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LAIR-1通过阻断JAK2 V617F突变的人HEL细胞JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制其增殖并促进其凋亡

细胞与分子免疫学杂志 2024年第3期40卷 207-214页

作者：樊翠张娅薇杨蕊吴肖婕周嘉迪薛江楠滨州医学院基础医学院免疫学教研室山东烟台264000 临沂市中医医院超声医学科山东临沂276000 滨州市人民医院中心实验室山东滨州256610 陕西中医药大学附属医院检验科陕西咸阳712000

目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以... 详细信息

目的研究人白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)对Janus激酶2(JAK2)V617F突变的人急性髓系白血病HEL细胞JAK/信号转导子与转录激活子(STAT)和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路的调节作用,以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法采用反转录PCR和基因测序鉴定JAK2 V617F突变;应用免疫共沉淀和Western blot法鉴定LAIR-1募集的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)种类;采用CCK-8法检测HEL细胞的增殖;采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测HEL细胞的凋亡率;采用Western blot法检测JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR通路蛋白酪氨酸磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、Bcl2相关X蛋白(BAX)和B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果在JAK2 V617F突变的HEL细胞中,LAIR-1与其配体胶原蛋白结合后可募集含Src同源域2磷酸酶2(SHP-2);LAIR-1可以下调HEL细胞JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、AKT和mTOR的蛋白酪氨酸磷酸化水平,并能够显著抑制cyclin D1和Bcl2的表达,而对BAX的表达水平未见显著影响;LAIR-1能够明显抑制HEL细胞的增殖,促进HEL细胞凋亡。结论在JAK2 V617F突变的人白血病HEL细胞中,LAIR-1可通过募集SHP-2抑制JAK/STAT和PI3K/AKT/mTOR信号通路的活化,进而抑制HEL细胞的增殖,促进细胞凋亡。

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潜伏相关核抗原在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒感染过程中的作用

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安徽医科大学学报 2023年第12期58卷 2150-2154页

作者：路正东晏巍振(综述) 王林定周畅(审校) 安徽医科大学第一临床医学院合肥230032 安徽医科大学基础医学院病原与免疫学实验室合肥230032 安徽医科大学微生物学教研室合肥230032

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是卡波氏肉瘤(KS)的致病因素。在潜伏相关核抗原(LANA)影响下,KSHV侵入宿主细胞后早期便会出现一系列病理性活动,但目前尚无有效的早期治疗方案。该文对LANA在KSHV感染过程中的相关机制进行综述,有助于阐明... 详细信息

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)是卡波氏肉瘤(KS)的致病因素。在潜伏相关核抗原(LANA)影响下,KSHV侵入宿主细胞后早期便会出现一系列病理性活动,但目前尚无有效的早期治疗方案。该文对LANA在KSHV感染过程中的相关机制进行综述,有助于阐明LANA蛋白在KS发病机制中的具体过程,为KS潜伏期治疗提供参考。

关键词：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒潜伏相关核抗原发病机制信号通路裂解复制免疫逃逸

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人5-脂氧合酶重组蛋白的纯化及其多克隆抗体的制备

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医学理论与实践 2024年第11期37卷 1805-1807,1817页

作者：王晓玲郭明飞史铁伟高丽枫王文涛赤峰学院基础医学院病原生物学与免疫学教研室内蒙古自治区赤峰市024000

目的:原核表达并纯化人5-脂氧合酶(5LO)△112蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备5-LO多克隆抗体。方法:使用DNAMAN设计重组引物,PCR扩增N端缺失112个氨基酸的5-LO截短DNA片段,将其重组到KpnⅠ和EcoRⅠ酶切的pET30a(+)质粒中,重组质粒pET30a-... 详细信息

目的:原核表达并纯化人5-脂氧合酶(5LO)△112蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备5-LO多克隆抗体。方法:使用DNAMAN设计重组引物,PCR扩增N端缺失112个氨基酸的5-LO截短DNA片段,将其重组到KpnⅠ和EcoRⅠ酶切的pET30a(+)质粒中,重组质粒pET30a-5LO△112转化大肠杆菌Rosetta(DE3),培养至OD_(600)为0.4时加入IPTG以诱导5LO△112重组蛋白表达,目的蛋白经纯化后免疫新西兰大白兔制备其多克隆抗体。结果:使用BugBuster蛋白提取试剂裂解细菌并获得纯度较高的包涵体,包涵体用含6mol/L盐酸胍的溶液变性溶解,再经Ni-NTA agarose亲和纯化得到高纯度的5LO△112重组蛋白。用该蛋白免疫新西兰大白兔获得5-LO的特异性抗体,该抗体的效价为1∶51200。结论:使用6mol/L盐酸胍溶解包涵体蛋白结合Ni-NTA agarose亲和纯化的方法成功获得了纯度较高的5LO△112重组蛋白,并用此蛋白制备了高效价的多克隆抗体。

