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益骨胶囊含药血清在共育体系中对大鼠成骨细胞增殖、ALP活性及IL-1. mRNA表达的影响

中国病理生理杂志 2006年第6期22卷 1171-1173页

作者：傅淑平张荣华徐立群暨南大学药学院中药学教研室广东广州510632

目的:观察益骨胶囊含药血清在成骨-破骨细胞共育体系中对SD大鼠成骨细胞(OB)增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性及白细胞介素-1.(IL-1.)mRNA表达的影响。方法:(1.取1.龄SD大鼠颅骨分离培养OB,取5d龄SD大鼠四肢股骨、胫骨分离培养破骨细胞(OC),... 详细信息

目的:观察益骨胶囊含药血清在成骨-破骨细胞共育体系中对SD大鼠成骨细胞(OB)增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性及白细胞介素-1.(IL-1.)mRNA表达的影响。方法:(1.取1.龄SD大鼠颅骨分离培养OB,取5d龄SD大鼠四肢股骨、胫骨分离培养破骨细胞(OC),建立细胞上清相通但细胞间不相互混杂的平面式成骨-破骨细胞共育体系,实验分为两组(含药血清组和对照组)。(2)MTT法检测OB增殖,氨基安替吡啉测酚法测定ALP活性,FQ-PCR法测定IL-1.mRNA相对表达量。结果:含药血清组中OB的A值、ALP活性、IL-1./β-actin比值均高于对照组(P<0·05)。结论:益骨胶囊含药血清在共育体系中可促进OB增殖、增强OB ALP活性,提高IL-1.mRNA的表达。

关键词：益骨胶囊成骨细胞白细胞介素1. 碱性磷酸酶 mRNA表达

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益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织骨形态发生蛋白2表达的影响(英文)

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中国临床康复 2006年第3期10卷 190-192,F0003页

作者：杨丽张荣华朱晓峰蔡宇黄丰暨南大学附属第一医院中医科广东省广州市510632 暨南大学药学院中药学教研室广东省广州市510632

背景:骨形态发生蛋白-2是高效骨诱导因子。骨形态发生蛋白-2诱导骨内、外膜和骨髓基质细胞分化为骨母细胞,有加强骨床再生能力的作用,还可以活化或诱导血管周围的间充质细胞分化为软骨和成骨细胞。目的:观察益骨胶囊预防和治疗用药对去... 详细信息

背景:骨形态发生蛋白-2是高效骨诱导因子。骨形态发生蛋白-2诱导骨内、外膜和骨髓基质细胞分化为骨母细胞,有加强骨床再生能力的作用,还可以活化或诱导血管周围的间充质细胞分化为软骨和成骨细胞。目的:观察益骨胶囊预防和治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织骨形态发生蛋白-2蛋白表达的影响。设计:随机分组设计、对照实验。单位:暨南大学附属第一医院中医科。材料:实验于 2003-03/1.在暨南大学中药学实验室完成。动物:选择1.月龄普通级雌性 SD 大鼠 72只,体质量(380±20)g,由广东省医学实验动物中心提供(合格证号:粤检证字第 2002A024号)。随机抽取24只分为假手术(腹部切口但不切除卵巢)预防用药组(1.只)和治疗用药组(1.只),余 48只行腹部切口双侧卵巢切除术复制骨质疏松模型后随机分为 4组:模型预防用药组、模型治疗用药组、预防用药组、治疗用药组,每组 1.只。药物:益骨胶囊由淫羊藿、枸杞子、熟地黄、牛膝等组成,深圳三九医药股份有限公司提供免煎颗粒,配制成水溶液,含生药 1.0g/m L。干预:益骨胶囊预防用药于手术后 3d 即开始灌胃,假手术预防用药组、模型预防用药组灌胃生理盐水 3m L、预防用药组灌胃益骨胶囊水溶液 3m L,1. /d,共 24周;益骨胶囊治疗用药于手术后第 1.周开始灌胃,假手术治疗用药组、模型治疗用药组灌胃生理盐水 3m L、治疗用药组灌胃益骨胶囊水溶液 3m L,1. /d,共 1.周。免疫组化方法检测骨组织骨形态发生蛋白-2蛋白表达。主要观察指标:骨组织骨形态发生蛋白-2阳性反应细胞的平均灰度值。结果:大鼠造模 24周时,模型预防用药组、预防用药组、假手术预防用药组大鼠骨组织骨形态发生蛋白-2阳性反应细胞的平均灰度值分别为81.84±1..01.1.4.46±6.55,1.0.1.±1..09,模型预防用药组明显低于假手术预防用药组 (P <0.01.,预防用药组显著高于模型预防用药组(P<0.01.,与假手术预防用药组相近(P >0.05)。模型治疗用药组、治疗用药组、假手术治疗用药组大鼠骨组织骨形态发生蛋白-2阳性反应细胞的平均灰度值分别为 77.97±1..35,1.0.32±8.69,1.1.79±1..1.,模型治疗用药组明显低于假手术治疗用药组(P <0.01.,治疗用药组显著高于模型治疗用药组(P <0.01.,与假手术治疗用药组相近(P >0.05)。结论:益骨胶囊预防和治疗用药均能促进骨组织骨形态发生蛋白-2蛋白表达。

