检索结果-内蒙古大学图书馆

中国临床康复 2005年第14期9卷 80-82页

作者：王斌吴建贤洪永锋类延花王明丽安徽医科大学附属医院康复医学科安徽省合肥市230022 安徽医科大学基础医学院微生物学教研室安徽省合肥市230022

目的:通过对非特异性下腰痛患者血清中人巨细胞病毒pp65抗体的检测,试图探究人巨细胞病毒潜伏感染在非特异性下腰痛中的潜在致病作用。方法:实验于2002-05/2004-01在安徽医科大学第一附属医院康复医学科门诊完成。比较3组不同人群外周... 详细信息

目的:通过对非特异性下腰痛患者血清中人巨细胞病毒pp65抗体的检测,试图探究人巨细胞病毒潜伏感染在非特异性下腰痛中的潜在致病作用。方法:实验于2002-05/2004-01在安徽医科大学第一附属医院康复医学科门诊完成。比较3组不同人群外周血清人巨细胞病毒pp65IgM抗体阳性水平。分别采集3组空腹静脉血2mL,作为待检血清。用间接酶联免疫吸附法即人巨细胞病毒pp65重组蛋白抗原包被96孔酶标板,依次加入待测血清。经酶标抗人抗体显色后,用酶标仪(BIO-RAD,model550,US-A)测定A值。结果以(样品A450-本底)÷(对照组A450-本底)≥2.1判为阳性。结果:非特异性下腰痛组人巨细胞病毒pp65IgM阳性率为48.21%(27/56),高于健康大学生组的17.86%(5/28),差异有显著性意义(χ2=7.294,P=0.007);非特异性下腰痛组的人巨细胞病毒pp65IgM阳性率高于脑瘫患儿组的26.42%(14/53),差异有显著性意义(χ2=5.514,P=0.019)。结论:非特异性下腰痛患者出现腰痛症状时可能与人巨细胞病毒的再激活有关,但需进一步确定人巨细胞病毒pp65抗体阳性水平与临床症状的相关性、是否需要相应干预和干预后的变化,以及进行相应组织细胞的病毒分离从而获得腰痛与人巨细胞病毒再激活感染病源学结论的直接证据。对人巨细胞病毒感染与非特异性下腰痛的相关性进?

关键词：腰痛巨细胞病毒感染

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汉坦病毒H8205株IL-2/G1融合基因在Vero细胞中的稳定表达

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热带医学杂志 2005年第2期5卷 120-123页

作者：胡洪波张泽华黄汉菊贾珉刘广华中科技大学同济医学院基础医学院病原生物学系微生物学教研室武汉430030

目的探讨外源性IL-2/G1融合基因在非洲绿猴肾细胞(Vero)获得稳定表达的可行性,为汉坦病毒基因工程疫苗的研制提供一定的实验基础。方法将汉坦病毒H8205株G1的cDNA重组人源IL-2基因后克隆到真核表达载体pcDNA3.1/His,形成重组真核表达质... 详细信息

目的探讨外源性IL-2/G1融合基因在非洲绿猴肾细胞(Vero)获得稳定表达的可行性,为汉坦病毒基因工程疫苗的研制提供一定的实验基础。方法将汉坦病毒H8205株G1的cDNA重组人源IL-2基因后克隆到真核表达载体pcDNA3.1/His,形成重组真核表达质粒pcDNA3.1/His-IL-2-G1,在脂质体介导下,将其导入Vero细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,并继续培养6周,然后通过间接免疫荧光、ELSIA、SDS-PAGE电泳等方法检测IL-2-G1基因在Vero细胞中的稳定表达情况。结果成功构建重组质粒pcDNA3.1/His-IL-2-G1,其片段插入方向正确。经间接免疫荧光和SDS-PAGE电泳证实,转染了真核表达质粒pcDNA3.1/His-IL-2-G1后在Vero细胞培养上清和胞浆中有融合蛋白的表达,其相对分子量为78000u,与预期的相符合。经人IL-2ELISA检测试剂盒检测证实在培养上清和细胞裂解物所表达的融合蛋白有IL-2特性。结论在脂质体介导下,外源性IL-2/G1融合基因能够成功导入Vero细胞并获得稳定表达。

