检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2006年第11期33卷 1086-1093页

作者：胡质毅龙綮新王珣章中山大学生命科学学院有害生物控制及资源利用国家重点实验室

葡萄糖依赖性促胰岛素多肽或抑胃肽(glucose-dependentinsulinotropicpolypeptideorgastricinhibitorypeptide,GIP)是由42个氨基酸组成的胃肠调节肽,在高血糖背景下能够刺激胰岛素释放,能够抑制胃酸分泌、促进神经细胞增生,具有广泛的... 详细信息

葡萄糖依赖性促胰岛素多肽或抑胃肽(glucose-dependentinsulinotropicpolypeptideorgastricinhibitorypeptide,GIP)是由42个氨基酸组成的胃肠调节肽,在高血糖背景下能够刺激胰岛素释放,能够抑制胃酸分泌、促进神经细胞增生,具有广泛的临床应用价值.化学提取或人工合成GIP,成本过高,不宜规模化生产,故应用基因工程技术研制重组人GIP(rhGIP)并探讨其生物活性有积极的现实意义.人工合成具有大肠杆菌偏爱密码子的编码GIP成熟肽的cDNA序列,利用pET32a(+)系统进行原核表达;在小规模发酵条件下,进行优化诱导表达和目的蛋白的亲和纯化;通过检测SD大鼠胃酸分泌和血糖浓度,对纯化后的rhGIP进行生理活性研究;通过形态学观察和培养基中NO含量测定,检测rhGIP对PC12细胞NO自由基生成量的影响;应用Aβ25-35加入培养基造成PC12细胞神经损伤模型,分别以高、中、低剂量rhGIP作用于此模型,通过MTT(2-(4,5-dimethylthia-zol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide)法测定PC12细胞的活性.结果显示,成功克隆了人GIP基因,诱导表达的rhGIP占细胞总蛋白质的35%,部分可溶,部分以包涵体形式存在.经过诱导表达的重组蛋白质分子质量约为26ku,与理论值相符.纯化后的rhGIP具有免疫活性.优化诱导表达条件为表达菌生长密度A600值0.50,IPTG浓度0.5mmol/L,温度37℃,诱导表达时间4h.裂解上清液经固定化金属亲和层析一步法层析后,表达的水溶性rhGIP融合蛋白的最后得率为1.2mg/L菌液,纯度为85%.纯化后的rhGIP能够使SD大鼠胃液pH值增高,其抑制胃酸分泌作用与生理盐水对照组比较差异有显著性(P<0.05),而rhGIP组和标准品GIP组比较差异无显著性.在高血糖背景下,注射rhGIP15min后,大鼠血浆血糖浓度较基础血糖显著降低(P<0.05),30min时与单独注射葡萄糖的模型对照组比较,差异无显著性,而rhGIP组和标准品GIP组其差异不显著.在rhGIP对神经细胞的营养和对PC12细胞免受神经损伤和缺氧损伤影响的研究中发现,用rhGIP培养PC12细胞32h后,rhGIP组NO含量极显著低于正常对照组(P<0.01),细胞存活较多,神经突起延伸较好,中、高剂量rhGIP组均较神经损伤和缺氧损伤组活性显著升高(P<0.05),且细胞活性呈剂量依赖关系,rhGIP组与标准品GIP组差异不显著,与正常对照组亦无显著差异.研究结果表明,已得到高效表达的rhGIP融合蛋白,该蛋白质具有免疫活性,具有抑制胃酸分泌和降低大鼠血浆血糖浓度的生理活性,并且对神经细胞有营养和保护作用.

关键词：抑胃肽葡萄糖依赖性促胰岛素多肽原核表达 PC12细胞生物活性

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用PCR法检测苏云金杆菌的溶原性噬菌体

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中山大学学报（自然科学版） 2006年第4期45卷 79-82页

作者：廖威宋少云陈维春薛清华孙钒艾云灿庞义中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室

根据苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,B.t)溶原性噬菌体G IL01(GenBank Accession Number:AJ536703)的同源序列设计一对引物,用35株B.t标准菌株和生产菌株MZ1(血清型H3 a3b)的过夜培养物作模板,结果有16株菌株包括MZ1能扩增出大小约... 详细信息

