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湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会

作者：王静魏蕾武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心

目的：肿瘤转移是一个复杂的过程，肿瘤细胞自身的迁移能力与肿瘤的侵袭转移密切相关。由肌动蛋白调节蛋白所调控的肌动蛋白聚合/解聚的动态变化是决定肿瘤细胞迁移能力的关键环节。血管扩张刺激磷蛋白（vasodilator-stimulated phospho... 详细信息

目的：肿瘤转移是一个复杂的过程，肿瘤细胞自身的迁移能力与肿瘤的侵袭转移密切相关。由肌动蛋白调节蛋白所调控的肌动蛋白聚合/解聚的动态变化是决定肿瘤细胞迁移能力的关键环节。血管扩张刺激磷蛋白（vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP）作为一种肌动蛋白调节蛋白，能够调节细胞黏附和伸展过程中肌动蛋白的重排，在细胞迁移过程中起重要作用。前期我们采用免疫组化比较癌和癌旁组织VASP表达状况，结果显示VASP的表达水平随着肿瘤分化程度的降低呈逐渐升高的趋势，提示VASP 促进胃癌细胞转移的可能。为了探讨VASP对人胃癌细胞侵袭性的影响,我们通过pcDNA6.2-GW／EmGFP-miR 介导的外源性miRNA-VASP 下调胃癌细胞BGC823 VASP的表达，观察它对人胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法：设计并合成4对靶向VASP mRNA的寡核苷酸片段，将其连接到 pcDNA6.2-GW／EmGFP-miR 载体，构建表达microRNA(miRNA)的真核载体s1、s2、s3、s4，脂质体转染法将重组质粒转入BGC823细胞。实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)分析VASP mRNA抑制效率;Western blotting测定VASP 蛋白的表达量改变;二维划痕实验和三维细胞侵袭实验（Transwell migration assays）观察胃癌细胞迁移和侵袭能力的改变。结果：转染48h 后，s3组VASPmRNA 较空转染组(Mock)和非特异序列组(Neg)明显减少，且少于其他组;72h后，s3组VASP蛋白表达明显少于其他组。在划痕实验和三维细胞侵袭实验中，转染s3 后BGC823 细胞组较其他组迁移速率明显减少，细胞侵袭能力明显降低。结论：人胃癌细胞BGC823的VASP 表达可被质粒导入的外源性miRNA-VASP 有效抑制，进而降低其迁移和侵袭能力。

关键词：肿瘤转移胃癌血管扩张刺激磷蛋白侵袭能力

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槲皮素对含oxHDL血浆致内皮细胞损伤的保护作用

槲皮素对含oxHDL血浆致内皮细胞损伤的保护作用

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湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会

作者：杨瑞莉肖秀凤林淑贤刘译聪魏蕾武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心

目的：研究槲皮素(Que)对含氧化高密度脂蛋白(oxHDL)血浆致内皮细胞(ECV304) 损伤的保护作用，并探讨其可能的机制。观察Que对oxHDL 所致ECV304 形态、MDA含量及LDH活性的影响，为开发利用Que 治疗AS及其并发症提供实验依据。方法... 详细信息

目的：研究槲皮素(Que)对含氧化高密度脂蛋白(oxHDL)血浆致内皮细胞(ECV304) 损伤的保护作用，并探讨其可能的机制。观察Que对oxHDL 所致ECV304 形态、MDA含量及LDH活性的影响，为开发利用Que 治疗AS及其并发症提供实验依据。方法：常规培养ECV304细胞被分为5组：对照组(ECV304+HDL)、oxHDL组（ECV304+oxHDL)、Que高剂量处理组(ECV304+oxHDL+80μmol/L Que)、Que中剂量处理组(ECV304+oxHDL+60μmol/L Que)及Que低剂量处理组(ECV304+oxHDL+40μmol/L Que)，培养24 h后平行检测各组ECV304形态、细胞内脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量、细胞乳酸脱氢酶（LDH）活性。结果：倒置相差显微镜下，对照组ECV304呈多角形单层铺路石样排列，经oxHDL作用24h后排列杂乱、皱缩变形，并可见部分细胞肿胀变圆甚至浮起，形成小片脱失区。低剂量Que处理组ECV304形态无明显差别，而中、高剂量组ECV304的形态与oxHDL组比较有明显不同：细胞呈多角形，紧密排列，与对照组相似;与oxHDL组相比，中、高剂量Que处理组ECV304培养液中LDH活性与MDA含量明显降低(P﹤0.05～0.01)，而低剂量Que处理组结果无显著性差异(P＞0.05)。结论：Que对含oxHDL 血浆致ECV304 损伤有保护作用，并且呈一定的剂量依赖性。

