检索结果-内蒙古大学图书馆

植物研究 2019年第2期39卷 287-293页

作者：颜斌武丹阳李慧玉东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

Brassinolide Enhanced Expression2(BEE2)基因属于bHLH转录因子家族,是调控油菜素内酯信号转导的上游调控因子。本研究通过RT-PCR技术克隆BpBEE2基因的全长cDNA序列,构建植物过表达及抑制表达载体,并通过农杆菌介导法进行白桦的遗传转... 详细信息

Brassinolide Enhanced Expression2(BEE2)基因属于bHLH转录因子家族,是调控油菜素内酯信号转导的上游调控因子。本研究通过RT-PCR技术克隆BpBEE2基因的全长cDNA序列,构建植物过表达及抑制表达载体,并通过农杆菌介导法进行白桦的遗传转化,对获得的转基因株系进行生长量及盐、旱胁迫分析,结果表明:获得了长度为1 080 bp的全长cDNA序列,成功构建了该基因的过表达及抑制表达载体,并获得了过表达和抑制表达的白桦株系。BpBEE2基因过表达白桦株系的苗高高于对照株系,而抑制表达株系的苗高低于对照株系。同时发现BEE2基因对盐、旱胁迫后对植株的鲜重也产生了影响。说明Bp BEE2可能参与了植物的生长发育过程,并且改善了植物的抗旱、耐盐性。

关键词：白桦 BpBEE2基因载体构建遗传转化抗旱耐盐

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拟南芥AtUNE12基因的耐盐功能初探

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植物研究 2020年第2期40卷 257-265页

作者：李子义贺子航卢惠君王玉成及晓宇东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

bHLH转录因子家族成员在植物生长发育、生理代谢及非生物胁迫响应过程中起重要作用。本研究选取拟南芥抗逆相关bHLH转录因子家族中AtUNE12基因为研究对象,对其进行耐盐功能初探。首先构建AtUNE12基因的植物过表达载体(pROKⅡ-AtUNE12),... 详细信息

bHLH转录因子家族成员在植物生长发育、生理代谢及非生物胁迫响应过程中起重要作用。本研究选取拟南芥抗逆相关bHLH转录因子家族中AtUNE12基因为研究对象,对其进行耐盐功能初探。首先构建AtUNE12基因的植物过表达载体(pROKⅡ-AtUNE12),通过农杆菌介导的浸花法转化拟南芥,利用qRT-PCR技术检测获得T3代AtUNE12过表达转基因植株。在盐胁迫下,分析过表达AtUNE12与野生型拟南芥长势、根长及鲜重;比较过表达AtUNE12与野生型植株的电解质渗透率、失水率、MDA含量、POD与SOD活性及H2O2含量,鉴定AtUNE12基因是否具有耐盐能力。结果表明:过表达AtUNE12基因降低了拟南芥植株的失水率、电解质渗透率及MDA含量,保护细胞膜结构的完整性;增强了POD与SOD活性,降低了拟南芥植株内的H2O2含量,进而增强拟南芥植株的ROS清除能力,从而提高拟南芥的耐盐能力。

关键词： bHLH转录因子 AtUNE12 拟南芥耐盐抗逆分析

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杨树SHMT基因家族分析及PtrSHMT9突变体创制

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植物研究 2020年第6期40卷 906-912页

作者：李冰程玉祥东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)在植物细胞一碳代谢途径上起着重要作用。我们识别毛果杨PtrSHMT家族有9个基因成员,eFP数据显示7个PtrSHMTs基因在多个组织内有转录表达,其中PtrSHMT9在木质部表达水平最高。进一步定量PCR和Aspwood检测显示,Pt... 详细信息

丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)在植物细胞一碳代谢途径上起着重要作用。我们识别毛果杨PtrSHMT家族有9个基因成员,eFP数据显示7个PtrSHMTs基因在多个组织内有转录表达,其中PtrSHMT9在木质部表达水平最高。进一步定量PCR和Aspwood检测显示,PtrSHMT9表达量在茎木质组织次生壁加厚阶段呈现高水平,这表明它可能参与杨树木材形成。用Cas9/gRNA基因编辑技术,制备PtrSHMT9被编辑产生的突变体,获得4个不同株系ptrshmt9敲除突变体。这些研究结果为深入探究树木SHMT及PtrSHMT9功能,提供了基础信息和遗传材料。