根据苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,B.t)溶原性噬菌体G IL01(GenBank Accession Number:AJ536703)的同源序列设计一对引物,用35株B.t标准菌株和生产菌株MZ1(血清型H3 a3b)的过夜培养物作模板,结果有16株菌株包括MZ1能扩增出大小约为750 bp的预期产物,推测这16株菌为溶原菌。MZ1菌株的过夜培养液与指示菌ZK1(血清型H25)混匀并在双层琼脂上培养12 h后出现了滴度为2×107pfu的噬菌斑,从而证明生产菌株MZ1确为溶原菌;又以G IL01同源性较高的其它四个基因设计引物,分别以MZ1的培养物及其溶原性噬菌体基因组为模板进行PCR扩增,结果两者得到几乎一致的带型,进一步证明了生产菌株MZ1为溶原菌,说明利用PCR法检测鉴定苏云金杆菌的溶原性是可行的。比较指示菌方法、直接电镜法和DNA鉴定法,PCR法快速简便,对B.t生产上快速检测其溶原性噬菌体有实用意义。

关键词：苏云金杆菌溶原性噬菌体

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意大利黑麦草菌根际效应研究

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中山大学学报（自然科学版） 2008年第3期47卷 79-84页

作者：辛国荣孙斌黎国喜吴瑾杨宇洁王宇涛杨中艺中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室∥中山大学生命科学学院广东广州510275

研究了水田冬种意大利黑麦草AM形成的规律、稻田中AMF密度变化以及土壤因子对意大利黑麦草AM形成的影响,进而探讨AM对意大利黑麦草生长和发育的影响。结果表明:①翻耕不施肥、不翻耕施肥和不翻耕不施肥处理的意大利黑麦草总感染率上升... 详细信息

研究了水田冬种意大利黑麦草AM形成的规律、稻田中AMF密度变化以及土壤因子对意大利黑麦草AM形成的影响,进而探讨AM对意大利黑麦草生长和发育的影响。结果表明:①翻耕不施肥、不翻耕施肥和不翻耕不施肥处理的意大利黑麦草总感染率上升幅度均达到了显著水平(p<0.05);②土壤中AMF孢子密度随着意大利黑麦草生长时间的增加而增加,与感染率的增长趋势基本保持一致,且二者之间相关性达到极显著正相关(p<0.01);③意大利黑麦草根系AM的感染率与土壤pH值极显著正相关(p<0.01),与土壤温度显著正相关(p<0.05),与土壤含水量极显著负相关(p<0.01),与水解N质量分数显著负相关(p<0.05)。土壤中AMF孢子密度与土壤温度极显著正相关(p<0.01),与pH显著正相关(p<0.05),与土壤有机质质量分数、水解N质量分数、全P质量分数和速效P质量分数显著负相关的(p<0.05);④意大利黑麦草产量与AM感染率(p>0.05)和AMF孢子密度(p<0.05)均呈负相关。

关键词：意大利黑麦草(Lolium mutiflorum L.) 丛枝菌根真菌感染率孢子密度菌根际效应生理生态

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广东不同地区冬种意大利黑麦草根际AM生理生态研究

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中山大学学报（自然科学版） 2008年第2期47卷 79-83,88页

作者：辛国荣孙斌黎国喜吴瑾杨宇洁王宇涛杨中艺中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室∥生命科学学院广东广州510275

对广东省不同地区意大利黑麦草根际VA菌根的形成规律和营养环境条件(含水量、pH值、土壤温度、土壤养分等)进行了研究。结果表明,在广东省不同地区意大利黑麦草根系中普遍存在AMF(Arbuscular mycorrhiza fungi)的感染,但AMF对意大利黑... 详细信息

对广东省不同地区意大利黑麦草根际VA菌根的形成规律和营养环境条件(含水量、pH值、土壤温度、土壤养分等)进行了研究。结果表明,在广东省不同地区意大利黑麦草根系中普遍存在AMF(Arbuscular mycorrhiza fungi)的感染,但AMF对意大利黑麦草的感染不存在地带性特征。除菌丝感染外,还发现有大量的丛枝状结构和泡囊状结构。AM总感染率、菌丝感染率、丛枝感染率以及泡囊感染率都与土壤全P、速效P含量极显著负相关(p<0.01)。不同地区黑麦草根际土壤中含有的AMF孢子数量存在差异,AMF孢子总数与AM丛枝感染率、AM泡囊感染率极显著正相关(p<0.01)。AMF孢子总数与土壤含水量、有机质含量、全N含量、水解N含量极显著正相关(p<0.01);与全P含量显著负相关(p<0.05)。土壤理化性状、地域以及环境因子的不同,可能是导致了不同地方AMF数量差异的主要原因。研究结果对水田管理和科学施肥具有指导意义。

