检索结果-内蒙古大学图书馆

时珍国医国药 2011年第4期22卷 942-944页

作者：杜泽乡孙情乔伟于冉冉冯乐平桂林医学院.药学院广西桂林541004 桂林医学院.生物技术学院广西桂林541004

目的探讨白花丹抑制舌癌细胞Tca的增殖及对细胞凋亡的影响。方法将舌癌细胞Tca按5×103个/孔的浓度接种于96孔细胞培养板,置于37℃,5%CO2的培养箱中预培养24 h,待细胞80%长满孔底,24 h后将白花丹分别按0.025,0.1,0.2,0.3 mg/ml和0.4... 详细信息

目的探讨白花丹抑制舌癌细胞Tca的增殖及对细胞凋亡的影响。方法将舌癌细胞Tca按5×103个/孔的浓度接种于96孔细胞培养板,置于37℃,5%CO2的培养箱中预培养24 h,待细胞80%长满孔底,24 h后将白花丹分别按0.025,0.1,0.2,0.3 mg/ml和0.4 mg/ml分别加入各培养组中,每组5复孔。置37℃、5%CO2培养箱中培养。分别培养48,72,96,120 h后,用酶标仪在490 nm下,MTT染色法测定细胞增殖情况,计算白花丹对肿瘤细胞的抑制率。同时,Hoe-chest33342荧光染色法测定细胞核变化情况,观察细胞凋亡的形态学变化情况。结果随着白花丹浓度的增大和作用时间的延长,白花丹对人舌癌细胞增殖的抑制作用越明显。当药物浓度达0.4 mg/ml时,培养48 h时与其他各组比较有统计学意义(P<0.05或P<0.01),当药物浓度在0.3 mg/ml细胞培养达96 h时,与小于0.3 mg/ml和小于96 h培养时间的其他各组比较均有显著性差异(P<0.05),说明此点是白花丹有效成分抑制肿瘤细胞的一个关键点。细胞培养72 h后Hoechst33342染色发现,随着药物浓度的不断增加,凋亡细胞的数量越来越多。当药物浓度达到0.4 mg/ml时,镜下几乎很少见到完整的细胞核出现,相反出现了大量的细胞和碎片和不完整的细胞核。结论白花丹提取物可以有效抑制肿瘤细胞增长,导致肿瘤细胞大量地细胞凋亡,说明其在肿瘤治疗中具有很大的应用价值。

关键词：白花丹素舌癌增殖凋亡

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地蚕的化学成分研究

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中药材 2023年第11期46卷 2741-2744页

作者：闫梦麒彭彩凤韦易伸黄婉仪黄远莹周先丽梁成钦桂林医学院药学院广西桂林541199 桂林医学院生物技术学院广西桂林541199

目的:研究地蚕Stachys geobombycis ***的化学成分。方法:运用硅胶柱、MCI、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶色谱柱及高效液相色谱等技术,对地蚕根的化学成分进行分离纯化,并根据波谱数据鉴定所得化合物结构。结果:从地蚕根中分离得到10个化合... 详细信息

目的:研究地蚕Stachys geobombycis ***的化学成分。方法:运用硅胶柱、MCI、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶色谱柱及高效液相色谱等技术,对地蚕根的化学成分进行分离纯化,并根据波谱数据鉴定所得化合物结构。结果:从地蚕根中分离得到10个化合物,分别鉴定为:glucosuringic acid(1)、腺苷(2)、cyclo(L-Phe-L-Thr)(3)、异香草酸(4)、8-O-methyl harpagide(5)、leucoseptoside A(6)、calceolarioside B(7)、chrysoeriol-7-sophoroside(8)、脱咖啡酰基毛蕊糖苷(9)、syringalide A-3′-α-L-rhamnopyranoside(10)。结论:化合物1~10均为首次从地蚕中分离得到。

关键词：地蚕分离纯化结构鉴定化学成分

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异麦芽酮糖减少小鼠肝脏脂肪堆积的关键基因筛选与验证

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食品工业科技 2022年第16期43卷 1-8页

作者：何秋玲张彩平桂静刘泳杏季久秀周波张震桂林医学院药学院广西桂林541199 桂林医学院智能医学与生物技术学院广西桂林541199 临沂大学农林科学学院山东临沂276005 桂林医学院科学实验中心广西桂林541199

为筛选和验证异麦芽酮糖减少小鼠肝脏脂肪堆积的关键基因,本研究利用Limma软件包对异麦芽酮糖和蔗糖饲喂22周的雄性小鼠肝脏转录组数据进行差异表达分析(GSE54723,n=14),共筛选出49个DEGs,通过Metascape软件对DEGs进行GO功能富集分析和K... 详细信息

