.60)U/L,F=5.893,P<0.05;LDH:(2312.99±95.77)U/L比(1974.23±75.80)U/L,F=5.019,P<0.05];而中药干预可抑制术后血清中ALT、AST、LDH升高,NPT组大鼠术后24 h血清ALT、AST、LDH低于NP组[ALT:(561.31±40.49)U/L比(747.33±40.04)U/L,F=688.807,P<0.05;AST:(792.38±44.03)U/L比(1041.87±48.60)U/L,F=838.255,P<0.05;LDH:(1702.75±62.32)U/L比(1974.23±75.80)U/L,F=514.608,P<0.05];通路激活及中药干预的交互作用呈现出抑制作用,APT组大鼠术后24 h血清ALT、AST、LDH低于NP组[ALT:(437.88±47.88)U/L比(747.33±40.04)U/L,F=156.296,P<0.05;AST:(510.02±55.54)U/L比(1041.87±48.60)U/L,F=272.576,P<0.05;LDH:(1473.69±71.94)U/L比(1974.23±75.80)U/L,F=134.480,P<0.05];且术后48 h,NP组、AP组、NPT组、APT组4组大鼠血清ALT、AST、LDH均较术后24 h降低。术后24 h 4组大鼠肝细胞病理均呈现出不同程度坏死,以AP组坏死最严重,且术后48 h各组肝细胞坏死程度较术后24 h轻。术后24 h,各组大鼠肝组织中核因子-κB(NF-κB)及ICAM1的表达以NP组表达最高,APT组最低,而术后48 h各组NF-κB及ICAM1表达趋势同术后24 h,且各自较术后24 h表达有所下降。术后24 h,相对于NP组,AP组及APT组中miR-223、TLR9的表达明显升高,NPT组的表达明显降低;而NPT组、AP组及APT组中mtDNA的表达均明显降低,以APT组降低最显著,术后48 h各组三者表达量均较术后24 h降低,以APT组降低最显著。结论通腑泻热法中药可以通过mtDNA/TLR9/miR-223通路改善肝脏缺血再灌注损伤。

关键词：肝脏缺血再灌注损伤通腑泄热法

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老年人的听力下降何时需就诊?这些方法测出听力异常

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祝您健康 2022年第9期 26-28页

作者：李军政暨南大学医学院第四附属医院(广州市红十字会医院)耳鼻咽喉头颈外科

上门诊时经常遇到一些老人来看病,听力下降了多年才来就诊,问他们为何不早来看病,他们就说:"老了,听力下降是正常现象,不用看.只是最近耳鸣得厉害,才想来找医生开点药,缓解一下".老年人听力出问题,下列说法有误区那么,"... 详细信息

上门诊时经常遇到一些老人来看病,听力下降了多年才来就诊,问他们为何不早来看病,他们就说:"老了,听力下降是正常现象,不用看.只是最近耳鸣得厉害,才想来找医生开点药,缓解一下".老年人听力出问题,下列说法有误区那么,"老年人的听力下降不用看"这个说法是正确的吗?仔细思考,这个说法至少说明百姓存在2个误区:误区一:老年人的耳聋只是衰老的结果,不用在意.

关键词：误区老年人正常现象看病就诊

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危重烧伤老年患者早期临床特征的多中心回顾分析及预后的危险因素分析

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第3期40卷 249-257页

作者：马琪敏汤文彬李孝建常菲尹希陈昭宏吴国华夏成德李晓亮王德运储志刚张逸王磊吴抽浪童亚林崔培郭光华朱志豪黄圣宇常刘刘锐刘永计王玉松刘晓彬沈拓朱峰海军军医大学第一附属医院烧伤外科上海200433 同济大学附属东方医院重症医学科上海200120 暨南大学附属广州市红十字会医院烧伤整形科广州510220 张家港市第一人民医院烧伤整形科张家港215600 福建医科大学附属协和医院烧伤科福州350001 郑州市第一人民医院烧伤科郑州450004 武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤科武汉430060 南通大学附属医院烧伤整形科南通226001 浙江省台州医院烧伤科临海317000 解放军第924医院烧伤整形科桂林541002 南昌大学第一附属医院烧伤整形与创面修复医学中心南昌330006 大连市第四人民医院烧伤整形科大连116031 黑龙江省医院烧伤科哈尔滨150036

