检索结果-内蒙古大学图书馆

林业科学研究 2025年第2期38卷 116-126页

作者：钟姗辰张伟溪张冰玉苏晓华唐芳中国林业科学研究院林业研究所林木遗传育种全国重点实验室国家林业和草原局林木培育重点实验室北京100091 南京林业大学南方现代林业协同创新中心江苏南京210037

[目的]建立欧美杨‘渤丰3号’叶片高效的原生质体提取体系,为基因功能研究和基因编辑分子育种提供技术支撑。[方法]利用两种组分的酶解液和不同的预处理方法检测‘渤丰3号’杨叶片原生质体提取的效率和质量,优化原生质体纯化条件,以建... 详细信息

[目的]建立欧美杨‘渤丰3号’叶片高效的原生质体提取体系,为基因功能研究和基因编辑分子育种提供技术支撑。[方法]利用两种组分的酶解液和不同的预处理方法检测‘渤丰3号’杨叶片原生质体提取的效率和质量,优化原生质体纯化条件,以建立最适合‘渤丰3号’杨叶片高效的原生质体提取方法。[结果]结果表明,酶解液1(1.5%纤维素酶+0.75%离析酶+20 mmol·L^(-1)MES+10 mmol·L^(-1)KCl+0.6 mol·L^(-1)甘露醇+10 mmol·L^(-1)CaCl_(2)+1%BSA)酶解原生质体的效果优于酶解液2(0.8%纤维素酶+0.2%离析酶+5 mmol·L^(-1)MES+0.6 mol·L^(-1)甘露醇),酶解液1酶解得到的原生质体数量较多,且细胞较为完整,杂质少。酶解前的抽真空处理能略微提高原生质体的数量,但得到的原生质体与未抽真空处理的相比,细胞易碎、杂质更多;而换用更小空隙细胞筛对原生质体过滤的效果提升不明显。采用W5溶液直接洗涤可以获得最多的原生质体但有少许的杂质,在样品量有限的情况下可以使用该纯化方式。0.5 mol·L^(-1)蔗糖溶液纯化后的原生质体中杂质最少,但会损失较多的原生质体细胞;而0.75 mol·L^(-1)蔗糖溶液的纯化效果最好,既能减少杂质,又能获得较多的原生质体,适用于对原生质体纯度要求较高的情况。[结论]通过优化酶解条件、预处理步骤和纯化方法,本研究建立了欧美杨‘渤丰3号’叶片高效的原生质体提取体系。这一体系能够显著提高原生质体的提取效率和纯度,为后续的基因功能研究和分子育种实验提供了可靠的基础。

关键词：欧美杨 ‘渤丰3号’杨原生质体酶解原生质体纯化

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CRISPR系统及其衍生工具在植物中的应用前景

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分子植物育种 2025年第6期 1904-1911页

作者：邵莉颖李璐付琰芮杨达杨静莉东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室

CRISPR技术具有高效、准确等优点，为植物基因组的编辑和调控提供了有力的技术支持。对CRISPR技术的深入了解能够促进植物基因编辑的研究与应用。本研究介绍的CRISPR系统的结构和作用机理都略有不同，但均能够切割特定的靶序列并完成基... 详细信息

CRISPR技术具有高效、准确等优点，为植物基因组的编辑和调控提供了有力的技术支持。对CRISPR技术的深入了解能够促进植物基因编辑的研究与应用。本研究介绍的CRISPR系统的结构和作用机理都略有不同，但均能够切割特定的靶序列并完成基因编辑。在基因中引入DSB再进行修复的方式虽然便于研究，但是效率较低。新兴的衍生技术如碱基编辑、Prime Editors、DNA-free编辑、CRISPR的干扰和激活等均能有效避免该问题，并且特异性较高。目前，CRISPR技术在植物的遗传改良上的应用已相对成熟。此外，该技术在多重基因编辑、表观遗传调控、活细胞成像等领域中，也都具有极大的应用潜力。本研究还补充介绍了CRISPR基因编辑植物的检测方式，如PCR/RE法、Sanger测序、错配切割法、高分辨熔解曲线分析法、高通量测序。本研究主要介绍了CRISPR系统和衍生工具，并阐述了该技术在植物中的应用与检测方式，以期促进CRISPR技术更好地应用于植物基因编辑领域。

关键词： CRISPR技术 Cas蛋白基因编辑

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高密度条件下株型改良对春玉米根-冠特征及籽粒产量的影响

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中国农业科学 2025年第7期58卷 1296-1310页

