检索结果-内蒙古大学图书馆

分子植物育种 2015年第7期13卷 1645-1652页

作者：张丽杰赵丽蒙陆秀君沈海龙沈阳农业大学林学院沈阳110866 东北林业大学林学院林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

为了建立水曲柳愈伤组织诱导和体胚发生体系,并为体胚发生分子机理研究提供有效培养系统,本研究以水曲柳成熟合子胚和未成熟合子胚的子叶和下胚轴为外植体,探讨了灭菌剂及其处理时间对外植体灭菌效果的影响和激素浓度对愈伤组织诱导和... 详细信息

为了建立水曲柳愈伤组织诱导和体胚发生体系,并为体胚发生分子机理研究提供有效培养系统,本研究以水曲柳成熟合子胚和未成熟合子胚的子叶和下胚轴为外植体,探讨了灭菌剂及其处理时间对外植体灭菌效果的影响和激素浓度对愈伤组织诱导和体胚发生的影响。结果表明:外植体处理试剂和消毒时间是10%Na Cl O处理1 min最为适宜;以MS1/2(MS所有成分均减半)为基本培养基,NAA 3 mg/L+BA1.5 mg/L为水曲柳未成熟合子胚子叶和下胚轴诱导愈伤组织和体胚发生的最佳激素组合,诱导率分别为6.5%和9.7%;NAA 5 mg/L+BA 2 mg/L为水曲柳成熟合子胚子叶与胚轴诱导愈伤组织和体胚发生的最佳激素组合,诱导率分别为29.3%和19.5%。研究结果补充和突破了前人研究只从水曲柳合子胚子叶获得体胚发生和只从叶柄获得有效愈伤组织增殖的结果,并为揭示体胚发生机理有效愈伤组织和体胚发生系统的建立奠定了基础。

关键词：水曲柳愈伤组织诱导体胚发生子叶下胚轴组织培养

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高温胁迫诱导对白桦悬浮细胞三萜积累及防御酶活性的影响

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生物技术通报 2015年第9期31卷 111-118页

作者：常志凯白祎杰董恒尹静詹亚光东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040 东北林业大学林木遗传育种与生物技术国家重点实验室哈尔滨150040

通过研究不同高温胁迫下白桦细胞的细胞活力,防御酶活性和总三萜含量的变化,确定诱导白桦细胞合成三萜的最适高温胁迫条件。35℃、40℃、45℃、50℃和55℃胁迫白桦细胞1、2和4 h,测定其细胞活力,防御酶(SOD、CAT和PAL)活性和总三萜含量... 详细信息

通过研究不同高温胁迫下白桦细胞的细胞活力,防御酶活性和总三萜含量的变化,确定诱导白桦细胞合成三萜的最适高温胁迫条件。35℃、40℃、45℃、50℃和55℃胁迫白桦细胞1、2和4 h,测定其细胞活力,防御酶(SOD、CAT和PAL)活性和总三萜含量。结果显示,45-55℃高温胁迫下,细胞活力显著下降,以50℃2 h处理下降最显著,是对照细胞活力的6.8%;SOD和PAL活性显著增加,以55℃4 h处理后24 h时SOD和PAL活性最高,分别较对照提高164.9%和159.6%;CAT活性受到抑制,以55℃2 h和4 h处理在12 h后取样最低。50℃处理2 h后24 h取样,细胞总三萜含量最高,浓度为76.66 mg/g,比对照提高105.6%。最终确定50℃胁迫2 h后24 h取样为利用高温胁迫诱导白桦悬浮细胞合成三萜类物质的最适温度胁迫条件。

关键词：白桦防御酶三萜温度胁迫

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白桦BplMYB46转录因子的原核表达和重组蛋白的纯化

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东北林业大学学报 2015年第10期43卷 1-5页

作者：国会艳刘志华胡萍贾园园张春蕊杨传平王玉成牡丹江师范学院牡丹江157012 林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学)

从白桦的转录组中发现一个MYB类转录因子Bpl MYB46,将其与拟南芥的MYB类转录因子进行氨基酸序列比对分析,并将其构建到原核表达载体p GEX-4T-2上,获得重组表达载体p GEX-4T-2-Bpl MYB46,然后导入原核表达菌株BL21中,利用异丙基-β-D-硫... 详细信息