目的探讨危重烧伤老年患者早期临床特征及预后的危险因素。方法该研究为回顾性病例系列研究。收集2015年1月—2020年12月12家医院收治的符合入选标准的124例危重烧伤老年患者的临床资料,其中大连市第四人民医院4例、福建医科大学附属协... 详细信息

目的探讨危重烧伤老年患者早期临床特征及预后的危险因素。方法该研究为回顾性病例系列研究。收集2015年1月—2020年12月12家医院收治的符合入选标准的124例危重烧伤老年患者的临床资料,其中大连市第四人民医院4例、福建医科大学附属协和医院5例、暨南大学附属广州市红十字会医院22例、黑龙江省医院5例、海军军医大学第一附属医院27例、南昌大学第一附属医院9例、南通大学附属医院10例、武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院9例、解放军第924医院12例、张家港市第一人民医院6例、浙江省台州医院4例、郑州市第一人民医院11例。统计患者的总体临床特征,包括性别、年龄、体重指数、烧伤总面积、Ⅲ度烧伤面积、吸入性损伤情况、致伤因素、是否合并基础疾病以及伤后入院时间。根据伤后28 d内的存活结局,将患者分为存活组(89例)与死亡组(35例),比较2组患者基本资料与伤情(同前总体临床特征);伤后第1个24 h凝血指标,包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间、D-二聚体、纤维蛋白降解产物(FDP)、国际标准化比值(INR)、纤维蛋白原;伤后第1个24 h血常规指标,包括白细胞计数、血小板计数、中性粒细胞与淋巴细胞比值、单核细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容;伤后第1个24 h脏器功能指标,包括直接胆红素、总胆红素、尿素、血肌酐、天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白、血糖、甘油三酯、总胆固醇、碱性磷酸酶、肌酸激酶、电解质指标(血钾、血钠、血氯、血钙、血镁及血磷)、尿酸、肌红蛋白、脑钠肽;伤后第1个24 h感染及血气指标,包括降钙素原、C反应蛋白、pH值、氧合指数、碱剩余、乳酸;治疗情况,包括是否行机械通气、是否行连续性肾脏替代治疗、是否行抗凝治疗、是否应用血管活性药及液体复苏情况。筛选影响危重烧伤老年患者伤后28 d死亡的独立危险因素。结果124例患者中男82例、女42例,年龄60~97岁,体重指数23.44(21.09,25.95)kg/m^(2),烧伤总面积54.00%(42.00%,75.00%)体表总面积(TBSA),Ⅲ度烧伤面积25.00%(10.00%,40.00%)TBSA,主要为中重度吸入性损伤,以火焰烧伤者为主,合并基础疾病者43例,以伤后入院时间≤8 h者为主。2组患者年龄,烧伤总面积,Ⅲ度烧伤面积,吸入性损伤情况,伤后第1个24 h PT、APTT、D-二聚体、FDP、INR、白细胞计数、血小板计数、尿素、血肌酐、血糖、血钠、尿酸、肌红蛋白、尿量比较,差异均有统计学意义(Z值分别为2.37、5.49、5.26、5.97、2.18、1.95、2.68、2.68、2.51、2.82、2.14、3.40、5.31、3.41、2.35、3.81、2.16、-3.82,P<0.05);是否行机械通气、是否应用血管活性药比较,差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为9.44、28.50,P<0.05)。年龄、烧伤总面积、Ⅲ度烧伤面积、伤后第1个24 h血肌酐、伤后第1个24 h APTT均为危重烧伤老年患者伤后28 d死亡的独立危险因素(比值比分别为1.17、1.10、1.10、1.09、1.27,95%置信区间分别为1.03~1.40、1.04~1.21、1.05~1.19、1.05~1.17、1.07~1.69,P<0.05)。结论危重烧伤老年患者多为火焰烧伤,常伴随中重度吸入性损伤,早期常伴有炎症反应增强、血糖升高、纤溶激活、脏器功能损害等,这与其预后相关。年龄、烧伤总面积、Ⅲ度烧伤面积、伤后第1个24 h血肌酐和APTT是该群体伤后28 d死亡的独立危险因素。

