检索结果-内蒙古大学图书馆

中国老年学杂志 2011年第6期31卷 985-988页

作者：李莎莎袁桂峰骆耐香王雯刘菁陈森洲桂林医学院病理学教研室广西桂林541001 桂林医学院微生物学与免疫学教研室

目的探讨昆明山海棠(THH)对低氧诱导因子(HIF-1α)在胶原性关节炎(CIA)大鼠模型中表达的影响及其作用机制。方法建立CIA大鼠模型,然后用THH灌胃给药治疗30 d,观察关节炎指数(AI),30 d后HE染色观察关节的病理改变,RT-PCR以及免疫组化法检... 详细信息

目的探讨昆明山海棠(THH)对低氧诱导因子(HIF-1α)在胶原性关节炎(CIA)大鼠模型中表达的影响及其作用机制。方法建立CIA大鼠模型,然后用THH灌胃给药治疗30 d,观察关节炎指数(AI),30 d后HE染色观察关节的病理改变,RT-PCR以及免疫组化法检测HIF-1α的表达。结果给药30 d后,THH组HE染色显示滑膜增殖以及炎症反应明显减轻,免疫组化以及PT-PCR显示HIF-1α表达明显降低(P<0.05)。结论 THH对CIA大鼠有显著疗效,其作用机制与调节外周血以及滑膜组织内的HIF-1α的表达有关。

关键词：昆明山海棠胶原诱导性关节炎低氧诱导因子-1α

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HCMV截短UL83基因真核表达重组体的构建、转染及其免疫效力研究

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微生物学报 2006年第3期46卷 451-455,T0001页

作者：高荣保李艳秋王明丽安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032

为了构建人巨细胞病毒（HCMV）截短UL83基因真核表达重组体，实现其在Hep-2细胞中的稳定表达，研究该截短UL83基因真核表达重组体免疫效力，采用基因重组的方法，将HCMVAD169株截短UL83基因定向克隆到带有绿色荧光蛋白（GFP）作为报告... 详细信息

为了构建人巨细胞病毒（HCMV）截短UL83基因真核表达重组体，实现其在Hep-2细胞中的稳定表达，研究该截短UL83基因真核表达重组体免疫效力，采用基因重组的方法，将HCMVAD169株截短UL83基因定向克隆到带有绿色荧光蛋白（GFP）作为报告基因的真核表达载体pEGFP-C1上，构建真核重组表达质粒pEGFP-C1-UL83；脂质体转染至Hep-2细胞中，G418筛选获得稳定表达pp65细胞表达系。经基因测序屁示，重组体中截短UL83基因完全正确。RT-PCR和Westem blot检测证实其可在Hep-2细胞中稳定表达。用该重组体和其表达产物在HCMV先天性感染小鼠模型上进行免疫保护试验显示，母鼠血清可检测到特异性抗HCMVpp65抗体，效价为：1：2．51～1：50．79；子鼠脑组织内未分离出病毒，亦未检测出病毒pp65蛋白抗原表达。初步结果表明，pEGFP-C1-UL83具有较好的免疫原性，可作为DNA疫苗刺激机体产生有效抗体。并具有阻止病毒垂直传播的保护性作用。

关键词： HCMV截短uL83基因绿色荧光蛋白转染 Hep-2细胞 DNA疫苗

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乳酸杆菌诱导小鼠宫颈鳞癌U_(14)细胞凋亡的动物实验

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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第4期24卷 268-271页

作者：李秀真朱万孚曹卉曹蕊陈廷山长武刘昌平北京大学基础医学院病原生物学系山东济宁医学院微生物学教研室

目的　探讨乳酸杆菌 (Lactobacillus,LB)对小鼠宫颈鳞癌U14 的抗癌作用及对U14 细胞凋亡的诱导作用。方法　建立KM和 6 15近交系鼠U14 移植瘤动物模型 ,并随机分组 ,检测实验组与对照组小鼠的瘤体平均重量和抑瘤率 ;采用TUNEL法检测细... 详细信息

