检索结果-内蒙古大学图书馆

大鼠视交叉上核与松果体中Clock基因转录的昼夜节律性及不同光反应性(英文)

生理学报 2006年第4期58卷 359-364页

作者：王国卿傅春玲李建祥杜玉珍童建苏州大学医学院基础医学系生理学教研室苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室苏州215123

本研究旨在观察和比较视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN)与松果体(pineal gland,PG)中Clock基因内源性昼夜转录变化规律以及光照对其的影响。Sprague-Dawley大鼠在持续黑暗(constant darkness,DD)和12 h光照：12 h黑暗交替(12 hour- light：12 hour-dark cycle,LD)光制下分别被饲养8周(n=36)和4周(n=36)后,在一昼夜内每隔4 h采集一组SCN和PG组织(n=6),提取总RNA,用竞争性定量RT-PCR测定不同昼夜时点(circadian times,CT or zeitgeber times,ZT)各样品中Clock基因的mRNA相对表达量,通过余弦法和Clock Lab软件获取节律参数,并经振幅检验是否存在昼夜节律性转录变化。结果如下：(1)SCN中Clock基因mRNA的转录在DD光制下呈现昼低夜高节律性振荡变化(P＜0．05),PG中Clock基因的转录也显示相似的内源性节律外观,即峰值出现于主观夜晚(SCN为CT15,PG为CT18),谷值位于主观白天(SCN为CT3,PG为CT6)(P＞0．05)。(2) LD光制下SCN中Clock基因的转录也具有昼夜节律性振荡(P＜0．05),但与其DD光制下节律外观相比,呈现反时相符律变化(P＜0．05),且其表达的振幅及峰值的mRNA水平均增加(P＜0．05),而PG中Clock基因在LD光制下转录的相应节律参数变化却恰恰相反(P＜0．05)。(3)在LD光制下,光照使PG中Clock基因转录的节律外观反时相于SCN(P＜0．05),即在SCN和PG的峰值分别出现于光照期ZT10和黑暗期ZT17,谷值分别位于黑暗期ZT22和光照期ZT5。结果表明,Clock基因的昼夜转录在SCN和PG中存在同步的内源性节律本质,而光导引在这两个中枢核团调节Clock基因昼夜节律性转录方面有着不同的作用。

关键词： Clock基因昼夜节律光照视交叉上核松果体

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大鼠松果体Clock基因和芳烷脘N-乙酰基转移酶基因的昼夜节律性表达及光照影响

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生理学报 2005年第1期57卷 97-102页

作者：王国卿杜玉珍童建苏州大学医学院基础医学系生理学教研室苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室苏州215007

探讨12h光照、12h黑暗交替(12h-light:12h-darkcycle,LD)及持续黑暗(constantdarkness,DD)光制下松果体Clock基因和芳烷脘N-乙酰基转移酶基因(arylalkylamineN-acetyltransferasegene,NAT)是否存在昼夜节律性表达及其光反应变化。Sprague-Dawley大鼠在LD和DD光制下分别被饲养4周(n=36)和8周(n=36)后,在一昼夜内每隔4h采集一组松果体组织(n=6),提取总RNA,用竞争性定量RT-PCR测定不同昼夜时点样品中Clock及NAT基因的mRNA相对表达量,通过余弦法和ClockLab软件获取节律参数,并经振幅检验是否存在昼夜节律。结果如下:(1)在DD或LD光制下,松果体Clock和NAT基因mRNA的表达均呈现夜高昼低的节律性振荡(P<0.05)。(2)与DD光制下比较,LD光制下松果体Clock和NAT基因的表达振幅及峰值相的mRNA水平均降低(P<0.05)。(3)在DD或LD光制下,Clock和NAT基因之间显示相似的节律性表达(P>0.05)。结果表明,Clock和NAT基因在松果体中存在同步的内源性昼夜节律表达,光照作用可使其表达下调。

关键词： Clock基因 NAT基因昼夜节律光照松果体

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中国西南城乡妇女孕前体重及孕期增重评价研究

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卫生研究 2014年第4期43卷 546-549页

作者：代正燕李鸣芮溧孙晓红庞学红周岚曾果四川大学华西公共卫生学院营养食品卫生与毒理学系成都610041 昆明医学院公共卫生学院营养与食品科学教研室贵阳医学院公共卫生学院营养与食品科学教研室