关键词：汉坦病毒 Vero细胞融合蛋白稳定表达

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同种异型抗原激活并套式PCR法克隆人颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段

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重庆医科大学学报 2005年第6期30卷 777-780页

作者：伊正君朱道银杨春何永林刘晔华重庆医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室重庆400016

目的:采用套式PCR克隆经同种异型抗原激活后的人细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表达的颗粒溶素(Granulysin, GLS)Mr 15000与Mr 9000活性片段的编码序列并进行序列测定与分析,为进一步表达纯化该活性片段和研究GLS的免疫杀伤机制奠定基础。办法... 详细信息

目的:采用套式PCR克隆经同种异型抗原激活后的人细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表达的颗粒溶素(Granulysin, GLS)Mr 15000与Mr 9000活性片段的编码序列并进行序列测定与分析,为进一步表达纯化该活性片段和研究GLS的免疫杀伤机制奠定基础。办法:抽提经过培养并激活的健康人CTL淋巴细胞总RNA,经逆转录后以套式PCR方法扩增出GLS的Mr 15000 与Mr 9000活性片段的编码序列,插入pET32a(+)载体,转化大肠杆菌TOP10,阳性克隆经PCR及酶切鉴定后进行测序分析。结果:成功扩增出了包含GLSMr 15000与Mr9000活性片段完整编码序列的cDNA,与预期大小相同,PCR、酶切及测序鉴定证明得到了读码框正确的pET32a-Mr 15000与pET32a-Mr 9000重组子。序列分析表明GLS基因编码产物在第119 位存在氨基酸多态性。结论:人天然颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段编码序列能够通过以上方法获得和克隆并用于后续研究。

关键词：同种异型抗原颗粒溶素细胞毒性T淋巴细胞套式PCR

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鬼臼乙叉甙对星形胶质细胞瘤表达β1,4-半乳糖基转移酶的影响

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实用癌症杂志 2005年第1期20卷 8-11页

作者：严美娟沈爱国程纯邵晓轶李爱红顾建新南通大学基础医学院微生物学与免疫学教研室 226001 复旦大学上海医学院基因研究中心 200032

目的　研究鬼臼乙叉甙(Etoposide ,又称VP16)影响人星形胶质细胞瘤SHG 44细胞周期过程中,与N 糖链合成有关的β1,4 半乳糖基转移酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ(β- 1,4 -galactosyltransferaseⅠ、Ⅱ、Ⅴ,β- 1,4- GalT- Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ)表达变化。方法　首... 详细信息

目的　研究鬼臼乙叉甙(Etoposide ,又称VP16)影响人星形胶质细胞瘤SHG 44细胞周期过程中,与N 糖链合成有关的β1,4 半乳糖基转移酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ(β- 1,4 -galactosyltransferaseⅠ、Ⅱ、Ⅴ,β- 1,4- GalT- Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ)表达变化。方法　首先应用流式细胞仪技术分析VP16处理SHG 44细胞过程中细胞增殖情况的变化,再采用NorthernBlot方法分析处理过程中的SHG 44细胞中β- 1,4 -GalT- Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ的表达变化。结果　流式细胞仪检测表明,细胞培养基加入12 0 μmol/LVP161～6h后能引起SHG 44细胞的S期阻滞。NorthernBlot显示,VP16作用1～6h过程中,β- 1,4 GalT -Ⅰ、Ⅴ表达无显著变化。而β- 1,4- GalT -Ⅱ表达在此过程中则有升高趋势。结论　VP16能够引起星形胶质细胞瘤细胞SHG 44细胞周期改变过程中,β- 1,4 -GalT- Ⅰ、Ⅴ的表达无变化,而β- 1,4 -GalT- Ⅱ的表达明显升高。提示VP16引起肿瘤细胞周期改变,可能通过影响β- 1,4- GalT- Ⅱ的表达,引起有关蛋白质的糖基修饰而实现的。

关键词：星形胶质细胞瘤半乳糖基转移酶鬼臼乙叉甙 SHG-44细胞周期 Northern 流式细胞仪技术流式细胞仪检测 VP16 细胞增殖情况肿瘤细胞周期表达变化 Blot 细胞培养基 β-1 N-糖链细胞过程处理过程方法分析蛋白质升高

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铜绿假单胞菌Quorum Senseing系统中lasR和rhlR基因的克隆、表达及生物学功能研究

铜绿假单胞菌Quorum Senseing系统中lasR和rhlR基因的克隆、表达...

