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CRMP1基因慢病毒干扰质粒构建及其对SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体蛋白表达的影响

中国免疫学杂志 2025年第2期41卷 433-438页

作者：王松豪秦坤韩雨张微微徐绍业邵晓云桂林医学院人体解剖学教研室桂林541199 桂林医学院科学实验中心桂林541199

目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构... 详细信息

目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构建CRMP1重组干扰质粒。将重组正确的shCRMP1质粒转染HEK-293T细胞进行慢病毒包装,获得的慢病毒上清浓缩后感染SH-SY5Y细胞,Western blot检测SH-SY5Y细胞内CRMP1的干扰效果及其对NLRP3炎症小体各组分蛋白表达的影响。结果:DNA测序结果显示,pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒构建成功;转染HEK-293T细胞包装慢病毒后,细胞内CRMP1蛋白表达下降;慢病毒浓缩液感染SH-SY5Y细胞经嘌呤霉素筛选,Western blot发现shCRMP1慢病毒能显著下调SH-SY5Y细胞中CRMP1蛋白表达。同时稳定敲减CRMP1的SH-SY5Y细胞系中发现,MPP^(+)诱导下,抑制CRMP1表达可有效抑制NLRP3炎症小体活化。结论:成功构建pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒,且干扰CRMP1可抑制MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体活化,为进一步研究CRMP1在帕金森病等神经退行性疾病中的发生机制奠定基础。

关键词：坍塌反应调节蛋白1 慢病毒干扰人神经母细胞瘤细胞 NLRP3炎症小体

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基于转录组和单细胞测序数据分析CALU与肝细胞癌患者预后的关系及其作用机制

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吉林大学学报(医学版) 2025年第2期51卷 447-459页

作者：王小燕李雪莲梁斌田文斐马海林莫之婧桂林医学院智能医学与生物技术学院实验教学中心桂林医学院广西高校分子医学工程重点实验室桂林医学院智能医学与生物技术学院生物化学教研室

目的:通过生物信息学方法分析人钙腔蛋白（CALU）的表达水平与肝细胞癌（HCC）预后之间的关系,构建HCC预后列线图,并阐明其可能的作用机制。方法:从癌症基因组数据库（TCGA）下载374例HCC组织样本数据,从基因型组织表达数据库（GTEx）下... 详细信息

