检索结果-内蒙古大学图书馆

西北植物学报 2013年第2期33卷 254-260页

作者：王鹏凯吕伟光胡雪怡陈金慧施季森南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

以鹅掌楸属植物北美鹅掌楸的悬浮细胞和组培苗叶片为材料,对北美鹅掌楸原生质体分离、纯化与培养条件进行研究。结果表明:叶片和悬浮细胞用含有0.1%2-吗啉乙磺酸(MES)和0.6mol/L甘露醇的Cell ProtoplastWash(60M-CPW)溶液25℃预处理1h... 详细信息

以鹅掌楸属植物北美鹅掌楸的悬浮细胞和组培苗叶片为材料,对北美鹅掌楸原生质体分离、纯化与培养条件进行研究。结果表明:叶片和悬浮细胞用含有0.1%2-吗啉乙磺酸(MES)和0.6mol/L甘露醇的Cell ProtoplastWash(60M-CPW)溶液25℃预处理1h效果最好;悬浮细胞最佳酶解液为60M-CPW+1%纤维素酶+1%半纤维素酶+0.2%果胶酶Y-23+0.1%MES,每克材料25℃酶解6h有效原生质体产量可以达到3×106个;叶片最佳酶解液为60M-CPW+2%纤维素酶+1%半纤维素酶+0.2%果胶酶Y-23+0.1%MES,每克材料25℃酶解10h有效原生质体产量可以达到11×106个;悬浮细胞原生质体易于培养,在KM8p+1.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA培养基中培养25d可形成肉眼可见的愈伤组织。

关键词：北美鹅掌楸原生质体酶解条件愈伤组织

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麝香百合及东方百合品种核型分析

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第1期37卷 67-70页

作者：房磊姜珊席梦利施季森傅伟杨斌南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

以麝香百合‘白狐狸’(‘White Fox’)和‘雷山’(‘Lei Shan’)、东方百合‘水晶布兰卡’(‘Crystal Blanca’)和‘康斯坦撒’(‘Constansa’)的试管苗根尖为研究材料,用环己酰亚胺预处理,然后卡诺氏固定液固定,纤维素酶和果胶酶解离... 详细信息

以麝香百合‘白狐狸’(‘White Fox’)和‘雷山’(‘Lei Shan’)、东方百合‘水晶布兰卡’(‘Crystal Blanca’)和‘康斯坦撒’(‘Constansa’)的试管苗根尖为研究材料,用环己酰亚胺预处理,然后卡诺氏固定液固定,纤维素酶和果胶酶解离后采用涂片法制片,对4种观赏百合进行核型分析。结果表明,‘白狐狸’核型为3A,‘雷山’、‘水晶布兰卡’和‘康斯坦撒’的核型均为3B。核型公式分别为:‘白狐狸’2n=2x=24=4m+4st(2SAT)+16t,‘雷山’2n=2x=24=2m+2sm+10st(2SAT)+10t,‘水晶布兰卡’2n=2x=24=4m+10st+10t,‘康斯坦撒’2n=2x=24=4m(1SAT)+10st+10t。‘白狐狸’、‘雷山’、‘水晶布兰卡’及‘康斯坦撒’的核不对称系数分别为83.11%、82.78%、79.75%、81.22%。

关键词：麝香百合东方百合核型分析

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东方百合SRAP体系优化及引物筛选

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第3期37卷 6-10页

作者：邱帅丁信誉席梦利施季森林木遗传和生物技术省部共建教育部重点实验室南京林业大学

以东方百合商品种‘索蚌’(‘Sorbonne’)和‘康斯坦撒’(‘Constantsa’)及其F1代杂交群体为实验材料,从100对SRAP引物中筛选出59对扩增产物丰富、具有较高多态性的引物,同时对PCR反应体系进行了优化。采用正交设计,对Mg2+、dNTPs、Ta... 详细信息

