检索结果-内蒙古大学图书馆

植物研究 2023年第2期43卷 300-310页

作者：刘森尧贾丰璘国庆樊高锋周博如姜廷波林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学哈尔滨150040

为揭示小黑杨(Populus simonii×P. nigra)在面对非生物胁迫时,转录因子PsnbHLH162在植物体内发挥的作用,同时探究该基因在植物体内的信号转导过程,进而为未来获取优良的抗逆树种提供理论基础。以小黑杨为原材料,克隆获取PsnbHLH16... 详细信息

为揭示小黑杨(Populus simonii×P. nigra)在面对非生物胁迫时,转录因子PsnbHLH162在植物体内发挥的作用,同时探究该基因在植物体内的信号转导过程,进而为未来获取优良的抗逆树种提供理论基础。以小黑杨为原材料,克隆获取PsnbHLH162基因,对目的基因和启动子进行生物信息学分析;之后用150 mmol·L^(-1)NaCl、4℃低温分别对野生型小黑杨进行胁迫处理,利用荧光定量PCR,分析基因响应非生物胁迫的功能。结果显示:PsnbHLH162 cDNA基因片段长537 bp,基因N端内含1个高度保守的HLH结构域。该基因表达蛋白是不含跨膜区域的稳定的亲水性蛋白,其定位在细胞核内且没有转录激活活性。启动子区域内含多种ABA应答、生长素应答、光应答和circadian元件,证实此基因参加非生物胁迫应答。荧光定量PCR结果表明在盐胁迫下,与茎、叶组织相比,基因在根组织的表达量最高;在低温胁迫下,与叶、根组织相比,基因在茎组织的表达量最高。发现野生植株内,PsnbHLH162能被盐、低温诱导表达。

关键词：小黑杨 PsnbHLH162 生物信息学低温胁迫盐胁迫

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小黑杨转录因子PsnbZIP1应答盐胁迫功能分析

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植物研究 2023年第2期43卷 288-299页

作者：廖诗贤王宇婷董立本顾咏梅贾丰璘姜廷波周博如林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学哈尔滨150040

为揭示小黑杨(Populus simonii×P. nigra)在面对非生物胁迫时,转录因子PsnbZIP1在植物体内发挥的功能,以小黑杨为试验材料,克隆得到PsnbZIP1的ORF区序列长为432 bp,并初步分析PsnbZIP1盐胁迫下的分子机制。采用q-PCR分析PsnbZIP1在... 详细信息

为揭示小黑杨(Populus simonii×P. nigra)在面对非生物胁迫时,转录因子PsnbZIP1在植物体内发挥的功能,以小黑杨为试验材料,克隆得到PsnbZIP1的ORF区序列长为432 bp,并初步分析PsnbZIP1盐胁迫下的分子机制。采用q-PCR分析PsnbZIP1在150 mmol·L^(-1)NaCl处理小黑杨组培苗时的表达模式,发现该基因的表达量快速上升;通过生物信息学分析预测PsnbZIP1转录因子为无跨膜结构且具有信号肽的亲水性不稳定蛋白;用农杆菌(Agrobacterium)介导的烟草(Nicotiana)瞬时表达观察该基因的亚细胞定位情况,结果表明该基因为核定位蛋白;用酵母单杂交实验证明该基因编码的蛋白在酵母体内不具有转录激活功能。对PsnbZIP1基因的启动子序列进行分析,结果表明该启动子包含了生长素应答、脱落酸应答元件、光应答元件以及种子特异性调控的顺式作用调控元件,该基因可能在植物的生长发育与响应胁迫过程中发挥了重要作用;启动子还包括参与干旱诱导的MYB结合位点和MYBHv1结合位点,表明该基因有可能与一些干旱诱导相关MYB基因相互作用。

关键词：小黑杨 bZIP转录因子盐胁迫生物信息学

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光照与氮添加对红皮云杉幼树生长与叶形态功能的影响

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森林工程 2022年第4期38卷 1-9页

作者：邢鸿林刘天义扎史都吉程琳杨玲林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

筛选出有效促进红皮云杉幼树生长的土壤养分和光照条件,为建立促进红皮云杉幼树生长的管理技术提供科学依据,以黑龙江省佳木斯市孟家岗林场8~10 a生红皮云杉人工幼龄林木为研究对象,采用裂区设计试验方法,设置3种光照条件(全光、0.5郁... 详细信息

