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植物研究 2016年第3期36卷 469-475页

作者：严冬刘殿昆司冬晶郑密赵曦阳曲冠证李莹东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

为了获得分离效果好、清晰度高的杨树叶片蛋白质双向电泳图像,本研究以小黑杨、毛果杨和84K杨叶片为材料,采用三氯乙酸—丙酮沉淀法、Tris-饱和酚法和Tris-三氯乙酸法提取杨树叶片总蛋白质,分别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向凝胶电泳对... 详细信息

为了获得分离效果好、清晰度高的杨树叶片蛋白质双向电泳图像,本研究以小黑杨、毛果杨和84K杨叶片为材料,采用三氯乙酸—丙酮沉淀法、Tris-饱和酚法和Tris-三氯乙酸法提取杨树叶片总蛋白质,分别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向凝胶电泳对蛋白质进行分离,应用Image Master 2D Platinum 6.0软件对这3种蛋白质提取方法得到的双向电泳凝胶进行分析。结果表明:Tris-三氯乙酸法最适用于双向电泳的杨树叶片蛋白质的提取。利用Tris-三氯乙酸法提取蛋白质得到的鲜样中总蛋白质平均含量为949.46μg·g-1,得到的蛋白质点平均数量为567个,所得到的双向电泳凝胶图谱分离效果好、清晰度高。

关键词：杨树叶片 Tris-三氯乙酸法,蛋白质提取双向凝胶电泳

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毛果杨HDA902基因的克隆、序列分析和亚细胞定位

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分子植物育种 2016年第5期14卷 1082-1090页

作者：刘超李开隆刘春娟马旭俊东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)是一类重要的酶,催化组蛋白去乙酰化,参与组蛋白乙酰化状态的调节,对染色体结构修饰和基因表达调控发挥着重要的作用。为了研究毛果杨HDA902基因的亚细胞定位,进而为研究其功能奠定基础,采... 详细信息

组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)是一类重要的酶,催化组蛋白去乙酰化,参与组蛋白乙酰化状态的调节,对染色体结构修饰和基因表达调控发挥着重要的作用。为了研究毛果杨HDA902基因的亚细胞定位,进而为研究其功能奠定基础,采用PCR的方法克隆了毛果杨组蛋白去乙酰化酶基因HDA902的编码序列,采用生物信息学方法分析了该基因所编码的蛋白质序列,并构建了HDA902-GFP融合基因表达载体,通过其在洋葱表皮细胞的表达来确定HDA902蛋白的亚细胞定位。研究结果表明,毛果杨HDA902基因的开放阅读框为1 500 bp,编码1个由499个氨基酸残基组成的蛋白质。序列比对和结构域分析显示,毛果杨HDA902蛋白与其他植物同源蛋白具有一个保守的结构域HDAC3。系统进化树分析表明,毛果杨HDA902蛋白在进化上与桃(Prunus persica)HDAC(XP_007200978.1)和苹果(Malus domestica)HDA19-like(XP_008348955.1)的亲缘关系较近。启动子分析表明,毛果杨HDA902基因的启动子序列包含5UTR Pyrich stretch、ARE、ACE和HSE等多个与逆境和光响应相关的顺式作用元件。亚细胞定位分析表明,毛果杨HDA902蛋白主要存在于细胞质中。这些研究结果为进一步研究毛果杨组蛋白去乙酰化酶HDA902基因的功能提供了理论基础。

关键词：毛果杨组蛋白去乙酰化酶基因克隆生物信息学亚细胞定位

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白桦MYB家族基因序列及表达分析

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植物研究 2016年第2期36卷 252-257页

作者：刘慧子孙丹于颖张楠王超东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

MYB转录因子家族是植物重要的转录因子家族之一,其成员在植物的生长、发育、细胞壁形成及胁迫反应等多方面发挥重要作用。从白桦(Betula platyphylla Suk.)中鉴定了17条MYB家族基因,与拟南芥家族基因进行系统进化分析结果表明,17个白桦... 详细信息

