检索结果-内蒙古大学图书馆

基于Kingfisher Flex系统树木叶片RNA的提取方法比较及优化

分子植物育种 2020年第9期18卷 3009-3017页

作者：何佳悦王莉贾翠蓉朱显亮王亚琴翁启杰周长品甘四明李发根中国林业科学研究院林木遗传育种国家重点实验室北京100093 中国林业科学研究院热带林业研究所热带林业研究国家林业局重点实验室广州510520

随着林木功能基因组学的发展,如何快速高效地提取高质量的核酸变得越来越重要。本研究基于Kingfisher Flex全自动磁珠提取纯化系统,以细叶桉叶片为材料,利用5种磁珠法RNA提取试剂盒(A/B/C/D/E)比较提取RNA的质量和纯度,筛选出试剂盒C为... 详细信息

随着林木功能基因组学的发展,如何快速高效地提取高质量的核酸变得越来越重要。本研究基于Kingfisher Flex全自动磁珠提取纯化系统,以细叶桉叶片为材料,利用5种磁珠法RNA提取试剂盒(A/B/C/D/E)比较提取RNA的质量和纯度,筛选出试剂盒C为最佳试剂盒。在试剂盒C默认提取程序基础上,利用正交设计L9(34),研究Kingfisher Flex全自动磁珠提取纯化系统上不同洗涤速度、洗脱速度及时间等机器参数对提取RNA的浓度和纯度的影响。正交试验结果表明,对提取RNA的浓度和纯度影响最大的机器参数是洗涤速度,正交试验最优程序组合下提取RNA的纯度稍优于试剂盒C,但是得率仅为试剂盒C的1/3,综合比较后确认试剂盒C默认程序为提取细叶桉叶片RNA的最优提取程序。另外利用试剂盒C也分别对降香黄檀、大果紫檀、油楠、檀香、黑木相思和柚木这六个树种的叶片RNA进行提取,结果表明提取出的RNA均满足cDNA建库以及转录组测序实验的要求。本研究建立了Kingfisher Flex全自动磁珠提取纯化系统上树木叶片RNA的高效提取方法,对树木叶片高通量RNA提取有重要的应用价值,并为其他树种在提取RNA程序上对相关参数进行优化和设置提供了参考。

关键词： Kingfisher Flex系统树木叶片 RNA提取磁珠法RNA提取试剂盒

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光照强度对不同欧美杨无性系生理生化特性的影响

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分子植物育种 2020年第11期18卷 3743-3750页

作者：王明援刘宁李波丁密张伟溪黄秦军中国林业科学研究院林业研究所林木遗传育种国家级重点实验室国家林业和草原局林木培育重点实验室北京100091

为研究不同欧美杨无性系对光强变化的响应机理,以6个欧美杨杂交无性系为试验材料,利用遮阴网进行光强控制,设置3个光强梯度(CK:100%自然光强;L1:55%自然光强;L2:20%自然光强),测定各处理下无性系的生理生化指标并对无性系进行综合评价... 详细信息

为研究不同欧美杨无性系对光强变化的响应机理,以6个欧美杨杂交无性系为试验材料,利用遮阴网进行光强控制,设置3个光强梯度(CK:100%自然光强;L1:55%自然光强;L2:20%自然光强),测定各处理下无性系的生理生化指标并对无性系进行综合评价。结果表明,随着光照强度的降低,‘11-21-8’、‘11-26-8’与‘11-32-1’无性系的可溶性糖含量、蛋白质含量和游离脯氨酸含量呈逐渐降低的趋势。‘11-26-4’的蛋白质含量及游离脯氨酸含量在L1处理下有最大值。从整体水平上看,L1及L2处理下无性系的细胞膜透性、丙二醛含量高于CK处理。无性系的过氧化物酶活性及超氧化物歧化酶活性在不同光强处理间呈现不同的变化趋势。‘11-26-4’、‘11-26-8’与‘11-26-9’无性系的过氧化物酶活性和超氧化物歧化酶活性在不同光强处理间均具有显著差异。无性系生理生化活性的隶属函数综合评价结果显示,在自然光强下‘11-21-8’无性系的生理生化活性最优,‘11-36-26’无性系在极度弱光条件下需较高的生理生化活性维持生长。本研究探究了不同无性系对光强变化的响应差异,为高光效杂交欧美杨无性系选育研究提供一定的参考。