关键词：人5-脂氧合酶包涵体蛋白亲和纯化多克隆抗体制备

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沉默环状RNA_胚胎致死异常视觉样蛋白2(circELAVL2)抑制小鼠睾丸TM4支持细胞增殖并促进其凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第11期38卷 1005-1010页

作者：史圣甲季兴哲孙建华张洲西北妇女儿童医院生殖中心陕西西安710003 空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032

目的观测沉默环状RNA_胚胎致死异常视觉样蛋白2(circELAVL2)对小鼠睾丸TM4支持细胞增殖和凋亡的影响,并探索潜在机制。方法应用小干扰RNA技术沉默小鼠睾丸TM4细胞circELAVL2的表达,沉默circELAVL2后,采用CCK-8法和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧... 详细信息

目的观测沉默环状RNA_胚胎致死异常视觉样蛋白2(circELAVL2)对小鼠睾丸TM4支持细胞增殖和凋亡的影响,并探索潜在机制。方法应用小干扰RNA技术沉默小鼠睾丸TM4细胞circELAVL2的表达,沉默circELAVL2后,采用CCK-8法和5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷染色评估TM4细胞增殖能力,流式细胞术和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测TM4细胞的凋亡。生物信息学方法预测微小RNA-382-3p(miR-382-3p)与circELAVL2的结合位点,荧光素酶报告实验检测circELAVL2与miR-382-3p的结合能力。实时定量PCR检测circEALVL2和miR-382-3p表达水平。结果沉默circELAVL2的表达后,TM4细胞增殖速度和EdU阳性细胞比例降低,凋亡细胞比例增加。机制研究结果显示circELAVL2可结合并下调miR-382-3p表达。结论circELAVL2可通过结合并抑制miR-382-3p表达促进小鼠TM4支持细胞增殖能力并抑制其凋亡。

关键词：支持细胞环状RNA(circRNA) 环状RNA_胚胎致死异常视觉样蛋白2(circELAVL2) 微小RNA(miRNA) 细胞增殖细胞凋亡

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miRNA-206通过Akt信号通路抑制失神经肌肉萎缩

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中华手外科杂志 2021年第5期37卷 377-381页

作者：杨卫可贾瑞平田致忠杨卫强郭新军郭继强新乡市中心医院骨科河南453000 新乡医学院基础医学院免疫学教研室河南453003

目的研究miRNA-206通过Akt信号通路抑制失神经肌肉萎缩的机制。方法构建小鼠失神经支配肌肉萎缩模型,荧光定量PCR检测miRNA-206变化;小鼠肌肉原位注射miRNA-206 agomir或miRNA-206 sponge,3 d后小鼠建造肌肉失神经支配模型,7 d后免疫印... 详细信息

目的研究miRNA-206通过Akt信号通路抑制失神经肌肉萎缩的机制。方法构建小鼠失神经支配肌肉萎缩模型,荧光定量PCR检测miRNA-206变化;小鼠肌肉原位注射miRNA-206 agomir或miRNA-206 sponge,3 d后小鼠建造肌肉失神经支配模型,7 d后免疫印迹检测肌肉萎缩标志蛋白Fbx32和TRIM63的表达量;以荧光素酶报告实验验证miRNA-206和Akt 3′UTR区域结合。结果荧光定量PCR结果显示,miRNA-206在失神经导致的肌肉萎缩中下调。小鼠肌肉原位注射miRNA-206 agomir,免疫印迹实验结果显示,肌肉萎缩标志蛋白Fbx32和TRIM63表达明显降低;失神经支配小鼠肌肉原位注射miRNA-206 sponge,Fbx32和TRIM63表达明显升高。通过荧光素酶实验证明了miRNA-206和Akt 3′UTR区域结合。进一步的免疫印迹实验结果显示,抑制miRNA-206表达时,Akt表达下调;过表达miRNA-206时,Akt表达上调。结论miRNA-206通过Akt信号通路抑制失神经肌肉萎缩。

关键词：周围神经动物实验肌肉萎缩 miRNA-206

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金匮肾气丸与补中益气丸联用对自然衰老C57小鼠运动及代谢的影响

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中国老年学杂志 2021年第3期41卷 600-603页