关键词：槲皮素高密度脂蛋白内皮细胞损伤保护

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CD4+CD25+调节性T细胞与人类获得性免疫缺陷病毒感染

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现代生物医学进展 2008年第1期8卷 155-157页

作者：贺琼徐赫杜桂书邓路瑶吴栗洋徐兰王月丹北京大学基础医学院免疫学系 100083 北京大学医学部生物医学实验教学中心 100083

CD4+CD25+是调节性T细胞中功能最重要的一类.它是一类具有特殊免疫调节功能的T细胞亚群.它能够抑制自身免疫病的发生和发展,参与肿瘤免疫的调节,同时在感染和移植免疫中也发挥着极其重要的作用.T细胞的这一亚群具有免疫调节和免疫抑制... 详细信息

CD4+CD25+是调节性T细胞中功能最重要的一类.它是一类具有特殊免疫调节功能的T细胞亚群.它能够抑制自身免疫病的发生和发展,参与肿瘤免疫的调节,同时在感染和移植免疫中也发挥着极其重要的作用.T细胞的这一亚群具有免疫调节和免疫抑制的特性,新近发现它亦与爱滋病的发生、发展关系密切.HIV进入人体后,CD4+CD25+调节性T细胞抑制了机体的免疫效应但它也同时被感染,最终由于细胞毒的作用而死亡.由于调节性T细胞数量的减少不能有效的发挥其抑制作用,HIV持续的过度活化使得T细胞逐渐耗竭说明在HIV发生、发展的不同阶段Treg细胞可能都发挥了免疫抑制作用,但是却对HIV感染与爱滋病发病的进程产生了不同的效应.此外,CD4+CD25+调节性T细胞还与HIV病毒的持续存在密切相关.本文就CD4+CD25+调节性T细胞与人类获得性免疫缺陷病毒(HIV)感染之间关系进行初步的探讨.

关键词： HIV 爱滋病调节性T细胞感染

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五年制和七年制临床医学专业病理生理学教学工作的比较研究

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中国病理生理杂志 2008年第8期24卷 1661-1664页

作者：魏蕾范彪孙静李柯周璇李华韩国鸽张懿敏张亚辉熊鸣欧阳静萍武汉大学基础医学院病理生理教研室基础医学实验教学中心湖北武汉430071 武汉大学第二临床学院湖北武汉430071 武汉大学公共卫生学院卫生统计教研室湖北武汉430071 武汉大学第一临床学院湖北武汉430060

目的:比较我校五年制和七年制学生对病理生理学教学需求的不同,分析在实施了不同内容和形式的教学计划后两种学制学生病理生理学考试成绩的差异,评价专业理论考试的质量,为五年制、七年制临床医学生的教育改革提供参考依据。方法:采用... 详细信息

目的:比较我校五年制和七年制学生对病理生理学教学需求的不同,分析在实施了不同内容和形式的教学计划后两种学制学生病理生理学考试成绩的差异,评价专业理论考试的质量,为五年制、七年制临床医学生的教育改革提供参考依据。方法:采用问卷调查形式,分析本校2002级临床医学七年制和2003级临床医学五年制学生对教学要求的不同;运用标准化试题库编制试卷,对试卷质量和考试结果分析。结果:问卷调查显示七年制学生更加赞成PBL和双语教学方式。试卷设计质量很高(各题P≥0.50,D≥0.15)。五、七年制学生考试试卷平均区分度分别为0.27±0.03和0.24±0.06,试卷的分半信度为0.75±0.05。七年制学生平均成绩为(69.1±10.2)分,χ2=0.990,P>0.05。五年制学生平均成绩为(74.4±11.3)分,χ2=0.111,P<0.01。结论:针对不同层次学生,我们的教学内容安排及试卷设计都是合理的。