关键词：毛果杨 SHMT ptrshmt9突变体 Cas9/gRNA

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刚毛柽柳ThGRF2基因的克隆和渗透胁迫应答分析

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植物研究 2022年第6期42卷 1044-1051页

作者：吴静王媛媛王丹妮刘百超刘中原东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

14-3-3蛋白通常也称为通用调节因子(general regulatory factors,GRF),是一类丝氨酸和苏氨酸磷酸化结合蛋白,通过与其他转录因子或信号蛋白相互作用参与调节细胞内基础代谢、信号传导、参与植物生长发育以及环境胁迫应答等一系列生理过... 详细信息

14-3-3蛋白通常也称为通用调节因子(general regulatory factors,GRF),是一类丝氨酸和苏氨酸磷酸化结合蛋白,通过与其他转录因子或信号蛋白相互作用参与调节细胞内基础代谢、信号传导、参与植物生长发育以及环境胁迫应答等一系列生理过程。本研究从刚毛柽柳干旱转录组中克隆获得一条干旱胁迫差异表达的ThGRF2基因。ThGRF2基因CDS片段全长为786 bp,编码261个氨基酸。相对分子质量为29.40 kDa,理论等电点(pI)为4.76。将ThGRF2基因构建到pROK2过表达载体上,瞬时转化刚毛柽柳,渗透胁迫前后生理指标结果显示,渗透胁迫后ThGRF2过表达提高了转基因柽柳的叶绿素含量、SOD和POD活性,降低了丙二醛(MDA)含量、电导率(EL)和失水率,表明ThGRF2基因在刚毛柽柳渗透胁迫应答中起重要作用。为进一步探究刚毛柽柳ThGRF2基因的非生物胁迫耐受性功能奠定基础。

关键词：刚毛柽柳 14-3-3蛋白渗透胁迫生理指标

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白桦BpPIN3基因启动子序列及应答特性分析

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植物研究 2022年第4期42卷 592-601页

作者：陈坤方功桂穆怀志姜静东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

PIN蛋白家族作为植物中重要的生长素外排载体家族,在植物生长和发育过程中表现出广泛的生理效应。为了进一步了解Bp PIN3的功能,探究其在白桦(Betula platyphylla)发育过程中及其对不同激素信号和非生物胁迫的响应,采用生物信息学方法... 详细信息

PIN蛋白家族作为植物中重要的生长素外排载体家族,在植物生长和发育过程中表现出广泛的生理效应。为了进一步了解Bp PIN3的功能,探究其在白桦(Betula platyphylla)发育过程中及其对不同激素信号和非生物胁迫的响应,采用生物信息学方法分析白桦Bp PIN3启动子序列。以1年生和2年生白桦无性系苗木的根、茎、叶和顶芽为材料进行组织部位表达模式分析。以白桦幼苗为材料,用100μmol·L;生长素(IAA)、100μmol·L;赤霉素(GA;)、200μmol·L;脱落酸(ABA)和长光照条件下分别进行激素诱导和光胁迫处理,并取激素处理后0、2、4、8、16、24、48 h以及光胁迫后0、1、3、6,12、24、48、72 h时的白桦叶片和根提取RNA,利用q RT-PCR技术分析Bp PIN3基因的表达情况。结果显示:Bp PIN3启动子序列包含赤霉素、脱落酸、茉莉酸甲酯等不同类型的生长素响应元件,以及多个与逆境相关的顺式调控元件。Bp PIN3在不同生长年份白桦的多个组织部位都有表达,尤其在叶片中表达量较高,并且所有组织部位中Bp PIN3第二年的表达量均高于第一年。Bp PIN3基因在不同处理条件下,不同部位间的相对表达量的变化存在一定差异,IAA及GA能够诱导白桦叶片组织细胞中的Bp PIN3上调表达;而在ABA处理下除16、48 h外,Bp PIN3基因表现出与IAA处理下相反的表达模式。在根组织中,IAA、GA;及ABA均能诱导Bp PIN3的表达。在叶片组织中,遮光胁迫诱导了Bp PIN3基因的表达;在根组织中,随着处理时间的推移,12 h开始Bp PIN3基因的相对表达量均显著高于对照(0 h)。根据试验结果,推测Bp PIN3基因在白桦生长发育过程,以及IAA、GA;和ABA信号转导途径和植物光响应过程中发挥重要调控作用。

