检索结果-内蒙古大学图书馆

肿瘤防治研究 2008年第9期35卷 617-620页

作者：田芳柴玉荣许培荣刘红涛薛乐勋郑州大学基础医学院病理生理学教研室 450052 郑州大学基础医学院基础医学院组胚教研室 450052 郑州大学基础医学院细胞生物学研究室 450052

目的利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达,探讨在食管鳞癌细胞中将NF-κB作为基因治疗靶点的价值。方法将荧光素标记的对照siRNA转染到食管鳞癌细胞中观察转染效率,p65siRNA转染到EC9706和Eca109细胞中,使用Western blot的... 详细信息

目的利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达,探讨在食管鳞癌细胞中将NF-κB作为基因治疗靶点的价值。方法将荧光素标记的对照siRNA转染到食管鳞癌细胞中观察转染效率,p65siRNA转染到EC9706和Eca109细胞中,使用Western blot的方法检测p65和Cyclin D1蛋白的表达,使用EMSA法检测转染前后p65与DNA结合活性的变化;流式细胞仪检测p65siRNA与5-Fu(327μg/ml)单独或联合应用,对食管鳞癌细胞周期的影响。结果荧光素标记的siRNA转染食管鳞癌细胞的效率可达90%以上。在转染后的EC9706和Eca109细胞中,p65和Cyclin D1蛋白的表达水平下调;NF-κB与DNA的结合活性明显下降;G0/G1期的细胞开始增加,同时S期的细胞逐渐减少;当转染p65siRNA细胞联合使用5-Fu时,G0/G1期的细胞明显增加,同时S期的细胞明显减少。结论p65siRNA可以特异性的阻断NF-κB信号通路,下调NF-κB下游基因中细胞周期蛋白Cyclin D1的表达,表明活化的NF-κB信号通路可以成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点。

关键词：食管鳞癌 NF-κB RNA interference Cyclin D1

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中华眼镜蛇膜毒素和碘-131协同免疫导向对体外鼻咽癌细胞的抑制作用

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南方医科大学学报 2008年第7期28卷 1235-1236,1239页

作者：赵永胜杨惠玲刘长征南方医科大学附属深圳医院/深圳市第二人民医院核医学科广东深圳518035 中山大学医学院病理生理学教研室广东广州510089 中山大学医学院实验核医学教研室广东广州510089

目的为探索鼻咽癌新的特异性治疗方法,制备了中华眼镜蛇膜毒素(CT)和碘-131(131I)与抗鼻咽癌单克隆抗体BAC5的偶联物,观察其对体外鼻咽癌细胞CNE2的抑制作用。方法采用氯胺T法将131I标记于BAC5,Iodogen法将125I标记于CT,用异型双功能交... 详细信息

目的为探索鼻咽癌新的特异性治疗方法,制备了中华眼镜蛇膜毒素(CT)和碘-131(131I)与抗鼻咽癌单克隆抗体BAC5的偶联物,观察其对体外鼻咽癌细胞CNE2的抑制作用。方法采用氯胺T法将131I标记于BAC5,Iodogen法将125I标记于CT,用异型双功能交联剂SPDP偶联BAC5和125I-CT,并用噻唑蓝法观察抑瘤效应。结果125I-CT-BAC5的IC50为9.17×10-8mol/L,131I-BAC5的IC50为5.83×108Bq/L,联合用药后抑制率明显提高。结论125I-CT-BAC5和131I-BAC5对体外培养的CNE2细胞均有抑制作用,二者联合应用则抑制作用更为明显。

关键词：中华眼镜蛇膜毒素碘-131 鼻咽癌抗体单克隆

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小鼠肝癌细胞H_(22)培养上清液对鼠细胞L_(929) MTP53、EGFR蛋白表达的影响

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肿瘤基础与临床 2008年第4期21卷 296-297页

作者：张晓艳田芳汤为学郑州大学基础医学院病理生理学教研室河南郑州450052 重庆医科大学病理生理学教研室重庆400016

目的探讨小鼠肝癌细胞H22培养上清液对鼠L929细胞MTP53、EGFR蛋白表达的影响。方法采用肝癌细胞H22的培养上清液诱导正常成纤维细胞L929,诱导细胞为L929-H22。采用免疫细胞化学方法检测MTP53、EGFR蛋白的表达。结果MTP53、EGFR蛋白的表... 详细信息

