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丁酸钠对自身免疫性肝炎辅助性T淋巴细胞17及肝脏Toll样受体4信号通路的影响

中华传染病杂志 2018年第1期36卷 25-29页

作者：吴锦露陈永平胡恩德陈达之陈璐陆峰彬李慧许烂漫黄瑜林镯王晓东温州医科大学附属第一医院感染内科温州市肝脏病学重点实验室 325025 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

目的了解丁酸钠对小鼠自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis, AIH）Th17的调节作用及对肝脏Toll样受体（Toll-like receptors, TLR）4炎症通路的影响。方法将50只6周龄雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为对照组、AIH组、丁酸钠组... 详细信息

目的了解丁酸钠对小鼠自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis, AIH）Th17的调节作用及对肝脏Toll样受体（Toll-like receptors, TLR）4炎症通路的影响。方法将50只6周龄雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为对照组、AIH组、丁酸钠组和高纤维组，每组10只，余10只小鼠用于提取肝脏特异性抗原S-100。诱导AIH模型建立后，丁酸钠组予500 mg/（kg·d）丁酸钠灌胃治疗，高纤维组予订制高纤维饲料喂养，持续3周后处死。观察各组小鼠肝脏病理变化，血清ALT、AST、IL-17A和TNF-α水平，脾脏Th17比例、肝脏TLR4、髓样分化因子（myeloid differentiation factor, MyD）88表达情况。对各样本均数进行正态性检验和方差齐性分析，各样本均数比较采用单因素方差分析。结果丁酸钠组及高纤维组小鼠肝脏炎症细胞浸润及细胞坏死明显比AIH组减轻。对照组、AIH组、丁酸钠组及高纤维组ALT分别为（24.833±2.229）、（88.333±9.543）、（27.167±3.189）和（29.833±6.113） U/L，AST分别为（97.000±14.953）、（285.000±35.434）、（139.500±38.976）和（127.167±28.687） U/L，各组间差异均有统计学意义（F值分别为156.491、44.118，均P〈0.01）。丁酸钠组和高纤维组小鼠脾脏Th17比例及其转录因子维甲酸相关孤儿受体γt明显低于AIH组，差异均有统计学意义（F值分别为21.780和68.283，均P〈0.05）；AIH组小鼠肝脏TLR4和MyD88蛋白表达明显高于对照组，丁酸钠组及高纤维组表达则被抑制，差异均有统计学意义（F值分别为26.235、28.293，均P〈0.01）；与AIH组相比，丁酸钠组及高纤维组肝脏和外周血中IL-17和TNF-α表达均降低。结论丁酸钠对自身免疫性肝炎进行免疫调节，改善肝脏炎性反应。

关键词：肝炎自身免疫性丁酸钠高纤维饮食辅助性T淋巴细胞17 Toll样受体4信号通路

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H7N9禽流感病毒裂解佐剂(MF59)疫苗稳定性研究

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微生物学免疫学进展 2019年第4期47卷 22-26页

作者：沈吉友吴晓鑫陈磊李方仲苏波周雨晴姚伟浙江天元生物药业有限公司技术开发部浙江杭州311100 浙江大学医学院附属第一医院感染科传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003 上海青赛生物科技有限公司研发部上海201500

目的评价H7N9禽流感病毒裂解佐剂(MF59)疫苗的稳定性。方法采用国内自主构建的重组H7N9禽流感病毒疫苗株毒种制备单价疫苗原液,制备含MF59佐剂的成品疫苗。按照企业注册质量标准进行检定,分别放置于(37±2)℃、(25±2)℃和(5... 详细信息

目的评价H7N9禽流感病毒裂解佐剂(MF59)疫苗的稳定性。方法采用国内自主构建的重组H7N9禽流感病毒疫苗株毒种制备单价疫苗原液,制备含MF59佐剂的成品疫苗。按照企业注册质量标准进行检定,分别放置于(37±2)℃、(25±2)℃和(5±3)℃环境下,观察不同时间疫苗的稳定性。结果经检定,成品疫苗的外观、装量、无菌检查、异常毒性检测、细菌内毒素含量、渗透压质量摩尔浓度及其他检定项目均符合企业注册质量标准。H7N9禽流感病毒裂解佐剂(MF59)疫苗在(37±2)℃保存3 d、在(25±2)℃保存3个月、在(5±3)℃保存30个月,疫苗各项指标均符合企业注册质量标准。结论 H7N9禽流感病毒裂解佐剂(MF59)疫苗具有良好的稳定性。