MYB转录因子家族是植物重要的转录因子家族之一,其成员在植物的生长、发育、细胞壁形成及胁迫反应等多方面发挥重要作用。从白桦(Betula platyphylla Suk.)中鉴定了17条MYB家族基因,与拟南芥家族基因进行系统进化分析结果表明,17个白桦MYB基因分属不同亚家族的不同亚类,其中10条属于1R/4R型亚家族,其余7条属于2R型亚家族。BplMYB13与已知的次生细胞壁合成相关基因At MYB46聚为一组,BplMYB15和BplMYB26分别与胁迫响应和非生物胁迫应答相关MYB聚为一组,BplMYB23与硫代葡萄糖苷合成相关MYB聚为一组,BplMYB9、21和22与苯丙烷生物合成相关MYB聚为一组。利用Real time RT-PCR分析白桦MYB家族基因在白桦形成层和木质部组织一个生长季不同发育时期及人工弯曲处理6 h的表达模式。结果显示17个MYB基因在5月中旬至7月中旬白桦形成层活动旺盛,木质部迅速形成期表达量较高,其中Bp MYB13在全生长季形成层和新生木质部中都有较高的表达水平,推测该基因与次生细胞壁的形成相关;在白桦茎干人工弯曲处理6 h时,与直立木和对应木相比,14条基因在应拉木中上调表达;与直立木相比,7条基因在对应木中上调表达。说明这些基因对人工弯曲处理和重力刺激具有应答反应,可能在白桦木质部发育和响应外力刺激等过程的生理变化中起重要作用。

关键词：白桦 MYB基因家族序列分析表达分析

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白桦BpGT14基因启动子克隆及表达活性分析

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北京林业大学学报 2016年第7期38卷 16-24页

作者：李蕾蕾孙丰坤李天宇寇萍詹亚光曾凡锁东北林业大学生命科学学院林木遗传育种国家重点实验室

本文利用Site Finding-PCR方法克隆了白桦BpGT14基因起始密码子ATG上游2 169 bp序列,并通过PLACE启动子预测工具对其进行元件分析。结果表明,该启动子片段含有启动子核心元件及多种逆境及激素响应元件,同时具有植物苯丙烷及木质素生物... 详细信息

本文利用Site Finding-PCR方法克隆了白桦BpGT14基因起始密码子ATG上游2 169 bp序列,并通过PLACE启动子预测工具对其进行元件分析。结果表明,该启动子片段含有启动子核心元件及多种逆境及激素响应元件,同时具有植物苯丙烷及木质素生物合成的MYB类转录因子的重要结合基序。研究选取了其中含有启动子核心元件的1 156 bp片段构建了pBpGT14∷GUS植物表达载体,利用农杆菌侵染的方法将pBpGT14∷GUS报告基因瞬时转化烟草植株,鉴定该启动子在烟草中的表达活性及对非生物胁迫和激素的响应模式。对转基因烟草植株进行GUS染色,结果表明该启动子具有启动活性,且在茎段处活性较高;进一步分析非生物胁迫对烟草中GUS酶活性的影响,表明该启动子对ABA、NaCl、PEG及高温处理均有明显响应,且对于NaCl及PEG处理响应迅速。为了更好的鉴定白桦BpGT14基因启动子在白桦细胞中的启动活性及响应模式,本文构建了pBpGT14∷GFP载体并瞬时转化白桦茎段悬浮细胞,进行研究。GFP转录水平分析结果与GUS酶活性结果基本一致,但其中部分时间点仍存在差异。选取PEG处理3、6、12及24 h的转GFP基因白桦茎段悬浮细胞,在显微镜下观察其绿色荧光蛋白,以此揭示该启动子对干旱的响应模式。结果表明,该启动子在白桦茎段悬浮细胞中启动了GFP的表达,在处理初期(3 h),荧光效果明显;随着处理时间的增加,细胞脱水明显,且在细胞壁表现高亮度荧光。

关键词：白桦糖基转移酶14基因启动子克隆报告基因非生物胁迫

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植物铜伴侣蛋白的研究进展

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贵州农业科学 2017年第1期45卷 9-15页

作者：高丽颖唐孟泉黄家欢许志茹东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040

铜是植物生长发育所必需的微量元素,是参与生命基本过程的辅因子。铜伴侣蛋白在运输铜离子、参与目的蛋白的装配及保护机体免受游离铜离子毒害等方面发挥重要作用。因此,铜伴侣蛋白对植物体内铜稳态的调节具有重要的贡献。为了促进植物... 详细信息

铜是植物生长发育所必需的微量元素,是参与生命基本过程的辅因子。铜伴侣蛋白在运输铜离子、参与目的蛋白的装配及保护机体免受游离铜离子毒害等方面发挥重要作用。因此,铜伴侣蛋白对植物体内铜稳态的调节具有重要的贡献。为了促进植物铜伴侣蛋白的进一步深入研究,从铜伴侣蛋白的起源、种类及3种铜伴侣蛋白(ATX-like、CCS和COX17)相关研究方面进行综述。