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第八届全国化疗药理会议

作者：谢轶贾文祥杨发龙曾蔚杨维清程曦张再容四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041

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单链抗体A7基因的原核细胞表达

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延边大学医学学报 2005年第4期28卷 241-244页

作者：李辉李强魏晶齐栋魏成淑李红花李英信孟繁平延边大学基础医学院微生物学与免疫学教研室吉林延吉133000 烟台毓璜顶医院山东烟台264000

[目的]制备抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因,为基因治疗重症肌无力奠定基础.[方法]构建含有抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因的重组原核表达载体pHEN 2-单链抗体A 7,将其转化至大肠杆菌HB 2151中,以异丙基--βD-... 详细信息

[目的]制备抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因,为基因治疗重症肌无力奠定基础.[方法]构建含有抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因的重组原核表达载体pHEN 2-单链抗体A 7,将其转化至大肠杆菌HB 2151中,以异丙基--βD-硫代半乳糖苷(IPTG)为诱导剂,在外周质中进行表达,以硼酸钠裂解细菌细胞壁,制备含有单链抗体的裂解液,应用鼠抗c-myc单克隆抗体的斑点杂交试验检测表达的单链抗体A 7基因.[结果]在大肠杆菌的外周质中可见单链抗体A 7基因表达,培养上清液中未见单链抗体A 7基因表达.[结论]抗乙酰胆碱受体主要免疫原区单链抗体A 7基因在原核细胞成功表达.

关键词：重症肌无力 DNA结合蛋白类受体,胆碱能

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幽门螺杆菌VacA基因型与胃疾病

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重庆医科大学学报 2005年第2期30卷 253-255页

作者：田一玲杨致邦余歌军重庆医科大学基础医学院微生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院卫生科重庆400016

目的:探讨幽门螺杆菌(H .pylori)VacA基因型在各种胃肠疾病中的分布及关系。方法:从胃十二指肠疾病患者胃粘膜标本中分离培养H .pylori,PCR测定VacA基因型。结果:10 8株H .pylori菌株,VacAs1a阳性为85株( 79% ) ,VacAs1b阳性2 2株( 2 0 ... 详细信息

目的:探讨幽门螺杆菌(H .pylori)VacA基因型在各种胃肠疾病中的分布及关系。方法:从胃十二指肠疾病患者胃粘膜标本中分离培养H .pylori,PCR测定VacA基因型。结果:10 8株H .pylori菌株,VacAs1a阳性为85株( 79% ) ,VacAs1b阳性2 2株( 2 0 % ) ,VacAm1阳性2 9株( 2 7% ) ,VacAm2阳性77株( 71% ) ,VacAs1a/m2阳性6 6株( 6 1.1% ) ,未发现s2型菌株。其中,慢性胃炎患者VacAs1a阳性率为6 5 .4 % ( 34/ 5 2 ) ,消化性溃疡患者VacAs1a阳性率为90 % ( 36 / 4 0 ) ,胃癌患者VacAs1a阳性率为94 % ( 15 / 16 )。结论:H .pylori菌株VacA基因型绝大多数为s1a/m2型,该型菌株存在于各种胃肠疾病中。

关键词：幽门螺杆菌细胞空泡毒素基因聚合酶链反应胃肠疾病

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用NCCLS M27-A微量法测定白色念珠菌对氟康唑的药物敏感性

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大理学院学报（综合版） 2005年第1期4卷 40-41,45页

作者：马雪莲白丽郭利军王晶中元英大理学院药学院云南大理671000 大理学院基础医学院医学微生物学及免疫学教研室云南大理671000

目的:探讨体外药物敏感试验测定白色念珠茵的药物敏感性。方法:根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)M27-A方案的微量液体稀释法,对34株健康人口腔中分离的白色念珠菌进行药敏试验,测定其MIC值。结果:34株白色念珠茵MIC值在0.25-... 详细信息