以东方百合商品种‘索蚌’(‘Sorbonne’)和‘康斯坦撒’(‘Constantsa’)及其F1代杂交群体为实验材料,从100对SRAP引物中筛选出59对扩增产物丰富、具有较高多态性的引物,同时对PCR反应体系进行了优化。采用正交设计,对Mg2+、dNTPs、Taq聚合酶及引物浓度进行4因素4水平优化,并在此基础上对Mg2+、引物浓度和退火温度进行了单因素优化。结果表明,东方百合SRAP的最佳体系为:1×Buffer,Mg2+浓度2.7 mmol/L,dNTPs浓度0.25 mmol/L,引物浓度0.8μmol/L,Taq聚合酶1.5μmol/min,模板DNA 60～100 ng。SRAP两步反应最佳退火温度为第1步35℃,第2步退火59.3℃。最后用‘索蚌’、‘康斯坦撒’和部分F1植株对优化体系进行稳定性检测,发现所筛选出的59对引物在优化的体系下均有稳定的扩增产物。

关键词：东方百合序列相关扩增多态性分子标记体系优化引物筛选

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南林895杨离体培养及耐盐基因GmNHX1的转化

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南方农业学报 2013年第8期44卷 1237-1242页

作者：孙伟博杨立恒诸葛强南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

摘要：【目的】建立南林895杨杂交无性系最适遗传转化体系，为创新耐盐南林895杨种质资源奠定基础。【方法】以南林895杨叶片和茎段为外植体，对其再生体系和耐盐基因GmNHX1遗传转化的部分影响因子进行分析。【结果】使用NaClO消毒处理1... 详细信息

摘要：【目的】建立南林895杨杂交无性系最适遗传转化体系，为创新耐盐南林895杨种质资源奠定基础。【方法】以南林895杨叶片和茎段为外植体，对其再生体系和耐盐基因GmNHX1遗传转化的部分影响因子进行分析。【结果】使用NaClO消毒处理10～15min的外植体褐化率和污染率均较低；以叶片为外植体产生的不定芽状态良好，而茎段分化的不定芽容易白化死亡。PCR检测结果表明，转GmNHX1基因植株可扩增获得符合大小的特异性条带（1641bp）；通过荧光显微镜能够观察到转基因植株中的SGFP激发出的绿色荧光，证明GmNHX1基因已经高效整合到南林895杨的基因组中。【结论】叶片是南林895杨离体培养再生体系的最佳外植体来源，其离体培养所得的植株完全可以满足根癌农杆菌介导基因转化对受体的要求，可用于耐盐基因GmNHX1的遗传转化。

关键词：南林895杨离体培养再生体系耐盐基因GmNHX1 转化

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马尾松转录组测序和分析

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分子植物育种 2013年第3期11卷 385-392页

作者：王晓锋何卫龙蔡卫佳阮倩倩潘婷季孔庶林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京林业大学南京210037

本研究首次构建了马尾松均一化cDNA文库,采用Illumina高通量测序技术对转录组进行了测序,利用生物信息学方法开展基因表达谱的研究、功能基因的预测。EST序列拼接获得83680个contig,其中33772个contig被注释为相应的331669对生物学功能,... 详细信息

本研究首次构建了马尾松均一化cDNA文库,采用Illumina高通量测序技术对转录组进行了测序,利用生物信息学方法开展基因表达谱的研究、功能基因的预测。EST序列拼接获得83680个contig,其中33772个contig被注释为相应的331669对生物学功能,10647个contig被注释具有酶功能。根据KEGGpathway数据库,对马尾松转录组的contig进行Pathway生物学通路的注释和预测,共识别出10647个contig具有对应的1029种酶功能,并关联到135条生物学通路。SSR查找发现,从83680个contig中找到889个SSR位点,占contig总数的比例为1.06%。其中,三核苷酸重复所占比例最高,达到48.37%,其次是六核苷酸重复,为19.12%,比例最低的是四核苷酸重复,仅为4.72%,二核苷酸重复和五核苷酸重复基本相同,分别为14.62%和13.16%。SSR不同重复基元类型中,出现频率最高的为AT/AT,其次是AGC/CTG和AAG/CTT。