筛选出有效促进红皮云杉幼树生长的土壤养分和光照条件,为建立促进红皮云杉幼树生长的管理技术提供科学依据,以黑龙江省佳木斯市孟家岗林场8~10 a生红皮云杉人工幼龄林木为研究对象,采用裂区设计试验方法,设置3种光照条件(全光、0.5郁闭度、0.7郁闭度)下氮添加(每株每年100 g)样地和对照样地,分析光照与氮添加对红皮云杉幼树生长和叶形态功能的影响差异。结果表明,①不同光照条件之间,全光条件下树高年生长量最大,全光施肥条件下地径年生长量最大,其次为0.5郁闭度条件;氮添加对树高和地径年生长量影响较小;②不同光照条件下,随着郁闭度增加,比叶面积、叶绿素含量增加,叶干物质含量、叶绿素a/b降低,叶养分含量变化不显著;氮添加对叶形态、叶绿素含量和叶养分含量影响不显著。由此可知,相比氮添加,光照对红皮云杉幼树生长、叶形态和光合能力的影响更显著,全光、氮添加条件下幼树具有较大树高和地径年生长量,高径年生长量比最低,氮添加可促进光合效率提高。红皮云杉造林适宜选择全光条件或近似全光条件植苗,造林后可通过氮添加提高幼树光合能力以促进生长。

关键词：红皮云杉人工林郁闭度氮添加林木生长叶形态光合能力

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逆境胁迫下柽柳脂质转运蛋白基因(ThLTP)的克隆与功能初步分析

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林业科学研究 2012年第4期25卷 492-499页

作者：林琳李健李慧玉穆怀志姜静东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

从以刚毛柽柳为材料构建的NaCl胁迫的根cDNA文库中测序得到1条LTP基因序列,其全长为635 bp、编码116个氨基酸,命名为ThLTP基因。采用实时荧光定量RT-PCR的方法,分别对0.2 mol.L-1NaCl、150μmol.L-1CdCl2、20%(W/V)PEG6000、100μmol.L-1ABA及4℃下ThLTP基因在柽柳中的表达模式进行了分析,结果表明:ThLTP基因除了在4℃条件下根组织中为下调表达外,在其它处理中均表现为上调表达。将ThLTP基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)的原核表达载体pET32a中,对重组菌Escherichia coli BL21(pET32a-LTP)的抗旱耐盐性进行分析。结果表明:在0.8%(W/V)NaCl和20%(W/V)PEG6000条件下,对照菌*** BL21(pET32a)无对数生长期,而重组菌*** BL21(pET32a-LTP)经过3 h的延迟生长后,进入到对数增长期,表明ThLTP可受盐、碱、低温诱导并能提高重组菌的抗旱耐盐能力。

关键词：刚毛柽柳脂质转移蛋白抗旱耐盐性表达分析

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白桦BpbZIP1基因抗旱耐盐分析及ABRE元件结合鉴定

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林业科学研究 2020年第5期33卷 68-76页

作者：郭依萍石晶静周美琪于颖王超林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学黑龙江哈尔滨150040

[目的]在白桦(Betula platyphylla Suk)中鉴定抗非生物胁迫bZIP基因,为研究白桦抗逆性状形成的分子基础及抗性遗传改良提供数据和材料。[方法]从白桦苗克隆白桦bZIP基因,利用生物信息学对该基因进行系统进化分析。利用瞬时转化法进行快... 详细信息

[目的]在白桦(Betula platyphylla Suk)中鉴定抗非生物胁迫bZIP基因,为研究白桦抗逆性状形成的分子基础及抗性遗传改良提供数据和材料。[方法]从白桦苗克隆白桦bZIP基因,利用生物信息学对该基因进行系统进化分析。利用瞬时转化法进行快速基因功能分析,通过组织化学染色和生理指标测定鉴定抗旱耐盐功能。利用酵母单杂交初步鉴定转录因子与元件的结合。[结果]获得白桦bZIP基因,命名为BpbZIP1,其与已知抗性相关基因蛋白序列聚为一组。BpbZIP1基因受NaCl处理的诱导,在甘露醇处理下,表达变化不明显。在NaCl胁迫条件下,转基因株系清除活性氧的能力强于野生型,SOD和POD活性提高;在甘露醇胁迫条件下,转基因株系活性氧清除能力与野生型差别不明显,SOD活性升高,POD活性上升不显著。BpbZIP1能够与ABRE元件特异性结合。[结论]BpbZIP1基因能够通过清除活性氧来提高白桦瞬时转化株系的耐盐能力,抗旱能力不明显。鉴定出具有耐盐能力的白桦bZIP基因及其结合元件,为进一步分析白桦bZIP基因的耐盐分子调控机制提供基础数据。