关键词：欧美杨光照强度生理生化综合评价

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楸树叶绿体基因组密码子偏性分析

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南方农业学报 2021年第10期52卷 2735-2743页

作者：李凤辛静辛雅萱肖遥屈亚亚王军辉麻文俊辛培尧西南林业大学国家林业和草原局西南风景园林工程技术研究中心/西南地区生物多样性保育国家林业和草原局重点实验室昆明650224 中国林业科学研究院林业研究所/林木遗传育种国家重点实验室/国家林业和草原局林木培育重点实验室/楸树国家创新联盟北京100091

【目的】分析楸树叶绿体基因组密码子使用偏性,为楸树乃至梓属植物叶绿体基因组学、物种进化特征及遗传多样性分析等研究提供理论依据。【方法】利用Codon W 1.4.2及EMBOSS expiorer的cusp和chips软件对51个楸树叶绿体基因的编码区(CDS... 详细信息

【目的】分析楸树叶绿体基因组密码子使用偏性,为楸树乃至梓属植物叶绿体基因组学、物种进化特征及遗传多样性分析等研究提供理论依据。【方法】利用Codon W 1.4.2及EMBOSS expiorer的cusp和chips软件对51个楸树叶绿体基因的编码区(CDS)序列进行密码子相关参数、中性绘图、ENC-plot和PR2-plot等分析,并通过构建高、低表达偏性基因库,以ENC值和RSCU值为参考标准,最终筛选最优密码子。【结果】51个基因密码子的平均GCall含量为38.48%,密码子不同位置GC含量为:GC_(1)(47.03%)>GC_(2)(39.93%)>GC_(3)(28.09%),说明第3位的GC并非均匀分布;ENC为34.93~56.50,平均为46.87。GC2与GC1呈极显著正相关(P<0.01),而GC_(3)与GC_(1)和GC_(2)无显著正相关(P>0.05);ENC与GCall、GC_(1)、GC_(3)和N均呈显著正相关(P<0.05,下同);密码子数(N)与GC_(3)和ENC呈显著正相关。RSCU>1的密码子共有30个,其中,以A或U结尾的密码子有29个。中性绘图分析结果显示,GC_(3)与GC_(12)相关系数为0.0188,二者无显著相关性,回归系数为0.143。ENC-plot分析结果显示,大部分基因偏离了ENC预期标准曲线,少数分布在预期曲线附近;有7个密码子分布在GC3含量-0.05~0.15区间,其余区间共有44个密码子,而这44个基因离ENC标准曲线较远。PR2-plot分析结果显示,落在中线上的基因较少,平面图右下方的基因分布较多,表明在各碱基使用频率方面存在偏性,即T>A,G>C。各碱基使用频率存在偏性(T>A,G>C),说明基因组密码子的偏性更多受选择效应的影响。最终筛选出7个为最优密码子UUU、CUU、CCU、AAA、GAU、CGA和GGU。【结论】楸树叶绿体基因组密码子偏性较弱,偏好使用A或U结尾的密码子,主要受选择压力的影响,受突变等其他因素影响较小。

关键词：楸树叶绿体基因组密码子偏好性最优密码子

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复幼促进核桃不定根发生的DNA甲基化机制探讨

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西北植物学报 2020年第7期40卷 1135-1147页

作者：李莉宋晓波常英英张俊佩徐慧敏裴东林木遗传育种国家重点实验室国家林业局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所北京100091 中国林学会北京100091 河南省洛宁县林业局河南洛阳471700

该研究以核桃的复幼和成龄插穗为材料,通过甲基化修饰依赖性内切酶测序技术(MethylRAD-Seq),在全基因组水平上检测成龄与复幼插穗中DNA甲基化位点分布特征,进一步对复幼处理前后插穗中差异甲基化位点相关基因的表达情况进行分析。结果显... 详细信息