为筛选和验证异麦芽酮糖减少小鼠肝脏脂肪堆积的关键基因,本研究利用Limma软件包对异麦芽酮糖和蔗糖饲喂22周的雄性小鼠肝脏转录组数据进行差异表达分析(GSE54723,n=14),共筛选出49个DEGs,通过Metascape软件对DEGs进行GO功能富集分析和KEGG信号通路分析,使用Cytoscape软件和WGCNA软件包构建基因共表达网络,取重叠基因搜寻关键节点基因,挖掘得到10个关键节点基因Pnliprp1、Prss2、Clps、Tff2、Pnlip、Ctrl、Cpa1、Cel、Dmbt1、Vil1,基因功能分析表明Pnlip、Pnliprp1、Cel、Clps与脂质代谢相关。qPCR结果显示,异麦芽酮糖组肝脏组织中这4个与脂质代谢相关基因的表达量显著高于蔗糖组,通过比较正常人和非酒精性脂肪肝患者肝脏组织转录组数据中上述基因的表达量(GSE163211,n=318),发现正常人Pnlip、Pnliprp1、Cel、Clps基因表达量亦显著(P<0.05)高于病例组。本研究揭示了异麦芽酮糖通过上调Pnlip、Pnliprp1、Cel、Clps的合成促进脂肪分解从而降低肝脏脂质的积累,为异麦芽酮糖影响肝脏脂质代谢的分子机制研究提供了理论支撑。

关键词：异麦芽酮糖蔗糖转录组数据节点基因脂质代谢

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常氧条件下姜黄素对肝癌Hep1细胞缺氧诱导因子-1α表达的影响

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山东医药 2010年第43期50卷 13-15页

作者：陈秋月曾思恩倪琦谭宁桂林医学院附属医院广西桂林541001 桂林医学院病理教研室桂林医学院生物技术学院

目的为肝癌的治疗提供新思路。方法将对数生长期肝癌Hep1细胞随机分为6组,空白对照组仅加入培养液,实验对照组加入等量溶媒二甲基亚砜(DMSO),姜黄素1～4组分别加入姜黄素5、10、15、20μmol/L。各组均置于常氧环境中培养24 h。RT-PCR法... 详细信息

目的为肝癌的治疗提供新思路。方法将对数生长期肝癌Hep1细胞随机分为6组,空白对照组仅加入培养液,实验对照组加入等量溶媒二甲基亚砜(DMSO),姜黄素1～4组分别加入姜黄素5、10、15、20μmol/L。各组均置于常氧环境中培养24 h。RT-PCR法检测HIF-1αmRNA表达,Western blot法检测HIF-1α蛋白表达。结果姜黄素2～4组HIF-1αmRNA表达均明显高于空白对照组(P均<0.05)。姜黄素1～4组HIF-1α蛋白表达均明显高于空白对照组(P均<0.01)。结论常氧条件下,姜黄素呈浓度依赖性方式上调肝癌Hep1细胞HIF-1α的表达。

关键词：肝癌Hep1细胞姜黄素缺氧诱导因子-1α 常氧条件

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烧烤牛肉食品对果蝇致突变性的影响

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环境与职业医学 2009年第6期26卷 575-577页

作者：韦日明黄俊杰罗峙均肖福英桂林医学院生物技术学院细胞与遗传学教研室广西桂林541004 桂林医学院生物技术学院2005级生物技术专业广西桂林541004

[目的]观察烧烤牛肉对果蝇致突变性的影响。[方法]采用Oregon K野生型黑腹雄果蝇,分别饲养在含有烧烤牛肉的培养基中(浓度分别为0.96×10^(-3)g/mL、2.88×10^(-3)g/mL 8.64×10^(-3)g/mL),然后在普通培养基中与雌蝇交配,观... 详细信息

[目的]观察烧烤牛肉对果蝇致突变性的影响。[方法]采用Oregon K野生型黑腹雄果蝇,分别饲养在含有烧烤牛肉的培养基中(浓度分别为0.96×10^(-3)g/mL、2.88×10^(-3)g/mL 8.64×10^(-3)g/mL),然后在普通培养基中与雌蝇交配,观察F_1代致突变情况。[结果]染毒组与空白组比较,染毒组的F_1代果蝇致突变率为1.601%。除0.96×10^(-3)g/mL组与空白组差异无统计学意义外(P>0.05);2.88×10^(-3)g/mL组和8.64×10^(-3)g/mL组与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。[结论]烧烤牛肉对果蝇有明显的致突变作用。

关键词：烧烤食物黑腹果蝇致突变性

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pcDNA3-hNGF真核表达载体的构建及其在大鼠骨髓基质干细胞中的表达

