检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2019年第7期44卷 757-761,766页

作者：刘芳卢婷蔡梦迪吴芳草陈相好王彩霞崔古贞陈峥宏贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室贵州贵阳550025 贵州医科大学医学检验学院贵州贵阳550004

目的:获得高纯度Cas9蛋白,制备Cas9蛋白特异性抗体。方法:以Cas9基因序列为模板,设计特异性引物,PCR扩增获得Cas9基因全长序列,利用无缝拼接技术构建pET28a-Cas9重组表达载体;转化***21(DE3),经IPTG诱导表达Cas9蛋白,并利用His-Tag技术... 详细信息

目的:获得高纯度Cas9蛋白,制备Cas9蛋白特异性抗体。方法:以Cas9基因序列为模板,设计特异性引物,PCR扩增获得Cas9基因全长序列,利用无缝拼接技术构建pET28a-Cas9重组表达载体;转化***21(DE3),经IPTG诱导表达Cas9蛋白,并利用His-Tag技术分离纯化Cas9蛋白;将纯化获得的Cas9蛋白免疫新西兰大白兔,制备Cas9蛋白多克隆抗体。结果:pET28a-Cas9重组表达载体转化的***21(DE3)可表达Cas9蛋白,纯化的Cas9蛋白免疫家兔得到的多克隆抗体效价>1∶256 K。结论:本研究获得了高质量Cas9蛋白及多克隆抗体,为后续CRISPR-Cas9基因编辑的应用奠定了良好的基础。

关键词： Cas9蛋白蛋白表达与纯化多克隆抗体

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姜黄素对结肠炎小鼠结肠组织相关细胞因子表达的调控作用

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天津中医药大学学报 2020年第6期39卷 686-689页

作者：王垚付新张聪纪羽婷黑龙江中医药大学基础医学院微生物学与免疫学教研室哈尔滨150040 黑龙江中医药大学药学院中药化学教研室哈尔滨150040

[目的]探讨不同剂量姜黄素对结肠炎(UC)小鼠的疗效和作用机制。[方法]把小鼠分成正常组、模型组、姜黄素低、中、高剂量组、美沙拉嗪组,采用三硝基苯磺酸(TNBS)复制小鼠结肠炎模型后,经姜黄素治疗7 d,观察小鼠体重和粪便性状等一般生活... 详细信息

[目的]探讨不同剂量姜黄素对结肠炎(UC)小鼠的疗效和作用机制。[方法]把小鼠分成正常组、模型组、姜黄素低、中、高剂量组、美沙拉嗪组,采用三硝基苯磺酸(TNBS)复制小鼠结肠炎模型后,经姜黄素治疗7 d,观察小鼠体重和粪便性状等一般生活习性;分离结肠进行HE染色观察组织病理学形态改变及评分以进行疗效评价;ELISA检测相关细胞因子水平。[结果]模型组与正常组比较,结肠组织上清液中GM-CSF、IL-2、IL-12P40、IL-21的表达上升,而IL-4、IL-15和IL-23的量则下降。经姜黄素治疗后的小鼠与模型组相比,结肠组织上清液中GM-CSF、IL-2、IL-12P40、IL-21的表达降低,IL-4、IL-15和IL-23的量升高。[结论]姜黄素可通过抑制促炎因子的表达,同时增加抑炎因子分泌而有效治疗结肠炎。

关键词：姜黄素结肠炎细胞因子作用机制

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苫瓜蛋白MAP30在毕赤酵母中的表达及其诱发胃腺癌细胞MCG803凋亡的研究

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现代预防医学 2009年第10期36卷 1932-1934页

作者：樊剑鸣朱沙罗俊张改平河南省动物免疫学重点实验室郑州450002 郑州大学公共卫生学院卫生毒理学研究室郑州大学基础医学院免疫和微生物学教研室

[目的]克隆苦瓜蛋白MAP30基因,并在毕赤酵母中表达和纯化其融合蛋白,体外测定MAP30诱发胃腺癌细胞MCG803凋亡。[方法]利用RT-PCR技术扩增861bp的苦瓜蛋白MAP30基因编码区序列.克隆至pMD18-T载体。构建苦瓜MAP30毕赤酵母表达质粒pPICZaA-... 详细信息