目的探讨小鼠肝癌细胞H22培养上清液对鼠L929细胞MTP53、EGFR蛋白表达的影响。方法采用肝癌细胞H22的培养上清液诱导正常成纤维细胞L929,诱导细胞为L929-H22。采用免疫细胞化学方法检测MTP53、EGFR蛋白的表达。结果MTP53、EGFR蛋白的表达L929-H22细胞较L929细胞显著增强(Ρ<0.001)。结论小鼠肝癌细胞培养上清液诱导细胞MTP53、EGFR的表达与正常细胞不同,MTP53、EGFR的表达增强可能在细胞恶性转化过程中发挥作用。

关键词：肝癌细胞H22 培养上清液诱导 MTP53 EGFR 成纤维细胞L929

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氯离子通道阻断剂影响顺铂对人红白血病耐药细胞作用机制的实验研究

氯离子通道阻断剂影响顺铂对人红白血病耐药细胞作用机制的实验研...

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中国病理生理学会受体和信号转导专业委员会暨消化专业委员会联合学术会议

作者：康劲松郑花陈野孙连坤吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室

目的:耐药性的产生是影响化疗药物疗效的最重要的因素之一。目前研究表明多药耐药的机制除与ABC转运蛋白(ATP-binding cassette transponer)超家族的成员如P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-relat... 详细信息

目的:耐药性的产生是影响化疗药物疗效的最重要的因素之一。目前研究表明多药耐药的机制除与ABC转运蛋白(ATP-binding cassette transponer)超家族的成员如P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-related proteins,MRP)等促进药物外排有关,还与细胞凋亡不足密切相关。因此本研究的目的在于探讨氯离子通道阻断剂NPPB(5-硝基-2,3-苯丙胺基苯甲酸盐)对顺铂(DDP)诱导的人红白血病耐阿霉素耐药细胞株RK562细胞损伤中的作用。方法:应用MTT法检测RK562细胞的生存率;RT-PCR检测BAX、MDR、MRP、及CIC-3的mRNA表达;Western blotting方法检测Bcl-2、P65、MDR的蛋白水平。结果:50μmol/L NPPB对RK562细胞无明显损伤。而顺铂组与对照组相比,存活率明显降低,MDR、MRP、ClC-3 mRNA及MDR、Bcl-2蛋白表达降低,Bax mRNA表达升高。顺铂与NPPB合加组与顺铂组相比,存活率明显升高,MDR、MRP、ClC-3 mRNA及MDR、Bcl-2蛋白表达升高,Bax mRNA表达降低。结论:NPPB对顺铂(DDP)诱导的人红白血病耐阿霉素耐药细胞株RK562细胞损伤具有拮抗作用,其机制可能与其上调RK562细胞MDR及MRP的表达,促进顺铂的外排,增强RK562多药耐药性有关;此外,可能还与其抗凋亡的作用密切相关。

关键词：顺铂氯离子通道阻断剂 5-硝基-2,3-苯丙胺基苯甲酸盐(NPPB) RK562细胞

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抑制氯通道ClC-3能促进顾铂诱导人神经胶质瘤U251细胞损伤

抑制氯通道ClC-3能促进顾铂诱导人神经胶质瘤U251细胞损伤

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中国病理生理学会受体和信号转导专业委员会暨消化专业委员会联合学术会议

作者：苏静周磊陈野孙连坤吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室

目的:探讨有效抑制氯通道ClC-3表达对顺铂诱导人神经胶质瘤U251细胞损伤的影响。方法:U251细胞按处理方法不同分4组,对照组(转染无义寡核苷酸),转染CLC-3反义寡核苷酸组,顺铂组(无义寡核苷酸与顺铂联用),CLC-3反义寡核苷酸与顺铂联用组... 详细信息

目的:探讨有效抑制氯通道ClC-3表达对顺铂诱导人神经胶质瘤U251细胞损伤的影响。方法:U251细胞按处理方法不同分4组,对照组(转染无义寡核苷酸),转染CLC-3反义寡核苷酸组,顺铂组(无义寡核苷酸与顺铂联用),CLC-3反义寡核苷酸与顺铂联用组。应用RT-PCR和(或) Western blot检测相关基因ClC-3、p53、Bcl-2、Bax、Cytochrome C、easpase3表达;MTT法检测细胞生存率:TUNEL法和PI/Annexin V双染法检测细胞凋亡;AO染色检测细胞内小泡酸化和溶酶体膜稳定性。结果:ClC-3反义寡核苷酸能有效抑制U251细胞ClC-3 mRNA和蛋白表达(抑制率>50%):ClC-3抑制能增加顺铂作用下U251细胞p53表达,Bcl-2/Bax表达比值降低,Cytochrome C释放增加,Caspase3激活增强(P<0.05,n=3);同时,ClC-3抑制能增加顺铂诱导U251细胞死亡:AO染色,顺铂作用下U251细胞内红色颗粒状荧光与对照组相比差异不明显,ClC-3反义核苷酸单独或联合顺铂作用于U251细胞均能引起细胞内红色颗粒状荧光明显降低(P<0.05,n=3)。结论:①特异性ClC-3反义寡核苷酸能有效抑制U251细胞ClC-3 mRNA和蛋白的表达。②抑制ClC-3表达增强顺铂对U251细胞的损伤,机制可能为:降低溶酶体膜稳定性,通过溶酶体-线粒体途径加重细胞损伤;抑制细胞内小泡酸化,破坏U251细胞内pH稳态,加重细胞死亡。