关键词：骨质疏松大鼠骨形态发生蛋白质类中药疗法益骨胶囊骨组织骨形态发生蛋白2

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益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨形态学与血清雌二醇及肿瘤坏死因子α变化的干预

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中国临床康复 2005年第31期9卷 175-177页

作者：杨丽张荣华朱晓峰蔡宇黄丰暨南大学附属第一医院中医科暨南大学药学院中药学教研室广东省广州市510632 暨南大学药学院中药学教研室

目的:观察益骨胶囊预防用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨形态学及血清雌二醇、肿瘤坏死因子α的影响。方法:实验于2003-03/1.在暨南大学完成。36只1.月龄SD雌性大鼠随机抽取1.只为假手术组,其余24只在手术造模后随机分为模型组及预防组;以双... 详细信息

目的:观察益骨胶囊预防用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨形态学及血清雌二醇、肿瘤坏死因子α的影响。方法:实验于2003-03/1.在暨南大学完成。36只1.月龄SD雌性大鼠随机抽取1.只为假手术组,其余24只在手术造模后随机分为模型组及预防组;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型;各组均在手术后3天开始灌胃,假手术组、模型组灌胃生理盐水3mL、预防组灌胃益骨胶囊水溶液3mL,1./d,共24周。股骨组织脱钙切片观察骨形态学;放射免疫方法测定血清雌二醇和肿瘤坏死因子α水平,评估雌二醇抑制肿瘤坏死因子α而抗骨质疏松的作用。结果:实验过程中无实验动物死亡,均进入结果分析。①光镜下骨形态学改变:假手术组苏木精-伊红染色见骨小梁粗壮、饱满,着色较深,形态结构完整,骨髓腔相对较小,腔内造血细胞数量较多,模型组骨小梁纤细,着色淡,数目减少且形态结构完整性差,有的部位有扭曲和断裂,骨小梁连接点减少,游离末端增多,骨小梁间隙增大,骨髓腔增宽,骨髓腔内造血细胞减少,脂肪细胞增多,预防组骨小梁数目较多,形态结构完整,骨小梁壁厚,骨小梁连接点多,游离末端少,骨髓腔小,骨髓腔内造血细胞较多,脂肪细胞少见。②假手术组和预防组24周时血清雌二醇水平接近,但两者均明显高于模型组犤(88.703±1..21.),(83.02.±1..007),(27.825±1..393)ng/L,P<0.01.,前两组相接近(P>0.05)③假手术组和预防组24周时血清肿瘤坏死因子α水平接近,但两者明显高于模型组犤(0.906±0.258),(1.222±0.436),(2.900±0.788)mg/L,P<0.01.,前两组相接近(P>0.05)。结论:实验结果显示,模型大鼠血清雌二醇水平明显降低,这是由于大鼠卵巢分泌雌二醇功能丧失,导致体内雌二醇水平下降;大鼠血清中骨吸收刺激因子肿瘤坏死因子α含量明显升高,表明在正常情况下雌二醇对肿瘤坏死因子α有一定的抑制作用,当雌二醇水平下降时,解除或降低了这种抑制作用,从而使肿瘤坏死因子α增加。在使用具有补肾活血功效的益骨胶囊预防用药后,血清雌二醇水平保持较高水平,这说明益骨胶囊能刺激体内雌激素分泌,具有类雌激素样作用;血清肿瘤坏死因子α水平下降,说明益骨胶囊预防用药对肿瘤坏死因子α可能具有下调作用。