目的:通过生物信息学方法分析人钙腔蛋白（CALU）的表达水平与肝细胞癌（HCC）预后之间的关系,构建HCC预后列线图,并阐明其可能的作用机制。方法:从癌症基因组数据库（TCGA）下载374例HCC组织样本数据,从基因型组织表达数据库（GTEx）下载160例正常组织样本数据。采用配对样本t检验分析在HCC组织样本和配对癌旁正常组织样本中CALU的表达差异,并采用人类蛋白图谱数据库（HPA）进行验证。采用DESeq2包对CALU低和高表达组HCC组织样本进行差异表达基因（DEGs）鉴定,采用pROC包进行受试者工作特征（ROC）曲线分析,采用单因素和多因素Cox回归分析确定CALU在不同临床病理特征HCC患者中的预后价值,采用ggplot2包绘制森林图,采用rms包和survival包构建列线图及校准图,分析CALU用于区分HCC组织与正常组织的诊断价值。采用Kaplan-Meier Plotter数据库数据对CALU与HCC患者预后的关系进行验证。采用GSE14520数据集中216例HCC样本基因转录表达数据对列线图预测准确性进行验证。采用基因本体（GO）功能注释和京都基因与基因组百科全书（KEGG）对DEGs进行功能及通路富集分析,采用基因集富集分析（GSEA）获得DEGs显著富集的基因集。采用GSE149614中10例HCC组织样本和8例癌旁正常组织样本单细胞测序数据对CALU与HCC患者预后关系及其作用机制进行验证。结果:与正常组织比较,HCC组织中CALU mRNA表达水平明显升高（P<0.001）,HCC组织中CALU蛋白表达量升高。在HCC样本的CALU低表达组和CALU高表达组共发现928个DEGs,包括784个上调DEGs和144个下调DEGs。ROC分析,CALU用于区分癌和癌旁组织具有较高的诊断价值,ROC曲线下面积（AUC）为0.839。生存分析,CALU高表达组HCC患者生存率明显低于CALU低表达组（P<0.001）。单因素和多因素Cox回归分析确定CALU高表达是HCC患者预后的独立危险因素,并构建预后预测列线图。GSE14520数据集数据证实CALU可用于预测HCC预后。GO功能富集分析,上述DEGs主要富集于细胞氧化应激、铁死亡和铜死亡等方面（P<0.05）;KEGG通路分析,DEGs富集的通路主要有细胞外基质（ECM）受体互作、亚油酸代谢和神经活性配体受体互作（P<0.05）。GSEA分析,CALU高表达激活细胞周期G1期到S期、泛素化蛋白聚合反应和HCC进展,CALU低表达则促进HCC细胞氧化应激、铁死亡和铜死亡。单细胞测序分析,CALU mRNA在较高的肿瘤分期HCC细胞亚群中表达水平更高,CALU高表达HCC细胞亚群主要与泛素化、p53和细胞周期有关（P<0.01）,CALU低表达HCC细胞亚群主要与细胞氧化应激、铁死亡和组蛋白绑定有关（P<0.01）。结论:CALU高表达可能与HCC患者预后不良存在关联,构建的HCC预后列线图预测患者生存率效果较好。上调CALU可能通过调节细胞周期G1期到S期和蛋白泛素化以促进HCC进展,而下调CALU可能通过诱导HCC细胞氧化应激、铁死亡和铜死亡从而抑制HCC进展。

关键词：人钙腔蛋白肝细胞癌生物信息学单细胞测序分析癌症预后

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雷公藤萜类化合物的抗肿瘤作用机制及联合治疗研究进展

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中国现代应用药学 2025年第6期42卷 995-1002页

作者：梁慧慧唐科谭亲友桂林医学院附属医院临床药学与临床药理学教研室桂林医学院药学院中美健康与疾病脂质研究中心

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重大慢性疾病，手术切除并联合药物辅助治疗是抗肿瘤治疗的主要手段，但如今的抗肿瘤药物多存在耐药性和不良反应。随着近年来肿瘤发病率的不断增加，使用安全、有效的中医药治疗肿瘤成为热点。雷公藤是中... 详细信息

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重大慢性疾病，手术切除并联合药物辅助治疗是抗肿瘤治疗的主要手段，但如今的抗肿瘤药物多存在耐药性和不良反应。随着近年来肿瘤发病率的不断增加，使用安全、有效的中医药治疗肿瘤成为热点。雷公藤是中国的一种传统中药，已被证实对多种恶性肿瘤均具有显著治疗效果，其有效成分中萜类化合物雷公藤甲素和雷公藤红素被认为是传统中医药治疗肿瘤的代表药物。本文全面阐述了雷公藤萜类化合物发挥抗肿瘤的作用机制，并对其联合治疗进行分析和拓展，以期为雷公藤萜类化合物的深入研究和临床应用提供理论依据和研究思路。

关键词：雷公藤萜类化合物抗肿瘤作用机制联合治疗

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线粒体自噬在动脉粥样硬化中作用的研究进展

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中国病理生理杂志 2025年第3期41卷 585-592页

作者：郑标王琼肖玉波谢远杰莫中成广西糖尿病系统医学重点实验室桂林医学院组织学与胚胎学教研室广西桂林541199 湖南医药学院公共卫生与检验医学院湖南怀化418000

线粒体自噬作为一种特殊的选择性自噬,通过调控细胞脂质代谢、炎症反应、氧化应激等过程参与动脉粥样硬化的发生发展。近年来的研究发现,许多药物及中草药成分通过调控巨噬细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞的线粒体自噬,影响动脉粥... 详细信息

