检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2008年第11期28卷 982-983页

作者：武有聪白丽袁有华郭利军大理学院基础医学院医学微生物学及免疫学教研室 671000

本文采用美国临床实验室标准化研究所（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）推荐的微量液基稀释法，检测60株分离自HIV感染者口腔的念珠菌对4种抗真菌药物的敏感性，并用随机扩增多态性DNA（randomly amplified po... 详细信息

本文采用美国临床实验室标准化研究所（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）推荐的微量液基稀释法，检测60株分离自HIV感染者口腔的念珠菌对4种抗真菌药物的敏感性，并用随机扩增多态性DNA（randomly amplified polymorphic DNA，RAPD）分型方法对念株菌进行基因多态性研究，以探讨念株菌耐药性与DNA多态性的关系。

关键词： HIV感染者口腔念珠菌基因多态性耐药性多态性分析多态性DNA 微量液基稀释法 DNA多态性

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HIV相关性口腔念珠菌RAPD多态性分析

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微生物学通报 2009年第5期36卷 728-734页

作者：武有聪白丽袁有华郭利军大理学院基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000

运用RAPD技术对60株分离自HIV感染者口腔的念珠菌进行分析,其中P2随机引物扩增条带数量0～5条,大小300bp～2kb,白色念珠菌以300bp、400bp和600bp3个主条带为主,非白色念珠菌也存在类似条带。采用SPSS13.0聚类分析,分为5个基因群,14个基... 详细信息

运用RAPD技术对60株分离自HIV感染者口腔的念珠菌进行分析,其中P2随机引物扩增条带数量0～5条,大小300bp～2kb,白色念珠菌以300bp、400bp和600bp3个主条带为主,非白色念珠菌也存在类似条带。采用SPSS13.0聚类分析,分为5个基因群,14个基因型,白色念珠菌主要为B群。其中P385和P403对5-氟孢嘧啶耐药,聚为C1基因型(欧氏距离平方为0.115),P321和P522对两性霉素B耐药,聚为D1基因型(欧氏距离平方为0.221)。表明HIV感染者口腔来源的念珠菌存在丰富的基因多态性,RAPD技术对于白色念珠菌的基因型鉴定具有重要意义;念珠菌不同种间具有相对特征性的条带,同种不同株间存在相似的条带特征;某些条带特征可能与念珠菌的耐药性相关。

关键词：基因多态性药物敏感性念珠菌人类免疫缺陷病毒

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靶向ST6GalI的siRNA与反义寡核苷酸联合应用对结肠癌细胞转移能力的影响

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南方医科大学学报 2007年第2期27卷 136-140页

作者：苑天红李明远李婉宜李虹蒋忠华四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041

目的探讨人α2,6-唾液酸转移酶(ST6GalI)小分子干扰RNA(siRNA)及其与相同或不同靶点的反义寡核苷酸(ASO)联合应用,对ST6GalI高表达的结肠癌SW480细胞的粘附和侵袭力的影响。方法设计并合成靶向ST6GalI的siRNA及ASO,用脂质体Lipofectamin... 详细信息

目的探讨人α2,6-唾液酸转移酶(ST6GalI)小分子干扰RNA(siRNA)及其与相同或不同靶点的反义寡核苷酸(ASO)联合应用,对ST6GalI高表达的结肠癌SW480细胞的粘附和侵袭力的影响。方法设计并合成靶向ST6GalI的siRNA及ASO,用脂质体Lipofectamine2000包裹后转染SW480细胞。实验分为空白对照组、脂质体对照组、siRNA组、ASO1组(与siRNA不同靶点)、ASO2组(与siRNA相同靶点)、siRNA+ASO1组及siRNA+ASO2组,应用RT-PCR测定细胞中ST6GalImRNA水平,流式细胞术检测细胞表面α2,6-唾液酸含量,分别用CytoMatrixTM细胞粘附试剂盒及细胞侵袭分析试剂盒,检测细胞对细胞外基质的粘附与侵袭力。结果siRNA组、ASO1组、ASO2组、siRNA+ASO1组、siRNA+ASO2组中,SW480细胞的ST6GalImRNA表达水平、细胞表面α2,6-唾液酸含量及细胞对ECM的粘附与侵袭力均明显低于空白对照组、脂质体对照组(P<0.05),以siRNA+ASO1组最明显,且siRNA+ASO1组与siRNA组比较,差异有统计学意义(P<0.05),而siRNA+ASO2组与siRNA组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论化学合成的靶向ST6GalI的siRNA能够下调SW480细胞中ST6GalI基因的表达,继而降低细胞对ECM的粘附和侵袭力,并且与不同靶点的ASO联合应用具有相加和协同效应。