关键词：病理生理学期末考试成绩问卷调查比较研究

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松针油诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及其作用机制研究

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热带医学杂志 2008年第7期8卷 664-666,671,F0004页

作者：魏凤香李美玉王玲李红枝广东药学院基础学院生物学教研室广州510006 中山大学中山医学院基础医学实验教学中心广州510080

目的研究松针油对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用,探讨Hela细胞发生凋亡的分子机制。方法采用水蒸气蒸馏法提取松针油,气相色谱-质谱联用仪分析成分。MTT法测定松针油对Hela细胞增殖的影响。流式细胞仪和Hochest 33258检测药物作用前... 详细信息

目的研究松针油对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用,探讨Hela细胞发生凋亡的分子机制。方法采用水蒸气蒸馏法提取松针油,气相色谱-质谱联用仪分析成分。MTT法测定松针油对Hela细胞增殖的影响。流式细胞仪和Hochest 33258检测药物作用前后细胞凋亡的情况。应用Western blotting观察Hela细胞caspase-3酶原的变化。用caspase活性检测试剂盒检测caspase-3,8,9的活性。结果MTT结果显示松针油对Hela细胞生长有明显的抑制作用,呈显著的时间和浓度依赖性。流式细胞仪分析显示松针油诱导Hela细胞发生凋亡,细胞表现出典型的凋亡特征,并且可见凋亡小体,且凋亡率具有时间依赖性。松针油诱导Hela细胞凋亡过程中caspase-3被激活。Caspase-8,9活性增高,又有时间依赖性,且有时间顺序。结论松针油对Hela细胞的生长有明显的抑制作用,其作用机制是松针油可诱导Hela细胞发生凋亡。在诱导细胞凋亡的过程中,caspase-3的激活是介导Hela细胞发生凋亡的共同通路。同时,活化的caspase-8,9可能参与了caspase-3的激活,从而诱导凋亡的发生。

关键词：松针油 Hela细胞细胞凋亡 caspase

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EGCG对MCF-7细胞侵袭转移的影响及机制

EGCG对MCF-7细胞侵袭转移的影响及机制

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湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会

作者：张懿敏韩国鸽范彪魏蕾武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学人民医院武汉大学第一临床学院武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学中南医院武汉大学第二临床学院武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心

目的：观察表没食子儿茶素没食子酸酯(Green Tea（-)-Epigallocatechin-3-Gallate，EGCG)对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力的影响，研究在这一过程中EGCG对血管扩张刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP) 表达水平以及Rac1活性的影响，并进一步探讨Rac1活性与VASP表达之间的关系。方法：体外培养乳腺癌细胞系MCF-7，(1) 培养基中加入不同浓度EGCG（0，10，25，50，100μg/ml) 或多西紫杉醇(docetaxel)（0.05μg/ml)作为阳性对照，24 h后用细胞侵袭实验和损伤修复实验分别观察不同处理组中MCF-7 细胞的侵袭和迁移能力的差别;（2) 培养基中加(或不加) 入EGCG（50μg/ml) 处理24 h后用（或不用) EGF（15 ng/ml) 刺激15 min，Western blotting和RT-PCR分别检测各组细胞中Rac1和VASP在蛋白和mRNA 两个水平表达水平的差异，并用GST pull-down 试验检测各组细胞Rac1活性的差异;（3）将Rac1-siRNA片段经脂质体转染至MCF-7细胞内，24小时后，Western blotting和RT-PCR分别检测细胞 Rac1和VASP表达水平的变化。结果：(1) EGCG对MCF-7细胞的侵袭迁移能力均有明显的抑制作用，并且随浓度增加抑制作用逐渐增强，浓度为50μg/ml的EGCG对细胞侵袭转移的抑制作用与阳性对照多西紫杉醇(docetaxel)（0.05μg/ml)作用相当（P）0.05）;(2) EGF（15 ng/ml) 单独处理15 min后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组显著升高（P＜0.05），EGCG（50μg/ml) 单独处理24 h后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组显著降低（P＜0.05），EGCG（50μg/ml) 处理24 h后用(或不用) EGF（15 ng/ml) 刺激15 min，细胞内Rac1活性和VASP表达量与空白组无明显差异（P） 0.05）。（3）Rac1-siRNA转染组细胞中Rac1，VASP的mRNA和蛋白表达水平明显下降（P＜0.05）。结论：EGCG 可以有效抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力，这种抑制作用是通过降低细胞内Rac1的活性，进而减少VASP表达而实现的。