目的　探讨乳酸杆菌 (Lactobacillus,LB)对小鼠宫颈鳞癌U14 的抗癌作用及对U14 细胞凋亡的诱导作用。方法　建立KM和 6 15近交系鼠U14 移植瘤动物模型 ,并随机分组 ,检测实验组与对照组小鼠的瘤体平均重量和抑瘤率 ;采用TUNEL法检测细胞凋亡指数 (AI)。结果　与对照组比较 ,嗜酸乳杆菌 (L .acidophilus,LA)对两种品系小鼠移植瘤的抗癌作用 ,差异均具有非常显著性 (P <0 .0 1) ;提前给予LA组小鼠 ,其移植瘤生长速度显著慢于对照组 (P <0 .0 1) ;LA及干酪乳杆菌 (L .casie,LC)对于小鼠U14 移植瘤 ,亦具有显著抗癌作用 (P <0 .0 1) ,但LA与LC两组间的抗癌作用 ,差异无显著性(P >0 .0 5 ) ;在 6 15系小鼠模型组、LA及顺铂 (Diaminodichloroplatin ,DDP)组小鼠之间 ,AI的差异具有非常显著性 (P <0 .0 1)。结论　LB对小鼠宫颈鳞癌具有显著的抗癌作用 ,可有效地抑制肿瘤的发生和发展。

关键词：乳酸杆菌小鼠宫颈鳞癌 U14细胞细胞凋亡 TUNEL法微生物疗法

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2株红树林淤泥放线菌的鉴定及抗菌活性研究

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2011年第2期39卷 157-161页

作者：陈森洲黄大林刘菁袁桂峰钟毓娟桂林医学院微生物学与免疫学教研室广西桂林541004

【目的】对分离自广西北海红树林海洋淤泥中的2株放线菌(BH200951、BH200954)进行鉴定,并对其抗菌活性进行分析。【方法】对BH200951与BH200954 2株典型放线菌的形态特征及生理生化特征进行了观测,并采用医学药敏试验方法对其抗菌活性... 详细信息

【目的】对分离自广西北海红树林海洋淤泥中的2株放线菌(BH200951、BH200954)进行鉴定,并对其抗菌活性进行分析。【方法】对BH200951与BH200954 2株典型放线菌的形态特征及生理生化特征进行了观测,并采用医学药敏试验方法对其抗菌活性进行了测定,最后提取2株菌株的总DNA,用放线菌通用引物对其16 SrDNA进行PCR扩增,对获得的扩增结果进行DNA序列测定,采用邻接法构建其与其他典型菌株的系统发育树。【结果】在高氏1号培养基上,BH200951和BH200954菌株生长良好,菌落分别呈灰白色和黄色,菌落皱褶,致密坚实;在光学显微镜下观察发现,2株菌株气生菌丝发达,呈深灰色,成熟后生成孢子丝;能使明胶液化,淀粉、纤维素水解,牛奶凝固而不胨化;对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌均有较好的抑制作用。经测序后比对显示,2株放线菌菌株均属于链霉菌属,其中BH200951鉴定为链霉菌属(Streptomyces aurantiogriseus)AY999773的变种;BH200954初步鉴定为链霉菌属的仙台链霉菌。【结论】对分离自广西北海红树林海洋淤泥放线菌BH200951和BH200954菌株进行了鉴定,其发酵产物具有明显的抗菌活性。

关键词：海洋淤泥红树林放线菌 16S rDNA

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临床诊断为非甲～戊型肝炎患者的病原学研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2002年第1期16卷 7-10页

作者：何忠平庄辉宋淑静王雪萍王融冰刘庄北京大学基础医学院微生物学教研室 100083 北京地坛医院

目的　探讨临床诊断为非甲～戊型肝炎患者的病原学。方法　采用巢式PCR(nPCR)检测HBV、TTV、B19、和SENVDNA ;用逆转录巢式PCR(RT nPCR)检测HGV和HCVRNA。结果　 6 0例临床诊断为非甲～戊型肝炎患者中 ,单独HBVDNA阳性 30例 (阳性率为 5... 详细信息

目的　探讨临床诊断为非甲～戊型肝炎患者的病原学。方法　采用巢式PCR(nPCR)检测HBV、TTV、B19、和SENVDNA ;用逆转录巢式PCR(RT nPCR)检测HGV和HCVRNA。结果　 6 0例临床诊断为非甲～戊型肝炎患者中 ,单独HBVDNA阳性 30例 (阳性率为 5 0 0 % ) ,HBV和TTVDNA阳性10例 (16 7% ) ,HBV和B19DNA阳性 6例 (10 0 % ) ,HCVRNA、HBV和SENVDNA阳性 1例 (1 7% ) ,单独HCVRNA阳性 1例 (1 7% ) ,HCVRNA和B19DNA阳性 1例 (1 7% ) ,HGVRNA无一例阳性 ,单独B19DNA阳性 2例 (3 3% ) ,单独TTVDNA阳性 1例 (1 7% ) ,另 8例 (13 3% )上述病毒核酸均为阴性。HBV合并感染TTV或B19对其血清学生化指标无影响。结论　HBV是临床诊断为非甲～戊型肝炎的主要病原 ,HGV、TTV。