线粒体自噬作为一种特殊的选择性自噬,通过调控细胞脂质代谢、炎症反应、氧化应激等过程参与动脉粥样硬化的发生发展。近年来的研究发现,许多药物及中草药成分通过调控巨噬细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞的线粒体自噬,影响动脉粥样硬化的进程。本文围绕线粒体自噬调控细胞功能进而影响动脉粥样硬化进展的分子机制,总结了近年来通过靶向调控线粒体自噬抗动脉粥样硬化的治疗药物相关研究进展,为寻求靶向调控线粒体自噬改善动脉粥样硬化的防治新策略提供新的思路。

关键词：动脉粥样硬化线粒体自噬巨噬细胞血管内皮细胞血管平滑肌细胞

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热应激对精子发生过程影响机制的研究进展

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中国性科学 2025年第3期34卷 7-10页

作者：宋萌萌常子轩孟欣瑶张珂珂杜跃高金翠王锁凤艾庆燕延安大学医学院组胚教研室陕西延安716000

热应激会对精子发生过程产生影响,是造成男性生殖系统疾病和不育的一个重要因素。本文分别从热应激对睾丸中生精细胞、附睾中精子发育成熟及精子的影响机制方面作一综述,以便为热应激造成男性不育的临床治疗和药物研发提供科学依据。

关键词：热应激精子发生生精细胞精子附睾

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“PBL+TBL”融合课程思政在环境健康科学概论中的应用

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科学咨询 2025年第4期 98-101页

作者：沈玫周谢伟全宋家乐孙艳王程强桂林医学院创新创业教育学院桂林医学院产业技术研究院桂林医学院公共卫生学院食品卫生与营养学教研室桂林医学院公共卫生学院环境卫生与职业卫生教研室

目的探讨以问题为中心的学习(Problem-based learning，PBL)教学法联合以团队为基础的学习(Team-based learning，TBL)教学法融合课程思政在环境健康科学概论中的应用。方法采用PBL联合TBL教学法对公共卫生专业硕士研究生开展环境健... 详细信息

目的探讨以问题为中心的学习(Problem-based learning，PBL)教学法联合以团队为基础的学习(Team-based learning，TBL)教学法融合课程思政在环境健康科学概论中的应用。方法采用PBL联合TBL教学法对公共卫生专业硕士研究生开展环境健康科学概论教学，以案例为载体，将知识传授、能力培养和思政元素紧密融合，最后通过问卷匿名调查学生对教学效果及思政效果的评价。结果 88.23%学生认为本次教学改革能提高团队协作能力；84.31%学生认为能提升知识理解力；82.35%学生认为能提高学习兴趣；有78.43%学生认为能增强学习主动性；有74.51%学生认为能提高自身能力；88.23%学生对本次教学改革满意。78.43%学生认为本次教学改革让其体会到社会主义制度的优越性；有82.35%学生认为能让其增强民族自豪感；76.47%学生认为能让其体会中华民族的优秀传统文化；80.39%学生认为能培养自己的职业责任心和职业使命感；84.31%学生认为能培养自己科学严谨的作风。结论 PBL联合TBL教学法融合课程思政运用在环境健康科学概论的教学中，不仅能激发学生学习兴趣，还能发挥立德树人的作用，值得进一步推广。

关键词：以问题为中心的教学法以团队为基础的教学法环境健康科学概论课程思政思政元素研究生教育

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二甲双胍诱导结直肠癌细胞发生铜死亡及其机制

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华夏医学 2025年第1期38卷 28-36页

作者：梁慧慧唐科谭亲友桂林医学院药学院桂林541199 桂林医学院附属医院临床药学与临床药理学教研室桂林541001 中美健康与疾病脂质研究中心桂林541001

目的探讨二甲双胍诱导结直肠癌(CRC)细胞铜死亡作用及其机制。方法体外培养CRC细胞系(SW480、HT29),通过CCK8检测CRC细胞经不同浓度的Met分别干预24、48、72 h后的细胞活力;平板克隆实验检测Met对CRC细胞的增殖能力;Transwell检测Met对... 详细信息