作者：赵耀程前徐田军刘正王荣焕赵久然陆大雷李从锋中国农业科学院作物科学研究所/农业农村部作物生理生态重点实验室扬州大学农学院/江苏省作物遗传生理国家重点实验室培育点北京市农林科学院玉米研究中心/玉米DNA指纹及分子育种北京市重点实验室

【目的】增加种植密度是目前生产上提升玉米产量的主要农艺措施之一，但增密会导致群体结构不合理进而降低光照等有限资源利用效率，限制玉米产量潜力释放。基因编辑可以通过改良玉米株型来优化冠层结构使其适应密植进而增加产量，探明... 详细信息

【目的】增加种植密度是目前生产上提升玉米产量的主要农艺措施之一，但增密会导致群体结构不合理进而降低光照等有限资源利用效率，限制玉米产量潜力释放。基因编辑可以通过改良玉米株型来优化冠层结构使其适应密植进而增加产量，探明株型改良对春玉米根冠特性、籽粒产量及密度响应的影响及机制，可为春玉米的株型改良和密植高产提供理论与技术支撑。【方法】于2019和2020年在吉林省公主岭试验站进行为期2年的田间试验，以京科968和该品种的株型改良型品种京科Y968为试验材料，设置3个种植密度分别为6.0万株/hm2（D1）、7.5万株/hm2（D2）、9.0万株/hm2（D3）。研究相同遗传背景下株型对春玉米根-冠特征和产量的影响。【结果】在D1条件下，2种不同株型的春玉米品种间叶面积指数（LAI）、净光合速率（Pn）、光能利用效率（PUE）、干物质积累量及籽粒产量均无显著差异。但与京科968相比，京科Y968在D3条件下具有相对较高的主根条数（7.2%）和较大的根系干物质重量（6.0%），促进了营养物质的吸收；同时，在D2和D3条件下，京科Y968植株上部、中部和下部均具有相对较低的茎叶夹角和较高叶向值、叶面积指数。因此，D2和D3条件下灌浆中后期京科Y968穗位叶的Pn分别提高了7.5%和7.7%,PUE提高了4.3%和10.8%。结构方程模型分析表明，较高的叶向值和叶面积指数可正向直接地提升地上部干物质积累量，进而增加籽粒产量8.7%（D2）和11.2%（D3）。【结论】株型的改良使京科Y968在高密度条件下具有更高的主根条数和更大的根系干物质重，有利于地下部营养吸收，同时其叶片更为紧凑，光合速率显著提高，冠层光能利用率得到有效提升，根-冠结构更为合理，促进了地上部干物质积累，进而可以获得相对较高的籽粒产量。

关键词：春玉米种植密度株型改良根系特性冠层结构

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基于分子标记技术的马尾松和火炬松杂交子代鉴定与抗性评价

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林业科学研究 2025年第1期38卷 181-189页

作者：李俊刘青华高凯张振丰忠平周志春金国庆中国林业科学研究院亚热带林业研究所林木遗传育种全国重点实验室全省林木育种重点实验室国家林业草原马尾松工程技术研究中心浙江杭州311400 四川农业大学四川成都611130 淳安县林业总场有限公司姥山分场浙江杭州311700

[目的]早期快速精准鉴定马尾松和火炬松杂交子代,选育高抗马尾松×火炬松家系,以期更好地防控松材线虫病。[方法]本研究以马尾松为母本,火炬松为父本进行杂交,比对火炬松和油松基因组序列设计特异性引物,筛选马尾松与火炬松种间特... 详细信息

[目的]早期快速精准鉴定马尾松和火炬松杂交子代,选育高抗马尾松×火炬松家系,以期更好地防控松材线虫病。[方法]本研究以马尾松为母本,火炬松为父本进行杂交,比对火炬松和油松基因组序列设计特异性引物,筛选马尾松与火炬松种间特异性引物,对杂交后代进行扩增条带分析,建立马尾松×火炬松快速鉴定体系,通过接种松材线虫评价筛选高抗家系。[结果]从150对引物中筛选出12对引物组合用于鉴定,特异性强,稳定性好,且扩增率高。F1代29个家系共88个样本,其中81株鉴定为杂交植株,杂种率为92.05%;F2代21个家系共688个样本,其中279株为杂交植株,杂种率为40.55%;对马尾松×火炬松F2代13个家系进行抗性评价,获得5个高抗家系。[结论]12对引物组合可作为马尾松和火炬松杂交子代真实性鉴定,筛选获得5个高抗家系,为松材线虫病防控和抗性机理研究奠定基础。