该研究以核桃的复幼和成龄插穗为材料,通过甲基化修饰依赖性内切酶测序技术(MethylRAD-Seq),在全基因组水平上检测成龄与复幼插穗中DNA甲基化位点分布特征,进一步对复幼处理前后插穗中差异甲基化位点相关基因的表达情况进行分析。结果显示:(1)复幼处理可显著降低核桃插穗的DNA甲基化水平。(2)功能富集分析结果显示,差异甲基化位点相关基因主要参与油菜素内酯信号转导、次级代谢产物生物合成和木质素生物合成等功能,参与光合作用、MAPK(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路、果糖和甘露糖代谢、cAMP(cyclic AMP,CAMP)信号途径和苯丙烷生物合成等代谢通路。(3)qRT-PCR分析结果显示,复幼处理前后,不定根发生的关键调控基因NAC1、ARF5、ARF6和WRKY22在复幼和成龄材料中具有不同的表达模式。研究认为,复幼处理降低了核桃插穗中基因组DNA的甲基化水平,进而影响不定根发生过程关键功能基因的表达,可能是复幼调控核桃不定根发生能力的重要途径。

关键词：核桃复幼不定根发育阶段转变 Methyl-RAD测序

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山茶‘赤丹’及其芽变品种花瓣中花青苷成分与花色的关系

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林业科学 2019年第10期55卷 19-26页

作者：李辛雷王佳童孙振元殷恒福范正琪李纪元中国林业科学研究院亚热带林业研究所杭州311400 林木遗传育种国家重点实验室/中国林业科学研究院林业研究所北京100091

【目的】研究山茶‘赤丹’及其芽变品种花瓣中花青苷成分与含量,结合花色表型分析,明确其花色形成的物质基础,揭示其花青苷成分与花色关系,为山茶花色芽变育种提供依据。【方法】按照CIE L^*a^*b^*表色系法测量山茶‘赤丹’及其芽变品... 详细信息

【目的】研究山茶‘赤丹’及其芽变品种花瓣中花青苷成分与含量,结合花色表型分析,明确其花色形成的物质基础,揭示其花青苷成分与花色关系,为山茶花色芽变育种提供依据。【方法】按照CIE L^*a^*b^*表色系法测量山茶‘赤丹’及其芽变品种花色,利用高效液相色谱-光电二极管阵列检测(HPLC-DAD)和超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)联用技术定性定量分析其花瓣中花青苷成分与含量,运用多元线性回归方法研究花青苷成分与花色之间的关系。【结果】山茶‘赤丹’及其芽变品种花瓣中共检测到7种花青苷,分别是矢车菊素-3-O-β-半乳糖苷(Cy3Ga)、矢车菊素-3-O-β-葡萄糖苷(Cy3G)、矢车菊素-3-O-[6-O-(E)-咖啡酰]-β-半乳糖苷(Cy3Ga E Caf)、矢车菊素-3-O-[6-O-(E)-咖啡酰]-β-葡萄糖苷(Cy3G E Caf)、矢车菊素-3-O-[6-O-(Z)-p-香豆酰]-β-葡萄糖苷(Cy3G Zp C)、矢车菊素-3-O-[6-O-(E)-p-香豆酰]-β-半乳糖苷(Cy3Ga Ep C)和矢车菊素-3-O-[6-O-(E)-p-香豆酰]-β-葡萄糖苷(Cy3G Ep C)。山茶‘玉丹’花瓣中未检测到花青苷,山茶‘金碧辉煌’中未检测到Cy3G E Caf。【结论】山茶‘赤丹’及其芽变品种花瓣的花色随其总花青苷及主要花青苷成分含量增大而加深;粉红色和红色花瓣中主要花青苷成分为Cy3G和Cy3G Ep C,黑红色花瓣中主要花青苷成分为Cy3G和Cy3Ga;随着花瓣中Cy3Ga和Cy3G比例的增大花色加深。Cy3G和Cy3G Ep C是决定山茶‘赤丹’及其芽变品种花色的主要花青苷,其含量的增大显著增加花瓣的红色程度。

关键词：山茶芽变花青苷花色超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱

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外源水杨酸对NaCl胁迫下白榆幼苗光合作用及离子分配的影响

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西北植物学报 2020年第3期40卷 478-489页

作者：甘红豪赵帅高明远阴文华郭光智褚建民中国林业科学研究院林业研究所国家林业和草原局林木培育重点实验室林木遗传育种国家重点实验室北京100091 潍坊市自然资源和规划局山东潍坊261041

以1年生白榆幼苗为研究对象,设置0、0.5、1.0和2.0 mmol·L^-1水杨酸(SA)与0、50、100和150 mmol·L^-1 NaCl处理组合,考察盐胁迫下白榆幼苗生物量、光合色素含量、光合作用参数及根叶离子含量、分配、运输的情况,探讨外源SA对N... 详细信息