关键词： RNA 小分子干扰反义寡核苷酸唾液酸转移酶结肠肿瘤

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ST6Gal I基因特异性siRNA对SW480细胞黏附和侵袭力的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第1期23卷 39-41,45页

作者：苑天红李明远李婉宜李虹蒋忠华四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041

目的:探讨人α-2,6-唾液酸转移酶(ST6GalI)小分子干扰RNA(siRNA)对ST6GalI高表达的结肠癌SW480细胞株的黏附和侵袭力的影响。方法:设计并合成ST6GalI靶向的siRNA,用脂质体Lipofectamine2000包裹后转染SW480细胞。实验设空白对照组、脂... 详细信息

目的:探讨人α-2,6-唾液酸转移酶(ST6GalI)小分子干扰RNA(siRNA)对ST6GalI高表达的结肠癌SW480细胞株的黏附和侵袭力的影响。方法:设计并合成ST6GalI靶向的siRNA,用脂质体Lipofectamine2000包裹后转染SW480细胞。实验设空白对照组、脂质体对照组、非特异性siRNA组和ST6GalIsiRNA组,采用RT-PCR测定细胞中ST6GalImRNA表达水平,流式细胞术检测细胞表面α-2,6-唾液酸含量,并分别用CytoMatrixTM细胞黏附试剂盒及细胞侵袭分析试剂盒,检测细胞对细胞外基质(ECM)黏附与侵袭力。结果:与空白对照组、脂质体对照组、非特异性siRNA组相比,转染48h后,ST6GalIsiRNA组细胞中ST6GalImRNA表达明显下调;转染72h后,ST6GalIsiRNA组细胞表面α-2,6-唾液酸的含量及细胞对ECM的黏附和侵袭力均明显低于其他3个对照组(P<0.05)。结论:化学合成的靶向ST6GalI的siRNA能够下调SW480细胞中ST6GalI基因的表达,降低细胞对ECM的黏附和侵袭力。本实验为进一步研究应用RNA干扰技术抗肿瘤治疗奠定基础。

关键词： siRNA 结肠肿瘤唾液酸转移酶黏附肿瘤侵袭力

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青蒿油诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

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四川大学学报（医学版） 2004年第3期35卷 337-339页

作者：李燕李明远王林蒋中华李婉宜李虹四川大学基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 泸州医学院药物研究所

目的　研究青蒿油是否能诱导人肝癌细胞 SMMC- 772 1凋亡。方法　用青蒿油作用于 SMMC- 772 1细胞进行研究 ,以羟基喜树碱作为阳性对照 ,生理盐水作为阴性对照 ,采用 Giemsa's染色法、透射电镜检测细胞形态的改变、流式细胞仪检测... 详细信息

目的　研究青蒿油是否能诱导人肝癌细胞 SMMC- 772 1凋亡。方法　用青蒿油作用于 SMMC- 772 1细胞进行研究 ,以羟基喜树碱作为阳性对照 ,生理盐水作为阴性对照 ,采用 Giemsa's染色法、透射电镜检测细胞形态的改变、流式细胞仪检测细胞凋亡率及琼脂糖电泳检测 DNA图谱。结果　 10 0μg/ m l青蒿油作用于肝癌细胞 2 4h后 ,可见典型的细胞凋亡形态学改变即胞浆固缩、核染色质断裂、出现凋亡小体、DNA电泳呈梯形条带及流式细胞仪检测出现亚 G1 峰等。结论　青蒿油有诱导肝癌细胞凋亡的作用。

关键词：青蒿油肝癌细胞凋亡

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不可分型流感嗜血杆菌重组Hap蛋白的表达及其生物学活性分析

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南方医科大学学报 2010年第5期30卷 953-956页

作者：姚锋李婉宜邝玉李明远丰锋冯伟张强四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室四川成都610041

目的在原核系统中表达并纯化不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)的重要粘附因子Hap蛋白,并对其免疫原性和粘附活性进行初步研究。方法 IPTG诱导重组质粒pET32a(+)-Hap在***21中高效表达,Ni2+亲和层析柱纯化表达产物。用纯化的Hap重组蛋白进行... 详细信息