关键词：铜伴侣蛋白 ATX-like CCS COX17

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红松自由授粉子代家系生产力年度变异与家系选

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植物研究 2016年第2期36卷 305-309页

作者：张振张含国张磊东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

以黑龙江省尚志市苇河林业局青山种子园的79个红松优树半同胞家系子代为对象,测定其21、25和27 a生的生长性状。结果表明,在过半轮伐期后的红松生长性状以材积的增长量最大,在3个树龄材积的变异系数最大,树高、胸径和材积在3个树龄的平... 详细信息

以黑龙江省尚志市苇河林业局青山种子园的79个红松优树半同胞家系子代为对象,测定其21、25和27 a生的生长性状。结果表明,在过半轮伐期后的红松生长性状以材积的增长量最大,在3个树龄材积的变异系数最大,树高、胸径和材积在3个树龄的平均变异系数分别为13.12%、22.39%和46.34%。生长性状在21、25和27 a生均表现出显著或极显著的家系效应。生长性状遗传力受弱至中度的遗传控制,相同年度内,家系遗传力均高于单株遗传力。以材积做选择目标,以20%的入选率对材积进行选择,选出16个优良家系的材积在21、25和27 a时的平均值分别为0.036 8、0.048 6和0.061 6 m3,分别比当年生对照（CK）高28.67%、15.02%和14.07%,本研究还初选17个优良单株,材积的遗传增益在20.25%~34.37%。

关键词：红松自由授粉家系遗传变异家系选择

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施肥对水曲柳生长及开花结实的影响

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植物研究 2017年第2期37卷 298-303页

作者：王希刚詹亚光张桂琴闫朝福李想曾凡锁东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种与生物技术国家重点实验室哈尔滨150040 黑龙江省带岭林业科学研究所伊春153106 黑龙江省苇河林业局青山林木种子园尚志150628 北京美康基因科学股份有限公司丰台100070

为了研究施肥对水曲柳生长及开花结实的影响,以2年生水曲柳嫁接苗、13年生水曲柳幼树、29年生已开花水曲柳大树为材料,采用氮、磷、钾3因素3水平正交试验设计,连续三年进行施肥处理。通过测量嫁接苗的树高、地径;幼树的树高、胸径;已开... 详细信息

为了研究施肥对水曲柳生长及开花结实的影响,以2年生水曲柳嫁接苗、13年生水曲柳幼树、29年生已开花水曲柳大树为材料,采用氮、磷、钾3因素3水平正交试验设计,连续三年进行施肥处理。通过测量嫁接苗的树高、地径;幼树的树高、胸径;已开花大树的开花率、结实率等生长发育指标研究不同配方施肥对水曲柳生长发育状态的影响,得出促进水曲柳生长发育的施肥最优组合。结果显示:施肥处理对水曲柳的生长发育具有促进作用。3种肥料对2年生水曲柳嫁接苗生长的影响顺序为氮肥>磷肥>钾肥,施肥最优组合为氮肥每株0.006 kg、磷肥每株0.012 kg、钾肥每株0.008 kg;对13年生水曲柳幼树生长的影响顺序为氮肥>磷肥>钾肥,施肥最优组合为氮肥每株0.15 kg、磷肥每株0.3 kg、钾肥每株0.2 kg;对已开花水曲柳大树开花率及结实率的影响顺序为氮肥>钾肥>磷肥,施肥最优组合为氮肥每株0.3 kg、磷肥每株0.6 kg、钾肥每株0.4 kg。结果表明合理施肥可以促进水曲柳的生长和开花结实,本试验结果也为水曲柳合理施肥提供了技术依据。

关键词：水曲柳(Fraxinus mandshuriea) 施肥正交试验生长指标开花结实

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杂种落叶松家系变异分析与优良家系选择

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东北林业大学学报 2016年第4期44卷 1-7页

作者：贾庆彬张含国张磊张海啸林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

以黑龙江省龙江县错海林场10年生杂种落叶松家系试验林为研究对象,对生长与材性性状进行调查分析,结果表明:杂种落叶松家系生长性状存在较丰富的变异,材性性状变异相对较小,其中,日12×兴9、日3×兴2、兴10×日13和兴12... 详细信息