目的探讨二甲双胍诱导结直肠癌(CRC)细胞铜死亡作用及其机制。方法体外培养CRC细胞系(SW480、HT29),通过CCK8检测CRC细胞经不同浓度的Met分别干预24、48、72 h后的细胞活力;平板克隆实验检测Met对CRC细胞的增殖能力;Transwell检测Met对CRC细胞的迁移能力;倒置显微镜下分别观察低、中、高剂量的Met对CRC细胞形态的影响;Met联合铜死亡抑制剂对CRC细胞增殖的影响;qRT-PCR以及蛋白免疫质印迹分别从基因水平及蛋白水平上检测Met对CRC细胞中铁氧还蛋白1(FDX1)、二氢脂酰胺S-乙酰转移酶(DLAT)和热休克蛋白70(HSP70)表达影响。结果随着Met浓度的增加,CRC细胞活力呈浓度以及时间依赖性下降,而加入铜死亡抑制剂能部分逆转Met对CRC细胞活力的抑制作用;Met显著抑制CRC细胞的增殖能力和迁移能力且抑制作用呈浓度依赖性,以上结果均具有统计学意义(P<0.05)。高倍镜下观察到CRC细胞形态发生明显改变;Met在基因和蛋白水平均可显著抑制FDX1与DLAT的表达,促进HSP70的表达(P<0.05)。结论Met可以通过调控FDXI/DLAT通路诱导CRC细胞铜死亡,进而发挥抗CRC的作用。

关键词：二甲双胍结直肠癌铜死亡 FDX1 DLAT

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肝吸虫与宿主微生物群相互作用机制研究进展

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热带医学杂志 2025年第2期25卷 277-281页

作者：李醇彭小红桂林医学院寄生虫学教研室广西桂林541004 桂林医学院附属医院广西肝脏损伤与修复分子医学重点实验室广西桂林541004 广西教育厅病原生物学重点实验室广西桂林541004

肝吸虫主要有华支睾吸虫、麝猫后睾吸虫和猫后睾吸虫3种,寄生于哺乳动物肝胆管内,引起肝胆管纤维化甚至胆管癌。肝吸虫感染能够影响微生物群,导致肠道微环境发生改变。肝吸虫与宿主微生物群的相互作用可以潜在地调节胃肠道炎症及免疫功... 详细信息

肝吸虫主要有华支睾吸虫、麝猫后睾吸虫和猫后睾吸虫3种,寄生于哺乳动物肝胆管内,引起肝胆管纤维化甚至胆管癌。肝吸虫感染能够影响微生物群,导致肠道微环境发生改变。肝吸虫与宿主微生物群的相互作用可以潜在地调节胃肠道炎症及免疫功能,以应对致病性细菌菌株的出现。本文就近年来肝吸虫与宿主微生物群的相关研究进行阐述。

关键词：肝吸虫华支睾吸虫麝猫后睾吸虫宿主微生物群

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孕期应激子代脑内抗氧化失衡对子代认知功能的影响及作用机制

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山西医科大学学报 2025年第2期56卷 158-164页

作者：田晓寒吕梦姣周晓丹王梦慈袁孙强廖礼彬白生宾新疆医科大学基础医学院组胚教研室新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830011

目的探讨大鼠孕期应激子代脑内抗氧化失衡对子代认知功能及小胶质细胞的影响及分子机制。方法 12只SD孕鼠被随机分为应激组和对照组,每组6只,应激组在孕15~20 d给予限制性应激,对照组不予应激处理。通过旷场、高架十字迷宫及Y迷宫3种... 详细信息