以1年生白榆幼苗为研究对象,设置0、0.5、1.0和2.0 mmol·L^-1水杨酸(SA)与0、50、100和150 mmol·L^-1 NaCl处理组合,考察盐胁迫下白榆幼苗生物量、光合色素含量、光合作用参数及根叶离子含量、分配、运输的情况,探讨外源SA对NaCl胁迫下白榆幼苗耐盐生理特征的影响。结果表明:(1)NaCl胁迫显著抑制了白榆幼苗的生长、光合色素含量及光合能力,并破坏了白榆体内离子平衡。(2)喷施外源SA使盐胁迫下白榆幼苗的干重和根冠比均不同程度升高,0.5和2.0 mmol·L^-1 SA不同程度提高了50和100 mmol·L^-1 NaCl处理组幼苗叶片光合色素含量。(3)0.5 mmol·L^-1 SA显著提升了50 mmol·L^-1 NaCl处理组白榆幼苗的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr),1.0和2.0 mmol·L^-1 SA对150 mmol·L^-1 NaCl处理组幼苗净光合速率改善效果较好,外源SA对100 mmol·L^-1 NaCl处理组幼苗的光合作用参数无显著影响。(4)NaCl胁迫下,外源SA处理的白榆幼苗叶和根Na^+含量及Na^+/K^+、Na^+/Ca^2+和Na^+/Mg^2+显著降低,离子选择运输系数SK,Na、SCa,Na和SMg,Na升高,从而促进了幼苗K^+、Ca^2+和Mg^2+由根向叶片的转运;隶属函数分析发现对白榆幼苗叶和根中离子含量改善效果最好的SA浓度分别为1.0和2.0 mmol·L^-1。因此,适宜浓度的外源水杨酸能够有效改善NaCl胁迫下白榆幼苗的光合能力,有效调节白榆幼苗体内离子状态,从而增强白榆对NaCl胁迫的抗性。

关键词：水杨酸 NaCl胁迫白榆光合作用离子状态

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基于叶绿体基因组的单核苷酸多态位点的落叶松属(Larix Mill.)植物的分子鉴定新方法——以8个种/变种的分析为例

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植物学研究 2023年第4期12卷 227-239页

作者：李斌左云娟刘艳磊杨志荣靳晓白潘伯荣常青索志立中国林业科学研究院林业研究所北京中国林业科学研究院林木遗传和育种国家重点实验室北京中国科学院东南亚生物多样性研究中心云南勐腊中国科学院西双版纳热带植物园综合保护中心云南勐腊河北工程大学园林与生态工程学院河北邯郸中国科学院植物研究所国家植物标本馆北京国家植物园北京中国科学院新疆生态与地理研究所新疆乌鲁木齐中国科学院植物研究所系统与进化植物学国家重点实验室北京

高通量测序技术可低成本获得叶绿体全基因组序列,为落叶松属植物的精确鉴定提供了可能。我们利用叶绿体全基因组中的527个单核苷酸多态位点,作为分子性状,首次精准鉴定落叶松属8个种/变种,研制了分子分类检索表。单核苷酸多态位点存在... 详细信息

高通量测序技术可低成本获得叶绿体全基因组序列,为落叶松属植物的精确鉴定提供了可能。我们利用叶绿体全基因组中的527个单核苷酸多态位点,作为分子性状,首次精准鉴定落叶松属8个种/变种,研制了分子分类检索表。单核苷酸多态位点存在种间差异。喜马拉雅红杉(Larix himalaica W. C. Cheng & L. K. Fu)、新疆落叶松(L. sibirica Ledeb.)和欧洲落叶松(L. deciduas Mill.)的物种特有单核苷酸多态位点数量均较多,遗传分化较大。落叶松(原变种) (L. gmelinii (Rupr.) Kuzen. var. gmelinii)、黄花落叶松(L. gmelinii var. olgensis (A. Henry) Ostenf. & Syrach)、千岛落叶松(L. gmelinii var. japonica (Maxim. ex Regel) Pilg.)以及凯杨德落叶松(L. cajanderi Mayr)之间遗传差异较小。结果显示叶绿体基因组的单核苷酸多态位点信息,可用于落叶松属植物不同基因型的分子鉴定。本研究对于落叶松属植物种质资源的分类鉴定、保护和利用具有重要价值。