目的评价中国西南地区城乡妇女孕前体重及孕期增重状况。方法采用分层随机整群抽样法选取昆明、贵阳和成都地区城乡3391名6～24月龄婴幼儿母亲为研究对象，通过问卷调查收集其孕前身高、孕前体重、产前体重及孕龄等信息，依据WHO成人BM... 详细信息

目的评价中国西南地区城乡妇女孕前体重及孕期增重状况。方法采用分层随机整群抽样法选取昆明、贵阳和成都地区城乡3391名6～24月龄婴幼儿母亲为研究对象，通过问卷调查收集其孕前身高、孕前体重、产前体重及孕龄等信息，依据WHO成人BMI分类标准和美国IOM孕期增重推荐值（2009）评价孕前体重和孕期增重。结果孕前BMI平均为（20．3±2．4），孕前体重正常、消瘦和超重肥胖率分别为72．7％、24．1％和3．2％。孕期增重平均为（14．9±6．0）kg，城市（16．2±5．9）kg高于农村（13．5±5．7）kg（P〈0．05）；孕期增重适宜、不足和过多率分别为35．3％、31．1％和33．3％；孕期增重过多率城市（40．9％）高于农村（26．1％）（P〈0．05）；孕期增重不足率农村（41．4％）高于城市（20．9％）（P〈0．05）；23岁以下年龄组孕期增重不足率较高，24～34岁年龄组孕期增重过多率较高。结论中国西南城乡妇女孕前体重不足和孕期增重问题非常突出。

关键词：孕前体重孕期增重 BMI

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低剂量氢醌对大鼠骨髓间充质干细胞生物学性状及PARP-1表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2012年第2期38卷 216-220页

作者：高羽亭刘林华黄明元梁海荣范洪学唐焕文吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室吉林长春130021 广东医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室广东东莞523808 广东医学院公共卫生学院实验中心广东东莞523808

目的:探讨低剂量氢醌(HQ)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学性状及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)基因表达的影响,阐明低剂量HQ对骨髓的毒效应。方法:磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0μmol... 详细信息

目的:探讨低剂量氢醌(HQ)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)生物学性状及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)基因表达的影响,阐明低剂量HQ对骨髓的毒效应。方法:磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0和10.0μmol·L-1HQ染毒大鼠BMSCs为处理组。应用Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞活力和细胞增殖能力,通过磷脂结合蛋白(Annexin V)/碘化丙啶(PI)标记的流式细胞技术检测细胞凋亡,用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PARP-1基因表达的改变。结果:与PBS对照组比较,各剂量组细胞增殖能力明显提高(P<0.05);染毒48 h后,5.0和10.0μmol·L-1HQ组细胞的凋亡率均明显降低(P<0.05);染毒48 h后,2.5、5.0和10.0μmol·L-1HQ组细胞PARP-1表达量分别为对照组0.92、0.56(P<0.05)和0.45倍(P<0.05)。结论:低剂量HQ能抑制大鼠BMSCs凋亡和PARP-1基因表达,促进细胞增殖。

关键词：氢醌骨髓间充质干细胞聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1 细胞凋亡细胞增殖大鼠

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松果体昼夜节律生物钟分子机制的研究进展

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生理科学进展 2004年第3期35卷 210-214页

作者：王国卿童建苏州大学医学院生理学教研室苏州215007 苏州大学放射医学与公共卫生学院卫生毒理学教研室苏州215007

在各种非哺乳类脊椎动物中 ,松果体起着中枢昼夜节律振荡器的作用。近来 ,在鸟类松果体中相继发现了几种钟基因 ,如Per、Cry、Clock和Bmal等 ,其表达的时间变化规律与哺乳类视交叉上核 (SCN)的非常相似。钟的振荡由其自身调控反馈环路... 详细信息

在各种非哺乳类脊椎动物中 ,松果体起着中枢昼夜节律振荡器的作用。近来 ,在鸟类松果体中相继发现了几种钟基因 ,如Per、Cry、Clock和Bmal等 ,其表达的时间变化规律与哺乳类视交叉上核 (SCN)的非常相似。钟的振荡由其自身调控反馈环路的转录和翻译组成 ,鸟类松果体和哺乳类SCN似乎具有共同的钟振荡基本分子构架 ;若干钟基因产物作为正向或负向调节子影响钟的振荡 ;昼夜性的控时机制同时也需要翻译后事件的参与。这些过程对钟振荡器的稳定性和