关键词：病毒性肝炎乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒庚型肝炎病毒病原学诊断

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葡萄球菌肠毒素B突变体基因表达和功能的初步研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第2期21卷 200-203页

作者：俞红钱利生上海医科大学基础医学院微生物学教研室 200032

目的　应用PCR致变及基因克隆技术 ,获得抗原性保留 ,但超抗原毒性明显下降的葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体 ,用作新型淋巴细胞激活分子和超抗原疫苗的研究。方法　用PCR和PCR致变技术 ,从SEB标准株扩增SEB(SEB N)和SEB突变基因 (SEB M) ... 详细信息

目的　应用PCR致变及基因克隆技术 ,获得抗原性保留 ,但超抗原毒性明显下降的葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体 ,用作新型淋巴细胞激活分子和超抗原疫苗的研究。方法　用PCR和PCR致变技术 ,从SEB标准株扩增SEB(SEB N)和SEB突变基因 (SEB M) ,分别与原核表达质粒pTrc99A重组 ,转化大肠杆菌JM10 9,经筛选获得重组质粒pTrcNb和pTrcMb ,用双脱氧链终止法作序列分析。表达的SEB N和SEB M蛋白 ,经双向免疫扩散试验作抗原性鉴定后 ,刺激小鼠脾细胞并由ELISA法检测培养上清中IL 2的水平。结果　SEB N 15 0位苏氨酸 (密码子ACT)非定向突变为丙氨酸(密码子GCT) ,SEB M 2 3位天冬酰胺 (密码子AAT)定向突变为丝氨酸 (密码子AGT)。两种突变基因表达的蛋白均与抗SEB形成明显沉淀线 ,与天然SEB刺激小鼠脾细胞产生IL 2水平相比 ,SEB N和SEB M突变体蛋白分别下降 12 .5倍和 40倍。结论　获得了能表达SEB N和SEB M突变体蛋白的 2株工程菌。表达的突变体蛋白具有良好的免疫反应性 ,但刺激小鼠脾细胞产生白细胞介素 2的超抗原生物学活性明显下降。

关键词：葡萄球菌肠毒素B 突变体蛋白超抗原白细胞介素2

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lncRNA HOTAIR 和H19 SNPs与胃癌及EB病毒相关胃癌遗传易感性的关系

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中国病理生理杂志 2020年第11期36卷 2030-2036页

作者：卫美蓉王笑峰罗兵西京学院医学院陕西西安710123 青岛大学医学院基础医学院微生物学教研室山东青岛266021

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19及HOTAIR基因多态性与胃癌和EB病毒相关胃癌(EBVaGC)易感性的关系。方法:研究对象选择EB病毒阴性胃癌(EBVnGC)组织65例、EBVaGC组织50例及115例健康人外周血标本,并从中提取其DNA备用。选择H19 rs3024... 详细信息

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)H19及HOTAIR基因多态性与胃癌和EB病毒相关胃癌(EBVaGC)易感性的关系。方法:研究对象选择EB病毒阴性胃癌(EBVnGC)组织65例、EBVaGC组织50例及115例健康人外周血标本,并从中提取其DNA备用。选择H19 rs3024270和rs3741219,以及HOTAIR rs4759314和rs874945共4个基因多态性位点,利用Taq-Man MGB等位基因分型试剂盒对各单核苷酸多态性(SNP)位点基因进行分型,统计分析实验结果。结果:H19及HOTAIR的SNPs在全部标本中均符合Hardy-Weinberg平衡。(1)H19 rs3024270位点的SNP在胃癌组与对照组中的差异有统计学意义(P<0.05);其中G等位基因为保护基因,个体携带G等位基因可显著降低罹患胃癌的风险(P<0.01);(2)HOTAIR rs4759314位点在胃癌组与对照组中基因型和等位基因分布频率均有显著差异(P<0.05);基因型为GG的人群,胃癌的发病风险显著增加(P<0.05);且胃癌的风险基因可能是G等位基因,携带G等位基因人群罹患胃癌的风险显著增加(P<0.05);(3)H19 rs3741219及HOTAIR rs874945位点的各基因型及等位基因频率在两组间无显著差异(P>0.05);(4)HOTAIR rs4759314位点G等位基因在EBVaGC组的分布高于EBVnGC组,而EBVaGC和EBVnGC组间其他SNPs的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:H19 rs3024270和HOTAIR rs4759314位点的SNPs与胃癌的发病风险有关,但与EBVaGC的发病风险之间未观察到明确的关联性。

