检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：郑翔梁冰夏卫维周雪四川大学华西基础医学与法医学院基础医学专业实验室组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041

胰岛素抵抗性高血糖是Ⅱ型糖尿病,为现代社会慢性顽疾的主要特征,其发生机制尚未阐明.传统的Ⅱ型糖尿病动物模型如基因缺陷模型、化学诱导模型等,在症状的复制和致病机制上与临床发病过程有很大差异.为模拟精神应激、缺少运动等Ⅱ型糖...

胰岛素抵抗性高血糖是Ⅱ型糖尿病,为现代社会慢性顽疾的主要特征,其发生机制尚未阐明.传统的Ⅱ型糖尿病动物模型如基因缺陷模型、化学诱导模型等,在症状的复制和致病机制上与临床发病过程有很大差异.为模拟精神应激、缺少运动等Ⅱ型糖尿病患病的主要危险因素,并复制出典型的胰岛素抵抗性高血糖的症状,我们采用和改进了慢性束缚应激(Chronic Constriction Stress,CCS)大鼠模型.

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Mre11多克隆抗体的制备及初步鉴定

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西部医学 2013年第3期25卷 325-328页

作者：张付平王蕾郭莲娣王海斌任来峰曾鸣刘鳐马蕾四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学和神经生物学教研室四川成都610041 四川大学华西第二医院发育与干细胞研究所四川成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041

目的原核表达人Mre11蛋白,并制备出Mre11蛋白的多克隆抗体,为研究Mre11蛋白功能奠定基础。方法以人cDNA文库为模板,构建出原核表达质粒PET41a-Mre11,然后转化受体菌*** BL21,再经IPTG诱导表达,通过采用GST亲和纯化获得GST-融合蛋白,将... 详细信息

目的原核表达人Mre11蛋白,并制备出Mre11蛋白的多克隆抗体,为研究Mre11蛋白功能奠定基础。方法以人cDNA文库为模板,构建出原核表达质粒PET41a-Mre11,然后转化受体菌*** BL21,再经IPTG诱导表达,通过采用GST亲和纯化获得GST-融合蛋白,将该融合蛋白免疫兔以制备出Mre11多抗血清,最后采用western-blot及免疫荧光等方法检测其在细胞中的特异性。结果在受体菌*** BL21中成功诱导表达出了GST-Mre11融合蛋白,免疫新西兰大白兔后获得了高效价的Mre11蛋白抗血清,IP、western-blot及免疫荧光等多种方法检测证实该抗血清能够特异性识别293T和U2OS细胞株中Mre11蛋白,并能够正确清楚检测293T和U2OS细胞株中的Mre11表达情况,具有良好的特异性和高效性。结论成功制备出了兔抗人Mre11蛋白的多克隆抗体,为深入研究Mre11蛋白在DNA损伤中的功能奠定了基础。

关键词： Mre11 多克隆抗体原核表达 MRN复合体

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Mrell多克隆抗体的制备及初步鉴定

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西部医学 2013年第3期25卷 325-328页

作者：张付平王蕾郭莲娣王海斌任来峰曾鸣刘鳐马蕾四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学和神经生物学教研室　　四川成都　　（61004l）四川大学华厦第二医院发育与干细胞研究所　　四川成都　　（610041）四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室　　四川成都　　（610041）

目的原核表达人Mrell蛋白，并制备出Mrell蛋白的多克隆抗体，为研究Mrell蛋白功能奠定基础。方法以人cDNA文库为模板，构建出原核表达质粒PET41a—Mrell，然后转化受体茵E-coliBL21，再经IPTG诱导表达，通过采用GST亲和纯化获得GST-融... 详细信息

目的原核表达人Mrell蛋白，并制备出Mrell蛋白的多克隆抗体，为研究Mrell蛋白功能奠定基础。方法以人cDNA文库为模板，构建出原核表达质粒PET41a—Mrell，然后转化受体茵E-coliBL21，再经IPTG诱导表达，通过采用GST亲和纯化获得GST-融合蛋白，将该融合蛋白免疫免以制备出Mrell多抗血清，最后采用western—blot及免疫荧光等方法检测其在细胞中的特异性。结果在受体茵E-coliBI。21中成功诱导表达出了GST—Mrell融合蛋白，免疫新西兰大白兔后获得了高效价的Mrell蛋白抗血清，IP、western—blot及免疫荧光等多种方法检测证实该抗血清能够特异性识别293T和U20S细胞株中Mrell蛋白，并能够正确清楚检测293T和U20S细胞株中的Mrell表达情况，具有良好的特异性和高效性。结论成功制备出了兔抗人Mrell蛋白的多克隆抗体，为深入研究Mrell蛋白在DNA损伤中的功能奠定了基础。