关键词：骨质疏松/中药疗法大鼠卵巢切除术

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益骨胶囊含药血清对成骨细胞骨保护蛋白mRNA表达的影响

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中国临床康复 2005年第19期9卷 180-182页

作者：朱晓峰张荣华孙升云蔡宇郑仕富王廷春陈超李洁华广州暨南大学附属第一医院中医科广东省广州市510630 广州暨南大学药学院中药学教研室广东省广州市510630

目的:观察益骨胶囊含药血清对体外培养的大鼠成骨细胞骨保护蛋白mRNA的影响。方法:实验于2004-05/2005-02在广州暨南大学生命科学技术学院细胞与蛋白质工程实验室完成。选取1.月龄SD雌性大鼠20只,随机分为2组。中药给药组(益骨胶囊由淫... 详细信息

目的:观察益骨胶囊含药血清对体外培养的大鼠成骨细胞骨保护蛋白mRNA的影响。方法:实验于2004-05/2005-02在广州暨南大学生命科学技术学院细胞与蛋白质工程实验室完成。选取1.月龄SD雌性大鼠20只,随机分为2组。中药给药组(益骨胶囊由淫羊藿、当归、白芍、枸杞子等8味中药组成)和蒸馏水对照组,每组1.只。运用大鼠灌胃的方法制备含药血清和对照血清,分离、培养新生大鼠的颅骨成骨细胞,传代后分为2组(含药血清组和空白血清对照组),每组8孔,分别在培养24,48h时用反转录聚合酶链反应技术测定特异性电泳条带所显示成骨细胞中骨保护蛋白mRNA的相对表达量,酶联免疫法检测48,72和96h时200mL/L终浓度培养上清中骨保护蛋白的浓度。结果:两组动物各1.只,均无亡失,所取血清正常用于细胞培养。①成骨细胞在接种4h后可见部分细胞贴壁、伸展。随培养时间延长,细胞伸出较多突起,细胞形态为单核,多边形及梭形,培养2d细胞基本全部贴壁,主要为梭形或多边形,培养6d左右基本贴满瓶壁,呈铺路石样排列。单层铺满培养瓶后可出现重叠生长,传代细胞大约1.d天左右开始形成矿化结节。②特异性电泳条带显示益骨胶囊含药血清培养后24h和48h成骨细胞骨保护蛋白mRNA的表达均高于空白血清对照组犤(0.1.6±0.01.,0.236±0.01.),(0.1.2±0.01.,0.206±0.022),P<0.01.;③200mL/L终浓度的益骨胶囊含药血清培养后48,72和96h成骨细胞骨保护蛋白的表达明显高于空白血清对照组犤(0.1.30±0.01.8,0.1.81.0.01.0,0.1.83±0.01.6),(0.1.67±0.01.6,0.1.85±0.01.6,0.1.88±0.01.1.,P<0.01.P<0.05犦。结论:益骨胶囊含药血清具有促进成骨细胞表达骨保护蛋白的作用。提示益骨胶囊能够通过对成骨细胞的影响而对骨吸收环节具有抑制作用,但是否对其他信号通路也有作用尚待研究。

关键词：骨质疏松益骨胶囊/药理学成骨细胞

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去势雌鼠抗骨质疏松治疗中骨重建的定量分析

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中国临床康复 2005年第19期9卷 178-179,185页

作者：张荣华杨爱武杨丽朱晓峰蔡宇暨南大学附属第一医院中医科解放军第一八○医院内三科福建省泉州市362000 暨南大学药学院中药学教研室广东省广州市510632

目的:采用定量分析方法观察益骨胶囊治疗对去卵巢骨质疏松大鼠骨结构的影响。方法:本实验于2003-01.2004-06在暨南大学完成。32只SD雌性大鼠,通过卵巢切除术诱导骨质疏松模型,随机分为假手术组(打开腹腔,找到卵巢后并不切除)、模型组、... 详细信息