[目的]克隆苦瓜蛋白MAP30基因,并在毕赤酵母中表达和纯化其融合蛋白,体外测定MAP30诱发胃腺癌细胞MCG803凋亡。[方法]利用RT-PCR技术扩增861bp的苦瓜蛋白MAP30基因编码区序列.克隆至pMD18-T载体。构建苦瓜MAP30毕赤酵母表达质粒pPICZaA-MAP30并导入毕赤酵母Pichia pastoris ***-PAGE和Western印迹检测MAP30的表达。采用镍离子亲台层析纯化MAP30并通过单细胞凝胶电泳和MTT实验检测其诱发胃腺癌细胞MCG803的凋亡。[结果]克隆片段与基因库所登录的序列相一致,分泌表达的MAP30-His融合蛋白分子量约为30kDa,MAP30体外能诱发胃腺癌细胞MCG803凋亡,MAP30对MCG803半数抑制浓度(IC50)为72.0μg·ml^-1,在一定浓度下,能使肿瘤细胞形成明显的凋亡细胞核;通过单细胞凝胶电泳,能看到明显的慧星尾,表明MAP30引起了肿瘤细胞基因组的降解。[结论]MAP30可作为一个抗肿瘤药而应用于临床研究.

关键词：毕赤酵母基因苦瓜胃肿瘤细胞凋亡腺癌遗传学技术植物蛋白质类人类体外研究

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基因疫苗干预对感染小鼠心肌组织病理及超微结构的影响

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河北医科大学学报 2010年第5期31卷 501-505页

作者：羡鲜韩小艳孟丽赵春芳王永祥河北医科大学基础医学院病原生物学教研室河北石家庄050017 河北北方学院微生物学教研室河北张家口075000 河北医科大学电镜实验中心河北石家庄050017 河北医科大学基础医学院组织胚胎学教研室河北石家庄050017

目的探讨基因疫苗干预对柯萨奇病毒B组3型(coxsackie virus group B type 3,CVB3)感染后,小鼠心肌组织病理及细胞超微结构的变化及意义。方法将BALB/C小鼠随机分为3组,每组11只,用空质粒pcDNA3、基因疫苗pcDNA3/VP1和融合基因疫苗pcDNA3... 详细信息

目的探讨基因疫苗干预对柯萨奇病毒B组3型(coxsackie virus group B type 3,CVB3)感染后,小鼠心肌组织病理及细胞超微结构的变化及意义。方法将BALB/C小鼠随机分为3组,每组11只,用空质粒pcDNA3、基因疫苗pcDNA3/VP1和融合基因疫苗pcDNA3/MDC-L19-VP1分别免疫,共3次,每次间隔4周。末次免疫后第3周,每组随机取3只小鼠,腹腔注射含3倍半数致死量(3 half lethal dose,3LD50)的CVB3病毒液,感染后第7天将小鼠处死,用于检测血中病毒滴度,并取心脏组织进行病理观察和细胞超微结构观察。每组剩余8只小鼠,腹腔注射致死量病毒液,观察并记录动物存活情况。结果预防性接种重组基因疫苗后,CVB3感染的小鼠生存率pcDNA3/MDC-L19-VP1组为37.5%,pcDNA3/VP1组12.5%,pcDNA3组11 d内全部死亡,3组生存率比较差异有统计学意义(P<0.01);3组小鼠血中的病毒滴度依次降低,且差异有统计学意义(P<0.01);光镜观察显示pcDNA3/MDC-L19-VP1组小鼠心肌组织细胞未出现严重的水肿和炎细胞浸润,电镜显示心肌细胞未出现核周水肿,肌原纤维未见断裂溶解,线粒体、肌浆网等细胞器未见明显异常,仅有少量炎性细胞浸润。结论融合基因重组疫苗可以有效的预防CVB3感染对心肌的损伤。

关键词：疫苗,合成柯萨奇病毒感染小鼠

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绿脓假单胞菌主动外排表型及OPRM基因检测

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中华检验医学杂志 2006年第2期29卷 121-121页

作者：杨维青谢轶程曦曾蔚杜艳李学如张再容马巨辉贾文祥四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 西南交通大学生物工程系

绿脓假单胞菌(PA)是医院内最常见的条件致病菌之一,对多种抗菌药物表现耐药[1].研究发现PA细胞膜上的主动外排泵是导致其多重耐药的主要原因之一,主动外排泵由菌体细胞膜的内膜蛋白与外膜蛋白组成,在六种外排泵中外膜蛋白OprM最为常见[... 详细信息

绿脓假单胞菌(PA)是医院内最常见的条件致病菌之一,对多种抗菌药物表现耐药[1].研究发现PA细胞膜上的主动外排泵是导致其多重耐药的主要原因之一,主动外排泵由菌体细胞膜的内膜蛋白与外膜蛋白组成,在六种外排泵中外膜蛋白OprM最为常见[2].本试验对临床分离的PA多重耐药菌主动外排表型及OprM基因进行筛选,探讨PA多重耐药和主动外排的分子机制。