关键词： Mrell 多克隆抗体原核表达 MRN复合体

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脊髓刺激术对神经病理性痛模型大鼠痛行为和脊髓背角内小胶质细胞激活的影响

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神经解剖学杂志 2012年第3期28卷 230-236页

作者：张春奎李志红方相春唐君齐建国李金莲第四军医大学人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032 四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学教研室成都610041

目的:探讨脊髓刺激术(spinal cord stimulation,SCS)对神经病理性痛(neuropathic pain,NP)模型大鼠痛行为及脊髓背角内小胶质细胞激活的影响。方法:成年大鼠20只,随机分为4组:(1)正常对照组(control组);(2)SCS组:正常大鼠给予SCS刺激;(3... 详细信息

目的:探讨脊髓刺激术(spinal cord stimulation,SCS)对神经病理性痛(neuropathic pain,NP)模型大鼠痛行为及脊髓背角内小胶质细胞激活的影响。方法:成年大鼠20只,随机分为4组:(1)正常对照组(control组);(2)SCS组:正常大鼠给予SCS刺激;(3)脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)假刺激组(SNL+shamSCS组):SNL且植入SCS装置,但不刺激;(4)SNL+SCS组:SNL且给予SCS刺激。术前连续3 d、术后第5 d检测各组大鼠足底机械痛敏阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)。SCS组和SNL+SCS组术后第2-5 d给予SCS刺激,每d持续8 h;且在每次给予SCS 8 h刺激前进行90 min行为学测试,即SCS刺激30 min,以及刺激结束后的60 min内(共90 min),每15 min测量一次MWT。在第5 d给予SCS 8 h刺激结束后处死动物,利用免疫组织化学染色结合平均光密度(average optical density,AOD)分析的方法检测各组大鼠腰5节段脊髓背角内小胶质细胞特异性标志物OX-42的表达情况。结果:(1)行为学结果显示:术后第5 d,SNL+shamSCS组和SNL+SCS组大鼠手术侧后爪的MWT由术前26.00±0.0 g分别降至5.50±0.96 g和6.40±0.40 g(P<0.05);SNL+SCS组给予SCS刺激30 min后大鼠手术侧后爪的MWT明显有所提高,达16.20±2.60 g,与刺激前(6.40±0.40 g)相比有显著性差异(P<0.05);但停止SCS刺激60 min后,大鼠的MWT明显有所下降,与刺激前几乎没有明显差别。(2)免疫组化染色结果显示:术后第5 d,SNL+SCS组脊髓背角内OX-42的表达明显弱于SNL+shamSCS组,但二者都强于control组和SCS组;AOD结果也证实:SNL+SCS组大鼠脊髓背角内OX-42的AOD(1.29±0.28)明显低于SNL+shamSCS组(2.66±0.38),但仍高于control组(0.14±0.21)和SCS组(0.24±0.08)。结论:SCS对SNL模型大鼠的神经病理性痛有较好的镇痛效果;该作用可能与SCS刺激显著抑制脊髓背角内小胶质细胞的激活密切相关。

关键词：脊髓刺激术神经病理性痛小胶质细胞 OX-42 大鼠

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结合基因本体论和计算机模式识别技术筛选应答神经损伤的重要效应基因

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四川大学学报（医学版） 2012年第4期43卷 530-535页

作者：潘倩彭谨周雪杨浩章为四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学教研室成都610041 四川省医学科学院.四川省人民医院创伤代谢组多学科实验室成都610101

目的利用基因本体论(gene ontology,GO)方法结合计算机模式识别技术从基因芯片的海量数据中筛选出应答神经损伤的重要基因,并选择一种可能的关键基因Cd44对生物信息学结果进行验证。方法利用MATLAB软件对基因芯片数据(GSE26350)进行数... 详细信息

目的利用基因本体论(gene ontology,GO)方法结合计算机模式识别技术从基因芯片的海量数据中筛选出应答神经损伤的重要基因,并选择一种可能的关键基因Cd44对生物信息学结果进行验证。方法利用MATLAB软件对基因芯片数据(GSE26350)进行数据挖掘和GO分析,利用不同功能模块的基因在主成分得分图上的位置分布,从得出的核心基因分子谱中选择Cd44。干扰Cd44与其配体硫酸软骨素C(chondroitin sulfate C,CSC)的正常结合,观察其对神经突起延伸的影响。结果 GO分析结果显示,主成分得分图上红色*标记的第1类基因在分子功能方面主要与信号传递、受体活动和蛋白结合等相关。Cd44是此类基因6个外围效应蛋白基因之一,其功能多样。向培养的神经元培养基中添加不同试剂干扰CSC与Cd44的正常结合可不同程度缓解CSC对神经突起延伸的抑制作用。结论本实验初步证明CSC与筛选出的神经元表面分子Cd44的结合可抑制神经突起的延伸,这说明利用GO分析基因芯片可筛选出特定生理过程中的重要分子。

