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四川大学学报（医学版） 2008年第5期39卷 757-762页

作者：黄晓芹祝彼得降央泽仁四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 成都中医药大学组织胚胎学与解剖学教研室

目的探讨神经生长因子(NGF)对小鼠粒-巨噬系血细胞发生的影响。方法采用流式细胞术、祖细胞集落分析、血细胞计数、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附分析法(ELISA),检测注射NGF对正常和经60Coγ射线照射+腹腔注射环磷酰胺(放化疗复合损伤... 详细信息

目的探讨神经生长因子(NGF)对小鼠粒-巨噬系血细胞发生的影响。方法采用流式细胞术、祖细胞集落分析、血细胞计数、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附分析法(ELISA),检测注射NGF对正常和经60Coγ射线照射+腹腔注射环磷酰胺(放化疗复合损伤)小鼠骨髓细胞(BMC)增殖周期、粒-巨噬系祖细胞集落(CFU-GM)产率、外周白细胞总数、骨髓细胞粒-巨噬系集落刺激因子(GM-CSF)mRNA的表达及血清中GM-CSF和IL-3浓度的影响。并观察在体外培养体系中加入不同浓度的NGF时CFU-GM集落产率的变化及与GM-CSF的关系。结果在体外CFU-GM培养中,加入重组小鼠GM-CSF(rmGM-CSF)时,NGF剂量依赖性地提高集落产率。注射NGF7.5μg/(kg.d)或10μg/(kg·d)持续7d,正常和放化疗复合损伤小鼠外周血白细胞总数、小鼠骨髓细胞中S+G2/M期细胞比例、CFU-GM集落产率显著高于注射生理盐水的对照组;放化疗复合伤小鼠血清中的GM-CSF和IL-3也显著升高。结论NGF可与体外培养体系中的造血刺激因子协同作用,促进正常和放化疗复合损伤小鼠CFU-GM的形成。NGF在体内可促进正常和放化复合损伤小鼠骨髓细胞进入有丝分裂,促进造血干细胞向粒-巨噬系方向分化,促进CFU-GM的形成,提高外周血白细胞数;NGF还可刺激放化疗复合损伤小鼠体内GM-CSF和IL-3的分泌,这可能是NGF促进放化疗复合损伤后粒-巨噬系造血恢复的途径之一。

关键词：神经生长因子细胞增殖周期祖细胞集落分析造血生长因子基因表达

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肥胖伴慢性束缚应激小鼠血压升高与孤束核去甲肾上腺素能神经元损伤的关系研究

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四川大学学报（医学版） 2022年第1期53卷 77-82页

作者：王森甲郑翔毕文杰周雪四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院基础医学专业实验室成都610041 成都医学院人体解剖与组织胚胎学教研室成都610500

目的探讨肥胖伴慢性束缚应激(chronic restraint stress,CRS)是否致小鼠血压升高及其与孤束核中间部(iNTS)损伤的关系。方法制作CRS小鼠模型,将51只小鼠分为低脂非束缚组(LF组)、低脂束缚组(LS组)、高脂非束缚组(HF组)、高脂束缚组(HS组... 详细信息

目的探讨肥胖伴慢性束缚应激(chronic restraint stress,CRS)是否致小鼠血压升高及其与孤束核中间部(iNTS)损伤的关系。方法制作CRS小鼠模型,将51只小鼠分为低脂非束缚组(LF组)、低脂束缚组(LS组)、高脂非束缚组(HF组)、高脂束缚组(HS组);7 d束缚+3 d自由活动为一个周期,共4个周期(40 d);每个周期中第9天时检测小鼠体质量、并测量动脉收缩压,实验第40天时处死各组小鼠后取脑组织行免疫组织化学染色及免疫印迹检测胶质纤维状酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达,取附睾脂肪垫免疫印迹检测血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor,VEGFA)蛋白表达(代表脂肪组织血管密度)。结果在第40天时,HS组小鼠动脉收缩压明显高于其他三组小鼠,高脂喂养组(HF组和HS组)体质量增长明显;各组小鼠VEGFA蛋白表达差异无统计学意义;束缚组(LS组和HS组)小鼠脑组织iNTS星形胶质细胞活化,HS组iNTS TH表达减少;HF组、LS组小鼠血压均无异常变化;HS组血压普遍升高,其中37.5%小鼠出现高血压(动脉收缩压≥140 mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)。结论肥胖伴慢性束缚应激可致小鼠动脉血压升高,且其机制与孤束核去甲肾上腺素能神经元损伤有关。