关键词：胃癌长链非编码RNA H19基因 HOTAIR基因 EB病毒单核苷酸多态性易感性

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HPV16E7蛋白编码基因原核表达与鉴定

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四川大学学报（医学版） 2006年第2期37卷 187-190页

作者：施桥发王保宁李虹魏晓丽张卫东曹康蒋忠华李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 成都医学院病原生物学教研室

目的研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其细胞转化机制,对HPV16E7蛋白原核表达质粒进行构建、表达和鉴定。方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板,采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamH和Hind双酶切后插入相同酶切pET32a(+)载体... 详细信息

目的研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其细胞转化机制,对HPV16E7蛋白原核表达质粒进行构建、表达和鉴定。方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板,采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamH和Hind双酶切后插入相同酶切pET32a(+)载体,转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选。经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot检测目标蛋白表达情况。结果成功构建了原核表达质粒pET32/E7,HPV16E7-TRX融合蛋白在BL21(DE3)菌株中高效表达,在1mmol/LIPTG、30℃诱导条件下融合蛋白表达量占菌体总蛋白的30%左右。结论pET32/E7原核表达质粒的构建、HPV16E7融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。

关键词： HPV16 原核表达 SDS—PAGE 免疫印迹

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泛力克对白色念珠菌的抑制作用

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湖北医科大学学报 1998年第2期19卷 187-188页

作者：白瑞珍饶邦忠屈雪菊基础医学院微生物学与免疫学教研室

将泛力克油剂用琼脂板孔中滴加法对白色念珠菌临床菌株行抑菌试验，用常用的抗真菌药物达克宁霜、克霉唑软膏、无极膏作对照。经统计学处理显示，泛力克对白色念珠菌有很强的抑菌作用，其抑菌效果明显高于达克宁霜、克霉唑软膏和无极膏... 详细信息

将泛力克油剂用琼脂板孔中滴加法对白色念珠菌临床菌株行抑菌试验，用常用的抗真菌药物达克宁霜、克霉唑软膏、无极膏作对照。经统计学处理显示，泛力克对白色念珠菌有很强的抑菌作用，其抑菌效果明显高于达克宁霜、克霉唑软膏和无极膏（Ｐ＜０．０１）。

关键词：念珠菌白色药物作用泛力克

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DEN2重组E蛋白单克隆抗体的制备及其生物学活性

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中山大学学报（医学科学版） 2005年第1期26卷 56-60页

作者：曾祥凤江丽芳方丹云汤云霞魏惠永晏辉钧中山大学基础医学院微生物学教研室

[目的]研制登革病毒E蛋白特异性单克隆抗体,鉴定其各种生物学特性.[方法]用纯化的Pichia pastoris酵母表达的DEN2重组E蛋白作为抗原,免疫Balb/c小鼠,采用传统的细胞融合、有限稀释法克隆化杂交瘤细胞,制备稳定分泌McAbs的细胞株.采用硫... 详细信息

[目的]研制登革病毒E蛋白特异性单克隆抗体,鉴定其各种生物学特性.[方法]用纯化的Pichia pastoris酵母表达的DEN2重组E蛋白作为抗原,免疫Balb/c小鼠,采用传统的细胞融合、有限稀释法克隆化杂交瘤细胞,制备稳定分泌McAbs的细胞株.采用硫酸铵沉淀法纯化腹水中的McAbs,用ELISA、IFA、Western Blot和空斑减数中和实验等鉴定McAbs的各种生物学活性.[结果]用ELISA、IFA检测证实5株杂交瘤细胞产生的McAbs与DEN2重组E蛋白和DEN全病毒均有较高的亲和力;Western Blot分析发现其中3株杂交瘤细胞(3G3,6G11,4E3)分泌的McAbs能与其相对分子质量Mr=(66～69)×103的DEN2重组E蛋白结合.空斑减数中和实验证实所获得的单克隆抗体具有中和登革病毒感染C6/36细胞的作用.[结论]成功地制备了5株抗登革病毒E蛋白特异性的McAbs,为进一步研究E蛋白的结构和功能及临床诊断试剂盒研发打下了基础.

关键词： E蛋白 DEN 单克隆抗体生物学活性登革病毒 ELISA 分泌杂交瘤细胞硫酸铵沉淀法纯化

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