关键词：马尾松转录组测序 Ⅲumina高通量测序技术 SSR

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三种常用亲本分析软件效率的比较——以鹅掌楸属树种控制授粉子代亲本分析为例

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分子植物育种 2013年第2期11卷 241-248页

作者：李博潘文婷李康琴李火根南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

在亲本分析中,常用基于最大似然法的软件(如CERVUS,COLONY和PAPA)进行亲本推定,但不同软件各有其特点,其分析结果与亲本推定效率有时相差较大。为比较三种常用亲本分析软件(CERVUS3.0,COLONY2.0和PAPA2.0)的效率及特点,本文以包含278个... 详细信息

在亲本分析中,常用基于最大似然法的软件(如CERVUS,COLONY和PAPA)进行亲本推定,但不同软件各有其特点,其分析结果与亲本推定效率有时相差较大。为比较三种常用亲本分析软件(CERVUS3.0,COLONY2.0和PAPA2.0)的效率及特点,本文以包含278个鹅掌楸潜在亲本及90个鹅掌楸已知亲本的子代群体为材料,利用13对EST-SSR位点信息,分析子代亲本并与其真实亲本进行对照,进而评价三种亲本分析软件的效率,期望为林木亲本分析软件选择提供参考。研究结果表明,13个SSR位点在实验群体中检测出的等位基因数(A)、观测杂合度(Ho)及Shannon多样性指数(I)平均值分别为5.23,0.4766和1.4636,表明该批引物多态性高,适合用于亲本分析。就亲本分析效率而言,总体上看,谱系清楚的子代远高于谱系不清的子代,单亲分析远高于双亲分析。三种软件的分析效率及特点各有差别。对于谱系不清的林下更新子代苗木,双亲分析时,三种软件的分析效率差别不大。但单亲分析时,CERVUS与COLONY软件分析效率较高,其亲本推定的准确率分别为78.87%和69.90%,高于PAPA软件的分析效率。而对于谱系清楚的控制授粉子代,双亲分析时,采用PAPA软件对异交子代亲本推定准确率为34.72%,高于CERVUS及COLONY软件;而CERVUS与COLONY软件则适合于自交子代的亲本分析,其亲本推定的准确率分别可达83.33%及81.2%,远高于PAPA软件。

关键词：亲本分析 CERVUS COLONY PAPA 效率鹅掌楸属

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不平衡巢式设计遗传模型分析

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林业科学 2013年第3期49卷 1-8页

作者：童春发杨立伟蒋安纳施季森南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037 南京林业大学信息科学技术学院南京210037

虽然巢式试验设计在动植物育种中得到广泛应用,但是在不平衡数据条件下有关遗传参数估计和假设检验统计量的计算还存在着很多问题。文中针对不平衡数据条件下的巢式试验设计,使用固定效应模型和随机效应模型估计相关的遗传参数并进行相... 详细信息

虽然巢式试验设计在动植物育种中得到广泛应用,但是在不平衡数据条件下有关遗传参数估计和假设检验统计量的计算还存在着很多问题。文中针对不平衡数据条件下的巢式试验设计,使用固定效应模型和随机效应模型估计相关的遗传参数并进行相应的统计假设检验。对于固定效应模型,使用约束线性模型方法推导出亲本配合力估计及亲本间配合力假设检验统计量的计算公式。对于随机效应模型,采用混合线性模型中的方差分析法,推导出方差分量估计的计算公式,并给出方差分量估计标准误以及方差分量假设检验统计量的计算方法,进而给出遗传力计算公式及其标准误的近似计算方法。最后,用VC++编写多种形式巢式设计遗传模型的各种遗传参数估计和假设检验统计量计算的Windows应用软件,供林木遗传育种工作者使用。

关键词：巢式设计一般配合力方差分量遗传力

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植物磺肽素在杂交鹅掌楸体胚发生中的作用

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林业科学 2013年第2期49卷 33-38页

作者：陈金慧张艳娟吴亚云王鹏凯王光萍施季森南京林业大学森林资源与环境学院林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