关键词： H7N9禽流感病毒佐剂 MF59 裂解疫苗稳定性

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两性霉素B去氧胆酸盐、两性霉素B脂质体和伏立康唑诱导治疗HIV相关性隐球菌脑膜炎的效果比较

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新发传染病电子杂志 2019年第2期4卷 97-102页

作者：陶然师金川郭永征黄凡许利军陈英楼方圆黄莺徐燕朱彪陈耀凯喻剑华浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室杭州310003 杭州市西溪医院感染科二科杭州3100023 福建省建新医院感染科福州350025 重庆市公共卫生临床救治中心重庆400036

目的比较两性霉素B去氧胆酸盐(AmB)+5氟胞嘧啶(5FC)±氟康唑(Flu)、两性霉素B脂质体(LipAmB)+5FC和伏立康唑(Vori)+5FC作为诱导方案对于HIV相关隐球菌脑膜炎的治疗效果。方法对2010年1月至2017年12月年接受AmB+5FC±Flu、LipAmB... 详细信息

目的比较两性霉素B去氧胆酸盐(AmB)+5氟胞嘧啶(5FC)±氟康唑(Flu)、两性霉素B脂质体(LipAmB)+5FC和伏立康唑(Vori)+5FC作为诱导方案对于HIV相关隐球菌脑膜炎的治疗效果。方法对2010年1月至2017年12月年接受AmB+5FC±Flu、LipAmB+5FC和Vori+5FC诱导方案的85例HIV相关隐球菌脑膜炎患者进行回顾性分析,比较3组患者间药物副作用以及10周生存率。结果低钾和肌酐升高比例在AmB+5FC±Flu诱导组患者高于Vori+5FC诱导组(P=0.016和P=0.047),但是在LipAmB+5FC诱导组和Vori+5FC诱导组以及AmB+5FC±Flu诱导组和LipAmB+5FC诱导组的10周累计生存率分别为96.6%,85.5%和76.2%(Log-Rank P=0.093),组间比较无统计学意义(P=0.079,P=0.089;P=0.365,P=0.724),其中,LipAmB+5FC组10周累计生存率高于Vori+5FC组(Log-Rank P=0.022)。结论 Vori+5FC诱导治疗方案效果不优于AmB+5FC±Flu或LipAmB+5FC的治疗方案,但是副作用较少;LipAmB+5FC的诱导治疗不劣于AmB+5FC±Flu治疗方案。

关键词：艾滋病隐球菌脑膜炎两性霉素B去氧胆酸盐两性霉素B脂质体伏立康唑

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人类狂犬病若干问题的研究进展

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中华临床感染病杂志 2018年第1期11卷 20-27,46页

作者：马亦林浙江大学医学院附属第一医院感染病中心传染病诊治国家重点实验室杭州310003

近年来对狂犬病病毒（RV）的研究较深入，主要包括野毒、疫苗株及新鉴定的从蝙蝠分离株的基因结构、复制，基因功能与表达调控。根据核蛋白（N）碱基的同源性，将对人类致病RV分为7个基因型，分别归属于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ遗传谱系。人类狂犬病... 详细信息

近年来对狂犬病病毒（RV）的研究较深入，主要包括野毒、疫苗株及新鉴定的从蝙蝠分离株的基因结构、复制，基因功能与表达调控。根据核蛋白（N）碱基的同源性，将对人类致病RV分为7个基因型，分别归属于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ遗传谱系。人类狂犬病的发病机制尚未完全清楚，在治疗方面未能取得突破，专家对密尔沃基方案评价不认可。从目前动物模型的研究进展来看，新颖的治疗疫苗及抑制病毒复制与扩散药物的研制有前途，促使成功治愈狂犬病大有希望。本文回顾了狂犬病的若干新发现与信息，探讨RV的特性、暴露后对人类的致病机制及发病后的治疗研究的进展，希望对研究者与狂犬病防治者有所参考。