关键词：意大利黑麦草(Lolium mutiflorum L.) 丛枝菌根感染率孢子数量生理生态

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生态系统服务价值测度模式与方法

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生态学报 2019年第15期39卷 5379-5388页

作者：周鹏周婷彭少麟中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室

为了更好地权衡人类福祉与经济发展之间、生态系统各类服务之间的关系,加速生态系统服务价值评估成为全世界生态保护与可持续发展政策制定面临的首要难题。总结了原始价值评估和价值转移两类主要的生态系统服务评估测度模式,侧重概述了... 详细信息

为了更好地权衡人类福祉与经济发展之间、生态系统各类服务之间的关系,加速生态系统服务价值评估成为全世界生态保护与可持续发展政策制定面临的首要难题。总结了原始价值评估和价值转移两类主要的生态系统服务评估测度模式,侧重概述了价值转移的涵义、类型、历史研究、应用限制及现有的可用于价值转移的有代表性的数据库,在此基础之上归纳两类测度模式的优势和普遍存在的局限性。总体而言,基于生态功能的原始评估更适用于地区尺度的精细化管理,评估准确但相对难度大、耗时长、成本高;基于相似生境的价值转移方法更适用于国家或区域尺度进行估判和分级,估值快速但相对信息少、不确定性大、影响因素多。其后还介绍了集成了一类或多类测度模式中不同方法的综合评估模型与工具。通过分析当前主流的评估方法与日益增长的评估需求之间的矛盾,结合生态系统服务级联,最终提出基于关键生态系统特征建立简化预测模型的评估思路,目的是为了简化传统评估过程、缩短评估周期,完善并发展以往的价值转移,推动生态系统服务多尺度、大范围的摸底清查。

关键词：生态系统服务估值价值转移简化模型快速评估生态效益

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山东半岛丘陵生境优势树种凋落物对外来植物火炬树种子萌发和幼苗生长的影响

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林业科学 2016年第6期52卷 28-34页

作者：侯玉平魏巍翟文婷初航殷吉林柏新富卜庆梅鲁东大学生命科学学院烟台264025 中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室广州510006

【目的】认识和了解群落入侵抵抗力形成机制成为当前入侵生态学研究最为关注的热点和核心问题。本文比较山东半岛丘陵生境不同群落优势种对外来植物火炬树的化感抑制效应差异,探讨群落入侵抵抗力形成的化感驱动机制。【方法】采用培养... 详细信息

【目的】认识和了解群落入侵抵抗力形成机制成为当前入侵生态学研究最为关注的热点和核心问题。本文比较山东半岛丘陵生境不同群落优势种对外来植物火炬树的化感抑制效应差异,探讨群落入侵抵抗力形成的化感驱动机制。【方法】采用培养皿滤纸法进行凋落物水浸液种子发芽试验,比较山东半岛丘陵生境常见优势树种麻栎、刺槐、赤松、黑松凋落物对火炬树种子萌发、幼苗生长的化感作用差异;因土壤会影响许多化感物质的转化和存在形态进而影响其活性,进一步设置土壤介质参与的凋落物覆盖盆栽试验,对比研究不同树种凋落物覆盖对火炬树幼苗生物量积累及其分配的影响。【结果】凋落物水浸液种子发芽试验显示,麻栎相比刺槐、赤松、黑松,显著抑制火炬树种子萌发和幼苗生长。凋落物覆盖盆栽试验表明,高凋落物量(每盆50 g)时,麻栎较刺槐、赤松、黑松显著降低了火炬树幼苗的总生物量;低凋落物量(每盆25 g)时仅在麻栎和赤松之间存在显著差异,麻栎较赤松显著抑制了火炬树幼苗总生物量的积累;有麻栎凋落物覆盖时,火炬树幼苗生物量分配呈现叶生物量比降低,根生物量比和根冠比增大的趋势。【结论】麻栎的化感物质可在一定程度上控制火炬树的生长。利用对火炬树具有明显化感抑制作用的本地植物麻栎对其进行生态控制,或者构建高抵抗力植物群落,进而筛选有效化感物质,可能是一条值得尝试的控制火炬树扩散的新途径。研究结果可揭示群落入侵抵抗力形成的化感驱动机制,有助于进一步推动对入侵过程的认识,对外来植物入侵防控具有重要的理论和实践意义。