关键词：乳腺癌细胞侵袭转移血管扩张刺激磷蛋白体外培养

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多媒体教学与传统教学在人体寄生虫学实验教学中的结合应用

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热带医学杂志 2008年第9期8卷 993-994,986页

作者：张瑞琳徐劲中山大学中山医学院基础医学实验教学中心广州510080 中山大学中山医学院寄生虫学教研室广州510080

目的探讨多媒体实验与传统实验在人体寄生虫学实验教学中的应用效果。方法制作多种寄生虫多媒体实验教学课件,配合传统实验教学内容在本科实验教学中试用。结果多媒体实验在人体寄生虫学实验教学中起着重要作用,但多媒体实验教学并不能... 详细信息

目的探讨多媒体实验与传统实验在人体寄生虫学实验教学中的应用效果。方法制作多种寄生虫多媒体实验教学课件,配合传统实验教学内容在本科实验教学中试用。结果多媒体实验在人体寄生虫学实验教学中起着重要作用,但多媒体实验教学并不能代替传统的实验教学。结论多媒体教学与传统教学相结合的实验教学模式在人体寄生虫学实验教学中有较好效果。

关键词：人体寄生虫学多媒体实验教学传统实验教学

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淫羊藿甙对MCF-7细胞侵袭转移的影响及机制

淫羊藿甙对MCF-7细胞侵袭转移的影响及机制

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湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会

作者：范彪韩国鸽张懿敏陈华奇魏蕾武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学中南医院武汉大学第二临床学院武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学人民医院武汉大学第一临床学院武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学人民医院武汉大学第一临床学院

目的：淫羊藿（ICA）是小檗科多年生草本植物，别名仙灵脾，是具补肾壮阳，祛风除湿功效的特色传统中草药。本实验中着重观察ICA对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力的影响，研究在这一过程中ICA对血管扩张刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulat... 详细信息

目的：淫羊藿（ICA）是小檗科多年生草本植物，别名仙灵脾，是具补肾壮阳，祛风除湿功效的特色传统中草药。本实验中着重观察ICA对乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力的影响，研究在这一过程中ICA对血管扩张刺激磷蛋白(Vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP) 表达水平以及Rac1活性的影响，并进一步探讨Rac1活性与VASP表达之间的关系。方法：体外培养乳腺癌细胞系MCF-7：（1) 培养基中加入不同浓度ICA（0，10，25，50，100μg/ml) 或多西紫杉醇(docetaxel)（0.05μg/ml)作为阳性对照，24 h后用细胞侵袭实验和损伤修复实验分别观察不同处理组中MCF-7细胞的侵袭和迁移能力的差别;（2) 培养基中加(或不加)入ICA（50μg/ml) 处理24 h后用(或不用) EGF（15 ng/ml) 刺激15 min，Western blotting和RT-PCR分别检测各组细胞中 Rac1和VASP在蛋白和mRNA两个表达水平的差异，并用GST pull-down试验检测各组细胞Rac1活性的差异。（3）将Rac1-siRNA片段经脂质体转染至MCF-7 细胞内，24小时后，Western blotting和RT-PCR分别检测细胞Rac1和VASP表达水平的变化。结果：（1) ICA对MCF-7 细胞的侵袭迁移能力均有明显的抑制作用，并且随浓度增加抑制作用逐渐增强，浓度为50μg/ml的ICA对细胞侵袭转移的抑制作用与阳性对照多西紫杉醇(docetaxel)（0.05μg/ml)作用相当（P）0.05）;（2) EGF（15 ng/ml) 单独处理15 min后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组明显升高（P＜0.05），ICA（50μg/ml) 单独处理24 h后细胞内Rac1活性和VASP表达量较空白组明显降低（P＜0.05），ICA（50μg/ml) 处理24 h后用(或不用) EGF（15 ng/ml) 刺激15 min，细胞内Rac1活性和VASP表达量与空白组无明显差异（P）0.05）。（3）Rac1-siRNA转染组细胞中Rac1，VASP的mRNA和蛋白表达水平明显下降（P＜0.05）。结论：ICA 可以有效抑制乳腺癌细胞MCF-7的侵袭转移能力，这种抑制作用是通过降低细胞内Rac1的活性，进而减少VASP表达而实现的。