关键词：狂犬病病毒基因型密尔沃基方案

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冠状病毒的特性及其致病性研究进展

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中华临床感染病杂志 2018年第4期11卷 305-315页

作者：马亦林浙江大学医学院附属第一医院感染病中心传染病诊治国家重点实验室杭州310003

冠状病毒在自然界中广泛存在，其自然宿主包括家畜、禽类、鼠类及野生哺乳类动物等，尤其是有飞翔能力的哺乳动物一蝙蝠，是多种冠状病毒的自然储存宿主，也是病毒扩散、传播及致动物或人类疾病流行的传染源。已发现有6种冠状病毒可使... 详细信息

冠状病毒在自然界中广泛存在，其自然宿主包括家畜、禽类、鼠类及野生哺乳类动物等，尤其是有飞翔能力的哺乳动物一蝙蝠，是多种冠状病毒的自然储存宿主，也是病毒扩散、传播及致动物或人类疾病流行的传染源。已发现有6种冠状病毒可使人类致病，其中SARS-CoV及MERS-CoV具有高致死率。由于冠状病毒有广泛宿主的特点以及自身基因组的结构特征，使其在进化过程中极易发生基因重组和变异，呈现遗传多样性。新亚型及新的冠状病毒在此过程中不断出现，使该病毒可发生跨种属感染，也对感染的预防与治疗带来较大的困难。本文对冠状病毒的形态结构、分类、基因组与受体的特点、致病性和防治感染的措施等研究文献，作了回顾与论述。

关键词：冠状病毒感染 SARS病毒跨种属感染诊断治疗

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中医脉学探究

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中医临床研究 2018年第24期10卷 3-6页

作者：方辉杨介钻肖党生浙江大学医学院附属第一医院浙江杭州310000 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310000

脉诊是中医基本诊断技术,对脉诊的研究是中医学领域的重要研究方向。从传统中医角度来看,把握阴阳气血以及人体内气化过程的规律是研习脉学的重要途径。中西医结合过程中,将干细胞分裂分化过程和能量代谢作为人体生命现象中两个核心的... 详细信息

脉诊是中医基本诊断技术,对脉诊的研究是中医学领域的重要研究方向。从传统中医角度来看,把握阴阳气血以及人体内气化过程的规律是研习脉学的重要途径。中西医结合过程中,将干细胞分裂分化过程和能量代谢作为人体生命现象中两个核心的生理过程,并且作为阴阳概念的生理学基础。在以血管为核心的局部组织器官中,能量代谢过程和干细胞分裂分化过程仍然是组织器官生理代谢和细胞更新的核心所在,并构建了血管、血管内容物以及血管外组织之间的相互关系,即血管内的能量物质被氧化成能量的代谢终产物,同时血管内的干细胞迁徙到细胞血管外分裂分化以替代死亡细胞。因此,对脉象的研究就不能局限于桡动脉波形、节律,更需要关注桡动脉三维空间、血管壁、血管内容物以及血管同周围组织的关系。这样不仅能够掌握临床常见脉象,而且还能够通过上述脉象揣度人体内气血运行状态从而形成对病机的把握。

关键词：阴阳脉象中医学干细胞能量代谢

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细胞因子和趋化因子在手足口病患儿血清中的表达及其临床意义

细胞因子和趋化因子在手足口病患儿血清中的表达及其临床意义

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浙江省免疫学会第六次会员代表大会暨第十一次学术大会

作者：吴晓鑫程林芳翁天豪胡晨雨余东山吴南屏姚航平浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

研究背景和目的:细胞因子和趋化因子的异常表达与手足口病(HFMD)的临床病理机制目前不是很清楚,本研究旨在探讨不同类型的手足口病患儿血清细胞因子和趋化因子表达水平,及其与手足口病临床特征的关系。研究方法:本研究涉及轻度手足口病2... 详细信息