从白桦的转录组中发现一个MYB类转录因子Bpl MYB46,将其与拟南芥的MYB类转录因子进行氨基酸序列比对分析,并将其构建到原核表达载体p GEX-4T-2上,获得重组表达载体p GEX-4T-2-Bpl MYB46,然后导入原核表达菌株BL21中,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导重组蛋白的表达。结果显示:Bpl MYB46属于R2R3-MYB类转录因子;在IPTG终浓度为0.4 mmol/L,30℃条件下诱导4 h后p GEX-4T-2-Bpl MYB46原核蛋白表达量最高,主要为包涵体形式;利用尿素梯度透析法和电洗脱法纯化蛋白,发现电洗脱法成功获得浓度和纯度较高的重组蛋白。

关键词：白桦 BplMYB46转录因子原核蛋白蛋白纯化

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水曲柳胚后熟时期MSAP分析

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南京林业大学学报(自然科学版) 2015年第3期39卷 39-44页

作者：丛建民陈凤清沈海龙李玉花张鹏杨玲白城师范学院生命科学学院东北林业大学林学院东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学生命科学学院

为研究水曲柳合子胚发育后熟时期的基因组表观调控模式,以7月上旬到9月中旬8个取材时期多年生水曲柳合子胚子叶为研究对象,通过基因组甲基化敏感扩增多态性分析,检测了各时期基因组甲基化变化。结果表明:水曲柳合子胚在不同发育时期可... 详细信息

为研究水曲柳合子胚发育后熟时期的基因组表观调控模式,以7月上旬到9月中旬8个取材时期多年生水曲柳合子胚子叶为研究对象,通过基因组甲基化敏感扩增多态性分析,检测了各时期基因组甲基化变化。结果表明:水曲柳合子胚在不同发育时期可检测到933;39条清晰的电泳条带,说明不同发育时期水曲柳合子胚甲基化差异不明显。进一步统计胞嘧啶甲基化模式及其变异模式发现,7月初基因组在CNG、CG/CNG位点下降的变异位点多于其他时期,表明在水曲柳合子胚发育过程中发生了较大规模的去甲基化事件。

关键词：水曲柳合子胚表观遗传基因组甲基化敏感扩增多态性(MSAP)

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水曲柳SOC1基因表达载体的构建及生物信息学分析

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西南林业大学学报（自然科学） 2015年第6期35卷 6-13页

作者：付德山朱珠崔丽婷詹亚光齐凤慧东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学) 黑龙江哈尔滨150040

为研究SOC1开花调控关键节点基因在水曲柳花时调控中的作用,从水曲柳中克隆获得了SOC1的编码区全长,序列分析表明:SOC1基因长654 bp,编码218个氨基酸,与金鱼草MADSbox转录因子DEFH68基因序列相似性最高,核苷酸相似性为78%;水曲柳SOC1具... 详细信息

为研究SOC1开花调控关键节点基因在水曲柳花时调控中的作用,从水曲柳中克隆获得了SOC1的编码区全长,序列分析表明:SOC1基因长654 bp,编码218个氨基酸,与金鱼草MADSbox转录因子DEFH68基因序列相似性最高,核苷酸相似性为78%;水曲柳SOC1具有MADS-box结构域和K-结构域,同时具有DNA结合位点和磷酸化作用位点,属于MADS家族转录因子。同时利用双酶切法成功构建了水曲柳SOC1基因植物表达载体pROKⅡ-35S∶∶SOC1。

关键词：水曲柳 SOC1 生物信息学表达载体构建

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5年生白桦杂种子代多点稳定性分析及优良家系选择

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北京林业大学学报 2015年第12期37卷 24-31页

作者：徐焕文刘宇李志新彭儒胜尚福强邹建军刘桂丰姜静东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室辽宁省杨树研究所辽宁省森林经营研究所吉林省林业科学研究院

本文以10个白桦杂种子代家系为材料,分别在辉南、凌海、丹东等3个试验点营造子代测定林,对5年生白桦树高和胸径等性状进行多地点联合分析。结果表明:树高性状在各地点间和各家系间以及家系与地点的交互作用上均达到差异显著水平(P<0.... 详细信息