关键词：松果体昼夜节律生物钟分子机制非哺乳类脊椎动物

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TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定

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四川大学学报（医学版） 2003年第1期34卷 55-57页

作者：雷毅雄 Pius Joseph 刘玉清 Tong-manOng 广州医学院预防医学教研室广州510182 MolecularEpidemiologyLaboratory ToxicologyandMolecularBiologyBranchNationalInstituteforOccupationalSafetyandHealth 四川大学华西公共卫生学院卫生毒理学教研室

目的　构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株并对其构建的细胞株进行鉴定。方法　采用磷酸钙介导转染技术和 G4 18细胞筛选法 ,以 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO为表达载体 ,构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株 ;并应用 Western Blot技术对转... 详细信息

目的　构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株并对其构建的细胞株进行鉴定。方法　采用磷酸钙介导转染技术和 G4 18细胞筛选法 ,以 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO为表达载体 ,构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株 ;并应用 Western Blot技术对转基因表达产物进行分析与鉴定。实验设计分无转染组、载体转染组和目的基因转染组。结果　在 7株转染的 CHO细胞株中 ,有 3株具有高效稳定表达的 TIF3编码蛋白质 ;在 4株转染的 COS7细胞株中有 2株同样具有高效稳定的 TIF3编码蛋白质表达。结论　本研究成功地构建了 3株 TIF3转基因 CHO细胞株和 2株 TIF3转基因 COS7细胞株。

关键词： TIF3cDNA 稳定转染 CHO细胞 COS7细胞 Western Blot

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谷胱甘肽硫转移酶P1基因DNA甲基化、mRNA和蛋白表达与燃煤污染型地方性砷中毒关系探讨

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中华地方病学杂志 2013年第1期32卷 7-12页

作者：杨婷婷张爱华黄晓欣董学新贵阳医学院公共卫生学院毒理学教研室 550004 解放军第四十四医院

目的探讨谷胱甘肽硫转移酶P1（GSTPl）基因启动子区DNA甲基化、mRNA和蛋白表达与砷中毒的关系。方法123例砷中毒患者来自贵州省兴仁县交乐村燃煤污染型地方性砷中毒病区，按地方性砷中毒诊断标准（WS／T211-2001），其中轻度42例、中度4... 详细信息

目的探讨谷胱甘肽硫转移酶P1（GSTPl）基因启动子区DNA甲基化、mRNA和蛋白表达与砷中毒的关系。方法123例砷中毒患者来自贵州省兴仁县交乐村燃煤污染型地方性砷中毒病区，按地方性砷中毒诊断标准（WS／T211-2001），其中轻度42例、中度41例，重度40例。在距病区约13km的非砷暴露村．选择47例正常健康人作为对照。根据知情同意的原则，采集被调查者的外周血，用PCR法检测外周血GSTPl基因启动子区DNA甲基化，用荧光实时定量PCR法检测GSTPlmRNA表达。取自愿手术治疗的53例砷中毒患者的皮肤病理标本，其中一般病变28例、癌前病变20例、癌变5例，以病理学诊断无异常的15例非肿瘤手术患者的皮肤组织为对照组。采用免疫组织化学（IHC）法检测皮肤组织中GSTPl蛋白的表达。结果在按病情分组中，外周血GSTPl基因DNA甲基化阳性率轻（28．57％，12／42）、中（57．10％，23／41）、重度（65．00％。26／40）砷中毒组与对照组（6．38％，3／47）比较差异有统计学意义（x。值分别为7．792、26．000、33．412，P均〈0．01）；在按皮肤病理诊断分组中，GSTPl基因DNA甲基化阳性率一般病变（21．43％，6／28）、癌前病变（50．00％，10／20）、癌变组（80．00％，4／5）与对照组（6．67％，1／15）比较差异有统计学意义（x。值分别为3．562、7．468、10．756，P均〈O．05）。GsTPl基因DNA甲基化阳性率随砷中毒患者病情及皮肤病理损害程度加重而升高（趋势x。=38．239、x。=13．659，P均〈0．01）。与对照组（0．18426）比较，中（0．08777）、重度（0．05693）砷中毒组外周血GSTPlmRNA表达显著降低（P均〈0．01），其中重度砷中毒组低于中度砷中毒组（P〈0．01）；与对照组（0．33845）、一般病变组（0．27674）比较，癌前病变组（0．10481）、癌变组（0．04370）GSTPlmRNA表达显著降低（P均〈0．01），其中癌变组显著低于癌前病变组（P〈0．01）。皮肤组织中GSTPl蛋白阳性表达率组间比较差异有统计学意义（x2=20．948，P〈0．05），其中癌前病变组（65．00％，13／20）、癌变组（40．00％，2／5）与对照组（100．00％，15／15）比较差异有统计学意义（x2=12．183、11．778，P均〈0．01）。皮肤病损程度与GSTPl蛋白表达强度经Spearman等级相关分析，呈负相关关系（r=-0．520，P〈0．05）。按GSTPl基因DNA甲基化分组，GSTPlmRNA和蛋白表达阳性率与非甲基化组（0．18707、95．74％）比较，甲基化组（0．03840、57．14％）显著降低（Z=9．032，P〈0．01；x2=23．134，P〈0．01）。结论砷中毒可通过导致人体GSTPl基因启动子区DNA甲基化，进而抑制其mRNA和蛋白表达，GSTPl基因在砷致病或致癌过程中起重要作用。