关键词：马尾松×火炬松分子标记杂种鉴定抗性育种

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落叶松LkTCTP启动子的克隆及表达分析

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林业科学研究 2025年第2期38卷 48-57页

作者：黄雨芹张如鑫张馨元王俊臣齐力旺张立峰中国林业科学研究院林业研究所林木遗传育种全国重点实验室国家林业和草原局林木育种与培育重点实验室北京100091 河北农业大学生命科学学院河北保定071001 北京林业大学林学院北京100083

[目的]通过研究落叶松LkTCTP及其启动子的表达特性,揭示该基因在体细胞胚发育中的功能,评估它作为组成型启动子的可行性。[方法]利用染色体步移技术,获得LkTCTP启动子序列;采用qRT-PCR检测其在不同温度、激素处理下的表达模式;构建2.0 k... 详细信息

[目的]通过研究落叶松LkTCTP及其启动子的表达特性,揭示该基因在体细胞胚发育中的功能,评估它作为组成型启动子的可行性。[方法]利用染色体步移技术,获得LkTCTP启动子序列;采用qRT-PCR检测其在不同温度、激素处理下的表达模式;构建2.0 kb的LkTCTP启动子融合GUS载体,在模式植物及落叶松中研究其启动子活性及组织定位。[结果]获得了长度约为3.0 kb的LkTCTP启动子序列,生物信息学预测该区域含有多个与激素和抗逆相关的顺式作用元件,如AuxRR-core/TGA-element、TATC-box、TCA-element、LTR、MBS/TC-rich repeats等;高温(42、37℃)和激素(75μmol·L^(-1)ABA、50μmol·L^(-1)GA、50μmol·L^(-1)IAA、50μmol·L^(-1)SA)处理均可诱导LkTCTP上调;LkTCTP 2.0 kb启动子在拟南芥中驱动GUS呈组成型表达,也可用于目的蛋白的亚细胞定位研究;落叶松胚性细胞瞬时侵染6 d时表现出明显的GUS染色,引入P19蛋白可增加外源基因的表达强度;转基因体细胞胚苗的子叶、下胚轴以及根部均可观察到GUS染色,且子叶基部表达量明显高于叶尖,但在落叶松中的表达具有组织特异性。[结论]本文克隆了LkTCTP的启动子序列,发现其表达水平受温度、激素影响;在拟南芥幼苗及落叶松体细胞胚发育阶段均呈组成型表达,但在落叶松幼苗的表达具有组织特异性。上述结果表明LkTCTP参与落叶松体细胞胚发育,揭示了其启动子作为组成型启动子的应用潜力。本研究为开发适用于落叶松的基因工程元件提供理论依据。

关键词：落叶松 TCTP 启动子克隆体细胞胚表达分析

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桉树假单胞菌DF15对核桃黄曲霉的抑菌作用研究

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林业科学研究 2025年第2期38卷 165-172页

作者：昝译博代雅苹陆斌熊新武李旭吴迪牛犇裴东林木遗传育种全国重点实验室东北林业大学黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 林木遗传育种全国重点实验室国家林业和草原局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所北京100091 云南省林业和草原科学院云南昆明650204 中国农业科学院农产品加工研究所北京100193

[目的]筛选高效防控核桃黄曲霉毒素污染的生防细菌,实现核桃黄曲霉毒素污染绿色、低成本防控。[方法]利用核桃果仁筛选对黄曲霉有拮抗能力的生防细菌,对生防细菌进行形态学观察、分类学鉴定和生理生化特征检验,利用高效液相色谱分析该... 详细信息