本文以10个白桦杂种子代家系为材料,分别在辉南、凌海、丹东等3个试验点营造子代测定林,对5年生白桦树高和胸径等性状进行多地点联合分析。结果表明:树高性状在各地点间和各家系间以及家系与地点的交互作用上均达到差异显著水平(P<0.05);胸径仅在地点间达到显著水平(P<0.05)。辉南试验点生长较好的有201、203、204、316、318等家系;凌海试验点生长较好的有201、202、314、316、318、319等家系;丹东试验点生长较好的有202、315、318、319等家系。采用AMMI模型对参试家系的树高性状进行稳定性评价,结果显示:203、204、318、319、316属于高产稳产型家系;201、202属于高产非稳产型家系;320、315属于低产稳产型家系;314属于低产非稳产型家系。

关键词：白桦杂种子代多点试验遗传稳定性

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转TaLEA基因小黑杨无性系生长性状变异研究

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植物研究 2015年第4期35卷 540-546页

作者：刘殿昆刘梦然李志新汪广宇李莹郑密刘桂丰赵曦阳东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 黑龙江省大庆市绿化工程有限责任公司大庆163000

以6年生的10个转TaLEA基因和1个非转基因小黑杨无性系为材料,对其生长量、干形、叶片性状、皮孔性状等15个指标进行测定分析。方差分析与遗传参数计算结果表明：11个小黑杨无性系间各性状达极显著差异水平（P〈0.01）,各指标表型变异系... 详细信息

以6年生的10个转TaLEA基因和1个非转基因小黑杨无性系为材料,对其生长量、干形、叶片性状、皮孔性状等15个指标进行测定分析。方差分析与遗传参数计算结果表明：11个小黑杨无性系间各性状达极显著差异水平（P〈0.01）,各指标表型变异系数处于1.92%~39.98%,遗传变异系数与表型变异系数接近,重复力处于0.621~0.987,表明基因的转入对无性系各性状的生长有一定的影响,但这种影响主要由遗传因素控制。表型相关分析结果表明转基因小黑杨生长量与干形性状、叶片性状、皮孔性状均呈不同程度的相关性,表明多指标共同作用,控制植株生长发育;利用综合评定法,当入选率为10%,初步选出XL-1和XL-9等2个优良无性系,2个无性系的树高、胸径分别比CK高16.55%和15.38%,比平均值高13.38%和19.46%,遗传增益分别为12.18%和17.42%。本研究为转基因杨树的良种选育提供重要的理论依据。

关键词：小黑杨 TaLEA基因相关分析遗传增益

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过表达ThVHAc1对拟南芥V-ATPase各亚基表达的影响

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植物研究 2015年第5期35卷 692-695页

作者：杨桂燕郭宇聪赵玉琳张凤娇高彩球东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 西北农林科技大学林学院核桃研究中心杨凌712100

V-ATPase是多亚基复合蛋白,其c亚基负责V-ATPase的组装及质子通道的形成。本研究拟分析盐胁迫下过表达Th VHAc1基因拟南芥V-ATPase各亚基的表达,探讨过表达外源c亚基对拟南芥V-ATPase全酶响应盐胁迫表达模式的影响。实时荧光定量PCR结... 详细信息

V-ATPase是多亚基复合蛋白,其c亚基负责V-ATPase的组装及质子通道的形成。本研究拟分析盐胁迫下过表达Th VHAc1基因拟南芥V-ATPase各亚基的表达,探讨过表达外源c亚基对拟南芥V-ATPase全酶响应盐胁迫表达模式的影响。实时荧光定量PCR结果显示,盐胁迫下,过表达外源Th VHAc1拟南芥V-ATPase 28个亚基的表达发生了明显改变,且拟南芥5个c亚基的表达均不同程度的被抑制。表明外源Th VHAc1基因能影响拟南芥V-ATPase各亚基的表达以调节V-ATPase全酶的活性,但各亚基的表达模式与V-ATPase活性非简单对应关系,各亚基互相协调决定V-ATPase活性。