关键词： BpbZIP1基因抗旱耐盐功能分析

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逆境胁迫下山新杨PdbHMGs基因表达模式分析

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植物研究 2023年第6期43卷 932-942页

作者：王春瑶雷晓锦刘中原林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学哈尔滨150040

为了初步探究山新杨HMG(High mobility group proteins)基因在非生物胁迫下的功能,本研究从山新杨(Populus davidiana×***)中克隆获得HMGs基因,研究HMGs抗逆功能。利用同源序列比对,在山新杨中找到7条拟南芥(Arabidopsis thaliana)... 详细信息

为了初步探究山新杨HMG(High mobility group proteins)基因在非生物胁迫下的功能,本研究从山新杨(Populus davidiana×***)中克隆获得HMGs基因,研究HMGs抗逆功能。利用同源序列比对,在山新杨中找到7条拟南芥(Arabidopsis thaliana)HMGs的同源基因(命名为PdbHMG1~7)。利用生物信息学工具对PdbH⁃MG1~7进行序列分析。此外,通过qRT-PCR探究不同逆境胁迫下PdbHMG1~7基因在山新杨根和叶中的表达模式。PdbHMG1-7 ORF长度为456~2004 bp,编码氨基酸残基数为151~667,编码蛋白相对分子质量为16.72~75.54 kDa,理论等电点为5.35~9.36,且7个PdbHMG蛋白均为亲水性蛋白。多序列比对与进化树分析结果表明,7个PdbHMGs基因均含有保守的HMG-box结构域,都属于HMGB亚家族。顺式作用元件的分析结果表明,PdbHMGs基因的启动子序列包含多种响应激素和逆境胁迫元件。高盐、干旱、重金属和激素等胁迫处理后表达模式分析结果显示,7个PdbHMGs基因在山新杨根和叶中的表达至少在一个胁迫处理时间点发生了显著变化。在叶片中,PdbHMG2在NaCl、ABA、PEG_(6000)和CdCl_(2)胁迫下被诱导几乎全部为显著上调表达,而PdbHMG7则全部为下调表达;在NaCl和CdCl_(2)胁迫下,PdbHMG1、PdbHMG3和PdbHMG6在整个胁迫过程中几乎全部为显著上调表达。在根中,NaCl处理整个过程中PdbHMG3和PdbHMG5的表达趋势全部显著上调,而PdbHMG6在NaCl胁迫过程中除9~12 h无明显表达外,其余胁迫时间点全部为显著下调表达;在ABA处理过程中,PdbHMG6在根中全部为下调表达。7个PdbHMGs基因至少能在1种器官中对1种胁迫处理做出应答,但响应的胁迫类型和机制可能不同。本研究为后续进一步研究山新杨PdbHMGs家族基因的功能提供了参考。

关键词：高迁移率族蛋白山新杨非生物胁迫表达模式分析

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外源生长素质量浓度和扦插基质对色木槭嫩枝扦插生根的影响

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森林工程 2022年第5期38卷 1-9页

作者：周鑫鑫李茹月臧世阳堃芃杨玲林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

研究外源生长素(NAA和IBA)质量浓度和不同基质类型对色木槭嫩枝插穗生根指标和生根质量的影响,筛选出最佳的激素质量浓度和基质,为色木槭优良种质资源扩大繁殖和推广栽培奠定基础。本研究以色木槭当年生半木质化插穗为试验材料,设定0、... 详细信息