关键词：烧伤老年人预后危险因素回顾性研究

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中心静脉-动脉血二氧化碳含量差对重度烧伤患者削痂术容量复苏的指导意义

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实用医学杂志 2020年第6期36卷 761-766页

作者：梁冰曹阳黄浩然罗福荣张志广州市红十字会医院暨南大学医学院第四附属医院麻醉科广州510220 广州市红十字会医院暨南大学医学院第四附属医院烧伤整形外科广州510220

目的通过观察中心静脉-动脉血二氧化碳分压差(Pcv-aCO2)在大面积烧伤患者早期削痂术中液体复苏过程中的变化,探讨Pcv-aCO2对患者术后组织灌注及氧合的影响,为烧伤患者寻求更有效的液体复苏的综合目标方案。方法采用前瞻性观察性研究方法... 详细信息

目的通过观察中心静脉-动脉血二氧化碳分压差(Pcv-aCO2)在大面积烧伤患者早期削痂术中液体复苏过程中的变化,探讨Pcv-aCO2对患者术后组织灌注及氧合的影响,为烧伤患者寻求更有效的液体复苏的综合目标方案。方法采用前瞻性观察性研究方法,选择2016年1月至2018年12月广州市红十字会医院烧伤重症加强治疗病房(SICU)收治的大面积烧伤患者128例。所有患者均接受血流动力学监测及目标导向液体治疗,术毕中心静脉氧饱和度(ScvO2)<70%剔出试验。依据T基(诱导前)至T0(术毕)的Pcv-aCO2变化趋势将患者进行分组:第1组(H-H):Pcv-aCO2在T基至T0时间点间持续≥6 mmHg;第2组(L-H):Pcv-aCO2在T基时间点<6 mmHg,T0时间点≥6 mmHg;第3组(H-L):Pcv-aCO2在T基时间点≥6 mmHg,逐步降低至T0时间点<6 mmHg;第4组(L-L):Pcv-aCO2在T基至T0时间点间持续<6 mmHg。记录术毕及术后18 h心率(HR)、血压、中心静脉压(CVP)、心排血指数(CI)、Pcv-aCO2、乳酸等基本生理学指标,计算氧供指数(DO2I)、氧耗指数(VO2I)、氧摄取率(O2ER)、等氧动力学指标,评价Pcv-aCO2与CI的相关性;分析液体复苏治疗后不同Pcv-aCO2水平的组织灌注及氧合变化。结果85例患者均纳入最终分析,第1组(H-H):24例,第2组(L-H):8例,第3组(H-L):17例,第4组(L-L):36例。四组一般资料及APACHEⅡ评分比较差异均无统计学意义。手术时间、总输液量、总出血量组间比较差异均无统计学意义。DO2I在T0时间点L-L,H-L组与另外两组比较差异有统计学意义(P<0.001),O2ER在T0时间点L-L,H-L组与另外两组比较差异有统计学意义(P<0.001),在T18时间点,4组受试者的氧供需指标及氧摄取率指标均无差异。T0时间点、T18时间点HR、血压、CI、CVP组间比较差异均无统计学意义。T0时间点Pcv-aCO2与CI有相关性(r=-0.221),但T18相关性减弱(r=-0.0485),术后0 h至18 h乳酸清除率L-L,H-L组与另外两组比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论烧伤休克患者的CO与Pcv-aCO2并非简单的线性关系,通过监测PcvaCO2结合CO、血乳酸(Lac)等指标,可以帮助分析微循环的不同状态及病理阶段,提升复苏的准确性。