关键词：砷中毒煤谷胱甘肽硫转移酶P1 DNA甲基化转录基因表达

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苯和甲醛致细胞氧化损伤的联合作用初步探讨

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环境与健康杂志 2009年第3期26卷 218-219页

作者：欧超燕孔璐赵进顺桂林医学院卫生毒理学教研室广西桂林541004 东南大学公共卫生学院江苏南京210009

目的探讨苯与甲醛致细胞氧化损伤的联合作用。方法苯、甲醛染毒细胞24h后,测其谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活力。各组甲醛的浓度分别为0、0、0、0.31975、0.31975、0.31975、0.6395、0.6395、0.6395μg/ml,相... 详细信息

目的探讨苯与甲醛致细胞氧化损伤的联合作用。方法苯、甲醛染毒细胞24h后,测其谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活力。各组甲醛的浓度分别为0、0、0、0.31975、0.31975、0.31975、0.6395、0.6395、0.6395μg/ml,相应组别苯的浓度分别为0、0.392、0.784、0、0.392、0.784、0、0.392、0.784mg/ml。中国仓鼠肺成纤维细胞株(CHL)中加入不同浓度的苯、甲醛作用24h后,随浓度的增高,细胞GSH水平降低,MDA含量升高,SOD活力降低,且均呈剂量-反应关系(P<0.0001);根据正交实验设计方差分析,两因素存在交互作用(P<0.05)。结论苯与甲醛共同作用于CHL细胞,其所引起的CHL细胞氧化损伤作用的交互作用为协同作用。

关键词：苯甲醛联合作用氧化损伤

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基准剂量在燃煤砷暴露人群肝损害研究中的应用及其意义探讨

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中国地方病学杂志 2009年第2期28卷 157-161页

作者：张爱华李军洪峰罗鹏杨光红杨大平黄晓欣张碧霞董学新贵阳医学院公共卫生学院毒理学教研室 550004 解放军第44医院内科

目的探讨燃煤砷暴露人群肝损害的生物接触限值，筛选监测砷致肝损害的敏感生物学标志。方法以燃煤污染型地方性砷中毒病区118例砷暴露者为砷暴露组．非砷污染区50例居民为对照组。以尿砷、发砷（Ag—DDC法测定）作为接触指标；总胆汁酸... 详细信息