作者：叶蓉唐春凤刘道光朱明慧姚薇田顺亮刘承伟于兰桂林医学院基础医学院人体解剖学教研室广西桂林541004 柳州市中医医院桂林医学院临床医学院菏泽医学专科学校人体解剖学教研室桂林医学院药学院桂林医学院附属医院

目的观察金匮肾气丸与补中益气丸联用对老年C57小鼠运动能力及体重、血糖和不同部位体温的调节作用。方法以自然衰老小鼠为模型,将其分为实验组和对照组。实验组给予金匮肾气丸10 mg和补中益气丸5 mg,对照组给予同等剂量的纯净水。4 w后... 详细信息

目的观察金匮肾气丸与补中益气丸联用对老年C57小鼠运动能力及体重、血糖和不同部位体温的调节作用。方法以自然衰老小鼠为模型,将其分为实验组和对照组。实验组给予金匮肾气丸10 mg和补中益气丸5 mg,对照组给予同等剂量的纯净水。4 w后,通过平衡杆、爬杆、悬挂和旷场试验观察老年小鼠运动能力变化,检测小鼠体重、血糖和不同部位体温的变化情况。结果随着年龄的增长,对照组体重下降,血糖升高,四肢体温逐渐降低;而金贵肾气丸与补中益气丸联用能维持体重和血糖恒定,四肢体温明显提高,存活时间明显延长(P<0.05)。结论金匮肾气丸与补中益气丸联用可提高小鼠的运动能力及代谢水平,延长小鼠的寿命。

关键词：金匮肾气丸补中益气丸运动能力代谢水平

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丹皮酚调控ITGB3/p38MAPK抑制乳腺癌细胞增殖侵袭与上皮-间质转化

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国际免疫学杂志 2024年第1期47卷 1-5页

作者：李睿慧董航王辰囡邵长利宋汉君王建杰佳木斯大学基础医学院免疫学教研室佳木斯154007 深圳市盐田区人民医院(集团)血液内科深圳518081 佳木斯大学基础医学院病理学教研室佳木斯154007

目的探讨丹皮酚(paeonol,Pae)对三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响及可能机制。方法不同浓度Pae处理MDA-MB-231细胞后,设立对照样本。采用CCK8方法检测细胞增殖活... 详细信息

目的探讨丹皮酚(paeonol,Pae)对三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)的影响及可能机制。方法不同浓度Pae处理MDA-MB-231细胞后,设立对照样本。采用CCK8方法检测细胞增殖活性;Transwell法检测细胞的侵袭能力;流式细胞技术检测细胞周期;Western blot检测整合素β3(integrinβ3,ITGB3)、p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,p38MAPK)、磷酸化-p38MAPK(phosphorylated-p38MAPK,p-p38MAPK)蛋白的表达以及EMT相关标志物纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、波形蛋白(vimentin,Vim)、N-钙粘蛋白(N-cadherin,N-cad)的表达变化。结果60 mg/L的Pae对于乳腺癌细胞产生了明显的抑制作用,故本实验使用60 mg/L的Pae浓度。Pae分别处理24、48 h后,G0/G1的细胞周期分别从对照组的50.6%增加到53.0%和65.4%。S期处理48 h后,Pae组肿瘤细胞百分比从37.6%降低至26.6%。Transwell结果显示,与对照组相比,Pae处理乳腺癌细胞24、48 h后细胞侵袭数明显减少,差异有统计学意义[个:(378.73±47.62)比(193.64±32.54)或(174.37±27.83),t=5.35、5.75,P值均<0.05]。与对照组相比,Pae处理后乳腺癌细胞ITGB3、p38MAPK、p-p38MAPK表达水平明显降低;EMT标记物FN、N-cad、Vim表达均显著下降,差异有统计学意义[(0.97±0.19)比(0.48±0.10),(1.24±0.24)比(0.56±0.18),(0.93±0.18)比(0.51±0.13),t=4.08、3.93、3.28,P值均<0.05;(0.88±0.16)比(0.46±0.08),(0.96±0.17)比(0.43±0.12),(0.87±0.15)比(0.37±0.13),t=4.06、4.42、4.36,P值均<0.05]。结论Pae显著抑制三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞增殖,侵袭和EMT,该作用可能与ITGB3/p38MAPK信号通路激活有关。