关键词：慢性束缚应激高脂饮食去甲肾上腺素能神经元孤束核

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慢性束缚应激致大鼠持续性高血糖症与孤束核损伤有关

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解剖学报 2019年第4期50卷 423-430页

作者：毕文杰郑翔成都医学院人体解剖学与组织学胚胎学教研室成都610500 四川大学华西基础医学与法医学院基础医学专业实验室成都610041

目的探讨孤束核联合亚核前部(ac NTS)损伤在慢性束缚应激(CRS)所致的胰岛素抵抗性高血糖症发生中的作用。方法采用CRS大鼠模型(n=20;7 d束缚+3 d自由活动,共40 d),检测葡萄糖代谢相关指标。结果 CRS导致约1/3的个体(n=7)持续性的中度胰... 详细信息

目的探讨孤束核联合亚核前部(ac NTS)损伤在慢性束缚应激(CRS)所致的胰岛素抵抗性高血糖症发生中的作用。方法采用CRS大鼠模型(n=20;7 d束缚+3 d自由活动,共40 d),检测葡萄糖代谢相关指标。结果 CRS导致约1/3的个体(n=7)持续性的中度胰岛素抵抗性高血糖(空腹血糖不超过11 mmol/L)。CRS高血糖鼠ac NTS可观察到神经元染色浓缩,Caspase-3表达和TUNEL阳性染色,提示出现神经元凋亡样改变。机械损伤ac NTS(n=6),空腹血糖水平逐渐升高,也能导致胰岛素抵抗性高血糖,且高胰岛素血症、胰岛平均体积增大和血清皮质酮水平不变等特点与CRS小鼠一致。结论 CRS损伤了ac NTS的葡萄糖敏感神经元,从而使血糖调节紊乱。

关键词：慢性束缚应激,胰岛素抵抗性高血糖,神经元损伤,孤束核,酶联免疫吸附测定大鼠

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蛛网膜下腔置管灌注rhNCAM1促损伤脊髓再生修复的实验研究

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神经解剖学杂志 2011年第2期27卷 169-173页

作者：路伟王廷华王特为郭勇费强泸州医学院组织胚胎学教研室泸州646000 四川大学华西基础医学及法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室成都640041 泸州医学院解剖学教研室泸州646000

目的：探讨神经细胞粘附分子1（neural cell adhesion molecule 1,NCAM1）灌注治疗小鼠脊髓撞击伤后对脊髓修复及神经功能恢复的影响。方法：采用改良NYU（纽约大学）Weight-Drop Impactor打击装置,以25 gcf（l0 g重量从25 mm高度自由... 详细信息

目的：探讨神经细胞粘附分子1（neural cell adhesion molecule 1,NCAM1）灌注治疗小鼠脊髓撞击伤后对脊髓修复及神经功能恢复的影响。方法：采用改良NYU（纽约大学）Weight-Drop Impactor打击装置,以25 gcf（l0 g重量从25 mm高度自由落下）制备脊髓损伤模型（打击面积为2 mm×2 mm）。将SA小鼠30只随机分为3组：实验组（rhNCAM1组,n=10）于损伤即刻经蛛网膜下腔注入rhNCAM1蛋白2μl（约100μg）,隔日1次,共5次;对照组（生理盐水组,n=10）于损伤即刻经蛛网膜下腔注入生理盐水2μl,隔日1次,共5次;假手术组仅做椎板切除术,术后缝合切口。观察各组小鼠18周行为学改变,行BBB评分。第8周灌注固定、取材,采用神经纤维200（NF200）免疫荧光检测,进行图像分析及统计处理。结果：（1）行为学评估：实验组BBB评分在各时间点均显著高于对照组（P〈0.01）;（2）NF200免疫荧光染色：实验组阳性着色明显多于、并强于对照组;实验组无组织瘢痕结构面积明显小于对照组。结论：蛛网膜下腔应用rhNCAM1后可能改善SCI后损伤区及两端的神经细胞之间的功能,促进轴突再生,促进双下肢运动功能的恢复。