研究背景和目的:细胞因子和趋化因子的异常表达与手足口病(HFMD)的临床病理机制目前不是很清楚,本研究旨在探讨不同类型的手足口病患儿血清细胞因子和趋化因子表达水平,及其与手足口病临床特征的关系。研究方法:本研究涉及轻度手足口病28例,重度手足口病44例,健康儿童26例。采集静脉血检测细胞因子白细胞介素(IL)-4,IL-12,IL-18,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),干扰素-γ(IFN-γ)]和趋化因子IL-8,RANTES,单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和干扰素-γ-诱导蛋白-10(IP-10)等。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测粪便标本中肠病毒71(EV 71)RNA水平。

关键词：手足口病患儿异常表达细胞因子重型手足口病临床意义

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肠球菌对利奈唑胺耐药机制的研究进展

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中华临床感染病杂志 2018年第1期11卷 66-70页

作者：楼亚玲喻玮武喆裘云庆浙江大学医学院附属第一医院感染病中心传染病诊治国家重点实验室杭州310003

肠球菌属是医院感染的条件致病菌。近年来，随着抗菌药物的广泛使用，肠球菌对抗菌药物的耐药率呈逐年上升趋势，甚至出现了耐万古霉素肠球菌（VRE）。利奈唑胺是人工合成的恶唑烷酮类抗菌药物，由于不易与其他抑制细菌蛋白合成的抗菌... 详细信息

肠球菌属是医院感染的条件致病菌。近年来，随着抗菌药物的广泛使用，肠球菌对抗菌药物的耐药率呈逐年上升趋势，甚至出现了耐万古霉素肠球菌（VRE）。利奈唑胺是人工合成的恶唑烷酮类抗菌药物，由于不易与其他抑制细菌蛋白合成的抗菌药物发生交叉耐药，曾被认为是治疗VRE的最后一道防线。但自利奈唑胺上市以来，有关耐利奈唑胺肠球菌的报道相继出现。本文就近年来有关肠球菌对利奈唑胺的耐药机制作一综述，以期为耐药监测和新型抗菌药物的研发提供依据。

关键词：肠球菌属万古霉素抗药性利奈唑胺抗药性

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高脂饮食对自身免疫性肝炎肝损伤与焦亡的研究

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中华传染病杂志 2018年第1期36卷 18-24页

作者：陈璐陆峰彬叶韦玮陈永平陈达之吴锦露胡恩德李慧黄瑜许烂漫李骥温州医科大学附属第一医院感染内科温州市肝脏病学重点实验室 325025 义乌市中心医院感染科浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

目的探讨高脂饮食（high-fat diet, HFD）对小鼠自身免疫性肝炎（autoimmune hepatits, AIH）肝脏损伤的影响。方法50只C57BL/6雄性小鼠选取6只为S-100制备组，剩余小鼠用随机数字法随机分成标准饮食组（standard chow, SC）、HFD组、AI... 详细信息