目的:采用定量分析方法观察益骨胶囊治疗对去卵巢骨质疏松大鼠骨结构的影响。方法:本实验于2003-01.2004-06在暨南大学完成。32只SD雌性大鼠,通过卵巢切除术诱导骨质疏松模型,随机分为假手术组(打开腹腔,找到卵巢后并不切除)、模型组、益骨胶囊高、低剂量治疗组,每组8只。各组大鼠术后1.周开始灌胃,1./d,1.周为1.疗程。假手术组、模型组每天给予生理盐水1..6mL/kg灌胃;益骨胶囊低剂量组、益骨胶囊高剂量组每天分别给予低、高剂量益骨胶囊溶液1..6mL/kg灌胃,益骨胶囊低剂量组为1.1.g/1.0g(含生药1.0g/mL),益骨胶囊高剂量组为3.48g/1.0g(含生药3.0g/mL),全部大鼠在处死前第1.,1.,3,2天,分别给予皮下注射盐酸四环素25mg/kg和钙黄绿素5mg/kg,在骨表面形成黄色和绿色两层双荧光标记,以动态观察2次注射期间骨形成的情况。术后24周处死全部大鼠,取胫骨近端经处理制作骨切片在荧光显微镜下观察,进行骨小梁结构基本参数测算及定量分析;取股骨远端经处理制作骨切片,苏木精-伊红染色后测定星体积。结果:①益骨胶囊高剂量组骨小梁面积、宽度、数量、连接点数略低于或接近假手术组,高于模型组;益骨胶囊剂量组骨小梁分离度小于模型组,大于假手术组;益骨胶囊高、低剂量组骨小梁游离末端数均显著低于模型组,与假手术组相近。②骨矿化沉积率:模型组明显高于假手术组犤(1.94±0.21.,(1.49±0.1.)μm/d,P<0.01.,益骨胶囊低剂量组略低于模型组犤(1.69±0.1.8),(1.94±0.21.μm/d,P<0.05犦,高剂量组显著高于假手术组犤(1.76±0.1.),(1.49±0.1.)μm/d,P<0.01.。③星体积:模型组显著高于假手组犤(0.1.78±0.021.),(0.0729±0.01.9)mm3,P<0.01.,益骨胶囊高、低剂量组显著低于模型组犤(0.061.±0.01.3),(0.081.±0.01.0),(0.1.78±0.021.)mm3,P<0.01.。结论:益骨胶囊能明显改善骨质疏松模型大鼠的骨小梁结构,降低星体积,缩小骨小梁间隙,提高骨形成速率的同时降低骨吸收速率,最终增加骨量形成。

关键词：骨或骨组织/药物作用益骨胶囊/药理学骨质疏松/药物疗法卵巢切除术

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去势雌鼠骨计量学指标及星体积变化与益骨胶囊的干预作用

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中国临床康复 2005年第19期9卷 165-167页

作者：杨爱武张荣华吕宏升朱晓峰蔡宇黄丰解放军第一八○医院内三科福建省泉州市362000 暨南大学药学院中药学教研室解放军第一八○医院骨二科福建省泉州市362000 暨南大学药学院附属第一医院中医科广东省广州市510632

目的:观察益骨胶囊对去卵巢骨质疏松症大鼠骨计量学相关指标及星体积变化的影响。方法:本实验于2003-01.2004-06在暨南大学完成。选用32只SD雌性大鼠,随机分为4组假手术组、模型组、益骨胶囊高、低剂量预防组,每组8只,除假手术组其他24... 详细信息