关键词：烧伤中心静脉-动脉血二氧化碳分压差复苏

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芒果苷对RANKL诱导的Raw264.7向破骨细胞分化的影响

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中国老年学杂志 2017年第18期37卷 4457-4460页

作者：张金丽杨小红梁佩红陈鸿辉暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院创伤外科研究所

目的探讨芒果苷对核因子（NF）κB受体激活配体（RANKL）诱导的Raw264.7向破骨细胞分化的影响。方法以重组小鼠RANKL诱导小鼠巨噬细胞Raw264.7向破骨细胞分化为模型,采用不同浓度芒果苷进行干预,通过抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色和... 详细信息

目的探讨芒果苷对核因子（NF）κB受体激活配体（RANKL）诱导的Raw264.7向破骨细胞分化的影响。方法以重组小鼠RANKL诱导小鼠巨噬细胞Raw264.7向破骨细胞分化为模型,采用不同浓度芒果苷进行干预,通过抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色和破骨细胞骨架结构荧光染色观察破骨细胞数量和面积,反转录酶-聚合酶链反应（RT-PCR）检测破骨细胞分化特异性蛋白组织蛋白酶K的表达,萤光素酶报告基因法检测NF-κB通路激活情况;Western印迹检测细胞外调节蛋白激酶（ERK）磷酸化情况。结果芒果苷可以抑制破骨样细胞的生成,降低破骨细胞特异性基因的表达,抑制RANKL诱导的NF-κB通路的激活和ERK1/2的磷酸化水平。结论芒果苷可以抑制体外破骨细胞的分化。

关键词：芒果苷破骨细胞核因子-κB 核因子-Κb受体激活配体

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他汀类联合心血管药物治疗心血管疾病的临床效果分析

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世界临床医学 2017年第12期11卷 6-6页

作者：吴伟东罗磊易永盛丁锋姜锋暨南大学第四附属医院广州市红十字会医院心胸外科暨南大学第一临床医学院广东广州510220

目的:分析他汀类联合心血管药物治疗心血管疾病的临床效果.方法:将我院2015年8月至2016年8月收治的90例心血管疾病患者随机分为对照组(心血管药物治疗)及观察组(他汀类联合心血管药物治疗)各45例,分析两组临床治疗效果.结果:观察组不良... 详细信息

目的:分析他汀类联合心血管药物治疗心血管疾病的临床效果.方法:将我院2015年8月至2016年8月收治的90例心血管疾病患者随机分为对照组(心血管药物治疗)及观察组(他汀类联合心血管药物治疗)各45例,分析两组临床治疗效果.结果:观察组不良反应8.9％,对照组不良反应发生率6.7％,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗后两组血脂差异有统计学意义(P＜0.05).结论:他汀类联合心血管药物治疗心血管疾病效果理想且安全性高,可作为优选治疗方案推广使用.

关键词：他汀类心血管药物心血管疾病

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甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因沉默对人结肠癌HCT116细胞增殖凋亡的影响

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中华实验外科杂志 2016年第11期33卷 2529-2532页

作者：吴帆严伦谭国钳王百林广州市红十字会医院暨南大学医学院附属广州红十字会医院普通外科 510220

目的观察甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因（Mus81）沉默对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响并探讨其调控机制.方法采用慢病毒介导的小干扰RNA （siRNA）技术靶向沉默Mus81基因的表达,以实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）及Weste... 详细信息