关键词：氯通道ClC-3 反义寡核苷酸顺铂人神经胶质瘤U251细胞溶酶体细胞器酸化

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军事训练过程对武警部队学员性激素水平的影响

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武警医学院学报 2008年第8期17卷 653-657页

作者：齐莉薄海向晓辉南克勉佟长青武警医学院生理学与病理生理学教研室天津300162 武警医学院训练部天津300162

【目的】测试武警部队院校学员军事训练过程血液中睾酮等6项内分泌指标,旨在探讨军事训练过程性激素水平的变化及影响机制。【方法】武警部队指挥学院学员29名,技术学院学员22名,分别按照各自训练大纲训练。在训练前、训练第4、8、12周... 详细信息

【目的】测试武警部队院校学员军事训练过程血液中睾酮等6项内分泌指标,旨在探讨军事训练过程性激素水平的变化及影响机制。【方法】武警部队指挥学院学员29名,技术学院学员22名,分别按照各自训练大纲训练。在训练前、训练第4、8、12周末以放射免疫分析方法定量分析受试者血中睾酮(T),黄体生成素(LH),促卵泡激素(FSH),皮质醇,雌二醇(E2),胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)。【结果】(1)指挥院校组血清中睾酮含量随训练时程逐渐下降,与训练前比较第4、8、12周差异显著(P<0.01);而技术院校组则升高与训练前比较第8、12周有统计学意义(P<0.05)。(2)指挥院校组和技术院校组血清E2浓度在训练第12周极其显著性升高(P<0.01)。(3)血清LH的变化指挥院校组和技术院校呈相同趋势,第8周升至最高(P<0.01,P<0.05)。(4)指挥院校组训练的第12周表现为皮质醇下降(P<0.01),IGF-Ⅰ升高(P<0.05)。(5)指挥院校组和技术院校组FSH的变化均无统计学意义(P>0.05)。【结论】(1)军事训练对血清睾酮、黄体生成素、雌二醇、皮质醇、胰岛素样生长因子-Ⅰ的含量产生影响,但表现的时间不同。(2)军事训练对血清促卵泡激素的影响不显著。

关键词：军事训练睾酮胰岛素样生长因子-Ⅰ 放射免疫法

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抑制氯通道CIC-3能促进顺铂诱导人神经胶质瘤U251细胞损伤

抑制氯通道CIC-3能促进顺铂诱导人神经胶质瘤U251细胞损伤

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吉林省第六届生命科学大型学术报告会

作者：苏静周磊康劲松陈野孙连坤吉林大学白求恩医学院病理生理学教研室

抗肿瘤药物主要依靠其触发细胞死亡,尤其是细胞凋亡的作用来有效抑制肿瘤细胞。在肿瘤细胞恶性变过程中遗传变化形成的死亡逃避机制是影响抗肿瘤药物效果的主要原因。神经胶质瘤是最常见的脑肿瘤,初诊患者生存率通常低于一年。胶质瘤具... 详细信息

抗肿瘤药物主要依靠其触发细胞死亡,尤其是细胞凋亡的作用来有效抑制肿瘤细胞。在肿瘤细胞恶性变过程中遗传变化形成的死亡逃避机制是影响抗肿瘤药物效果的主要原因。神经胶质瘤是最常见的脑肿瘤,初诊患者生存率通常低于一年。胶质瘤具有抵抗常规抗肿瘤药

关键词：人神经胶质瘤 CIC-3 细胞损伤氯通道

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多效生长因子通过JNK信号通路负调控Schlafen2基因表达

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中国生物化学与分子生物学报 2008年第12期24卷 1135-1139页

作者：方玲胡迎春杨柳刘梦伊刘昕潘兴斌吴德昌霍艳英军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 兰州大学基础医学院病理与病理生理学研究所兰州730000 重庆医科大学病理学教研室重庆400016