以黑龙江省龙江县错海林场10年生杂种落叶松家系试验林为研究对象,对生长与材性性状进行调查分析,结果表明:杂种落叶松家系生长性状存在较丰富的变异,材性性状变异相对较小,其中,日12×兴9、日3×兴2、兴10×日13和兴12×兴2这4个家系变异较大。利用方差分析与多重比较等方法对杂种落叶松家系间差异性进行比较,结果表明:生长性状家系间差异达到显著水平,日5×兴9、日12×兴9、兴7×日77-2、日11×兴2这4个家系相比其它家系表现优异,树高方面,4个家系的平均值比总平均值高出9.32%,高出对照为22.86%,生长最快的日5×兴9家系比生长较慢的日3×长51家系高出21.64%,高出家系总平均值15.22%,高出对照为29.49%。胸径方面:4个家系的平均值比总平均值高出10.23%,高出对照为26.34%,生长最快的日5×兴9家系比生长较慢的日5×兴12家系高出24.67%,高出家系总平均值17.42%,高出对照为34.59%。木材密度方面,兴9×日76-2、日5×长78-3、日5×兴9、日11×兴2这4个家系表现较好,与其它多数家系存在差别,4个家系的平均值比总平均值高出11.79%,高出对照为11.98%,木材密度最大的的兴9×日76-2家系比密度较小的兴10×日13家系高出55.27%,高出家系总平均值15.18%,高出对照为15.33%,结合生长与材性性状分析结果,最终选择日5×兴9、日11×兴2这2个家系为杂种落叶松优良家系,家系遗传力为树高0.632,胸径0.807,木材密度0.460,遗传增益为树高0.139 5,胸径0.237 3,木材密度0.244 3。相关分析结果显示,木材密度与生长性状表现为正相关,纤维素质量分数与其它多数性状均表现为正相关,与木材密度相关达到显著水平,生长性状早晚相关均达到显著或极显著水平。

关键词：杂种落叶松变异分析家系选择相关分析高生长预测

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杂种落叶松家系变异分析与多性状联合选择

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东北林业大学学报 2016年第8期44卷 1-6页

作者：贾庆彬张含国张磊林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 哈尔滨150040

以黑龙江省铁力市丰林林场杂种落叶松家系试验林为研究对象,对生长性状、材性性状、生物量、碳储量进行调查分析,首先利用标准木数据进行生物量方程拟合,得到杂种落叶松家系生物量方程。变异分析结果显示:杂种落叶松家系生长性状、生物... 详细信息

以黑龙江省铁力市丰林林场杂种落叶松家系试验林为研究对象,对生长性状、材性性状、生物量、碳储量进行调查分析,首先利用标准木数据进行生物量方程拟合,得到杂种落叶松家系生物量方程。变异分析结果显示:杂种落叶松家系生长性状、生物量、碳储量存在较丰富的变异,材性性状变异相对较小。碳储量方面:日3×兴9、日5×长77-3、日11×兴2、兴5×兴9这4个家系变异较大。利用方差分析与多重比较等方法对杂种落叶松家系间差异性进行比较,结果显示:生物量、碳储量、木材密度家系间差异达到显著水平,碳储量方面,兴6×长6、兴7×日77-2、兴12×兴2、兴9×日76-2这4个家系相比其它家系表现优异,4个家系的平均值比总平均值高出18.82%,高出对照(CK)为20.74%,高出杂种混30.35%,高出长白落叶松小北湖与白刀山种源分别为35.40%和43.56%,高出兴安落叶松乌伊岭种源41.62%,高出长白落叶松自由授粉家系长73-18与长73-4分别为20.74%和30.35%。对杂种落叶松参试家系各性状值进行主成分分析,将生长、材性、碳储量等性状进行综合分析,多性状联合选择优良家系,最终选择兴6×长6、兴7×日77-2作为杂种落叶松优良家系。

关键词：杂种落叶松家系选择碳储量主成分分析

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毛果杨PtAREB1基因启动子的克隆及功能

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东北林业大学学报 2016年第4期44卷 18-24页

作者：王含魏明李成浩东北林业大学哈尔滨150040 林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学)

为了研究杨树ABF2同源基因的表达规律,从毛果杨基因组DNA中克隆出Pt AREB1基因上游一段1 800 bp序列。序列分析结果表明,该序列含有逆境胁迫响应元件TC-rich repeats、ABA应答元件ABRE和茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,Me JA)应答元件TGAC... 详细信息

为了研究杨树ABF2同源基因的表达规律,从毛果杨基因组DNA中克隆出Pt AREB1基因上游一段1 800 bp序列。序列分析结果表明,该序列含有逆境胁迫响应元件TC-rich repeats、ABA应答元件ABRE和茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,Me JA)应答元件TGACG-motif等胁迫相关元件。在序列分析的基础上,构建了Pt AREB1基因启动子驱动GUS报告基因的植物表达载体,利用农杆菌介导的花粉管通道法获得转基因拟南芥。结果表明Pt AREB1启动子可以在干旱、ABA、盐、Me JA和SA胁迫下,驱动GUS基因在转基因拟南芥的根、茎和叶中表达。说明Pt AREB1基因可能与干旱、高盐等胁迫应答紧密相关。

关键词：毛果杨 ABF转录因子 ABA 启动子拟南芥

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