目的:观察益骨胶囊对去卵巢骨质疏松症大鼠骨计量学相关指标及星体积变化的影响。方法:本实验于2003-01.2004-06在暨南大学完成。选用32只SD雌性大鼠,随机分为4组假手术组、模型组、益骨胶囊高、低剂量预防组,每组8只,除假手术组其他24只大鼠制成骨质疏松症模型。术后3d开始灌药,假手术组、模型组每天给予生理盐水1..6mL/kg灌胃;益骨胶囊低剂量组、益骨胶囊高剂量组每天分别给予低(含生药1.0g/mL)、高(含生药3.0g/mL)剂量益骨胶囊溶液1..6mL/kg灌胃,全部大鼠在处死前第1.,1.,3,2d,分别给予皮下注射盐酸四环素25mg/kg和钙黄绿素5mg/kg,在骨表面形成黄色和绿色两层双荧光标记,动态观察2次注射期间骨形成的情况。术后24周处死全部大鼠,取胫骨近端经处理制作骨切片在荧光显微镜下观察,进行骨小梁结构基本参数测算及定量分析;取股骨远端经处理制作骨切片,苏木精-伊红染色后进行星体积测定。结果:①骨小梁指标:骨小梁面积(反映骨量的多少)模型组明显低于假手术组犤(22.21.3.48)%,(41.1.±4.47)%,P<0.01.,益骨胶囊组显著高于模型组犤(36.08±6.06)%,(41.53±5.49)%,(22.21.3.48)%,P<0.01.,且高剂量组略高于假手术组犤(41.53±5.49)%,(41.1.±4.47)%犦;骨小梁宽度及数量(反映骨小梁结构形态及骨量变化)与连接点数模型组显著低于假手术组,益骨胶囊组明显高于模型组,高剂量组接近于假手术组;骨小梁分离度及游离末端数模型组显著高于假手术组,益骨胶囊组明显低于模型组。②骨矿化沉积率(代表成骨细胞的活性及每天骨矿化速度):模型组明显高于假手术组犤(1.95±0.21.,(1.52±0.1.)μm/d,P<0.01.,益骨胶囊组显著高于假手术组犤(1.74±0.1.),(1.78±0.1.),(1.52±0.1.)μm/d,P<0.05犦。③星体积(反应松质骨骨小梁和骨髓腔的大小):模型组显著高于假手术组犤(0.1.30±0.021.),(0.0723±0.01.8)mm3,P<0.01.,益骨胶囊组显著低于模型组犤(0.0598±0.01.7),(0.0467±0.01.6),(0.1.30±0.021.)mm3,P<0.01.,且低剂量组和高剂量组均低于假手术组,高剂量组更为显著。结论:益骨胶囊能显著减少骨量丢失,改善骨质疏松模型大鼠的骨小梁结构,降低星体积,缩小骨小梁间隙,在提高骨形成速率的同时降低骨吸收速率。

关键词：骨质疏松/中药疗法卵巢切除术大鼠

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痛泻要方对三硝基苯磺酸诱导的内脏痛觉超敏的影响

痛泻要方对三硝基苯磺酸诱导的内脏痛觉超敏的影响

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第九届全国中药药理学术交流会

作者：胡旭光张思为朱晓峰广东药学院中药学院中药药理教研室深圳人民医院中医科暨南大学华侨医院中医科

本文研究了痛泻要方对三硝基苯磺酸诱导的内脏痛觉超敏的影响。文章阐述了痛泻要方对TNBS诱导的内脏痛觉超敏的治疗作用和痛泻要方对热板法小鼠的止痛作用。

关键词：胃肠疼痛中药治疗痛泻要方中药药理

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人参皂苷Rg1.脂多糖诱导的C6细胞株淀粉样前体蛋白和脑啡肽酶表达的影响

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中国病理生理杂志 2004年第6期20卷 1042-1045页

作者：罗焕敏邓惠黄丰肖飞高勤李晓光暨南大学药学院神经药理研究室广东广州510632 暨南大学药学院中药学教研室广东广州510632

目的 :为寻找治疗阿尔茨海默病的有效药物 ,探讨人参皂苷Rg1.脂多糖 (LPS)诱导的C6细胞株淀粉样前体蛋白 (APP)和脑啡肽酶 (NEP)表达的影响。方法 :应用MTT比色法检测一定剂量LPS(1. 0mg&#1.3;L-1.和不同浓度人参皂苷Rg1.2 5、5、1.、... 详细信息

目的 :为寻找治疗阿尔茨海默病的有效药物 ,探讨人参皂苷Rg1.脂多糖 (LPS)诱导的C6细胞株淀粉样前体蛋白 (APP)和脑啡肽酶 (NEP)表达的影响。方法 :应用MTT比色法检测一定剂量LPS(1. 0mg·L-1.和不同浓度人参皂苷Rg1.2 5、5、1.、2 0 μmol·L-1.对C6细胞存活率的影响 ,应用RT -PCR观察细胞中APP、NEP表达的变化。结果 :LPS作用于C6细胞株 ,C6细胞存活率下降 ,细胞内APP的表达增加 ,NEP的表达降低。人参皂苷Rg1.提高LPS处理的C6细胞存活率 ,使细胞内APP的表达降低 ,NEP的表达升高。结论 :LPS造成细胞损伤和细胞内APP表达增加、NEP表达降低 ,人参皂苷Rg1.LPS造成的细胞毒性具有拮抗作用 ,可减弱LPS引起的细胞内APP表达增强 ,减轻LPS对细胞内NEP表达的抑制。

关键词：人参脂多糖类胶质瘤淀粉样β蛋白前体脑啡肽酶

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