目的观察甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因（Mus81）沉默对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响并探讨其调控机制.方法采用慢病毒介导的小干扰RNA （siRNA）技术靶向沉默Mus81基因的表达,以实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）及Western blot检测Mus81基因的表达抑制率.采用噻唑蓝（MTT）法绘制细胞生长曲线,以碘化丙锭（PI）及膜联蛋白V（Annexin V）-APC染色法检测细胞周期及凋亡率,以Real-time PCR法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关X蛋白（bax）及p53基因的表达.结果 Mus81基因和蛋白的抑制率分别为84.64％和71.03％（P＜0.01）.Mus81沉默后HCT116细胞的增殖速度明显降低（P＜0.01）,凋亡率明显升高[（19.69±0.20）％比（8.74±0.11）％,P＜0.01],G2/M期细胞比例轻微上升[（12.99±0.48）％比（11.69±0.41）％,P＜0.05],其bax和p53的表达分别升高了71.73％和12.02％（P ＜0.05）,bcl-2表达则降低了37.72％（P ＜0.01）.结论 Mus81基因沉默可明显促进HCT116细胞凋亡并抑制其增殖,其机制可能与调控bax、bcl-2及p53基因的表达有关.

关键词：甲磺酸盐及紫外线敏感性81号基因小干扰RNA 结肠癌增殖脱噬作用

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WEE1在结直肠癌组织中的表达及意义

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中华实验外科杂志 2016年第3期33卷 600-603页

作者：戈小川吴帆薛福龙刘建伟王百林暨南大学医学院附属广州市红十字会医院普通外科广州510220

目的探讨WEE1在结直肠癌患者组织中的表达与其临床病理和预后的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）方法和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）免疫组织化学法分别检测44例结直肠癌及癌旁组织和102例石蜡包埋的结直肠... 详细信息

目的探讨WEE1在结直肠癌患者组织中的表达与其临床病理和预后的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）方法和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）免疫组织化学法分别检测44例结直肠癌及癌旁组织和102例石蜡包埋的结直肠癌标本中的WEE1基因和蛋白的表达。并分析其基因和蛋白表达与临床病理、预后的关系。结果WEE1基因在结直肠癌及癌旁患者组织中的表达分别为0．392及0．297，差异有统计学意义（P〈0．01）。免疫组织化学的结果也显示，WEE1蛋白表达阳性率为52．9％（54／102），WEE1基因表达上调与与结直肠癌的远处转移（P〈0．05）及TNM分期（P〈0．05）密切相关，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。且WEE1高表达组患者的平均生存时间明显短于WEE1低表达组[（50．6±5．6）、（65．6±2．5）个月，P〈0．05]。结论WEE1基因在结直肠癌患者组织中为高表达，其高表达与结直肠癌的进展及不良预后密切相关。

关键词： WEE1 结直肠癌预后

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前列腺素E1上调血管性痴呆大鼠海马组织VEGF、BDNF的表达

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中国神经精神疾病杂志 2015年第8期41卷 471-476页

作者：刘博会张素平凌莉熊喜峰王慕真何锐邓婉青暨南大学附属第四医院广州市红十字会医院神经内科广州510220 广州市红十字会医院创伤外科研究所

目的探讨前列腺素E1(prostaglandin E1,PGE1)对双侧颈总动脉永久性结扎(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO)大鼠学习记忆功能及海马VEGF、BDNF表达的影响。方法 48只大鼠随机分为PGE1治疗组(PGE1,10μg·kg-1·d-1,iv)、PGE1+VEGFR拮抗剂组(PGE1,10μg·kg-1·d-1,iv;SU5416,25 mg·kg-1·d-1,ip)、溶剂对照组、假手术组,每组12只。术后15 d进行认知功能障碍筛选实验,24 d给予相应药物连续注射7d,药物处理后2 d予Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆功能后处死,蛋白印迹法观察大鼠海马组织VEGF、BDNF的表达。结果与溶剂对照组及PGE1+VEGFR拮抗剂组比,PGE1治疗组平均潜伏期降低(P<0.05),穿越次数增多(5.77±0.83 vs.2.88±0.47 vs.2.63±0.44,P<0.01),且原平台象限停留时间百分比增大(32.28%±4.56%vs.20.42%±5.50%vs.23.08%±5.06%,P<0.05);与溶剂对照组、假手术组相比,PGE1治疗增加了海马VEGF表达量(0.057±0.005 vs.0.038±0.002 vs.0.027±0.002,P<0.05)、BDNF表达量(0.481±0.049 vs.0.339±0.021 vs.0.224±0.04,P<0.05);与PGE1+VEGFR拮抗剂组比,PGE1治疗组VEGF表达量差异不明显(0.057±0.005 vs.0.053±0.003,P>0.05),但BDNF表达量增多(0.481±0.049 vs.0.373±0.034,P<0.05)。结论 PGE1可上调血管性痴呆大鼠海马组织VEGF、BDNF的表达并可改善血管性痴呆大鼠学习记忆功能,而VEGFR拮抗剂则可部分拮抗PGE1的这一作用。

