检索结果-内蒙古大学图书馆

南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第6期37卷 147-152页

作者：甄艳陈金慧施季森南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

植物体细胞胚胎发生(简称体胚发生)是细胞全能性的体现。在适宜的培养体系下,植物的体细胞理论上均存在脱分化启动胚发育进程的可能。尽管体胚发生这一生物学发育进程的报道已有50多年的历史,但仍有一些重要的科学问题还未得到完全阐明... 详细信息

植物体细胞胚胎发生(简称体胚发生)是细胞全能性的体现。在适宜的培养体系下,植物的体细胞理论上均存在脱分化启动胚发育进程的可能。尽管体胚发生这一生物学发育进程的报道已有50多年的历史,但仍有一些重要的科学问题还未得到完全阐明,例如成熟外植体胚性能力恢复的机理、外源/内源因子如何调控胚性能力获得、胚性获得的关键分子途径、胚性获得调控的信号网络等。笔者综述了体胚能力恢复的诱导因子、生理生化标记、调控基因、miRNA调控和蛋白质组特征等方面的研究进展。

关键词：愈伤组织胚性能力植物体胚发生

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柳杉SSR引物的筛选及反应体系的优化

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第6期37卷 17-21页

作者：徐进刘子梁南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

利用正交设计方法对柳杉SSR反应体系中的Mg2+、DNA模板、聚合酶、dNTP、引物等5个反应因子进行了优化,同时对反应程序中的退火温度进行筛选。结果表明:(1)柳杉10μL的SSR反应体系的最优条件为Mg2+浓度2.0 mmol/L、4种dNTP浓度均为0.15 m... 详细信息

利用正交设计方法对柳杉SSR反应体系中的Mg2+、DNA模板、聚合酶、dNTP、引物等5个反应因子进行了优化,同时对反应程序中的退火温度进行筛选。结果表明:(1)柳杉10μL的SSR反应体系的最优条件为Mg2+浓度2.0 mmol/L、4种dNTP浓度均为0.15 mmol/L、正反引物均为0.3μmol/L、Taq聚合酶为0.5μmol/min、DNA模板为20 ng;(2)从柳杉属植物的106对SSR引物中筛选出了多态性高,稳定性好的26对引物;(3)优化了筛选出的26对引物的退火温度。

关键词：柳杉 SSR引物引物筛选体系优化

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植物的胚形态建成及其基因调控机制研究进展

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第5期37卷 134-138页

作者：王鹏凯施季森张艳娟吴霜陈金慧南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

胚形态建成是植物生长发育的基础,是单细胞发育成功能性多细胞有机体的过程。高等植物在胚形态建成过程中首先确立极性随后形成轴性结构,为后续的胚形态建成和生长发育建立了空间坐标体系。笔者以模式植物拟南芥为例介绍了植物胚形态建... 详细信息

胚形态建成是植物生长发育的基础,是单细胞发育成功能性多细胞有机体的过程。高等植物在胚形态建成过程中首先确立极性随后形成轴性结构,为后续的胚形态建成和生长发育建立了空间坐标体系。笔者以模式植物拟南芥为例介绍了植物胚形态建成过程和基因调控机制,其中包括:MPK/GRD信号途径控制的合子伸长和极性化;WOX8、WOX9、WOX2指导合子不均等分裂和基顶轴方向确定;生长素信号、WOX5调控网络指导的根端分生组织确立、WUS/CLV3、STM调控网络指导顶端分生组织确立;以子叶形成为代表的侧生器官发生和近远轴发育模式的确立需要生长素信号控制和TCP/CUC基因的表达拮抗;SCR/SHR调控途径参与胚基部径向发育过程机理等。认为对胚形态建成过程中基因调控机理的研究有助于从一个全新的角度认识植物生长发育过程。

关键词：胚形态建成生长素信号基因调控顶端分生组织

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野百合与金佛山百合的核型分析及45S rDNA在其染色体上的物理定位

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第6期37卷 153-156页

作者：席梦利房磊张晓玲辛昊阳高婷婷施季森南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

采用涂片法和45S rDNA荧光原位杂交技术,对野百合(Lilium brownii)和金佛山百合(***)进行了核型分析和45S rDNA在其染色体上的物理定位。核型分析结果表明:野百合的核型为3B,金佛山百合核型为3A;野百合的核型公式为2n=2x=24=4m+8st(4SAT... 详细信息

采用涂片法和45S rDNA荧光原位杂交技术,对野百合(Lilium brownii)和金佛山百合(***)进行了核型分析和45S rDNA在其染色体上的物理定位。核型分析结果表明:野百合的核型为3B,金佛山百合核型为3A;野百合的核型公式为2n=2x=24=4m+8st(4SAT)+12t,金佛山百合的核型公式为2n=2x=24=4m+8st+12t;野百合和金佛山百合的核不对称系数分别为82.12%和82.65%。荧光原位杂交结果表明:野百合有6个45S rDNA位点,它们分别位于3、6、9号染色体上;金佛山百合有8个45S rDNA位点,它们分别位于1、3、6、8号染色体上。