目的:探讨体外药物敏感试验测定白色念珠茵的药物敏感性。方法:根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)M27-A方案的微量液体稀释法,对34株健康人口腔中分离的白色念珠菌进行药敏试验,测定其MIC值。结果:34株白色念珠茵MIC值在0.25-2.0μg/ml之间,所有菌株对氟康唑均有不同程度的敏感性。结论:NCCLS推荐的M27-A微量稀释法具有易操作、实用性强、结果稳定、重复性好的优点。健康人群来源的白色念珠茵对氟康唑敏感存在差异。

关键词：白色念珠菌氟康唑最低抑菌浓度 MIC NCCLS M27-A微量法

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2种纯化流感病毒方法的比较研究

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河北医科大学学报 2005年第3期26卷 179-181页

作者：曹康张卫东施桥发李虹蒋中华李明远四川大学华西医学中心基础与法医学院微生物学教研室四川成都610041 河北医科大学基础医学院病原生物学教研室河北石家庄050017

目的比较2种纯化浓缩鸡胚尿囊液中流感病毒方法。方法将流感病毒鸡胚尿囊液分别采用蔗糖密度梯度离心法(sucrose density gradient centrifugation,SDGC)和红细胞吸附释放法(absorptionandrelease RBC,AR RBC)进行纯化,收集纯化病毒测... 详细信息

目的比较2种纯化浓缩鸡胚尿囊液中流感病毒方法。方法将流感病毒鸡胚尿囊液分别采用蔗糖密度梯度离心法(sucrose density gradient centrifugation,SDGC)和红细胞吸附释放法(absorptionandrelease RBC,AR RBC)进行纯化,收集纯化病毒测定血凝效价,比较2种纯化方法。结果SDGC法纯化病毒可在30%和45%蔗糖层面交界处的区带中检测到流感病毒,血凝效价为1∶2560;用AR RBC法纯化病毒过程中用新鲜鸡红细胞出现了溶血现象,而用甲醛处理过的鸡红细胞则无此现象,血凝效价均为1∶2560。结论与SDGC法纯化病毒比较,AR RBC法是一种经济实用、操作简便并有较高纯化效率的方法,尤以甲醛处理过的鸡红细胞纯化效果最好。

关键词：流感病毒A型,人离心法,梯密度红细胞吸附释放法鸡胚

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口腔癌前病变细胞凋亡的原位观察与分析

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口腔医学 2005年第1期25卷 52-54页

作者：范媛詹瑧彭涛宋晓陵冯振卿南京中医药大学基础医学院微生物学教研室南京210029 南京医科大学基础医学院病理学教研室南京210029 南京医科大学口腔医学院病理科南京210029

目的　探讨口腔白斑、扁平苔藓的癌变机制。方法　通过原位末端转移酶标记法 ,观察分析 10例正常口腔黏膜上皮 ,18例扁平苔藓 ,2 3例白斑 ,2 2例鳞癌上皮组织凋亡状况。结果　除单纯上皮增生 ,非糜烂型扁平苔藓外 ,上皮 (轻、中、重 )... 详细信息

目的　探讨口腔白斑、扁平苔藓的癌变机制。方法　通过原位末端转移酶标记法 ,观察分析 10例正常口腔黏膜上皮 ,18例扁平苔藓 ,2 3例白斑 ,2 2例鳞癌上皮组织凋亡状况。结果　除单纯上皮增生 ,非糜烂型扁平苔藓外 ,上皮 (轻、中、重 )异常增生 ,鳞癌及糜烂型扁平苔藓的凋亡指数均高于正常 ,差异有显著性。从上皮异常增生到鳞癌凋亡指数逐渐增高 ,糜烂型扁平苔藓的凋亡指数低于鳞癌 ,差异有显著性。结论　细胞凋亡参与白斑癌变的过程 ,在病变不同阶段作用不同。

关键词：口腔白斑扁平苔藓凋亡原位

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