实验室前期研究发现,多效生长因子(pleiotrophin,PTN)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞中Schlafen2(Slfn2)基因高表达.为了探讨Ptn沉默诱导Slfn2基因表达可能涉及的信号通路,应用Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50ng/μl)对Ptn沉... 详细信息

实验室前期研究发现,多效生长因子(pleiotrophin,PTN)基因稳定沉默的小鼠胚胎成纤维细胞中Schlafen2(Slfn2)基因高表达.为了探讨Ptn沉默诱导Slfn2基因表达可能涉及的信号通路,应用Western印迹检测外源性PTN因子(终浓度50ng/μl)对Ptn沉默细胞JNK磷酸化水平的影响;应用Northern印迹分别检测JNK和p38通路特异性抑制剂对Ptn沉默细胞Slfn2基因转录水平的影响.结果发现,Ptn沉默细胞内JNK磷酸化水平高于对照细胞,外源性PTN处理后沉默细胞内JNK磷酸化水平下调;阻断JNK通路呈时间依赖性抑制Ptn沉默细胞中Slfn2基因转录,阻断p38通路对Ptn沉默细胞中Slfn2转录水平没有明显影响.结果提示,Ptn可能通过抑制其下游JNK/MAPK通路来负调控Slfn2的表达.

关键词：多效生长因子基因沉默 c-jun氨基末端激酶(JNK信号通路) Schlafen2

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前列腺组织STEAP表达与H2O2水平的关系

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中国病理生理杂志 2008年第2期24卷 354-356页

作者：潘玉琢郭丽荣梁爽李扬赵雪俭吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021

目的:探讨STEAP基因的功能。方法:应用RT-PCR、免疫印迹的方法,检测STEAP mRNA和蛋白在国人正常前列腺、前列腺癌组织中的表达水平。应用钼酸还原法检测正常前列腺内腺、外腺及前列腺癌组织H2O2水平,同时应用黄嘌呤氧化法测定3种组织中... 详细信息

目的:探讨STEAP基因的功能。方法:应用RT-PCR、免疫印迹的方法,检测STEAP mRNA和蛋白在国人正常前列腺、前列腺癌组织中的表达水平。应用钼酸还原法检测正常前列腺内腺、外腺及前列腺癌组织H2O2水平,同时应用黄嘌呤氧化法测定3种组织中SOD水平,分析其与STEAP表达的相关性。结果:国人前列腺癌STEAP mRNA和蛋白高表达;前列腺癌组织中H2O2水平及总SOD水平明显高于正常前列腺。结论:STEAP的功能之一可能是诱导内源性H2O2水平增高,促进细胞快速生长。

关键词：前列腺肿瘤过氧化氢前列腺6个跨膜上皮抗原

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基因工程技术制备抗IL-2蛋白抗体Fab片段及其鉴定方法的建立

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解放军医学杂志 2008年第5期33卷 534-536页

作者：李常颖李宏杰畅继武天津医科大学第二医院天津市泌尿研究所天津300211 华北煤炭医学院基础部病理生理学教研室

目的利用基因工程技术制备人源性抗IL-2蛋白的可溶性Fab抗体片段,并鉴定其抗原结合活性及特异性。方法用固相化的IL-2蛋白从人天然噬菌体抗体库中筛选出表达抗IL-2蛋白Fab抗体片段的阳性克隆,酶切及连接反应构建可溶性表达噬菌粒转化至... 详细信息

目的利用基因工程技术制备人源性抗IL-2蛋白的可溶性Fab抗体片段,并鉴定其抗原结合活性及特异性。方法用固相化的IL-2蛋白从人天然噬菌体抗体库中筛选出表达抗IL-2蛋白Fab抗体片段的阳性克隆,酶切及连接反应构建可溶性表达噬菌粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,并用SDS-PAGE鉴定抗体表达情况、ELISA鉴定其抗原结合活性和特异性。结果成功筛选并表达了抗IL-2蛋白的Fab段抗体,在SDS-PAGE中形成47kD的条带,Western blot证明为抗人Fab段抗体;ELISA证实该抗体片段具有良好的抗原特异性和抗原结合活性,与牛血清白蛋白、IL-4无交叉反应。结论成功表达并鉴定了人源性抗IL-2蛋白的可溶性Fab片段,构建了一种制备基因工程抗体的有效途径,为基因工程抗体在肿瘤免疫治疗方面的临床应用研究奠定了基础。

关键词：噬菌体抗体库免疫球蛋白类,Fab 白细胞介素2

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