关键词：主动外排泵绿脓假单胞菌基因检测表型多重耐药菌外膜蛋白条件致病菌 prM基因抗菌药物研究发现

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空斑试验在微生物实验教学中的改进及应用

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热带医学杂志 2024年第1期24卷 142-145,151页

作者：徐鸣阳朱勋谭泳谣谭姹辉陈剑煌李美玉中山大学医学院基础与临床医学教学实验室广东深圳518107 中山大学中山医学院微生物学教研室广东广州510080 中山大学中山医学院基础医学实验教学中心广东广州510080

目的通过更换侵染病毒来改进制作“空斑试验”示教板,以得到更鲜明的“空斑试验”结果,使其更好地服务本科实验教学。方法用不同滴度的寨卡病毒和登革病毒感染培养于12孔细胞培养板的Vero细胞,置37℃吸附2 h。吸附后,用1%甲基纤维素Eagl... 详细信息

目的通过更换侵染病毒来改进制作“空斑试验”示教板,以得到更鲜明的“空斑试验”结果,使其更好地服务本科实验教学。方法用不同滴度的寨卡病毒和登革病毒感染培养于12孔细胞培养板的Vero细胞,置37℃吸附2 h。吸附后,用1%甲基纤维素Eagle氏覆盖液进行覆盖步骤,置细胞于37℃培养6~7 d将细胞固定和染色后,用自来水冲洗,待干。结果感染寨卡病毒的未死亡脱落的Vero细胞被结晶紫染色,紫色背景明显。肉眼可看到寨卡病毒感染细胞产生的无色空斑,空斑呈圆形,清晰完整,边缘整齐。空斑数量随着病毒浓度的升高而增加,复孔产生空斑数量趋势一致。感染登革病毒的未脱落Vero细胞被染成紫色,形成较鲜明的紫色背景,登革病毒感染细胞产生了无色空斑,但是空斑的形成数量较少,且不是所有复孔都产生了空斑。随着病毒稀释倍数增加,产生的空斑数量无明显减少趋势。结论用寨卡病毒感染Vero细胞能得到更典型的空斑试验结果,该方法更适用于本科教学制作示教结果用。

关键词：空斑试验 Vero细胞寨卡病毒登革病毒实验教学

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铜绿假单胞菌必需基因的研究进展

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微生物学通报 2021年第6期48卷 2143-2154页

作者：张明月胡福泉黄广涛遵义医科大学第一临床学院贵州遵义563000 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院微生物学教研室重庆400038 遵义医科大学附属医院烧伤整形外科贵州省临床(创面修复)研究中心贵州遵义563000

铜绿假单胞菌为专性需氧非发酵革兰氏阴性杆菌,是医院感染的常见条件致病菌之一,可引起呼吸道、泌尿道、烧伤创面和菌血症等严重感染。铜绿假单胞菌耐药形势日益严峻,给临床治疗带来困难。必需基因是生长过程中必不可少的看家基因,对铜... 详细信息

铜绿假单胞菌为专性需氧非发酵革兰氏阴性杆菌,是医院感染的常见条件致病菌之一,可引起呼吸道、泌尿道、烧伤创面和菌血症等严重感染。铜绿假单胞菌耐药形势日益严峻,给临床治疗带来困难。必需基因是生长过程中必不可少的看家基因,对铜绿假单胞菌必需基因进行深入研究,不仅有助于了解细菌的生长、毒力等基本特性,也有助于筛选新的抗菌药物靶标。本文针对铜绿假单胞菌及其必需基因进行综述,首先介绍了铜绿假单胞菌的基本生理特性及目前耐药趋势,又归纳了必需基因的研究方法,最后对铜绿假单胞菌必需基因的研究进展进行总结。

关键词：铜绿假单胞菌必需基因转座子生物信息学 CRISPRi

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原核表达家蝇抗菌肽Phormicin A,B蛋白对大肠杆菌标准株的影响

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生物加工过程 2019年第6期17卷 623-629页

作者：王兵杜兵王代琴覃海韦鹏威姚杨万珊王涛吴建伟贵州医科大学生物与工程学院生物技术教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学医药生物技术工程研究中心贵州贵阳550025 贵州医科大学第一附属医院微生物免疫科贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学基础医学院病原生物学教研室贵州贵阳550025

抗菌肽是近年来新型的抗菌剂药物候选者。以家蝇防御素家族Phormicin A、B抗菌肽为研究对象,探究了其对大肠杆菌的作用效果。采用原核表达法获得二者蛋白,将其作用于大肠杆菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为20和7.5 ... 详细信息