研究外源生长素(NAA和IBA)质量浓度和不同基质类型对色木槭嫩枝插穗生根指标和生根质量的影响,筛选出最佳的激素质量浓度和基质,为色木槭优良种质资源扩大繁殖和推广栽培奠定基础。本研究以色木槭当年生半木质化插穗为试验材料,设定0、500、1 000、1 500、2 000 mg/L 5种NAA与IBA组合溶液(NAA+IBA)的质量浓度,选用蛭石、泥炭土、珍珠岩、珍珠岩+蛭石4种基质进行单因素随机区组试验。结果表明,不同NAA+IBA质量浓度和基质类型对测量指标均有极显著的影响(P<0.01),均在40 d时具有最高的生根率。不同激素质量浓度中,1 500 mg/L处理的在生根率(62.50%)、愈伤组织诱导率(66.67%)和新生根总长度上表现均为最佳;比较总根数,发现1 500、2 000 mg/L处理无显著性差异,但均显著(P<0.05)优于0、500、1 000 mg/L处理。在4种基质中,珍珠岩在生根率(66.67%)和愈伤组织诱导率(70.84%)上均表现最佳;珍珠岩+蛭石(1∶1)在新生根总长度和总根数上表现最佳。色木槭嫩枝扦插受NAA+IBA质量浓度和不同基质类型影响显著,综合考虑生根效果和生根质量,1 500 mg/L为最佳NAA+IBA激素质量浓度;珍珠岩在生根指标上显著优于其他基质,为最优选择;育苗后期为追求生根质量,则应使用珍珠岩+蛭石作为栽培基质。该研究建立的色木槭嫩枝扦插方法可用于优良种质资源的扩大繁殖。

关键词：色木槭半木质化枝条扦插繁殖生长素质量浓度 NAA IBA 基质

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杨树HSF家族基因生物信息学与胁迫应答表达分析

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北京林业大学学报 2021年第2期43卷 34-45页

作者：王雪怡顾咏梅张雪梅姜廷波刘焕臻东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

【目的】探究小黑杨热激转录因子HSF在应答高温和高盐胁迫时发挥的关键作用。保守结构域和顺式作用元件预测等对杨树HSF转录因子家族基因进行生物信息学分析。本研究以小黑杨为材料,经过37℃高温胁迫半个月后观察其形态变化;将小黑杨在3... 详细信息

【目的】探究小黑杨热激转录因子HSF在应答高温和高盐胁迫时发挥的关键作用。保守结构域和顺式作用元件预测等对杨树HSF转录因子家族基因进行生物信息学分析。本研究以小黑杨为材料,经过37℃高温胁迫半个月后观察其形态变化;将小黑杨在37℃下分别处理0、12、24、48 h,采用RT-qPCR对小黑杨组织中的PsnHSFs基因进行时空表达分析;将小黑杨于150 mmol/L NaCl胁迫分别处理0、24 h,通过RNA-seq分析PsnHSFs基因的相对表达量变化,并通过RT-qPCR进行验证。【结果】通过结构特征和系统发育比较将29个HSF转录因子家族基因分成A、B和C三个亚家族,各亚家族分别包含18、10和1个HSF基因;HSF编码的氨基酸序列长度介于209~595之间,均为亲水性蛋白;其N端具有高度保守的DBD结构域,由三个保守基序构成;HSF基因启动子序列中包含DRE core、ABRE和TC-rich等多种顺式作用元件。小黑杨经37℃高温处理后其株高仅为对照的76.51%,叶片呈卷曲状,叶表面粗糙,叶面积显著减小且苗干多侧枝柔软无韧性。RT-qPCR与RNA-seq结果表明,PsnHSFs被高温、高盐胁迫诱导表达。高温处理后其株高仅为对照的76.51%,叶片呈卷曲状,叶表面粗糙,叶面积显著减小且苗干多侧枝柔软无韧性。RT-qPCR与RNA-seq结果表明,PsnHSFs被高温、高盐胁迫诱导表达。家族基因以及揭示HSF参与木本植物胁迫应答的分子机制调控具有参考意义。

关键词：小黑杨 PsnHSFs 生物信息学胁迫应答

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白桦BpCHS3转基因植株耐盐性分析

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北京林业大学学报 2019年第4期41卷 1-7页

作者：姜晶李晓媛王楚王芳姜静东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

【目的】查耳酮合成酶(CHS)是黄酮类化合物生物合成途径中的关键酶,其高表达可以促进黄酮类化合物积累,增强植物抵抗盐碱、干旱等非生物胁迫的能力,开展转BpCHS3白桦耐盐性分析,为阐明该基因的功能提供参考。【方法】以前期获得的转BpC... 详细信息