关键词：基因本体论计算机模式识别神经突起延伸 Cd44 硫酸软骨素C

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督脉电针刺激对脊髓全横断小鼠大脑皮质运动区BDNF表达的影响

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四川大学学报（医学版） 2012年第2期43卷 250-253页

作者：张向飞邹宇赵娅王廷华章为四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 昆明医学院神经科学研究所昆明650031 四川大学华西医院转化神经科学中心成都610041

目的研究督脉电针刺激对脊髓全横断(spinal cord transection,SCT)小鼠大脑皮质运动区脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法将绿色荧光蛋白转基因小鼠在T9、T10间行SCT,随机分为电针(EA)组、对... 详细信息

目的研究督脉电针刺激对脊髓全横断(spinal cord transection,SCT)小鼠大脑皮质运动区脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法将绿色荧光蛋白转基因小鼠在T9、T10间行SCT,随机分为电针(EA)组、对照组,每组9只小鼠。EA组于术后第1d开始电针刺激至第13d结束,对照组仅做SCT。术后28d时,取小鼠大脑皮质运动区脑组织,用免疫组化、原位杂交、逆转录-聚合酶链式反应、酶联免疫吸附试验检测皮质运动区BDNF的表达变化。结果 BDNF蛋白和mRNA阳性产物主要表达于皮质运动区神经元。EA组、对照组皮质运动区BDNF蛋白表达分别为(1973.41±194.71)pg/mg、(1615.22±137.21)pg/mg,差异有统计学意义(P<0.05);而BDNFmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论脊髓损伤后督脉电针刺激能够有效增加小鼠大脑皮质运动区BDNF蛋白表达,这有助于揭示电针刺激促进脊髓损伤修复的机制。

关键词：脊髓全横断电针刺激脑源性神经营养因子小鼠

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免疫刺激对大鼠海马CA2-3区GR表达的影响

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西部医学 2012年第6期24卷 1054-1055页

作者：赵甜甜王蕾马玉琼刘旭光四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学和神经生物学教研室四川成都610041 成都中医药大学针灸推拿学院四川成都610075

目的探讨细菌脂多糖(LPS)对大鼠海马CA2-3区糖皮质激素受体(GR)表达的影响。方法将健康雄性SD大鼠10只随机分为实验组和对照组,每组5只,实验组大鼠腹腔注射LPS,对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水,用免疫组化方法测定大鼠海马CA2-3区GR的... 详细信息

目的探讨细菌脂多糖(LPS)对大鼠海马CA2-3区糖皮质激素受体(GR)表达的影响。方法将健康雄性SD大鼠10只随机分为实验组和对照组,每组5只,实验组大鼠腹腔注射LPS,对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水,用免疫组化方法测定大鼠海马CA2-3区GR的表达。结果 GR在大鼠海马各区散在分布,实验组大鼠海马CA2-3区GR表达量明显低于对照组(P<0.01)。结论海马CA2-3区GR参与调节LPS诱导的免疫反应过程。

关键词：细菌脂多糖海马 GR

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蛛网膜下腔置管灌注rhNCAM1促损伤脊髓再生修复的实验研究

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神经解剖学杂志 2011年第2期27卷 169-173页

作者：路伟王廷华王特为郭勇费强泸州医学院组织胚胎学教研室泸州646000 四川大学华西基础医学及法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都640041 泸州医学院解剖学教研室泸州646000

目的：探讨神经细胞粘附分子1（neural cell adhesion molecule 1,NCAM1）灌注治疗小鼠脊髓撞击伤后对脊髓修复及神经功能恢复的影响。方法：采用改良NYU（纽约大学）Weight-Drop Impactor打击装置,以25 gcf（l0 g重量从25 mm高度自由... 详细信息