关键词：乳腺癌淫羊藿甙细胞侵袭迁移血管扩张刺激磷蛋白

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VASP对内皮细胞ECV304迁移的调节作用的研究

VASP对内皮细胞ECV304迁移的调节作用的研究

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湖北省微循环学会第三届会员代表大会暨第八次学术年会、武汉微循环学会第六届会员代表大会暨第十二次学术年会

作者：陈华奇王静竹梦魏蕾武汉大学基础医学院病理学与病理生理学系基础医学实验教学中心武汉大学第二临床学院武汉大学中南医院

目的：内皮细胞的迁移在血管新生、伤口愈合、内皮损伤的修复等过程中起着重要的作用。肌动蛋白的重排在细胞移动过程中起着重要作用。血管扩张刺激磷蛋（vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP）能调节细胞移动过程中的肌动蛋... 详细信息

目的：内皮细胞的迁移在血管新生、伤口愈合、内皮损伤的修复等过程中起着重要的作用。肌动蛋白的重排在细胞移动过程中起着重要作用。血管扩张刺激磷蛋（vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP）能调节细胞移动过程中的肌动蛋白的重排。我们通过RNA干扰抑制内皮细胞ECV304中肌动蛋白相关蛋白VASP的表达水平，研究VASP在内皮细胞ECV304迁移过程中的作用。方法：化学合成针对VASP的特异性siRNA片段（VASP-942、VASP-1002、VASP-1024）和阴性对照siRNA，通过半定量RT-PCR和Western blotting分别检测mRNA和蛋白表达水平，细胞损伤修复实验检测转染细胞的迁移能力。（1) 通过半定量RT-PCR和Western blotting分别检测VASP的mRNA和蛋白表达水平，筛选出针对VASP的最有效的siRNA 片段;（2）以筛选出的最有效的VASP-siRNA转染ECV304细胞，设立阴性对照和空白对照，检测细胞中VASP的mRNA表达水平和蛋白表达水平以及细胞的迁移能力。结果： VASP-siRNA 转染ECV304 后，与对照组相比，被转染细胞中VASP的 mRNA和蛋白表达水平明显下降（P<0.05），细胞的迁移能力明显增强（P<0.05）。结论：成功设计并筛选出针对VASP的特异性siRNA片段;（2）VASP对内皮细胞 ECV304的迁移能力有着重要的调节作用，内皮细胞ECV304中VASP表达水平的下降可促进内皮细胞的迁移。

关键词：内皮细胞血管扩张刺激磷蛋细胞移动伤口愈合

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医学留学研究生病理生理学实验教学体会

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医学教育探索 2008年第4期7卷 430-431页

作者：魏蕾韩国鸽张懿敏李华范彪武军驻武汉大学础医学院病理生理教研室/基础医学实验教学中心湖北武汉430071 武汉大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室湖北武汉430071

留学生教育是我国高等教育的一个重要组成部分。针对近年来我校来华医学留学研究生教育持续发展的现状,我们从抓住学生特点,改进病理生理学教学方法和手段,重视实验教学等方面进行分析,从而探究适合我国的医学留学研究生病理生理学教学... 详细信息

留学生教育是我国高等教育的一个重要组成部分。针对近年来我校来华医学留学研究生教育持续发展的现状,我们从抓住学生特点,改进病理生理学教学方法和手段,重视实验教学等方面进行分析,从而探究适合我国的医学留学研究生病理生理学教学方法。

关键词：医学留学研究生病理生理学研究生课程实验课

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