关键词：前列腺素E1 血管性痴呆大鼠 VEGF BDNF

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维生素C对TNF-α及血清剥夺诱导的人髓核细胞凋亡的作用

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中国修复重建外科杂志 2015年第4期29卷 490-497页

作者：戴丽冰刘志河梁伟国姚依村徐家科叶冬平邹隆强沈雁暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院广州市创伤外科研究所广州510220 广州市红十字会医院骨科广州510220 广州市红十字会医院西澳大利亚大学外科学院病理学和医学实验室广州510220

目的探讨维生素C(Vitamin C,Vit C)在TNF-α及血清剥夺诱导人椎间盘髓核细胞凋亡中的作用及机制。方法取脊柱矫形手术患者的髓核组织,消化法获得正常髓核细胞,取第3代细胞按不同处理因素分为Vit C作用组(A组)、TNF-α诱导组(B组)和血清... 详细信息

目的探讨维生素C(Vitamin C,Vit C)在TNF-α及血清剥夺诱导人椎间盘髓核细胞凋亡中的作用及机制。方法取脊柱矫形手术患者的髓核组织,消化法获得正常髓核细胞,取第3代细胞按不同处理因素分为Vit C作用组(A组)、TNF-α诱导组(B组)和血清剥夺组(C组),每组再分为以下亚组:A组分为A1组(基础培养液)、A2组(100μg/m L Vit C)、A3组(200μg/m L Vit C);B组分为B0组(对照组)、B1组(100 ng/m L TNF-α)、B2组(100μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α)、B3组(200μg/m L Vit C+100 ng/m L TNF-α);C组分为C0组(对照组)、C1组(FBS浓度由8%降低为2%)、C2组(2%FBS+100μg/m L Vit C)、C3组(2%FBS+200μg/m L Vit C)。各组作用24 h后,采用流式细胞术检测各组膜联蛋白V、碘化丙啶双染后髓核细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测p53(基因编码相对分子质量为53×103的蛋白质)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Sox9和糖胺多糖(Aggrecan)m RNA表达。结果 A组:与A1组比较,A2、A3组的Vit C均能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P<0.05),但A2、A3组间比较差异无统计学意义(P>0.05);A2、A3组的Vit C可促进髓核细胞Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、Aggrecan、Sox9 m RNA表达,且A3组促进作用显著大于A2组(P<0.05)。B组:与B0组比较,B1组TNF-α促进了髓核细胞凋亡,增加了髓核细胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P<0.05);与B1组比较,B3组的Vit C能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,而B2组的Vit C则增加其凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。C组:与C0组比较,C1组2%FBS能诱导髓核细胞凋亡,但降低了髓核细胞p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达(P<0.05);与C1组比较,C3组的Vit C能降低髓核细胞凋亡及p53、FAS、Caspase 3 m RNA表达,而C2组的Vit C则增加其凋亡及p53、FAS m RNA表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Vit C能延缓或降低髓核细胞凋亡、促进细胞外基质合成与分泌,200μg/m L Vit C可延缓或降低100 ng/m L TNF-α和2%FBS诱导的凋亡,而100μg/m L Vit C则促进其诱导的凋亡。

关键词：维生素C 髓核细胞 TNF-α 血清剥夺细胞凋亡椎间盘退变

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