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肿瘤 2009年第10期29卷 955-960页

作者：戴支凯杨小生余丽梅桂林医学院药理学教研室桂林541004 遵义医学院药理学教研室遵义563003 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵阳550002

目的:观察刺梨提取物(extract from Rosa roxburghiiTratt,CL)联合5-氟尿嘧啶(5-florouracil,5-FU)抗人肝癌细胞SMMC-7721的作用。方法:采用MTT法检测和生长曲线绘制分析CL联合5-FU对SMMC-7721细胞生长的影响;通过检测硝基四氮唑蓝(nitroblue tetrazolium,NBT)阳性细胞百分率和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)含量,分析CL联合5-FU对SMMC-7721细胞分化的影响;采用丫啶橙(acridineorange,AO)/溴化乙锭(ethidium bromide,EB)荧光染色法和FCM法检测CL联合5-FU对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响。结果:联合作用组的细胞生长曲线较5-FU和对应浓度CL单独作用组下移,且联合作用组的联合作用系数q值为0.85～1.15,表明CL联合5-FU具有抗肿瘤相加作用;与对照组相比较,5-FU、CL和2药联合均能提高NBT阳性细胞比率(P<0.05),且联合用药组的NBT阳性细胞比率比CL单独作用组高(P<0.05);CL组和CL联合5-FU组均能降低细胞AFP含量,且随着CL浓度的增加而下降,但2组间差异无统计学意义(P>0.05);CL单独作用组和联合作用组间的细胞凋亡率无明显差异(P>0.05);与阴性对照组比较,5-FU组能增加异倍体细胞比率(P<0.05),CL组和CL联合5-FU组均能增加G0/G1期细胞比率(P<0.05)、减少S期细胞比率(P<0.05),联合用药组还能降低G2/M期细胞比率(P<0.05)。结论:CL与5-FU具有协同抗SMMC-7721细胞的作用,其机制可能与2者协同诱导细胞分化和抑制细胞增殖有关。

关键词：肝肿瘤细胞培养技术氟尿嘧啶刺梨细胞,SMMC-7721

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刺梨三萜对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响

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食品科学 2013年第13期34卷 275-279页

作者：黄姣娥江晋渝罗勇戴支凯桂林医学院药学院药理学教研室广西桂林541004 贵州航天医院神经内科贵州遵义563000

目的:观察刺梨三萜(Rosa roxburghii Tratt triterpene,RRTT)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,研究其可能的作用机制。方法:采用形态学观察和MTT法分析RRTT对SMMC-7721细胞增殖的影响;通过NBT还原实验和细胞培养上清液中甲胎蛋白(a... 详细信息

目的:观察刺梨三萜(Rosa roxburghii Tratt triterpene,RRTT)对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的影响,研究其可能的作用机制。方法:采用形态学观察和MTT法分析RRTT对SMMC-7721细胞增殖的影响;通过NBT还原实验和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)含量的测定分析RRTT对SMMC-7721分化的影响;采用AO/EB染色法和FCM检测RRTT对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响;RT-PCR检测Bad mRNA的表达。结果:RRTT对SMMC-7721细胞增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性。与阴性对照组比,随RRTT剂量的增加,NBT阳性细胞比率增加,AFP含量逐渐降低。RRTT对SMMC-7721细胞凋亡和增殖周期均无明显影响。RRTT作用后,Bad mRNA的表达下调。结论:RRTT具有体外抗SMMC-7721作用,其机制可能通过下调Bad mRNA的表达而诱导细胞分化,而与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡无关。

关键词：刺梨三萜化合物人肝癌SMMC-7721细胞细胞增殖细胞分化细胞凋亡

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丹参酮IIA对脂多糖引起腹膜间皮细胞损伤的保护作用（英文）

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天然产物研究与开发 2016年第3期28卷 420-423,340页

作者：张慧宋宇新乡医学院药学院药理学教研室新乡453000

本研究探讨了丹参酮IIA对脂多糖诱导大鼠腹膜间皮细胞(rat peritoneal mesothelial cells,RPMCs)炎症反应、氧化应激及其损伤的影响。采用原代培养大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs),分为正常对照组、5 mg/L LPS作用RPMC 24 h组、5 mg/L LPS分别... 详细信息

本研究探讨了丹参酮IIA对脂多糖诱导大鼠腹膜间皮细胞(rat peritoneal mesothelial cells,RPMCs)炎症反应、氧化应激及其损伤的影响。采用原代培养大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs),分为正常对照组、5 mg/L LPS作用RPMC 24 h组、5 mg/L LPS分别与40、80和160μmol/L丹参酮IIA共同作用24 h组。MTT测定各组RPMCs增值率。ELISA法检测细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α表达。流式细胞仪检测活性氧(ROS)水平,试剂盒检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)表达。RT-PCR法检测各组FN、COL I、Bcl-2和Bax mRNA的表达。研究发现丹参酮IIA+LPS组的RPMCs的增殖率明显高于LPS组(P<0.05)。丹参酮IIA可降低LPS刺激下RPMCs中IL-1β、IL-6、TNF-α、ROS和MDA的表达,同时FN、COL I、Bax mRNA表达也明显下降。但SOD水平和Bcl-2 mRNA表达明显升高,与LPS组相比。实验结果显示,丹参酮IIA具有抑制LPS所致的氧化应激及炎性反应,减少细胞凋亡及抑制纤维化的作用,进而起到对RPMCs的保护作用。