关键词：外来植物火炬树生物入侵化感作用化感适应性群落入侵抵抗力优势树种

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苏云金杆菌辅助蛋白P19对杀虫晶体蛋白Cry11Aa表达的影响

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微生物学报 2006年第3期46卷 353-357页

作者：师永霞曾少灵袁美妗孙钒庞义中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室

苏云金杆菌以色列亚种的p19基因、cry11Aa基因和p20基因位于同一操纵子上,据推测辅助蛋白P19可能与Cry11Aa蛋白的晶体化相关。本研究利用穿梭载体pHT3101构建了两个重组质粒pHcy1和pHcy3,两质粒均携带cry11Aa基因,但后者完全缺失了cry1... 详细信息

苏云金杆菌以色列亚种的p19基因、cry11Aa基因和p20基因位于同一操纵子上,据推测辅助蛋白P19可能与Cry11Aa蛋白的晶体化相关。本研究利用穿梭载体pHT3101构建了两个重组质粒pHcy1和pHcy3,两质粒均携带cry11Aa基因,但后者完全缺失了cry11Aa基因上游的p19基因。将重组质粒电激转化至苏云金杆菌无晶体突变株4Q7中进行蛋白表达,SDS-PAGE结果表明在4Q7(pHcy1)和4Q7(pHcy3)中均能检测到正常表达的Cry11Aa蛋白,但单位体积培养液的Cry11Aa蛋白在辅助蛋白P19存在时的表达量明显高于其单独表达的表达量;透射电镜观察显示两菌株中的Cry11Aa蛋白形成了大小相近、形状相似的双梯形晶体;另外,生物测定结果表明重组菌株4Q7(pHcy1)和4Q7(pHcy3)对三龄致倦库蚊的杀虫活性没有显著性差异。该现象说明辅助蛋白P19的缺失对Cry11Aa蛋白的晶体形成和杀蚊活性没有影响,但P19作为分子伴侣在一定程度上帮助提高了Cry11Aa蛋白的表达水平。

关键词：苏云金杆菌辅助蛋白P19 晶体蛋白Cry11Aa 生物测定

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增温对土壤N2O和CH4排放的影响与微生物机制研究进展

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应用生态学报 2020年第11期31卷 3906-3914页

作者：韩雪陈宝明中山大学生命科学学院/有害生物控制与资源利用国家重点实验室广州510275

全球变暖已引起人们的广泛关注,大气温室效应气体浓度增加是导致全球变暖的主要因素之一,土壤是温室效应气体的主要来源。反过来,全球变暖对土壤温室气体的排放具有反馈作用。温度升高不仅会影响植物、动物、微生物的生长及其相互作用,... 详细信息

全球变暖已引起人们的广泛关注,大气温室效应气体浓度增加是导致全球变暖的主要因素之一,土壤是温室效应气体的主要来源。反过来,全球变暖对土壤温室气体的排放具有反馈作用。温度升高不仅会影响植物、动物、微生物的生长及其相互作用,还会影响土壤的物质(尤其是氮、碳)循环过程,从而影响土壤温室效应气体的排放。本文主要总结了增温对土壤主要温室气体N2O和CH4排放的影响及其微生物机制。总体来看,增温能够促进这两种温室气体的排放,其排放主要与温度对氨氧化细菌(AOB)、反硝化功能基因、甲烷产生菌和甲烷氧化菌的丰度和组成的影响有关。土壤温室气体排放也受到植物的物种特性、养分吸收和群落组成,以及土壤营养元素含量、含水量、pH值等理化性质的影响。未来应更深入地从微生物角度探讨全球变暖对土壤温室气体排放的反馈作用机制,加强不同增温模式对土壤温室气体排放的影响研究,并关注增温与其他环境因子相互作用对土壤温室气体排放的影响等,以期为全球变暖对土壤温室气体排放反馈作用的预测提供理论依据。