关键词：神经细胞粘附因子灌注脊髓损伤与修复 NF200 小鼠

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芬戈莫德对神经干细胞和星形胶质细胞增殖及迁移的影响及其对小鼠脊髓损伤的保护机制

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吉林大学学报（医学版） 2018年第6期44卷 1218-1222页

作者：刘林娜陈婕妤吕方怡花扣珍蔡大敏银国利王俊娟温州医科大学附属第二医院检验医学科浙江温州325000 杭州医学院基础医学与法医学院人体解剖与组织胚胎学教研室浙江杭州310014

目的:探讨芬戈莫德(FTY720)对神经干细胞(NSCs)和星形胶质细胞迁移及增殖的影响,阐明FTY720对小鼠脊髓损伤(SCI)的保护作用及其机制。方法:体外培养NSCs和星形胶质细胞,每种细胞随机分为对照组(采用PBS进行处理)和实验组(采用0.1μmol&#... 详细信息

目的:探讨芬戈莫德(FTY720)对神经干细胞(NSCs)和星形胶质细胞迁移及增殖的影响,阐明FTY720对小鼠脊髓损伤(SCI)的保护作用及其机制。方法:体外培养NSCs和星形胶质细胞,每种细胞随机分为对照组(采用PBS进行处理)和实验组(采用0.1μmol·L^(-1) FTY720进行处理)。SCI小鼠随机分为对照组(口服PBS)和实验组(口服1mg·kg^(-1)·d^(-1) FTY720),每组10只。采用Transwell实验检测2组NSCs和星形胶质细胞的迁移细胞数,免疫荧光染色检测NSCs的迁移细胞数和增殖神经球数,HE染色检测2组小鼠SCI空洞面积,Basso Mouse Scale (BMS)评分评估小鼠运动能力恢复情况。结果:Transwell检测,与对照组比较,实验组NSCs迁移细胞数增多(P<0.05),星形胶质细胞迁移细胞数减少(P<0.05)。免疫荧光检测,与对照组比较,实验组NSCs增殖神经球数增多(P<0.05),实验组小鼠SCI震中星形胶质细胞数减少(P<0.05)。HE染色检测,与对照组比较,SCI空洞面积缩小(P<0.05)。BMS评分,与对照组比较,实验组小鼠BMS评分升高(P<0.05)。结论:FTY720可以促进NSCs增殖和迁移,抑制星形胶质细胞迁移,减少SCI后胶质疤痕形成,促进小鼠运动功能恢复。

关键词：脊髓损伤芬戈莫德神经干细胞星形胶质细胞

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心室传导系统形态学及其研究进展

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中国临床解剖学杂志 2020年第5期38卷 618-620页

作者：陈小瑜胡敏霞徐一鸣施阳东娄阳云安国防杭州医学院临床医学院杭州310053 杭州医学院医学影像学院杭州310053 杭州医学院基础医学与法医学院人体解剖与组织胚胎学教研室杭州310053

自Sunao Tawara于1906年发现房室结并对其结构、功能进行报道,关于心房室传导系统的研究开启了新纪元[1]。百余年来,随着解剖与组织胚胎学、生理学、分子生物学、免疫组化等技术的发展,众多学者在心房室传导系统的起源、形态、功能及一... 详细信息

自Sunao Tawara于1906年发现房室结并对其结构、功能进行报道,关于心房室传导系统的研究开启了新纪元[1]。百余年来,随着解剖与组织胚胎学、生理学、分子生物学、免疫组化等技术的发展,众多学者在心房室传导系统的起源、形态、功能及一些病理机制上获得大量的研究成果,但仍有许多未解之谜或争论[26]。传统认为,心房室传导系统由房室结、房室束、左右束支及Purkinje纤维网组成。