关键词：落叶松属叶绿体基因组单核苷酸多态位点植物鉴定

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广西大青山杉木人工林碳氮磷生态化学计量特征

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生态学报 2020年第4期40卷 1207-1218页

作者：胡小燕段爱国张建国杜海伦张雄清郭文福孙建军中国林业科学研究院林业研究所国家林业局林木培育重点实验室林木遗传育种国家重点实验室北京100091 南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京210037 中国林科院热带林业实验中心凭祥532600 中国林科院亚热带林业实验中心分宜336600

为研究杉木人工林生态系统植物、凋落物和土壤碳(C)、氮(N)、磷(P)生态化学计量特征的差异和相互关系,以广西大青山杉木密度试验林为研究对象,测定了5种初植密度下杉木人工林针叶、草本、凋落物和土壤的C、N、P含量及其比值。结果表明:... 详细信息

为研究杉木人工林生态系统植物、凋落物和土壤碳(C)、氮(N)、磷(P)生态化学计量特征的差异和相互关系,以广西大青山杉木密度试验林为研究对象,测定了5种初植密度下杉木人工林针叶、草本、凋落物和土壤的C、N、P含量及其比值。结果表明:针叶的C、N、P含量最高,凋落物次之,土壤最低。C∶N、C∶P表现为凋落物>针叶>草本>土壤,N∶P表现为凋落物>草本>针叶>土壤。其中针叶的N∶P均值为16.69,凋落物C∶N显著高于N发生释放的C∶N的临界值(30)。杉木人工林针叶和草本N、C∶N呈显著负相关关系,针叶和土壤的C∶N、N∶P,草本和凋落物P含量、C∶P均呈显著正相关关系,体现了杉木生态系统内的C、N、P在针叶、草本、凋落物和土壤之间相互转化和循环。南亚热带杉木人工林植物生长受P限制,凋落物分解慢,土壤有机质的矿化作用慢,养分循环能力低,因此在人工林抚育管理中,应保护林下植被,适当施肥,提高土壤肥力,维持杉木林长期生产力。

关键词：杉木化学计量特征植物凋落物土壤初植密度

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基于叶绿体基因组的单核苷酸多态位点的松属(松科)植物资源遗传多样性的分子鉴定新方法

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植物学研究 2024年第6期13卷 574-590页

作者：刘美辰郑勇奇李斌左云娟靳晓白杨志荣田宏郭明星索志立北京市食品检验研究院(北京市食品安全监控和风险评估中心) 北京中国林业科学研究院林业研究所北京中国林业科学研究院林木遗传和育种国家重点实验室北京中国科学院东南亚生物多样性研究中心云南勐腊中国科学院西双版纳热带植物园综合保护中心云南勐腊国家植物园北京中国科学院植物研究所植物标本馆北京内蒙古大青山国家级自然保护区管理局包头分局内蒙古包头汉中市茶业发展中心陕西汉中中国科学院植物研究所系统与进化植物学国家重点实验室北京

遗传多样性的精准鉴定是资源可持续利用的基础。我们利用松属的3个种的叶绿体基因组序列中的物种特有的535个单核苷酸多态位点作为分子性状首次编制分子鉴定检索表,供试样品得到成功鉴定。物种特有的单核苷酸多态位点的数量和核苷酸构... 详细信息