关键词：野百合金佛山百合核型分析荧光原位杂交

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北美鹅掌楸原生质体的分离与培养

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西北植物学报 2013年第2期33卷 254-260页

作者：王鹏凯吕伟光胡雪怡陈金慧施季森南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

以鹅掌楸属植物北美鹅掌楸的悬浮细胞和组培苗叶片为材料,对北美鹅掌楸原生质体分离、纯化与培养条件进行研究。结果表明:叶片和悬浮细胞用含有0.1%2-吗啉乙磺酸(MES)和0.6mol/L甘露醇的Cell ProtoplastWash(60M-CPW)溶液25℃预处理1h... 详细信息

以鹅掌楸属植物北美鹅掌楸的悬浮细胞和组培苗叶片为材料,对北美鹅掌楸原生质体分离、纯化与培养条件进行研究。结果表明:叶片和悬浮细胞用含有0.1%2-吗啉乙磺酸(MES)和0.6mol/L甘露醇的Cell ProtoplastWash(60M-CPW)溶液25℃预处理1h效果最好;悬浮细胞最佳酶解液为60M-CPW+1%纤维素酶+1%半纤维素酶+0.2%果胶酶Y-23+0.1%MES,每克材料25℃酶解6h有效原生质体产量可以达到3×106个;叶片最佳酶解液为60M-CPW+2%纤维素酶+1%半纤维素酶+0.2%果胶酶Y-23+0.1%MES,每克材料25℃酶解10h有效原生质体产量可以达到11×106个;悬浮细胞原生质体易于培养,在KM8p+1.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA培养基中培养25d可形成肉眼可见的愈伤组织。

关键词：北美鹅掌楸原生质体酶解条件愈伤组织

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麝香百合及东方百合品种核型分析

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第1期37卷 67-70页

作者：房磊姜珊席梦利施季森傅伟杨斌南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

以麝香百合‘白狐狸’(‘White Fox’)和‘雷山’(‘Lei Shan’)、东方百合‘水晶布兰卡’(‘Crystal Blanca’)和‘康斯坦撒’(‘Constansa’)的试管苗根尖为研究材料,用环己酰亚胺预处理,然后卡诺氏固定液固定,纤维素酶和果胶酶解离... 详细信息

以麝香百合‘白狐狸’(‘White Fox’)和‘雷山’(‘Lei Shan’)、东方百合‘水晶布兰卡’(‘Crystal Blanca’)和‘康斯坦撒’(‘Constansa’)的试管苗根尖为研究材料,用环己酰亚胺预处理,然后卡诺氏固定液固定,纤维素酶和果胶酶解离后采用涂片法制片,对4种观赏百合进行核型分析。结果表明,‘白狐狸’核型为3A,‘雷山’、‘水晶布兰卡’和‘康斯坦撒’的核型均为3B。核型公式分别为:‘白狐狸’2n=2x=24=4m+4st(2SAT)+16t,‘雷山’2n=2x=24=2m+2sm+10st(2SAT)+10t,‘水晶布兰卡’2n=2x=24=4m+10st+10t,‘康斯坦撒’2n=2x=24=4m(1SAT)+10st+10t。‘白狐狸’、‘雷山’、‘水晶布兰卡’及‘康斯坦撒’的核不对称系数分别为83.11%、82.78%、79.75%、81.22%。

关键词：麝香百合东方百合核型分析

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东方百合SRAP体系优化及引物筛选

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第3期37卷 6-10页

作者：邱帅丁信誉席梦利施季森林木遗传和生物技术省部共建教育部重点实验室南京林业大学

以东方百合商品种‘索蚌’(‘Sorbonne’)和‘康斯坦撒’(‘Constantsa’)及其F1代杂交群体为实验材料,从100对SRAP引物中筛选出59对扩增产物丰富、具有较高多态性的引物,同时对PCR反应体系进行了优化。采用正交设计,对Mg2+、dNTPs、Ta... 详细信息

以东方百合商品种‘索蚌’(‘Sorbonne’)和‘康斯坦撒’(‘Constantsa’)及其F1代杂交群体为实验材料,从100对SRAP引物中筛选出59对扩增产物丰富、具有较高多态性的引物,同时对PCR反应体系进行了优化。采用正交设计,对Mg2+、dNTPs、Taq聚合酶及引物浓度进行4因素4水平优化,并在此基础上对Mg2+、引物浓度和退火温度进行了单因素优化。结果表明,东方百合SRAP的最佳体系为:1×Buffer,Mg2+浓度2.7 mmol/L,dNTPs浓度0.25 mmol/L,引物浓度0.8μmol/L,Taq聚合酶1.5μmol/min,模板DNA 60～100 ng。SRAP两步反应最佳退火温度为第1步35℃,第2步退火59.3℃。最后用‘索蚌’、‘康斯坦撒’和部分F1植株对优化体系进行稳定性检测,发现所筛选出的59对引物在优化的体系下均有稳定的扩增产物。

关键词：东方百合序列相关扩增多态性分子标记体系优化引物筛选

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南林895杨离体培养及耐盐基因GmNHX1的转化

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南方农业学报 2013年第8期44卷 1237-1242页