关键词：刚毛柽柳表达分析 c亚基 V-ATPase ThVHAc1

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施肥对白桦树生长及开花结实的影响

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西北林学院学报 2015年第2期30卷 116-120,195页

作者：刘福妹姜静刘桂丰林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学黑龙江哈尔滨150040 中国林科院热带林业实验中心广西凭祥532600

合理施肥是促进林木生长发育的有效措施。研究是在前期获得显著促进白桦开花结实的配方肥基础上,进一步研究配方肥和单施氮、磷、钾肥元素对白桦生长、开花结实及荧光参数的影响。结果表明,施氮肥与施配方肥的效果一致,均能显著促进白... 详细信息

合理施肥是促进林木生长发育的有效措施。研究是在前期获得显著促进白桦开花结实的配方肥基础上,进一步研究配方肥和单施氮、磷、钾肥元素对白桦生长、开花结实及荧光参数的影响。结果表明,施氮肥与施配方肥的效果一致,均能显著促进白桦的株高和地径生长,使白桦株高和地径分别较对照提高32%和36%;施配方肥和氮肥能使70%以上的白桦开花,而施用磷、钾肥的白桦开花率仅为3%和1%,对照没有开花;与对照相比,虽然施肥均明显地提高了白桦叶片Fv/Fm、ΦPSⅡ和qP等荧光参数,降低NPQ,但施氮肥效果和配方肥的效果更加明显,并且二者还能显著提高白桦叶片叶绿素含量。说明配方肥中的氮是促进白桦生长和开花结实的关键元素,在以生产木材为经营目的的丰产林中可以施加氮肥为主的肥料,在以生产良种为目的的白桦种子园中应该选用配方肥。

关键词：白桦施肥生长叶绿素荧光参数

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红松转录组SSR分析及EST-SSR标记开发

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林业科学 2015年第8期51卷 114-120页

作者：张振张含国莫迟张磊东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 中国林业科学研究院亚热带林业研究所杭州311400

【目的】红松已开发的分子标记缺乏共显性的遗传标记，尚不能满足分子标记辅助育种的需要。利用转录组数据开发 SSR标记目前仍然是较为经济高效的 DNA分子标记开发策略，本研究利用高通量测序技术开发红松 EST-SSR标记，掌握其在转录组... 详细信息

【目的】红松已开发的分子标记缺乏共显性的遗传标记，尚不能满足分子标记辅助育种的需要。利用转录组数据开发 SSR标记目前仍然是较为经济高效的 DNA分子标记开发策略，本研究利用高通量测序技术开发红松 EST-SSR标记，掌握其在转录组序列中的分布类型及特征，为红松的 SSR多样性分析及变异分析提供基础。【方法】利用 SSR检索程序从红松转录组41476条 Unigenes中筛选得到1757个 SSR 位点，并对 SSR 位点的数量、分布特征进行统计分析。设计合成101对 SSR引物，采用琼脂糖电泳初步检查和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离检测方法确定引物的多态性，并收集扩增产物，送测序验证，最终开发出16对 SSR引物。合成6对荧光引物，采用荧光标记技术对来自黑龙江省鹤岗、林口、铁力、苇河4个种子园的53份自由授粉子代进行遗传多样性分析。【结果】基于转录组序列开发出的 EST-SSR的分布频率（ SSR 的个数与总 Unigene 的数量比）为4.24%。单、二、三核苷酸重复单元分别占总SSR的46.90%，17.12%和34.66%； SSR重复单元的重复次数分布在5～24次之间。参试的101对引物中有21对引物扩增可检测出多态性位点，占引物总数的20.8%；重测序验证，有16对引物能够扩增出目标序列。6对荧光引物共检测出18个等位基因，多态性信息量（PIC）为0.0363～0.6674，平均为0.325。【结论】红松属于基因组序列比较庞大的裸子植物，本研究可扩增出多态性位点的引物重复单元以二、三核苷酸重复为主。所研究红松种子园子代属于中等多态性水平。本研究印证了利用红松转录组数据开发 SSR标记的可行性，同时采用荧光标记技术检测红松自由授粉子代材料，为红松种质资源的多样性水平分析及变异水平的研究提供基础。

关键词：红松转录组遗传多样性

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