[目的]筛选高效防控核桃黄曲霉毒素污染的生防细菌,实现核桃黄曲霉毒素污染绿色、低成本防控。[方法]利用核桃果仁筛选对黄曲霉有拮抗能力的生防细菌,对生防细菌进行形态学观察、分类学鉴定和生理生化特征检验,利用高效液相色谱分析该细菌对黄曲霉毒素的减毒效果。[结果]本研究从核桃果仁表面分离获得197株共生细菌,经过筛选获得38株具有拮抗黄曲霉能力的生防细菌,其中菌株DF15对核桃黄曲霉拮抗效果最佳。经分类学鉴定,确定菌株DF15为一株桉树假单胞菌(Pseudomonas eucalypticola)。该菌株能够破坏黄曲霉菌丝形态,使其呈现形态扭曲、断裂内陷以及表面毛躁粗糙的状态。菌株DF15对黄曲霉生长抑制率达到90.0%,经其处理后的核桃样品无黄曲霉素检出。此外,DF15发酵菌液能够显著抑制黄曲霉生长,但其发酵上清液对黄曲霉无明显抑制效果;该菌株具有定殖在核桃果仁表面的能力,且定殖量在第5 d时达到最大值,初步证实DF15在核桃上的有效定殖是抑制黄曲霉的关键。[结论]桉树假单胞菌DF15对核桃黄曲霉污染的防治效果显著,为核桃黄曲霉毒素污染的生物减毒提供了菌种资源,也为核桃黄曲霉毒素微生物减毒剂的研发提供理论支撑。

关键词：生物防治黄曲霉毒素桉树假单胞菌核桃定殖

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无侧枝切花菊组培快繁体系的建立

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北方园艺 2025年

作者：姚依岑王子钰丛天慈高健洲袁存权花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室园林环境教育部工程研究中心林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学园林学院

以无侧枝切花菊品种‘圣雪’为试材，以茎尖和单芽茎段两种材料为外植体，采用植物组织培养的方法，研究了不同外植体、不同浓度植物生长调节剂对切花菊生根和分化的影响，以期建立高效稳定的无侧枝切花菊组织培养再生体系，为解决我国... 详细信息

以无侧枝切花菊品种‘圣雪’为试材，以茎尖和单芽茎段两种材料为外植体，采用植物组织培养的方法，研究了不同外植体、不同浓度植物生长调节剂对切花菊生根和分化的影响，以期建立高效稳定的无侧枝切花菊组织培养再生体系，为解决我国市场中缺乏无侧枝切花菊种苗提供技术支撑。结果表明：茎尖比单芽茎段更适合作为外植体，其中4～5 mm的茎尖效果比2～3 mm的茎尖好。在茎尖的初代培养中，MS+0 mg·L-16-BA+0mg·L-1NAA更适宜用来直接促进茎尖萌发，MS+2.0 mg·L-16-BA+0.3 mg·L-1NAA与MS+1.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA 更适宜用来诱导丛生芽产生，MS+1.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1NAA和1/2 MS+0.1 mg·L-1NAA分别可以用作菊花的继代与生根培养基使用，增殖、生根效果均良好。最终建立了切花菊品种‘圣雪’高效稳定的组织培养再生体系，为无侧枝切花菊新品种的规模化繁育提供了理论指导和技术支持。

关键词：无侧枝切花菊组培再生茎尖单芽茎段

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基于MaxEnt模型预测青杄和大果青杄潜在适生区

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林业科学研究 2025年第1期38卷 169-180页

作者：刘逸夫王军辉谭灿灿袁艳超郭宇峰王志勇贾子瑞中国林业科学研究院森林生态环境与自然保护研究所北京100091 中国林业科学研究院林业研究所北京100091 林木遗传育种国家重点实验室北京100091 北华大学林学院吉林吉林132013

[目的]探究青杄和大果青杄不同时期潜在适生区分布与气候变化的关系,为多样性保护和物种推广应用提供理论依据。[方法]基于130个青杄、15个大果青杄现代分布点和19个气候变量,采用最大熵模型(MaxEnt)模拟青杄和大果青杄在末次冰盛期(LGM... 详细信息

[目的]探究青杄和大果青杄不同时期潜在适生区分布与气候变化的关系,为多样性保护和物种推广应用提供理论依据。[方法]基于130个青杄、15个大果青杄现代分布点和19个气候变量,采用最大熵模型(MaxEnt)模拟青杄和大果青杄在末次冰盛期(LGM)、全新世中期(MH)、当代和未来2个时期在高排放场景(RCP8.5)、低排放场景(RCP2.6)的潜在适生区变化规律。[结果]MaxEnt模型对青杄和大果青杄的模拟具有较高的精度。等温性、温度季节性变化方差、最暖季度平均温度和最冷季度平均温度是影响青杄适生区分布的关键气候因子,昼夜温差月均值、温度季节性变化方差和最干季度平均温度是影响大果青杄适生区分布的关键气候因子。青杄当代适生区总面积约为103.11万km^(2),大果青杄约为17.25万km^(2)。在LGM和MH时期的青杄适生区总面积分别为当代的108.87%和79.12%,大果青杄则分别是161.58%和98.96%。青杄在RCP2.6-2050s、RCP2.6-2070s、RCP8.5-2050s和RCP8.5-2070s情景的高度适生区面积较当代增加了7.62%、15.58%、50.71%和53.11%;而大果青杄高度适生区面积较当代分别减少了53.29%、51.06%、58.07%和83.44%。[结论]相比降水因子,温度对青杄和大果青杄潜在分布区影响更大。青杄和大果青杄适生区总面积从LGM至MH时期再到当代,呈现出先减少后增加的趋势。未来气候情景下青杄高度适生区呈现扩张趋势,大果青杄高度适生区呈现收缩趋势,濒临灭绝,较青杄更易受到气候变化影响,尤其是在RCP8.5情景下。