抗菌肽是近年来新型的抗菌剂药物候选者。以家蝇防御素家族Phormicin A、B抗菌肽为研究对象,探究了其对大肠杆菌的作用效果。采用原核表达法获得二者蛋白,将其作用于大肠杆菌标准株,通过微量液体稀释法测定其最小抑菌浓度分别为20和7.5 mmol/L,并绘制了二者作用于大肠杆菌标准株的时间生长曲线。结果显示:家蝇Phormicin A、B原核表达蛋白对于大肠杆菌标准株的生长具有一定的抑制作用,此研究为应用于抗临床大肠杆菌感染药物的研发提供了一定的参考。

关键词： Phormicin 家蝇抗菌肽

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FDFT1基因的泛癌表达分析、与癌症预后的关联性分析及其对几种肿瘤细胞增殖的影响

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右江民族医学院学报 2023年第4期45卷 563-569页

作者：刘巧珍韦连登刘琳田旭云邹萸婷杨维玲姜艳曾怡右江民族医学院基础医学院广西百色533000 右江民族医学院基础医学院病原微生物学与免疫学教研室广西百色533000 广西高校肿瘤免疫与感染性疾病基础研究与转化重点实验室广西百色533000 右江民族医学院肿瘤免疫病理学重点实验室广西百色533000

目的探究FDFT1(farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1)基因在不同肿瘤中的表达差异及其对肿瘤预后与肿瘤微环境的影响,及FDFT1过表达对几种肿瘤细胞增殖的影响。方法利用TCGA联合GTEx数据库分析FDFT1 mRNA在不同肿瘤组织与正常... 详细信息

目的探究FDFT1(farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1)基因在不同肿瘤中的表达差异及其对肿瘤预后与肿瘤微环境的影响,及FDFT1过表达对几种肿瘤细胞增殖的影响。方法利用TCGA联合GTEx数据库分析FDFT1 mRNA在不同肿瘤组织与正常组织之间的表达差异;绘制K-M生存曲线,评估FDFT1基因表达与癌症预后的关系;利用细胞增殖实验探索FDFT1过表达对几种肿瘤细胞增殖的影响。结果与正常组织相比,在肾上腺皮质癌(adrenocortical carcinoma,ACC)等16种肿瘤组织中FDFT1 mRNA表达显著上调;在肾透明细胞癌(kidney renal cell carcinoma,KIRC)等8种肿瘤组织中FDFT1 mRNA表达下调。癌症预后相关性分析显示,FDFT1的高表达在ACC、胰腺癌(pancreatic adenocarcinoma,PAAD)、口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)及肝细胞癌(liver hepatocellular carcinoma,LIHC)中有较差的预后意义;而在KIRC中FDFT1的高表达与较好的预后有关。免疫浸润分析结果显示,与FDFT1基因低表达组相比,高表达组的ACC、OSCC、KIRC组织中活化的树突状细胞(activated dendritic cell,aDC)浸润评分较低;而在PAAD癌组织中,aDC浸润评分差异无统计学意义。细胞增殖实验结果显示FDFT1过表达促进人胰腺癌细胞(PANC-1)等细胞的增殖。结论FDFT1基因在ACC等16种肿瘤组织中mRNA表达上调,在KIRC等8种肿瘤组织中表达下调。FDFT1高表达在PAAD、OSCC和LIHC中与较差的预后有关,在KIRC中与较好的预后有关。FDFT1过表达慢病毒促进PANC-1等细胞的增殖。

关键词： FDFT1 泛癌表达分析细胞增殖

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LBL结合PBL教学法在医学微生物学实验教学的应用

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基础医学教育 2019年第2期21卷 128-131页

作者：任向宇陶格斯李恋福泉张明昱孙晓琳殷兆丽包丽丽内蒙古医科大学基础医学院病原生物与免疫学实验室呼和浩特010059 内蒙古医科大学基础医学院微生物学教研室内蒙古医科大学附属医院检验科

为了提高教学水平,拓宽教学思路,提高学生的动手能力和逻辑思维能力,将LBL与PBL相结合的教学模式尝试应用于医学微生物学实验教学,各取其优势,取得了良好的教学效果。在学生掌握基本的实验技能和方法的基础上,既调动了学生学习积极性,... 详细信息

为了提高教学水平,拓宽教学思路,提高学生的动手能力和逻辑思维能力,将LBL与PBL相结合的教学模式尝试应用于医学微生物学实验教学,各取其优势,取得了良好的教学效果。在学生掌握基本的实验技能和方法的基础上,既调动了学生学习积极性,注重培养学生自主学习能力、知识整合构建能力和团结协作能力,又结合LBL教学法系统、完整地传授了知识,增强学生对理论知识的理解与记忆,为以后的临床工作打下坚实的基础。

关键词：医学微生物学实验教学 PBL教学 LBL教学

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