【目的】查耳酮合成酶(CHS)是黄酮类化合物生物合成途径中的关键酶,其高表达可以促进黄酮类化合物积累,增强植物抵抗盐碱、干旱等非生物胁迫的能力,开展转BpCHS3白桦耐盐性分析,为阐明该基因的功能提供参考。【方法】以前期获得的转BpCHS3白桦为试材,进行转基因白桦qRT-PCR及Northern Blot检测,同时测定了叶片中花青素质量分数。NaCl胁迫处理下,分别测定转BpCHS3白桦的盐害指数、叶绿素荧光参数及光合参数。采用qRT-PCR技术,测定转基因株系的类黄酮代谢途径中CHS下游5个关键酶基因以及BpCHS家族成员相对表达量。【结果】qRT-PCR及Northern Blot检测显示,导入的目标基因BpCHS3在mRNA水平能够表达。转基因白桦组培生根苗在0.3%NaCl胁迫第25天,对照(WT)株系盐害指数高达83%,而转基因白桦平均盐害指数仅为39%;白桦转基因盆栽苗在0.4%NaCl胁迫后,叶绿素荧光参数及光合参数测定显示,NaCl胁迫第9天多数转基因株系最大光化学效率(F_v/F_m)仍为正常值,而WT株系降至0.66,胁迫第9天时实际光化学效率(Φ_(PSII))和光化学猝灭系数(qP)呈下降趋势,但WT株系的降幅高于转基因株系;NaCl胁迫6 d时,5个转基因株系的净光合速率(P_n)平均值仍高于WT的43.47%。认为盐胁迫下BpCHS3基因在白桦中的过量表达能够维持其较高的光电子传递活性,提高PSⅡ反应中心原初光能转换效率,同时也能维持较高的净光合效率。分别以转BpCHS3白桦cDNA为模板qRT-PCR分析显示,相对WT株系CHS下游的5个关键酶基因在转基因株系中均呈不同程度的上调表达,BpCHS家族成员中只有BpCHS3表达量显著上调,而BpCHS1和BpCHS2均呈下调表达或与WT株系差异不显著。BpCHS3过表达株系花青素质量分数分析发现,转基因白桦叶片中花青素质量分数均显著低于WT株系,推测BpCHS3的过量表达,对另外2个CHS家族成员产生共抑制,且影响花青素的合成。【结论】转BpCHS3白桦的耐盐性提高,与花青素质量分数多少无关,BpCHS3的过表达可能促进其他黄酮类化合物的积累,从而增强白桦的耐盐能力。

关键词：白桦 BpCHS3 遗传转化耐盐性

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抗褐化剂对水曲柳成熟胚外植体褐化及体胚发生的影响

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东北林业大学学报 2019年第11期47卷 32-37页

作者：王秋水刘春苹沈海龙杨玲刘洋谢添伊程雪张鹏林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040 沈阳农业大学林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学)

利用抗坏血酸(ASA)、谷胱甘肽(GSH)、硝酸银(AgNO3)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等抗褐化剂处理,检验水曲柳(Fraxinus mandshurica Rupr.)外植体褐化与体胚发生的响应格局及其相互关系。结果表明:①10 mg·L^-1的ASA处理显著降低了植体褐... 详细信息

利用抗坏血酸(ASA)、谷胱甘肽(GSH)、硝酸银(AgNO3)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等抗褐化剂处理,检验水曲柳(Fraxinus mandshurica Rupr.)外植体褐化与体胚发生的响应格局及其相互关系。结果表明:①10 mg·L^-1的ASA处理显著降低了植体褐化指数(代表外植体褐化面积比值)、褐化率和体胚发生率;随着ASA质量浓度的增加,褐化指数、褐化率和体胚发生率不断增加;在100 mg·L^-1时,褐化率达到98%(等同于对照),褐化面积和体胚发生率分别达到0.734和73%,均显著高于对照(P<0.05);200 mg·L^-1对外植体致死;协方差与相关性分析表明,ASA处理对水曲柳外植体褐化与体胚发生的影响格局之间具有显著相关性。②GSH对水曲柳外植体褐化指数和褐化率的影响较小,无规律性变化格局;10、20 mg·L^-1的低质量浓度处理显著降低体胚发生率,但随质量浓度增加体胚发生率增加,在200 mg·L^-1处理时显著高于对照,与100 mg·L^-1以下ASA处理的体胚发生影响趋势一致。③AgNO3在显著降低水曲柳外植体褐化指数和褐化率的同时也显著降低了体胚发生率;PVP处理对水曲柳外植体褐化影响不大,各处理体胚发生率虽均高于对照,但无规律性变化格局。④GSH、PVP和AgNO3这3种抗褐化剂对水曲柳外植体褐化与体胚发生的影响格局之间不具有显著相关性。综上,ASA可以用来进行水曲柳体胚发生伴随外植体褐化现象生物学机制解析的优选试剂。

关键词：水曲柳抗氧化剂外植体褐化体胚发生

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