关键词：氧化亚氮甲烷温室气体增温

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广东金山温泉沉积物中原核与真核微生物多样性初步分析

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微生物学报 2008年第6期48卷 717-724页

作者：肖凯曹理想陆勇军周世宁中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室广州510275

【目的】本研究旨在采用不同的PCR引物对广东省恩平市金山温泉的高温水底沉积物微生物多样性进行初步的分析。【方法】采用改进的玻璃珠法抽提温泉沉积物中环境基因组DNA，通过对用4对引物分别扩增得到的原核微生物16S rRNA基因和真核... 详细信息

【目的】本研究旨在采用不同的PCR引物对广东省恩平市金山温泉的高温水底沉积物微生物多样性进行初步的分析。【方法】采用改进的玻璃珠法抽提温泉沉积物中环境基因组DNA，通过对用4对引物分别扩增得到的原核微生物16S rRNA基因和真核微生物ITS序列的分析，将所得到的数据与国际基因数据库GenBank进行相似性比较并构建系统发育树。【结果】研究发现原核类群G的14个优势克隆中7个都属于蛭弧菌属（Bdellovibrio）。与它们最相似的序列是从海洋中分离到的两个菌株Bacteriovorax ***1（EF092445）和Bdellovibrio ***5（AF084859），相似性分别为96％和99％。原核类群x的4个序列主要属于蓝细菌类群，其中JS-X2与在美国黄石公园温泉发现的Uncultured Cyanobacterium（L35331）有95％的相似性，并且与已经全基因组测序的嗜热蓝细菌聚球藻Thermosynechococcus elongatus BP-1（47118315）有89％的相似性。真核类群Z有三个类群，分别是Penicillium sp．，Lodderomyces sp．和Gloeotinia sp．。其中大部分序列与青霉属相似性在88％～90％之间。【结论】所得到的结果显示金山温泉中的微生物多样性十分丰富。

关键词：温泉沉积物 RFLP 微生物多样性

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利用CRISPR/Cas9在人类黑色素瘤细胞中编辑MC1R与功能分析

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遗传 2022年第7期44卷 581-590页

作者：张充魏子璇王敏陈瑶生何祖勇中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室广州510006

MC1R(melanocortin 1 receptor)基因编码黑皮质素1型受体,它在配体α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte stimulating hormone,α-MSH)的刺激下,可促进细胞内cAMP(cyclic adenosine monophosaphate)的生成,从而激活PKA(protein kinase A system)信号通路,促进黑色素合成调控的关键转录因子–小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF),以及限速酶–酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)的表达,进而调控真黑素和褐黑素的合成,影响动物的毛色表型。有研究表明,杜洛克猪(Susscrofa domestica)MC1R蛋白第6个跨膜结构域(transmembrane domain 6,TM6)发生了A243T突变,该突变可能影响MC1R蛋白生物学功能,被认为是导致杜洛克猪红毛表型的主要因素,然而却一直未被验证过。因此,本研究以单链寡核苷酸(single-stranded oligo-deoxyribonucleotides,ssODN)作为同源重组模板,利用CRISPR/Cas9技术在人类黑色素瘤细胞系SK-MEL-2中引入MC1R基因的c.727G>A(A243T)突变,以分析其对MC1R功能的影响。结果表明ssODN发生同源重组的效率可达10%。通过对共转染ssODN和CRISPR/Cas9表达载体的细胞进行筛选和培养,获得6个单克隆细胞株,进行测序鉴定,结果未能筛选到发生预期突变的单克隆细胞株,所有单克隆细胞株皆在目标位点周围出现突变。对转染后的细胞群进行功能分析,结果发现其cAMP信号强度、MITF基因和TYR基因表达量均显著低于未转染的细胞,表明编辑MC1R可影响细胞的黑色素合成功能。本研究为深入分析MC1R突变影响动物毛色提供了进一步的参考。

关键词： MC1R 基因定点突变 CRISPR/Cas9 A243T

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