关键词：房室传导系统房室束房室结组织胚胎学 Purkinje纤维免疫组化形态学分子生物学

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神经生长因子对小鼠红系造血的影响及内在机制研究(英文)

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中国实验血液学杂志 2008年第6期16卷 1365-1371页

作者：黄晓芹祝彼得四川大学华西基础医学院与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室四川成都610041 成都中医药大学组织胚胎学与解剖学教研室四川成都610041

本研究探讨神经生长因子(NGF)对红系造血的影响及内在机制。采用流式细胞术、祖细胞集落测定、血细胞计数、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附分析法(ELISA),对经大腿肌肉注射NGF一定时间后小鼠骨髓细胞的(BMC)增殖周期、BFU-E、CFU-E集落... 详细信息

本研究探讨神经生长因子(NGF)对红系造血的影响及内在机制。采用流式细胞术、祖细胞集落测定、血细胞计数、实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附分析法(ELISA),对经大腿肌肉注射NGF一定时间后小鼠骨髓细胞的(BMC)增殖周期、BFU-E、CFU-E集落产率、外周血红细胞相关指标、肾脏EPO水平、骨髓细胞GM-CSF、脾脏EPO受体(EPOR)mRNA的表达及血清中EPO,GM-CSF和IL-1浓度进行检测,并观察培养体系中加入不同浓度的NGF时BFU-E、CFU-E集落产率的变化及与EPO、IL-3的关系。结果表明:注射NGF(7.5μg/kg)持续7天,骨髓细胞中S+G2/M期细胞比例、CFU-E和BFU-E集落产率、脾EPOR mRNA量显著高于注射生理盐水的对照组。持续13到19天,外周血网织红细胞比例、红细胞数、血红蛋白含量也有升高;在体外CFU-E培养中,无论是否加入EPO,加入的NGF均能剂量依赖性地促进集落的形成,且只加入NGF组的集落产率显著高于只加入EPO组。在BFU-E培养中加入NGF和IL-3时,集落产率显著高于加入EPO和IL-3组。结论:NGF可能通过提高造血细胞对EPO的反应性并可激活造血细胞上与EPO作用后一样的信号通路,进而促进骨髓细胞进入有丝分裂,促进造血干细胞向红系方向分化,促进BFU-E和CFU-E的形成,增加外周血中网织红细胞、红细胞、血红蛋白含量。

关键词：神经生长因子红系造血红系祖细胞集落分析造血生长因子 EPO GM—CSF

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黄芪体外作用对贫血小鼠骨髓基质细胞分泌SCF的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2002年第4期18卷 396-398页

作者：祝晓玲祝彼得四川大学华西医学中心基础医学与法医学院组织胚胎学教研室四川成都610041 成都中医药大学解剖学教研室

目的　研究黄芪注射液 (AMI)对贫血小鼠骨髓基质细胞分泌干细胞因子 (SCF)的影响。方法　在贫血小鼠骨髓基质细胞培养体系中 ,分别加入 0 .1mL不同浓度的AMI(终浓度分别为 4 0mg/L、4 0 0mg/L)作为药物 1组、药物 2组 ,对照组加入等量的... 详细信息

目的　研究黄芪注射液 (AMI)对贫血小鼠骨髓基质细胞分泌干细胞因子 (SCF)的影响。方法　在贫血小鼠骨髓基质细胞培养体系中 ,分别加入 0 .1mL不同浓度的AMI(终浓度分别为 4 0mg/L、4 0 0mg/L)作为药物 1组、药物 2组 ,对照组加入等量的IMDM培养液 ,检测各实验组培养体系中骨髓成纤维细胞集落 (CFU F)数。同时 ,分别收集培养上清液 ,透析浓缩成冻干粉 ,经IMDM液稀释后作为条件培养液 ,分别加入到高增殖潜能的集落形成细胞 (HPP CFC)培养体系中 ,检测各实验组培养上清液中所含SCF的水平。结果　与对照组相比较 ,药物组的CFU F数及骨髓基质细胞条件培养液 (BMSCM )中SCF的水平均明显升高。结论一定浓度的AMI可促进贫血小鼠骨髓CFU F增殖。