植物磺肽素(PSK),是近年来发现的一种新型植物肽类生长调节物质,具有促进单细胞的分裂增殖等生理功能。以杂交鹅掌楸未成熟胚来源的体胚发生体系为材料,探索PSK-α在植物体胚发生中的作用。研究发现PSK-α能够促进细胞分裂和增殖,有利... 详细信息

植物磺肽素(PSK),是近年来发现的一种新型植物肽类生长调节物质,具有促进单细胞的分裂增殖等生理功能。以杂交鹅掌楸未成熟胚来源的体胚发生体系为材料,探索PSK-α在植物体胚发生中的作用。研究发现PSK-α能够促进细胞分裂和增殖,有利于胚性细胞的形成。在杂交鹅掌楸体胚发生初期添加0.1mg·L-1的PSK-α可提高未成熟胚的脱分化率并能有效改善培养细胞的状态;0.5mg·L-1的PSK-α能够促进胚性愈伤组织的形成和增殖;体胚形成后期添加0.8mg·L-1的PSK-α利于其正常发育以及再生植株的培养。

关键词：杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生胚性愈伤组织再生植株植物磺肽素

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杂交鹅掌楸悬浮细胞高效摄取具有良好生物相容性的超微介孔氧化硅纳米颗粒

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中国科学：生命科学 2013年第2期43卷 177-184页

作者：夏兵董琛张文一陆叶陈金慧施季森南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037 南京林业大学现代分析测试中心南京210037

采用扫描电子显微镜（SEM）和激光共聚焦显微镜（LSCM）系统研究了超微介孔氧化硅纳米颗粒（MSNs）和杂交鹅掌楸悬浮细胞共孵育的互作特征.将MSNs通过异硫氰酸荧光素（FITC）标记后,再利用LSCM观察其被植物细胞摄取的情况.结果表明,5~1... 详细信息

采用扫描电子显微镜（SEM）和激光共聚焦显微镜（LSCM）系统研究了超微介孔氧化硅纳米颗粒（MSNs）和杂交鹅掌楸悬浮细胞共孵育的互作特征.将MSNs通过异硫氰酸荧光素（FITC）标记后,再利用LSCM观察其被植物细胞摄取的情况.结果表明,5~15nm的MSNs可以通过内吞途径有效将FITC分子载入完整植物细胞.然而,在无MSNs作为载体的情况下,游离FITC分子则无法进入完整植物细胞.SEM观察结果进一步表明,MSNs容易聚集在完整植物细胞的表面,而且通过硅元素含量对比分析,直接证明了MSNs可以被完整植物细胞摄取到其内部.其次,利用荧光素二乙酸酯染料分析和MSNs共培养24h后的植物细胞的活性,其结果表明,这些细胞仍然保持很好的活力,而且也没有观察到明显的细胞死亡.最后发现,这些和MSNs共培养后的鹅掌楸细胞仍可以通过胚胎发育实现植株再生.综上所述,在植物生物学中,这种超微MSNs作为纳米载体可以应用到细胞的体外外源基因转染.

关键词：介孔氧化硅纳米颗粒内吞细胞毒性胚胎发育

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第三代测序技术及其应用

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中国生物工程杂志 2013年第5期33卷 125-131页

作者：张得芳马秋月尹佟明夏涛 1南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037 南京林业大学森林资源与环境学院南京210037

第二代测序技术发展到一定阶段以后其缺陷逐渐显现,而第三代测序技术的出现在一定程度上弥补了第二代测序技术在应用方面的缺点。就目前正在发展的5种第三代高通量测序技术的原理进行了阐述,并比较了这几种测序技术的优缺点,最后对三代... 详细信息

第二代测序技术发展到一定阶段以后其缺陷逐渐显现,而第三代测序技术的出现在一定程度上弥补了第二代测序技术在应用方面的缺点。就目前正在发展的5种第三代高通量测序技术的原理进行了阐述,并比较了这几种测序技术的优缺点,最后对三代测序技术在基因组测序,甲基化研究,RNA测序以及医学方面的应用作了简单介绍。

关键词：第三代测序单分子测序技术SMRT tSMS

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