遗传多样性的精准鉴定是资源可持续利用的基础。我们利用松属的3个种的叶绿体基因组序列中的物种特有的535个单核苷酸多态位点作为分子性状首次编制分子鉴定检索表,供试样品得到成功鉴定。物种特有的单核苷酸多态位点的数量和核苷酸构成存在种间差异。马尾松Pinus massoniana Lamb. (252)的特有单核苷酸多态位点的数量最多,随后依次是赤松P. densiflora Siebold & Zucc. (175)和黑松P. thunbergii Parl. (108)。马尾松的特有单核苷酸多态位点中,T的比例(29.37%)最高,随后依次是C (25.79%)、A (22.62%)和G (22.22%),G的比例最低,总体上差异较小。黑松的特有单核苷酸多态位点中,T (36.11%)的比例较C (12.96%)的比例高2.7倍,较G (20.37%)的比例高1.7倍;A (30.56%)的比例略低于T的比例,是G的1.5倍,是C的2.3倍。赤松的特有单核苷酸多态位点中,T (31.43%)和A (28.57%)的比例明显高于C (18.86%)或G (21.14%)的比例。结果显示,叶绿体基因组的单核苷酸多态位点信息,可用于松属植物资源遗传多样性的分子鉴定。调查了中国过去120多年来松属植物标本的采集和馆藏现状,讨论了存在的问题和对策。本研究对于松属植物的分类修订、种质资源的保护与利用具有重要价值。Accurate identification of genetic diversity is essential for sustainable utilization of plant resources. In this paper, 535 single nucleotide polymorphism (SNP) sites in the chloroplast genomes of 3 species from the genus Pinus L. were used as molecular traits to identify the plant genetic resource diversity of this plant genus and to compile a molecular classification key for the first time. There are differences in aspects of amount and base composition of SNPs among the species. The amount of SNPs in Pinus massoniana Lamb. (252) is the highest, being higher than that in P. densiflora Siebold & Zucc. (175) or P. thunbergii Parl. (108). In P. massoniana, the proportion of T (29.37%) is the highest, larger than that of C (25.79), and that of A (22.62%) or G (22.62%) is the lowest. In P. thunbergii, the proportion of T (36.11%) is 2.7 times that of C (12.96%), and 1.7 times that of G (20.37%). A (30.56%) is a little bit smaller than that of T, being 1.5 times that of G, and 2.3 times that of C. In P. densiflora, the proportion of T (31.43%) or A (28.57%) is significantly higher than that of C (18.86%) or G (21.14%). Our results indicated that single nucleotide polymorphism sites from the chloroplast genomes could be used for distinguishing different species successfully in the genus Pinus. The status of Pinus plant specimens collected in the past over 120 years in Chin

关键词：松科松属遗传多样性叶绿体基因组单核苷酸多态位点分子鉴定

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红豆杉TcERF基因qRT-PCR体系构建与优化

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农业生物技术学报 2020年第6期28卷 1096-1104页

作者：蒋路园王旭张恺恺陈段芬邱德有杨艳芳河北农业大学园艺学院中国林业科学研究院林业研究所林木遗传育种国家重点实验室/国家林业局林木培育重点实验室河北科技师范学院园艺科技学院

红豆杉(Taxus sp.)能够产生天然抗癌药物紫杉醇(taxol),但含量极低,开发与利用之间存在严重矛盾。乙烯响应因子(APETALA2/ethylene-responsive factor, AP2/ERF)对红豆杉中紫杉醇的生物合成起到重要调控作用。研究组前期获得了1个红豆杉... 详细信息

红豆杉(Taxus sp.)能够产生天然抗癌药物紫杉醇(taxol),但含量极低,开发与利用之间存在严重矛盾。乙烯响应因子(APETALA2/ethylene-responsive factor, AP2/ERF)对红豆杉中紫杉醇的生物合成起到重要调控作用。研究组前期获得了1个红豆杉ERF转录因子基因(命名为TcERF),为了更好地研究该基因的功能,本研究以曼地亚红豆杉(Taxus×media)愈伤组织为实验材料,采用正交实验L9(34)方法,根据TcERF基因序列设计、组合出3对引物,从qRT-PCR反应体系、cDNA模板用量和引物用量等方面进行优化,分别筛选出该基因在5μL小反应体系及10、20μL常用体系下的最佳组合。结果表明,在本研究优化后的5μL体系下,TcERF和看家基因:3,5-表异构酶-4-还原酶(3,5-epimerase-4-reductase, TBC41)基因的扩增效率分别为90%和94%;在优化后的10μL下,TcERF和TBC41的扩增效率分别为94%和95%;在优化后的20μL下,TcERF和TBC41的扩增效率分别为102%和93%,以上各扩增体系回归系数R2均大于0.980。以茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MeJA)处理24 h的红豆杉愈伤组织为材料,利用优化前和优化后的10μL体系检测并比较TcERF基因的表达,发现两个体系下该基因表达水平存在显著性差异,充分表明建立并优化qRT-PCR实验体系的必要性和重要性。本研究建立的3个qRT-PCR反应体系均可以保证红豆杉TcERF基因和看家基因具有接近100%的扩增效率,为后续该基因转录水平的表达检测以及功能研究提供了实验条件和技术支撑。

关键词：红豆杉乙烯响应因子(ERF) 正交试验 qRT-PCR

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