目的探讨高脂饮食（high-fat diet, HFD）对小鼠自身免疫性肝炎（autoimmune hepatits, AIH）肝脏损伤的影响。方法50只C57BL/6雄性小鼠选取6只为S-100制备组，剩余小鼠用随机数字法随机分成标准饮食组（standard chow, SC）、HFD组、AIH＋SC组及AIH＋HFD组，喂饲1周后进行AIH造模，4周后处死小鼠，收集小鼠肝脏、脾脏、血清，进行HE染色观察肝组织病理学改变；检测小鼠血清中ALT和AST变化；蛋白质印迹法和实时PCR法检检测肝组织中Nod样受体蛋白3（NLR pyrin domain containing 3, NLRP3）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1（cysteinyl aspartate specific proteinase, Caspase-1）的表达；ELISA试剂盒检测血清中TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌量；流式细胞仪分析脾脏中Th17细胞的数量。各组间均数比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA），每两组间比较方差齐性采用SNK-q检验，方差不齐采用非参数检验。结果HFD组肝组织可见少许脂肪空泡形成，AIH＋SC组可见血管周围炎性反应，AIH＋HFD组可见炎性反应加重，出现少许空泡样脂肪变性。与SC组小鼠相比，AIH＋SC组和HFD组小鼠的血清ALT和AST水平有所增加，AIH＋HFD组上升最为明显，各组均数相比差异均具有统计学意义（F值分别为57.12和37.58，P均〈0.05）。SC组外周血中Th17占CD4＋T细胞的比例为（2.98±0.90）%，HFD组为（6.89±0.99）%，AIH＋SC组为（6.47±1.08）%，AIH＋HFD组为（9.96±0.83）%，各组之间比较及两两比较差异有统计学意义（F＝54.05，P〈0.05）。SC组各血清细胞因子浓度分别为IL-1β [（7.62±2.81） ng/L]、IL-6 [（106.54±53.08） ng/L]、TNF-α [（107.26±36.20） ng/L]；HFD组分别为IL-1β [（25.06±7.09） ng/L]、IL-6 [（220.11±47.41） ng/L]、TNF-α [（273.77±33.62） ng/L]；AIH＋SC组分别为IL-1β [（17.49±5.68） ng/L]、IL-6[（260.73±50.29） ng/L]、TNF-α [（250.49±81.63） ng/L]；AIH＋HFD分别为IL-1β [（52.04±10.22） ng/L]、IL-6 [ （785.93±70.91） ng/L]、TNF-α [（913.97±64.57） ng/L]，各组之间差异均有统计学意义（F值分别为44.66、242.15、233.49，均P〈0.05）。HFD组和SC组相比、AIH＋HFD组与AIH＋SC组相比，NLRP3、Caspase-1表达明显上升，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论HFD促进AIH，可能是通过促炎因子分泌、促进Th17细胞活化和促进炎症小体NLRP3激活进而促进细胞焦亡。

关键词：肝炎自身免疫性脂肪因子类高脂饮食炎症小体细胞焦亡

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高盐饮食对肝脏纤维化的影响及其机制研究

高盐饮食对肝脏纤维化的影响及其机制研究

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浙江省免疫学会第六次会员代表大会暨第十一次学术大会

作者：梁雁陈佳宁侯显良曾萍陈文标章旭君林臣鸿刁宏燕浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

研究背景:肝纤维化是由持续性损伤修复反应引起的细胞外基质异常沉积,其常发展为肝硬化。肝星状细胞(HSC)的活化被认为是肝纤维化过程中的关键环节,巨噬细胞与HSC的相互作用可调控肝纤维化基质的形成。已有研究表明高盐饮食通过巨噬细... 详细信息

研究背景:肝纤维化是由持续性损伤修复反应引起的细胞外基质异常沉积,其常发展为肝硬化。肝星状细胞(HSC)的活化被认为是肝纤维化过程中的关键环节,巨噬细胞与HSC的相互作用可调控肝纤维化基质的形成。已有研究表明高盐饮食通过巨噬细胞加重自身免疫性疾病的严重程度,故本研究目的旨在探究高盐饮食是否会加重肝纤维化并探究其机制。方法:分别给予普通C57BL/6小鼠正常饮食和高盐饮食干预一个月,同时给予腹腔注射四氯化碳(CC14)每周2次,末次注射后24小时评估肝纤维化程度,通过流式细胞术分析小鼠肝脏巨噬细胞的变化,并检测肝脏转化因子-β(TGF-β)、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)、血小板源性生长因子(PDGF)水平。最后通过人来源单核细胞系(THP-1)进行体外实验进一步探究其机制。结果:研究发现,高盐饮食组相比正常饮食组,肝脏HSC活化标志α-平滑肌机动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达增多,肝脏损伤严重程度指标血清透明质酸(HA)的水平升高,同时肝组织Masson染色及HE染色结果显示高盐饮食组较正常饮食组小鼠肝纤维化及肝脏损伤程度加重。另外检测了肝脏巨噬细胞,发现高盐饮食组小鼠肝脏巨噬细胞比例升高,巨噬细胞促纤维化相关因子TGF-β、TIMP-1、PDGF表达水平升高。进一步通过体外实验发现,高盐环境培养THP-1后能使其TGF-β表达增加。结论:高盐饮食可能通过增加肝脏巨噬细胞浸润,促进巨噬细胞表达促纤维化因子,从而加重肝脏纤维化严重程度。

关键词：高盐饮食肝纤维化巨噬细胞

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