关键词：潜在适生区气候变化最大熵模型青杄大果青杄

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‘京枣39’叶片遗传转化体系的建立

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华中农业大学学报 2025年第1期44卷 43-49页

作者：马灵袁轶杨爽高艺陈学勋焦立军刘巍巍薄文浩庞晓明林木遗传育种全国重点实验室/林木育种与生态修复国家工程研究中心/北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 内蒙古自治区赤峰市敖汉旗双井林场赤峰024300

为建立‘京枣39’高效遗传转化体系,以‘京枣39’叶片为外植体进行遗传转化,探究卡那霉素(kanamycin,Kan)质量浓度、头孢噻肟(cefotaxime, Cef)和特美汀(timentin, Tim)抑菌质量浓度、预培养时间、不同菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮(a... 详细信息

为建立‘京枣39’高效遗传转化体系,以‘京枣39’叶片为外植体进行遗传转化,探究卡那霉素(kanamycin,Kan)质量浓度、头孢噻肟(cefotaxime, Cef)和特美汀(timentin, Tim)抑菌质量浓度、预培养时间、不同菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮(acetosyringone, AS)浓度及共培养时间对‘京枣39’叶片转化率的影响。结果显示‘,京枣39’叶片最佳遗传转化条件为,5 mg/L Kan选择压,50 mg/L Cef、250 mg/L Tim抑菌质量浓度,预培养4 d,农杆菌菌液OD600 nm值为0.6,侵染时间20 min,共培养基添加200μmol/L AS,共培养4 d。荧光检测和PCR试验证实外源目的基因已成功整合到‘京枣39’基因组中,实现了农杆菌介导的‘京枣39’叶片的遗传转化。

关键词：根癌农杆菌遗传转化 ‘京枣39’ 叶片抗性筛选

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无侧枝切花菊组培快繁体系的建立

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北方园艺 2025年第8期 8-17页

作者：姚依岑王子钰丛天慈高健洲袁存权花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室园林环境教育部工程研究中心林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学园林学院北京100083

以无侧枝切花菊品种‘圣雪’为试材,以茎尖和单芽茎段2种材料为外植体,采用植物组织培养的方法,研究了不同外植体、不同浓度植物生长调节剂对切花菊生根和分化的影响,以期建立高效稳定的无侧枝切花菊组织培养再生体系,为解决我国市场中... 详细信息

以无侧枝切花菊品种‘圣雪’为试材,以茎尖和单芽茎段2种材料为外植体,采用植物组织培养的方法,研究了不同外植体、不同浓度植物生长调节剂对切花菊生根和分化的影响,以期建立高效稳定的无侧枝切花菊组织培养再生体系,为解决我国市场中缺乏无侧枝切花菊种苗提供参考依据。结果表明:茎尖比单芽茎段更适合作为外植体,其中4~5 mm的茎尖效果比2~3 mm的茎尖好。在茎尖的初代培养中,MS+0 mg·L^(-1)6-BA+0 mg·L^(-1)NAA更适宜用来直接促进茎尖萌发,MS+2.0 mg·L^(-1)6-BA+0.3 mg·L^(-1)NAA与MS+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.1 mg·L^(-1)NAA更适宜用来诱导丛生芽产生,MS+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.1 mg·L^(-1)NAA和1/2MS+0.1 mg·L^(-1)NAA分别可以用作菊花的继代与生根培养基使用,增殖、生根效果均良好。最终建立了切花菊品种‘圣雪’高效稳定的组织培养再生体系。

关键词：无侧枝切花菊组培再生茎尖单芽茎段

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