目的探讨大鼠孕期应激子代脑内抗氧化失衡对子代认知功能及小胶质细胞的影响及分子机制。方法 12只SD孕鼠被随机分为应激组和对照组,每组6只,应激组在孕15~20 d给予限制性应激,对照组不予应激处理。通过旷场、高架十字迷宫及Y迷宫3种行为学试验检测8~9周龄成年子代认知功能,微量法检测8~9周龄成年子代外周血中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(MDA)水平,免疫组化法检测子代海马CA1区小胶质细胞变化及Iba1表达,qRT-PCR检测子代海马IL-1β、TNF-α的mRNA相对含量,免疫荧光法检测子代海马CA1区Nrf2、HO-1、Iba1表达,Western blot检测子代海马Nrf2、HO-1、Iba1蛋白表达。结果旷场试验结果显示,与对照组相比,应激组子代5 min内运动总路程未见明显差异,中央区路程明显减少(P<0.05);高架十字迷宫结果显示,与对照组相比,应激组子代在开放臂停留时间和进入开放臂次数百分比明显减少(P<0.05);Y迷宫结果显示,与对照组相比,应激组子代自主交替率明显减少(P<0.05)。与对照组相比,应激组外周血中SOD活性升高(P<0.01)、MDA水平降低(P<0.05)。免疫组化结果显示,与对照组相比,应激组子代海马CA1区小胶质细胞形态改变,激活数量增加(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与对照组相比,应激组子代海马中IL-1β、TNF-α的mRNA相对含量升高(P<0.01)。Western blot结果显示,与对照组相比,应激组子代海马区Iba1蛋白表达升高(P<0.05),Nrf2及HO-1蛋白表达下降(均P<0.01);免疫荧光与Western blot结果一致。结论大鼠孕期应激导致成年子代脑内抗氧化失衡,并通过影响Nrf2/HO-1通路激活小胶质细胞,从而影响成年子代认知功能。

关键词：孕期应激小胶质细胞 Nrf2 行为学检测认知功能障碍超氧化物歧化酶

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miR-33s在NF-κB抑制ABCA1表达及胆固醇流出中的作用

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生物化学与生物物理进展 2018年第5期45卷 553-559页

作者：陈筠江婷李孟奇赵国军桂林医学院组胚教研室桂林541004 桂林医学院教务处桂林541004

为探讨mi R-33s在核因子κB(NF-κB)抑制三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达及胆固醇流出中的作用,THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞经不同浓度脂多糖(LPS)处理,活化NF-κB,或以PDTC(NF-κB抑制剂)预处理细胞后再加入LPS,实时荧光定量PCR检... 详细信息

为探讨mi R-33s在核因子κB(NF-κB)抑制三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达及胆固醇流出中的作用,THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞经不同浓度脂多糖(LPS)处理,活化NF-κB,或以PDTC(NF-κB抑制剂)预处理细胞后再加入LPS,实时荧光定量PCR检测细胞mi R-33s及其宿主基因胆固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)的表达,蛋白质印迹法检测SREBPs的蛋白质表达,染色体免疫共沉淀检测NF-κB p65与SREBPs启动子区结合情况;LPS处理基础上,转染mi R-33s抑制物或mi R-33s模拟物,RT-PCR检测ABCA1 m RNA表达水平,蛋白质印迹法检测ABCA1蛋白水平,液体闪烁计数仪检测细胞内的胆固醇流出.结果显示,NF-κB活化促进mi R-33s及SREBPs的表达,使用PDTC抑制NF-κB,细胞内mi R-33s和SREBPs的表达下降;NF-κB p65可与SREBPs启动子区直接结合;转染mi R-33s抑制剂后,NF-κB活化对ABCA1的抑制作用减弱,胆固醇流出增强;相反,转染mi R-33s抑制物,NF-κB活化对ABCA1的抑制作用增强,胆固醇流出减弱.结果提示,NF-κB活化可促进mi R-33s表达,抑制ABCA1及胆固醇流出.

关键词： miR-33s 核因子κB 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 胆固醇流出

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