关键词：丹皮酚乳腺癌上皮-间质转化 ITGB3/p38MAPK

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产妇下肢深静脉血栓的预防及护理

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内江科技 2024年第6期45卷 29-31页

作者：祝司霞张梦洁攀枝花学院基础医学院病原生物与免疫学教研室攀枝花学院附属医院护理部

下肢深静脉血栓形成(lower extremity deep venous thrombosis,LEDVT)是产褥期并发症之一,是由于静脉血液在深静脉腔内不正常凝结阻塞管腔而引起的静脉血液回流障碍,因其可引起肺栓塞和其他严重并发症,对产妇生命健康和产后的恢复有巨... 详细信息

下肢深静脉血栓形成(lower extremity deep venous thrombosis,LEDVT)是产褥期并发症之一,是由于静脉血液在深静脉腔内不正常凝结阻塞管腔而引起的静脉血液回流障碍,因其可引起肺栓塞和其他严重并发症,对产妇生命健康和产后的恢复有巨大影响。为控制及减少产后下肢深静脉血栓的发生概率,护理人员、产妇及产妇家属应了解血栓形成的原因,通过心理、饮食和运动的基本预防、药物预防和物理预防等手段以避免下肢深静脉血栓的形成。对于产后产妇下肢深静脉血栓形成的护理,除了心理护理、药物护理等,更重要的是患肢的护理。

关键词：下肢深静脉血栓血液回流障碍产褥期并发症静脉血液药物护理心理护理物理预防护理人员

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军队院校公共事业管理专业医学免疫学教学实践与分析

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细胞与分子免疫学杂志 2021年第10期37卷 955-958页

作者：王静杨舒雅杨琨空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032

与欧美国家相比,我国高等院校的公共事业管理专业设立时间较短,国内军队院校更是近年起才陆续招收该专业学员,每年招收人数尚且较少,暂无大批学员毕业工作的借鉴先例。作为公共事业管理专业学员必修的一门基础医学课程,医学免疫学体系... 详细信息

与欧美国家相比,我国高等院校的公共事业管理专业设立时间较短,国内军队院校更是近年起才陆续招收该专业学员,每年招收人数尚且较少,暂无大批学员毕业工作的借鉴先例。作为公共事业管理专业学员必修的一门基础医学课程,医学免疫学体系系统性强、知识点交叉跨度大、理论学说层出不穷,初学者要准确理解、全面掌握和灵活运用所学知识点有一定难度。与其他长学制专业相比,公共事业管理专业的医学免疫学课程设计时间较短,学员对医学免疫学学习兴趣较低,对教员授课提出了更高的要求。我们从课前准备、教学设计、课后总结三个维度进行分析和总结,为该专业的教学活动及学员培养提供借鉴。

关键词：军队院校公共事业管理专业课前准备教学设计课后总结

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第7期40卷 585-590页

作者：宋洪涛卜欣阳李维妙卢通杨安钢秦卫军郑国旭空军军医大学西京医院泌尿外科陕西西安710032 空军军医大学基础医学院学员四大队陕西西安710032 西安交通大学第二附属医院乳腺诊疗中心陕西西安710004 空军军医大学基础医学院免疫学教研室陕西西安710032

目的研究细胞周期相关肿瘤高表达蛋白(CREPT)在前列腺癌中的表达情况和对前列腺癌发生发展的影响。方法采用基因表达谱交互分析数据库2(GEPIA2)和癌基因组图谱(TCGA)数据库进行生物信息学分析,22Rv1前列腺癌细胞转染CREPT小干扰片段下调... 详细信息

目的研究细胞周期相关肿瘤高表达蛋白(CREPT)在前列腺癌中的表达情况和对前列腺癌发生发展的影响。方法采用基因表达谱交互分析数据库2(GEPIA2)和癌基因组图谱(TCGA)数据库进行生物信息学分析,22Rv1前列腺癌细胞转染CREPT小干扰片段下调CREPT表达,采用CCK-8法、Transwell^(TM)实验和划痕愈合实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移。体内裸鼠荷瘤实验检测CREPT对前列腺癌发生发展的影响。结果CREPT在前列腺癌中异常高表达,并与无进展生存期、肿瘤T分期、N分期、前列腺特异性抗原(PSA)水平和Gleason评分相关。CREPT能够促进前列腺癌22Rv1细胞增殖、侵袭和迁移。体内裸鼠荷瘤实验表明CREPT能够促进前列腺癌的进展。免疫浸润分析结果表明CREPT高表达与CD8+T细胞的浸润呈负相关。结论CREPT是潜在前列腺癌预后标志物,有望成为前列腺癌新的治疗靶点。

关键词：前列腺癌细胞周期相关肿瘤高表达蛋白(CREPT) 22Rv1细胞

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