关键词：白桦 BpPIN3基因植物激素光响应

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瞬时遗传转化长白落叶松NAC基因植株抗旱性的研究

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植物研究 2020年第3期40卷 394-400页

作者：张磊熊欢欢曹庆赵佳丽张含国东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040

通过对长白落叶松转录组分析,克隆到1条NAC转录因子命名为LoNAC18,序列分析结果表明:基因全长1 101 bp,编码366个氨基酸,为不稳定亲水性蛋白。该基因瞬时遗传转化的长白落叶松植株在PEG模拟干旱胁迫条件下与对照相比,基因表达量上调,SOD... 详细信息

通过对长白落叶松转录组分析,克隆到1条NAC转录因子命名为LoNAC18,序列分析结果表明:基因全长1 101 bp,编码366个氨基酸,为不稳定亲水性蛋白。该基因瞬时遗传转化的长白落叶松植株在PEG模拟干旱胁迫条件下与对照相比,基因表达量上调,SOD、POD、可溶性蛋白、可溶性糖含量增加,MDA含量低于对照植株,说明LoNAC18基因在一定程度上参与调控长白落叶松应答PEG模拟干旱胁迫的过程,为进一步研究NAC基因在针叶树种胁迫应答中的功能与作用机制提供了参考依据。

关键词：长白落叶松瞬时遗传转化 NAC PEG

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裸层积处理方式和时间对红松种子萌发状态的影响

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南京林业大学学报(自然科学版) 2020年第4期44卷 37-46页

作者：王晓蕾崔晓坤张鹏沈海龙杨玲东北林业大学林学院林木遗传育种国家重点实验室(东北林业大学)

【目的】探讨不同裸层积处理方式和时间对红松(Pinus koraiensis Sieb. et Zucc.)种子形态发育、各部位抑制物生理活性以及萌发率的影响,并确定最佳裸层积处理条件。【方法】采用恒温、暖温转低温以及低温转日变温等条件下9种不同的裸... 详细信息

【目的】探讨不同裸层积处理方式和时间对红松(Pinus koraiensis Sieb. et Zucc.)种子形态发育、各部位抑制物生理活性以及萌发率的影响,并确定最佳裸层积处理条件。【方法】采用恒温、暖温转低温以及低温转日变温等条件下9种不同的裸层积处理方式,将新鲜成熟的红松种子置于人工控温环境中进行层积处理,暖温温度为20℃,低温温度为5℃,日变温温度为20℃/12 h+5℃/12 h,湿度控制在60%,层积时间持续20周,每4周取样测定种子胚长、胚率、胚质量比、萌发率以及中种皮和种仁抑制物生理活性。【结果】①层积结束时,暖温20周、日变温20周以及3种暖温转低温处理,胚长和胚率均显著增加;3种低温转日变温处理,日变温层积时间越长,胚长和胚率越大;低温20周处理种子胚长和胚率最小;经过20周层积处理,各处理胚质量比均比层积起始有所上升,层积结束时,暖温20周以及3种暖温转低温层积处理,胚质量比均超过5%,而其余处理胚质量比均低于5%。②在层积结束时,暖温20周、低温20周以及日变温20周处理种子基本不发芽,暖温8周转低温12周处理萌发率虽略低于暖温12周转低温8周处理,但其发芽指数显著大于暖温12周转低温8周处理,且其发芽时间最短。③层积结束时,中种皮浸提液原液抑制物活性明显减弱,但种仁浸提液原液抑制物活性依然较强。④相关分析显示,只有胚长和胚质量比与红松种子萌发率之间呈显著正相关关系,胚率以及抑制物活性与红松种子萌发率之间并无显著相关关系。【结论】裸层积暖温8周转低温12周处理的红松种子萌发效果最好,暖温处理有利于红松种子后熟生长,低温处理有利于生理休眠的解除。

关键词：红松种子休眠裸层积萌发变温

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白桦全同胞子代测定及优良家系早期选择

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北京林业大学学报 2017年第2期39卷 1-8页

作者：刘宇徐焕文滕文华姜静刘桂丰林木遗传育种国家重点实验室、东北林业大学林学院

开展种子园全同胞家系造林试验不仅能够选择出优良杂交亲本和杂交组合,而且也能加快种子园的改良进程。本文以白桦种子园中产种母树为试材,按测交系交配设计进行控制杂交,共获得20个杂交组合,在帽儿山试验点营造试验林,对6年生试验林各... 详细信息