目的：探讨神经细胞粘附分子1（neural cell adhesion molecule 1,NCAM1）灌注治疗小鼠脊髓撞击伤后对脊髓修复及神经功能恢复的影响。方法：采用改良NYU（纽约大学）Weight-Drop Impactor打击装置,以25 gcf（l0 g重量从25 mm高度自由落下）制备脊髓损伤模型（打击面积为2 mm×2 mm）。将SA小鼠30只随机分为3组：实验组（rhNCAM1组,n=10）于损伤即刻经蛛网膜下腔注入rhNCAM1蛋白2μl（约100μg）,隔日1次,共5次;对照组（生理盐水组,n=10）于损伤即刻经蛛网膜下腔注入生理盐水2μl,隔日1次,共5次;假手术组仅做椎板切除术,术后缝合切口。观察各组小鼠18周行为学改变,行BBB评分。第8周灌注固定、取材,采用神经纤维200（NF200）免疫荧光检测,进行图像分析及统计处理。结果：（1）行为学评估：实验组BBB评分在各时间点均显著高于对照组（P〈0.01）;（2）NF200免疫荧光染色：实验组阳性着色明显多于、并强于对照组;实验组无组织瘢痕结构面积明显小于对照组。结论：蛛网膜下腔应用rhNCAM1后可能改善SCI后损伤区及两端的神经细胞之间的功能,促进轴突再生,促进双下肢运动功能的恢复。

关键词：神经细胞粘附因子灌注脊髓损伤与修复 NF200 小鼠

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EPO对鼠胚脑皮质神经干细胞抗凋亡作用的研究

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济宁医学院学报 2011年第2期34卷 77-80页

作者：袁丽丽姜海燕杜红梅崔运河孔佑华张慧济宁医学院基础医学与法医学院山东济宁272067 济宁医学院精神卫生学院济宁272067 潍坊医学院组织胚胎学教研室山东潍坊261042

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对体外培养神经干细胞(neural stem cells,NSCs)凋亡的影响,为NSCs移植治疗脑损伤和脑部疾病提供实验依据。方法孕14 d(El4)大鼠取鼠胚脑皮质悬浮培养、贴壁诱导分化。采用光电镜观察,用免... 详细信息

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对体外培养神经干细胞(neural stem cells,NSCs)凋亡的影响,为NSCs移植治疗脑损伤和脑部疾病提供实验依据。方法孕14 d(El4)大鼠取鼠胚脑皮质悬浮培养、贴壁诱导分化。采用光电镜观察,用免疫细胞化学染色以Nestin蛋白作为鉴定NSCs的标记物,以MAP2、GFAP蛋白检测NSCs的分化。取第3代(P3)NSCs向悬浮培养基中分别添加不同剂量的EPO,EPO浓度分别为0.5U/ml,5U/ml,50U/ml,500U/ml,并设不添加EPO的对照组,通过Caspase-3蛋白检测NSCs的凋亡。结果 1)提取和分离E14d SD大鼠的胚脑皮质,在添加B27、bFGF、EGF的无血清培养基中培养,可形成大量悬浮的神经球并可进行体外扩增传代,神经球内的细胞均呈Nestin阳性、BrdU阳性。在添加10%胎牛血清的培养基中,神经干细胞可自然分化为神经元和神经胶质细胞。2)加入≥5U/ml EPO,神经球内Caspase-3的表达显著下降(P<0.01)。结论 1)大鼠胚胎脑皮质体外培养可得到大量增殖的NSCs并能分化为神经元和神经胶质细胞,为NSCs的研究提供了适宜的细胞培养模型。2)加入≥5U/ml EPO可降低体外培养的鼠胚脑皮质NSCs的凋亡率。

关键词：神经干细胞培养凋亡促红细胞生成素

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慢性束缚应激大鼠血糖与杏仁核谷氨酸脱羧酶65的相关性

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江苏大学学报（医学版） 2011年第3期21卷 212-215,277页

作者：李小京章为梁冰郑翔周雪四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室四川成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院基础医学专业实验室四川成都610041

目的:观察慢性束缚应激对大鼠血糖的影响,初步探讨血糖变化与杏仁核谷氨酸脱羧酶65(GAD65)表达变化的联系。方法:每天束缚大鼠3 h,建立束缚应激模型。分别在第7天、14天和21天采集样本,测量血糖值,称量肾上腺,计算肾上腺指数。用免疫组... 详细信息

目的:观察慢性束缚应激对大鼠血糖的影响,初步探讨血糖变化与杏仁核谷氨酸脱羧酶65(GAD65)表达变化的联系。方法:每天束缚大鼠3 h,建立束缚应激模型。分别在第7天、14天和21天采集样本,测量血糖值,称量肾上腺,计算肾上腺指数。用免疫组化的方法检测杏仁核GAD65的表达。结果:慢性束缚应激后,大鼠肾上腺指数明显增加(P<0.05)。其中有9只应激大鼠表现出高血糖的症状,同时杏仁核GAD65表达显著增加(P<0.01),而血糖不升高的大鼠GAD65的表达无明显变化。结论:长期慢性束缚应激可使部分大鼠出现高血糖。杏仁核GAD65的表达升高与血糖升高存在相关性。

关键词：谷氨酸脱羧酶65 杏仁核慢性束缚应激血糖大鼠

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