关键词：干细胞因子骨髓基质细胞黄芪贫血小鼠

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显微切片扫描系统的应用与管理经验探讨

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实验技术与管理 2019年第11期36卷 60-64,74页

作者：郑翔毕文杰四川大学华西基础医学与法医学院基础医学专业实验室四川成都610041 成都医学院人体解剖学与组织胚胎学教研室四川成都610500

根据管理和应用显微切片扫描系统的经验,围绕设备性能指标、应用场合、设备管理和标本制备技术等4个方面,阐述了当前存在的主要问题,并提出相应的改进措施。

关键词：显微切片扫描系统切片全景成像设备管理显微制片

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脊髓刺激术对神经病理性痛模型大鼠痛行为和脊髓背角内小胶质细胞激活的影响

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神经解剖学杂志 2012年第3期28卷 230-236页

作者：张春奎李志红方相春唐君齐建国李金莲第四军医大学人体解剖与组织胚胎学教研室暨梁銶琚脑研究中心西安710032 四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学教研室成都610041

目的:探讨脊髓刺激术(spinal cord stimulation,SCS)对神经病理性痛(neuropathic pain,NP)模型大鼠痛行为及脊髓背角内小胶质细胞激活的影响。方法:成年大鼠20只,随机分为4组:(1)正常对照组(control组);(2)SCS组:正常大鼠给予SCS刺激;(3... 详细信息

目的:探讨脊髓刺激术(spinal cord stimulation,SCS)对神经病理性痛(neuropathic pain,NP)模型大鼠痛行为及脊髓背角内小胶质细胞激活的影响。方法:成年大鼠20只,随机分为4组:(1)正常对照组(control组);(2)SCS组:正常大鼠给予SCS刺激;(3)脊神经结扎(spinal nerve ligation,SNL)假刺激组(SNL+shamSCS组):SNL且植入SCS装置,但不刺激;(4)SNL+SCS组:SNL且给予SCS刺激。术前连续3 d、术后第5 d检测各组大鼠足底机械痛敏阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)。SCS组和SNL+SCS组术后第2-5 d给予SCS刺激,每d持续8 h;且在每次给予SCS 8 h刺激前进行90 min行为学测试,即SCS刺激30 min,以及刺激结束后的60 min内(共90 min),每15 min测量一次MWT。在第5 d给予SCS 8 h刺激结束后处死动物,利用免疫组织化学染色结合平均光密度(average optical density,AOD)分析的方法检测各组大鼠腰5节段脊髓背角内小胶质细胞特异性标志物OX-42的表达情况。结果:(1)行为学结果显示:术后第5 d,SNL+shamSCS组和SNL+SCS组大鼠手术侧后爪的MWT由术前26.00±0.0 g分别降至5.50±0.96 g和6.40±0.40 g(P<0.05);SNL+SCS组给予SCS刺激30 min后大鼠手术侧后爪的MWT明显有所提高,达16.20±2.60 g,与刺激前(6.40±0.40 g)相比有显著性差异(P<0.05);但停止SCS刺激60 min后,大鼠的MWT明显有所下降,与刺激前几乎没有明显差别。(2)免疫组化染色结果显示:术后第5 d,SNL+SCS组脊髓背角内OX-42的表达明显弱于SNL+shamSCS组,但二者都强于control组和SCS组;AOD结果也证实:SNL+SCS组大鼠脊髓背角内OX-42的AOD(1.29±0.28)明显低于SNL+shamSCS组(2.66±0.38),但仍高于control组(0.14±0.21)和SCS组(0.24±0.08)。结论:SCS对SNL模型大鼠的神经病理性痛有较好的镇痛效果;该作用可能与SCS刺激显著抑制脊髓背角内小胶质细胞的激活密切相关。

关键词：脊髓刺激术神经病理性痛小胶质细胞 OX-42 大鼠

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