目的在原核系统中表达并纯化不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)的重要粘附因子Hap蛋白,并对其免疫原性和粘附活性进行初步研究。方法 IPTG诱导重组质粒pET32a(+)-Hap在***21中高效表达,Ni2+亲和层析柱纯化表达产物。用纯化的Hap重组蛋白进行体外竞争黏附实验,SEM观察及菌落形成单位计数法分析该重组蛋白的黏附活性。纯化蛋白与黏膜免疫佐剂CT-B联合鼻腔免疫BALB/C小鼠,ELISA检测小鼠抗Hap的IgA及IgG抗体水平。结果纯化产物的SDS-PAGE分析显示获得单一的目的蛋白条带,Gelanalysis软件分析蛋白纯度可达85%,纯化产物超滤浓缩后,测得其蛋白浓度为3.2g/L。体外竞争黏附实验观察到Hap重组蛋白的加入可明显抑制NTHi对胞外基质的黏附,且细菌黏附量的减少与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。该重组蛋白与免疫佐剂CT-B联合免疫小鼠,可刺激机体产生较高水平的IgG或IgA抗体,与重组抗原单独免疫组相比,差异具有显著性(P<0.05)。结论 Hap蛋白在原核系统中获得较高浓度和纯度的表达,纯化Hap重组蛋白具有良好的免疫原性和粘附活性。

关键词：不可分型流感嗜血杆菌 Hap重组蛋白免疫原性粘附活性

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灭活仙台病毒Tianjin株诱导人乳腺癌细胞系BCAP37凋亡研究

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中华肿瘤防治杂志 2014年第8期21卷 565-569页

作者：韩哲王顺达陈曦腾赵杰石立莹天津医科大学基础医学院微生物学教研室天津300070

目的:研究灭活仙台病毒Tianjin株诱导人乳腺癌细胞系BCAP37凋亡的作用。方法:用紫外线灭活不同浓度仙台病毒Tianjin株感染人乳腺癌BCAP37细胞,设立活病毒对照孔及正常细胞对照孔,感染后不同时间收集细胞,MTT法检测细胞存活率,琼脂糖凝... 详细信息

目的:研究灭活仙台病毒Tianjin株诱导人乳腺癌细胞系BCAP37凋亡的作用。方法:用紫外线灭活不同浓度仙台病毒Tianjin株感染人乳腺癌BCAP37细胞,设立活病毒对照孔及正常细胞对照孔,感染后不同时间收集细胞,MTT法检测细胞存活率,琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段降解情况,Hoechst染色观察细胞凋亡形态学变化,AnnexinⅤ/PI标记流式细胞仪检测细胞凋亡百分率,蛋白质印迹法检测Caspase-9及Caspase-3蛋白的表达。结果:MTT检测发现灭活仙台病毒Tianjin株对人乳腺癌细胞系BCAP37有明显的生长抑制作用,且呈剂量-时间依赖性;DNA片段琼脂糖凝胶电泳显示灭活病毒组呈典型的细胞凋亡梯形条带;Hoechst染色显示灭活病毒能够诱导BCAP37凋亡,显微镜下可见细胞核固缩,破裂,溶解,凋亡小体形成等形态学改变;流式细胞仪检测灭活病毒组细胞凋亡率为(15.1±1.1)%,明显高于正常细胞对照组,P<0.001;蛋白质印迹法结果显示,灭活病毒作用24h即出现Caspase-3及Caspase-9活化片段,与正常细胞组比较均明显升高,P值均<0.001。结论:灭活仙台病毒Tianjin株能够诱导人乳腺癌BCAP37细胞凋亡,其机制可能与Caspase-9和Caspase-3活化有关。

关键词：仙台病毒Tianjin株乳腺肿瘤 BCAP37 凋亡

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铜绿假单胞菌普通菌毛与耐药性R质粒的关系

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吉林大学学报（医学版） 2004年第1期30卷 100-102页

作者：常江史红艳李菁华关显智包头医学院微生物学教研室吉林大学基础医学院病原生物学教研室吉林长春130021

目的 :检测铜绿假单胞菌耐药株 PA36的耐药性 R质粒与菌毛及粘附性的关系。方法 :应用琼脂糖凝胶电泳试验、电镜照片制备及观察、粘附试验及质粒消除试验。结果 :PA36含有一条相对分子质量是 3.3× 1 0 6 的R质粒 ;电镜下观察 PA36... 详细信息

目的 :检测铜绿假单胞菌耐药株 PA36的耐药性 R质粒与菌毛及粘附性的关系。方法 :应用琼脂糖凝胶电泳试验、电镜照片制备及观察、粘附试验及质粒消除试验。结果 :PA36含有一条相对分子质量是 3.3× 1 0 6 的R质粒 ;电镜下观察 PA36具有周毛型菌毛 ;粘附试验于光镜下可见该菌大量粘附到脱落的尿道上皮细胞上 ;该 R质粒消除后该菌株的耐药性与菌毛一起消失 ,粘附性明显减弱。结论 :铜绿假单胞菌菌株 PA36编码普通菌毛、决定粘附性的基因主要是在相对分子质量为 3.3× 1 0 6 的一个