作者：孙伟博杨立恒诸葛强南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

摘要：【目的】建立南林895杨杂交无性系最适遗传转化体系，为创新耐盐南林895杨种质资源奠定基础。【方法】以南林895杨叶片和茎段为外植体，对其再生体系和耐盐基因GmNHX1遗传转化的部分影响因子进行分析。【结果】使用NaClO消毒处理1... 详细信息

摘要：【目的】建立南林895杨杂交无性系最适遗传转化体系，为创新耐盐南林895杨种质资源奠定基础。【方法】以南林895杨叶片和茎段为外植体，对其再生体系和耐盐基因GmNHX1遗传转化的部分影响因子进行分析。【结果】使用NaClO消毒处理10～15min的外植体褐化率和污染率均较低；以叶片为外植体产生的不定芽状态良好，而茎段分化的不定芽容易白化死亡。PCR检测结果表明，转GmNHX1基因植株可扩增获得符合大小的特异性条带（1641bp）；通过荧光显微镜能够观察到转基因植株中的SGFP激发出的绿色荧光，证明GmNHX1基因已经高效整合到南林895杨的基因组中。【结论】叶片是南林895杨离体培养再生体系的最佳外植体来源，其离体培养所得的植株完全可以满足根癌农杆菌介导基因转化对受体的要求，可用于耐盐基因GmNHX1的遗传转化。

关键词：南林895杨离体培养再生体系耐盐基因GmNHX1 转化

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马尾松转录组测序和分析

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分子植物育种 2013年第3期11卷 385-392页

作者：王晓锋何卫龙蔡卫佳阮倩倩潘婷季孔庶林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京林业大学南京210037

本研究首次构建了马尾松均一化cDNA文库,采用Illumina高通量测序技术对转录组进行了测序,利用生物信息学方法开展基因表达谱的研究、功能基因的预测。EST序列拼接获得83680个contig,其中33772个contig被注释为相应的331669对生物学功能,... 详细信息

本研究首次构建了马尾松均一化cDNA文库,采用Illumina高通量测序技术对转录组进行了测序,利用生物信息学方法开展基因表达谱的研究、功能基因的预测。EST序列拼接获得83680个contig,其中33772个contig被注释为相应的331669对生物学功能,10647个contig被注释具有酶功能。根据KEGGpathway数据库,对马尾松转录组的contig进行Pathway生物学通路的注释和预测,共识别出10647个contig具有对应的1029种酶功能,并关联到135条生物学通路。SSR查找发现,从83680个contig中找到889个SSR位点,占contig总数的比例为1.06%。其中,三核苷酸重复所占比例最高,达到48.37%,其次是六核苷酸重复,为19.12%,比例最低的是四核苷酸重复,仅为4.72%,二核苷酸重复和五核苷酸重复基本相同,分别为14.62%和13.16%。SSR不同重复基元类型中,出现频率最高的为AT/AT,其次是AGC/CTG和AAG/CTT。

关键词：马尾松转录组测序 Ⅲumina高通量测序技术 SSR

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枣基因组的微卫星特征

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林业科学 2013年第12期49卷 81-87页

作者：马秋月戴晓港陈赢男张得芳廖卓毅李淑娴南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建重点实验室南京210037

利用454高通量测序技术对枣基因组进行部分测序。经序列拼接,共获得总长约为8.4 Mb的基因组序列,从中找到15 036个微卫星重复序列。其中六碱基重复类型的重复数目最丰富,共6 033个,占重复序列总数的40.1%;其次是复合型碱基2 707个和单碱... 详细信息

利用454高通量测序技术对枣基因组进行部分测序。经序列拼接,共获得总长约为8.4 Mb的基因组序列,从中找到15 036个微卫星重复序列。其中六碱基重复类型的重复数目最丰富,共6 033个,占重复序列总数的40.1%;其次是复合型碱基2 707个和单碱基2 575个,分别占重复序列总数的18.0%和17.1%。另外,二碱基重复1 118个,三碱基1 050个,四碱基1 218个,五碱基335个,分别占重复序列总数的7.5%,7.0%,8.1%,2.2%。通过分析发现六碱基重复类型所占比例最多,但微卫星重复单元的重复次数变化却是二碱基微卫星显著高于其他各重复类型。在单碱基重复和二碱基重复这2种类型中,A/T以及AT/TA为最主要的重复单元;(AAN)n,(AAAN)n,(AAAAN)n和(AAAAAN)n为三碱基、四碱基、五碱基、六碱基重复类型中对应的优势重复单元,这些优势重复单元中富含A和T碱基。分析还发现,枣基因组微卫星长度变化的多样性与重复单元长度呈负相关(二碱基重复类型除外),这意味着枣基因组中重复单元较短的微卫星变异速率较快,而重复单元较长的微卫星变异速率较慢。对枣基因组微卫星侧翼序列分析发现,左侧序列与右侧序列GC含量相差不大;设计的引物序列中,有86%的引物可以特异扩增出含有SSR序列的位点。研究结果为枣的遗传研究提供丰富的序列信息和标记资源。

关键词：枣基因组 454测序微卫星

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