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中国骨质疏松杂志 2016年第1期22卷 41-44页

作者：粟谋贝朝涌蒋林彬徐威陈宁桂林医学院附属医院四肢创伤骨科 541001 桂林医学院生物技术学院 541004

目的构建人神经生长因子(h NGF)真核表达载体pc DNA3-h NGF,检测其在大鼠骨髓基质干细胞中的表达。方法利用PCR扩增h NGF全长c DNA,构建真核表达载体pc DNA3-h NGF,经测序证实后将其转染至大鼠骨髓基质干细胞中,利用Western blot方法检... 详细信息

目的构建人神经生长因子(h NGF)真核表达载体pc DNA3-h NGF,检测其在大鼠骨髓基质干细胞中的表达。方法利用PCR扩增h NGF全长c DNA,构建真核表达载体pc DNA3-h NGF,经测序证实后将其转染至大鼠骨髓基质干细胞中,利用Western blot方法检测h NGF的表达情况。结果 DNA测序结果显示构建的pc DNA3-h NGF表达载体与实验设计相符。Western blot检测显示该重组载体转染大鼠BMSCs 72h后,有h NGF的过表达。结论构建的pc DNA3-h NGF能在骨髓基质干细胞过表达h NGF蛋白,本研究为应用神经生长因子修饰的骨髓基质干细胞进行骨折治疗奠定了基础。

关键词：神经生长因子真核表达载体骨髓基质干细胞表达

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高浓度葡萄糖条件下肾小球系膜细胞内源性烟酰胺磷酸核糖转移酶对波形蛋白表达的调控作用

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吉林大学学报（医学版） 2017年第5期43卷 867-873,I0001,I0002页

作者：翟晓雅冯乔韦日明陈叶胡婷婷冯乐平桂林医学院公共卫生学院营养与食品卫生学教研室广西桂林541004 桂林医学院附属医院优生遗传科广西桂林541004 桂林医学院生物技术学院生物技术教研室广西桂林541004

目的:探讨高浓度葡萄糖条件下肾小球系膜细胞过度表达的内源性烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)对波形蛋白(Vimentin)表达的调控作用,阐明糖尿病并发肾脏炎症纤维化的形成机制。方法:取患严重自发性糖尿病的C57/BL6小鼠肾脏,以野生型C57/L8... 详细信息

目的:探讨高浓度葡萄糖条件下肾小球系膜细胞过度表达的内源性烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)对波形蛋白(Vimentin)表达的调控作用,阐明糖尿病并发肾脏炎症纤维化的形成机制。方法:取患严重自发性糖尿病的C57/BL6小鼠肾脏,以野生型C57/L86小鼠作为对照组,行病理切片和组织荧光染色,应用免疫共聚焦方法检测肾小球系膜细胞中内源性Nampt和Vimentin表达及定位;肾小球膜HBZY-1细胞随机分为4组,即0.56mmol·L^(-1)低浓度葡萄糖(LG)对照组、200mmol·L^(-1)高浓度葡萄糖(HG)处理组、HG+FK866组和HG+NMN组;高浓度葡萄糖干预5d后,分别施加FK866(10μmol·L^(-1))和NMN(1 mmol·L^(-1))作用24h后,通过免疫荧光和免疫印迹法检测细胞内源性Nampt、Vimentin、核因子κB p65(NF-κBp65)和依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的组蛋白去乙酰化酶1(Sirt1)表达水平;应用RT-PCR和免疫印迹等方法检测细胞Nampt和Vimentin表达水平。结果:与野生型C57/BL6小鼠组比较,严重糖尿病组小鼠肾小球明显萎缩,肾小球细胞内Vimentin表达水平随内源性Nampt表达水平升高而增加(P<0.01);与0.56mmol·L^(-1)低浓度葡萄糖对照组比较,高浓度葡萄糖冲击细胞Nampt、NF-κBp65和Vimentin表达水平明显升高(P<0.01),Sirt1表达水平明显降低(P<0.01)。HG+FK866和HG+NMN组肾小球系膜细胞中Nampt、Vimentin和NF-κBp65表达水平均较对照组明显降低(P<0.01)。结论:高浓度葡萄糖冲击条件下肾小球系膜细胞过度表达的内源性Nampt能够通过NF-κBp65和Sirt1信号通路促进Vimentin表达。

关键词：高浓度葡萄糖烟酰胺磷酸核糖转移酶核因子κBp65 去乙酰化酶1 波形蛋白

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常氧条件下姜黄素对肝癌Hep1细胞VEGF表达的影响

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时珍国医国药 2011年第8期22卷 1939-1941页

作者：曾思恩倪琦谭宁桂林医学院附属医院广西桂林541001 桂林医学院.生物技术学院广西桂林541001

目的探讨常氧条件下姜黄素对肝癌Hep1细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将肝癌Hep1细胞用不同浓度的姜黄素(终浓度分别为0,5,10,15,20μmol/L)处理,置于常氧环境中培养24 h。RT-PCR检测Hep1细胞中VEGF mRNA表达水平的变化,W e... 详细信息