关键词：假单胞菌铜绿/细胞学纤毛细菌/遗传学质粒

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Cad11高和低表达肾癌细胞分选与Cad11对肾癌细胞迁移作用的影响

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中华肿瘤防治杂志 2015年第6期22卷 427-431页

作者：季擎天钟启平李晓霞天津医科大学基础医学院微生物学教研室天津300070

目的分选Ⅱ型成骨细胞型钙黏附蛋白(cadherin-11,Cad11)高和低表达的肾癌细胞786-O细胞群,并证实Cad11在肾癌细胞786-O中的迁移作用。方法将质粒pBMN-Ⅰ-GFP-Cad11转染于Phoenix细胞进行包装,之后感染786-O细胞,流式细胞仪分选后扩大培... 详细信息

目的分选Ⅱ型成骨细胞型钙黏附蛋白(cadherin-11,Cad11)高和低表达的肾癌细胞786-O细胞群,并证实Cad11在肾癌细胞786-O中的迁移作用。方法将质粒pBMN-Ⅰ-GFP-Cad11转染于Phoenix细胞进行包装,之后感染786-O细胞,流式细胞仪分选后扩大培养建立786-LG细胞。将786-LG细胞经Cad11抗体2C7孵育后用BSA封闭,洗涤后加入标记APC的二抗,同时以786-LG细胞(未经任何处理)和786-LG细胞(只加入标记APC的二抗处理)作为阴性对照确定分选门,绿色荧光通道和红色荧光通道进行双参数分析,流式细胞仪分选技术筛选Cad11高和低表达的786-O肾癌细胞群,蛋白质印迹法检测分选细胞Cad11的表达。786-Cad11+和786-Cad11-细胞血清饥饿24h后接种于内室(细胞数为1×104),每组设3个复孔,Transwell细胞迁移实验和细胞结晶紫染色计数穿过小室的细胞数目,以穿过膜的细胞数目评估Cad11对其肾癌细胞786-O的迁移作用。结果成功构建786-LG细胞。流式细胞仪检测结果显示,786-LG细胞中Cad11阳性细胞亚群占细胞总数的75.98%。Cad11细胞群分选后,GFP+/APC+双阳性细胞和GFP+/APC-单阳性细胞分别占细胞总数的28.0%和20.1%。蛋白质印迹法检测结果表明,Cad11相对表达量786-LG细胞为0.25±0.02,786-Cad11+细胞为0.60±0.03,786-Cad11-细胞为0.10±0.01,差异有统计学意义,F=132.32,P<0.001。与786-LG细胞相比,两个细胞亚群786-Cad11+和786-Cad11-中Cad11蛋白的表达量均有明显变化,前者蛋白表达量升高至2.41倍(P=0.007),后者蛋白表达量降低至0.41倍(P=0.004),差异均有统计学意义。Transwell迁移实验结果表明,786-LG细胞迁移数目为114.33±4.09,786-Cad11+细胞迁移数目为139.00±5.19,786-Cad11-细胞迁移数目为77.67±3.71,差异有统计学意义,F=49.65,P=0.000 2。结论成功建立了高和低表达Cad11的786-O细胞模型,并证实Cad11的表达与肾癌细胞的迁移密切相关。

关键词： Ⅱ型成骨细胞型钙黏附蛋白分选肾癌细胞迁移

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副粘病毒Tianjin株NP、P、M及L蛋白的生物信息学分析

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微生物学通报 2008年第9期35卷 1433-1438页

作者：石立莹李梅李晓眠何健民袁立军天津医科大学基础医学院微生物学教研室天津300070

为了进一步明确副粘病毒Tianjin株的来源和种系进化地位,探讨其高致病性的机制。对Tianjin株NP、P、M及L蛋白进行了生物信息学分析。进化树显示：Tianjin株属于副粘病毒亚科呼吸道病毒属,且很可能为仙台病毒新的基因型。相似性比较表明,... 详细信息

为了进一步明确副粘病毒Tianjin株的来源和种系进化地位,探讨其高致病性的机制。对Tianjin株NP、P、M及L蛋白进行了生物信息学分析。进化树显示：Tianjin株属于副粘病毒亚科呼吸道病毒属,且很可能为仙台病毒新的基因型。相似性比较表明,P蛋白变异最大,相似性仅为78.7%～91.9%;L蛋白相似性最高,为96.0%～98.0%。序列比对显示：NP蛋白氨基酸序列中存在15个独特的变异位点,P蛋白存在29个,M蛋白存在6个,L蛋白存在29个。这些独特变异位点的存在很可能是导致Tianjin株在宿主来源和致病特点等方面与已知仙台病毒株具有较大差异的原因。

关键词：副粘病毒仙台病毒狨猴生物信息学

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