目的探讨燃煤砷暴露人群肝损害的生物接触限值，筛选监测砷致肝损害的敏感生物学标志。方法以燃煤污染型地方性砷中毒病区118例砷暴露者为砷暴露组．非砷污染区50例居民为对照组。以尿砷、发砷（Ag—DDC法测定）作为接触指标；总胆汁酸（TBA，酶循环法测定）、谷胱甘肽硫转移酶（Gsrrs，化学比色法测定）和γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT，重氮试剂比色法测定）作为肝细胞损害效应指标；血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PC—Ⅲ）和Ⅳ型胶原（Ⅳ·C）作为肝纤维化效应指标（均用放射免疫法测定）。运用基准剂量（BMD）法计算各效应指标对应的尿砷和发砷的BMD及其95％可信区间下限值（BMDL），并根据BMD和BMDL大小判断各效应指标的敏感性。结果砷暴露组的砷接触指标尿砷（98．50mg／kgCr）、发砷（7．42mg／kg）和肝损害效应指标TBA、GSTs、γ-GT、HA、PC—Ⅲ、Ⅳ·c的几何均数（6．78μmol／L、22．05U／L、48．04U／L、85．19μg／L、89．76μg／L、86．85μg／L）均明显高于对照组的尿砷（22．98mg／kgCr）、发砷（1．28mg／kg）和肝损害效应指标（4．63μmol／L、13．76U／L、36．45U／L、54．62μg／L、74．45μg／L、54．81μg/L，P〈0．01），尿砷、发砷与肝损害效应指标间存在剂量-效应关系（P〈0．05或〈0．01）。尿砷的BMD和BMDL范围分别为49．53～101．96、39．02～70．15mg／kgCr，发砷的BMD和BMDL范围分别为3．04～5．02、2.36～3．25mg／kg。肝细胞损害指标的敏感顺序均为GSTs〉TBA〉γ-GT；而肝纤维化指标的敏感顺序均为HA〉Ⅳ·C〉PC—Ⅲ。结论根据肝损害生物学标志的最低尿砷、发砷BMDL值，结合当地健康人群尿砷、发砷平均值，建议燃煤砷暴露者肝损害的生物接触限值尿砷为35．00mg／kgCr，发砷为2．50mg／kg。GSTs、TBA、γ-GT和HA、Ⅳ·C、PC—Ⅲ分别能不同程度地反映燃煤砷污染对人体的肝细胞损害和肝纤维化情况；GSTs、HA分别是其相对最敏感的生物学标志。

关键词：砷中毒煤肝损害生物学标志基准剂量

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NaAsO_2对L-02肝细胞Cyto-c释放和Caspase-3表达的影响

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毒理学杂志 2010年第4期24卷 291-293页

作者：罗鹏张开菊张爱华曾小盼贵阳医学院公共卫生学院卫生毒理学教研室贵州贵阳550004

目的观察NaAsO2在诱导人胚肝细胞株(L-02)细胞凋亡过程中对细胞色素-C(Cytochrome C;Cyto-c)释放和半胱天冬酶-3(Caspase-3)表达的影响。方法分别以0(对照组)、50、100和150μmol/L的NaAsO2染毒L-02肝细胞24 h后,采用流式细胞仪检测细... 详细信息

目的观察NaAsO2在诱导人胚肝细胞株(L-02)细胞凋亡过程中对细胞色素-C(Cytochrome C;Cyto-c)释放和半胱天冬酶-3(Caspase-3)表达的影响。方法分别以0(对照组)、50、100和150μmol/L的NaAsO2染毒L-02肝细胞24 h后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测Cyto-c和Caspase-3在NaAsO2诱导L-02肝细胞凋亡过程中的变化。结果流式细胞术检测到0、50、100和150μmol/L浓度NaAsO2组细胞凋亡率为6.3%±0.40%、12.1%±0.89%、20.15%±0.50%和28.23%±4.77%。与对照组相比细胞凋亡率明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Western blot法检测Cyto-c的释放量分别是1.10%±0.35%,1.73%±0.73%、1.83%±0.67%和2.43%±0.74%,随染砷剂量的增加而增加,仅高剂量组差异具有统计学意义(P<0.05);Caspase-3分别为0.41%±0.45%,0.74%±0.14%、0.76%±0.04%和1.02%±0.18%,随染砷剂量的增加而增加,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);结论在该试验条件下,NaAsO2可诱导L-02肝细胞发生凋亡,Cyto-c和Caspase-3在细胞凋亡过程中发挥着重要作用。

关键词： NaAsO2 L-02细胞细胞凋亡 Cyto-c Caspase-3

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