目的探讨常氧条件下姜黄素对肝癌Hep1细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将肝癌Hep1细胞用不同浓度的姜黄素(终浓度分别为0,5,10,15,20μmol/L)处理,置于常氧环境中培养24 h。RT-PCR检测Hep1细胞中VEGF mRNA表达水平的变化,W estern-b lot检测Hep1细胞VEGF蛋白表达的变化。结果姜黄素10,15,20μmol/L组VEGF mRNA的表达与空白对照组相比均明显升高(P<0.05或P<0.01),且呈浓度依赖性。姜黄素0,5μmol/L组VEGF mRNA的表达与空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05);姜黄素5,10,15,20μmol/L组VEGF蛋白的表达与空白对照组相比均明显升高(P<0.01),且呈浓度依赖性。姜黄素0μmol/L组VEGF蛋白的表达与空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论常氧条件下,姜黄素呈浓度依赖性方式上调肝癌Hep1细胞VEGF的表达。

关键词：肝癌Hep1细胞姜黄素血管内皮生长因子常氧

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靶向小鼠Tsc1和Tsc2基因的CRISPR/Cas9系统的构建及其打靶效力验证

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中国生物制品学杂志 2023年第4期36卷 400-405页

作者：杨玲玲陈玲李锦昆王川贵李勇岳鹏鹏于鸿浩桂林医学院智能医学与生物技术学院广西高校医药生物技术与转化医学重点实验室广西桂林541199

目的设计并构建靶向Tsc1和Tsc2基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统,并在细胞水平验证基因编辑效力。方法针对小鼠Tsc1和Tsc2基因分别设计3个sgRNA导向序列,构建sgRNA表达载体,与Cas9表达质粒共转染小鼠N2a细胞,经药物筛选获得阳性细胞后,PC... 详细信息

目的设计并构建靶向Tsc1和Tsc2基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统,并在细胞水平验证基因编辑效力。方法针对小鼠Tsc1和Tsc2基因分别设计3个sgRNA导向序列,构建sgRNA表达载体,与Cas9表达质粒共转染小鼠N2a细胞,经药物筛选获得阳性细胞后,PCR扩增打靶位点的DNA片段,利用TA克隆测序验证打靶效率。结果 Tsc1基因Tsc1-M-sgRNA2、Tsc1-M-sgRNA3及Tsc2基因Tsc2-M-sgRNA1、Tsc2-M-sgRNA2、Tsc2-M-sgRNA3这5个靶点均发生基因编辑,编辑效率分别为40%、80%、30%、30%和20%。结论成功构建了有编辑效力的靶向小鼠Tsc1和Tsc2基因的CRISPR-Cas9基因编辑系统。

关键词： CRISPR/Cas9系统基因编辑结节性硬化症 Tsc1 Tsc2

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重组多价人精子表位肽的原核表达及其条件优化

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现代预防医学 2012年第11期39卷 2799-2802页

作者：谢琦林军白玲石青峰叶元杨冰刘永明桂林医学院生物技术学院桂林医学院附属医院检验科桂林医学院附属医院妇科

目的构建重组多价人精子表位肽原核表达质粒,优化其在大肠杆菌中的表达条件。方法用化学合成法合成多价人精子表位肽基因。该基因经PCR扩增,BamHI和XhoI双酶切后,克隆至GST融合表达载体PGEX-4T-1获得重组质粒。将该重组质粒转化*** BL21... 详细信息

目的构建重组多价人精子表位肽原核表达质粒,优化其在大肠杆菌中的表达条件。方法用化学合成法合成多价人精子表位肽基因。该基因经PCR扩增,BamHI和XhoI双酶切后,克隆至GST融合表达载体PGEX-4T-1获得重组质粒。将该重组质粒转化*** BL21(DE3),经IPTG诱导表达。利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统,观察在摇瓶发酵条件下改变培养基组成、诱导温度、诱导时机、诱导剂浓度和诱导时间等条件对GST-多价人精子表位肽融合蛋白表达量的影响。结果构建了重组多价人精子表位肽原核表达载体。在摇瓶实验中,优化的表达条件为:TB培养基,诱导温度37℃,在菌体对数生长的中后期进行诱导,IPTG诱导终浓度0.05 mmol/L,诱导时间5 h。优化后GST-多价人精子表位肽融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的30.2%,且主要以可溶形式表达。结论成功构建重组多价人精子表位肽原核表达质粒,重组表达载体在*** BL21(DE3)内主要表达可溶形式的GST-多价人精子表位肽融合蛋白,在优化条件下可获得较高的表达量。

关键词：重组多价人精子表位肽 GST融合蛋白大肠杆菌表达条件

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