开展种子园全同胞家系造林试验不仅能够选择出优良杂交亲本和杂交组合,而且也能加快种子园的改良进程。本文以白桦种子园中产种母树为试材,按测交系交配设计进行控制杂交,共获得20个杂交组合,在帽儿山试验点营造试验林,对6年生试验林各组合的树高、胸径和材积等性状进行调查分析。树高、胸径和材积生长量在不同母本子代间和不同杂交组合间均表现极显著的差异(P<0.01),胸径与材积性状在不同父本子代间也表现显著的差异(P<0.05)。根据多重比较结果分别进行了优良父本和优良母本的初选,同时,采用多目标决策法对参试的杂交组合进行多性状综合评价,将综合评价值大于0.80的前5位组合评选为优良杂交组合,入选率为25.00%,其中Q2和Q19家系为最优杂交组合。入选的优良杂交组合各性状均值分别较参试整体均值高3.85%、10.01%、20.82%,3个性状的遗传增益分别为2.90%、7.64%、16.22%。研究结果不仅为白桦全同胞子代选择提供理论依据,而且也为白桦高世代种子园的亲本选配提供参考。

关键词：白桦全同胞子代测定

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毛白杨种内杂交无性系苗期生长模型构建

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北京林业大学学报 2013年第5期35卷 15-21页

作者：赵曦阳张志毅东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室北京林业大学林木育种国家工程实验室

以50个毛白杨种内杂交无性系为材料,对无性系苗期苗高生长进行Logistic模型构建,探讨不同无性系苗期生长过程的变异情况。结果表明,毛白杨种内杂交无性系苗高生长呈"S"型曲线,利用Logistic方程进行拟合,拟合系数超过0.887。... 详细信息

以50个毛白杨种内杂交无性系为材料,对无性系苗期苗高生长进行Logistic模型构建,探讨不同无性系苗期生长过程的变异情况。结果表明,毛白杨种内杂交无性系苗高生长呈"S"型曲线,利用Logistic方程进行拟合,拟合系数超过0.887。方差分析结果表明,不同变异来源毛白杨种内杂交无性系苗高差异均达到显著水平(P<0.01)。毛白杨种内杂交无性系平均速生点为第176天,平均速生期持续时间为44 d,速生期平均苗高总生长量为31.43cm,速生期内苗高日生长平均值为0.72 cm。极值k与苗高年生长实测值呈极显著正相关,k值可以作为苗期苗高生长的评价指标。苗高最终生长量与速生期内平均生长量达极显著正相关,表明毛白杨苗期苗高生长与速生期平均生长量关系密切。

关键词：毛白杨 Logistic模型变异

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基于Cas9/gRNA创制毛果杨COBRA3基因突变体

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北京林业大学学报 2018年第4期40卷 10-15页

作者：崔永耀程玉祥东北林业大学林学院、林木遗传育种国家重点实验室

【目的】COBRA对植物生长发育具有重要作用,已有的研究表明,植物COBRA基因与其次生生长有关。为探究树木COBRA基因信息及部分基因功能,我们对毛果杨Ptr COBRA基因家族展开识别和分析性研究。【方法】分析Ptr COBRA家族成员关系时运用系... 详细信息

【目的】COBRA对植物生长发育具有重要作用,已有的研究表明,植物COBRA基因与其次生生长有关。为探究树木COBRA基因信息及部分基因功能,我们对毛果杨Ptr COBRA基因家族展开识别和分析性研究。【方法】分析Ptr COBRA家族成员关系时运用系统进化树,确定毛果杨Ptr COBRA家族基因的各组织转录表达时采用半定量RT-PCR,创制Ptr COBRA3基因突变体时使用Cas9/gRNA基因编辑策略,毛果杨遗传转化采用农杆菌介导组培幼苗茎段浸染法。【结果】我们识别毛果杨基因组上存在14个Ptr COBRA基因成员,进化树显示Ptr COBRA家族分成两个分支。半定量RT-PCR表明,Ptr COBRA3和Ptr COBRA11在毛果杨木质部高丰度、特异地转录表达,在木质化茎节中其转录水平也较高。基于Cas9/gRNA技术我们敲除了毛果杨Ptr COBRA3,获得4株ptrcobra3敲除突变体。ptrcobra3突变体植株表型:植株矮小,叶片细长且卷曲,茎干略有弯曲。【结论】Ptr COBRA3和Ptr COBRA11是Ptr COBRA家族中与毛果杨次生生长相关的主要成员;基因敲除遗传证据显示Ptr COBRA3基因参与毛果杨茎干次生生长,Ptr COBRA11与它存在功能的冗余。

关键词：毛果杨 PtrCOBRA3 基因突变体 Cas9/gRNA

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