关键词：丹参酮IIA 脂多糖氧化应激腹膜间皮细胞

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黄酮类化合物对动物实验性肝损伤保护作用的研究进展

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中国药理学通报 2008年第1期24卷 5-10页

作者：郭菁菁杨秀芬广西中医学院药学院药理学教研室广西南宁530001

各种黄酮类化合物如黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、异黄酮类、黄烷酮类等对化学性肝损伤、药物性肝损伤、免疫性肝损伤、酒精性肝损伤、缺血/再灌注性肝损伤等实验性肝损伤均有不同程度的保护作用。这种保护作用与黄酮化合物清除自由... 详细信息

各种黄酮类化合物如黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、异黄酮类、黄烷酮类等对化学性肝损伤、药物性肝损伤、免疫性肝损伤、酒精性肝损伤、缺血/再灌注性肝损伤等实验性肝损伤均有不同程度的保护作用。这种保护作用与黄酮化合物清除自由基、抗氧化、抗脂质过氧化反应、调节免疫功能等有关。研究各种黄酮类化合物对动物实验性肝损伤的作用对于开发防治肝脏疾病的药物有重要意义。该文就近年来黄酮类化合物对动物实验性肝损伤作用的研究进展作一综述。

关键词：黄酮类化合物动物实验肝损伤

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HPLC法检测人血浆中枸橼酸坦度螺酮的浓度

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药物分析杂志 2006年第12期26卷 1751-1753页

作者：胡爱萍温州医学院药学院药理学教研室温州325027

目的:建立反相高效液相色谱内标法测定人血浆中枸橼酸坦度螺酮的浓度。方法:枸橼酸坦度螺酮血浆样品加入奥卡西平内标液,经2 mol·L^(-1)碳酸钠碱化后用乙酸乙酯-正己烷(4:1)一步提取,上清液于50℃水浴氮气吹干。色谱柱:Hyper-sil C... 详细信息

目的:建立反相高效液相色谱内标法测定人血浆中枸橼酸坦度螺酮的浓度。方法:枸橼酸坦度螺酮血浆样品加入奥卡西平内标液,经2 mol·L^(-1)碳酸钠碱化后用乙酸乙酯-正己烷(4:1)一步提取,上清液于50℃水浴氮气吹干。色谱柱:Hyper-sil C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm,Agilent);流动相:乙腈-水-0.15 mol·L^(-1)磷酸二氢钠缓冲液(pH=3.0)(33:62:5);流速:0.8 mL·min^(-1);检测波长:239 nm;柱温:35℃。结果:枸橼酸坦度螺酮在0.02～5.0μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9994),定量下限为0.02μg·mL^(-1)。相对回收率98.6%～99.8%,提取回收率83.2%～92.3%,日内和日间 RSD 分别为2.9%～4.9%和3.8%～5.1%。结论:本法简便、准确、灵敏度高,适用于枸橼酸坦度螺酮的临床血药浓度检测及药代动力学研究。

关键词：枸橼酸坦度螺酮药物动力学血浆高效液相色谱法

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蜂胶黄酮对培养大鼠乳鼠心肌细胞游离钙离子的影响

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中成药 2011年第9期33卷 1488-1492页

作者：王浩刘义辛晓明徐晓燕陈伟高允生泰山医学院药学院药理学教研室山东泰安271016 辽宁医学院药理学教研室辽宁锦州121001

目的探讨蜂胶黄酮对培养大鼠乳鼠心肌细胞内游离钙离子的影响及其作用机制。方法原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,用钙敏荧光探针Fura-2/AM负载染色后,采用阳离子测定系统,检测给药前后心肌细胞游离钙离子浓度[Ca2+]i及心肌细胞钙瞬变。结果... 详细信息

目的探讨蜂胶黄酮对培养大鼠乳鼠心肌细胞内游离钙离子的影响及其作用机制。方法原代培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,用钙敏荧光探针Fura-2/AM负载染色后,采用阳离子测定系统,检测给药前后心肌细胞游离钙离子浓度[Ca2+]i及心肌细胞钙瞬变。结果 (1)静息状态下,心肌细胞[Ca2+]i为(83.3±11.7)nmol/L(x±s,n=6),终质量浓度分别为0.2、1、5μg/mL蜂胶黄酮对静息[Ca2+]i无影响。(2)KClI、so能明显升高[Ca2+]i(P<0.01),预孵蜂胶黄酮能抑制KCl及Iso引起的[Ca2+]i增高(P<0.01);(3)蜂胶黄酮能降低心肌细胞钙瞬变峰值,抑制钙瞬变频率,对KCl、异丙肾上腺素诱导心肌细胞钙瞬变变化具有抑制作用。结论蜂胶黄酮可抑制心肌细胞内钙超载,其作用机制可能与影响钙通道及细胞内钙释放有关。

关键词：蜂胶黄酮心肌细胞钙离子 Fura-2

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罗汉果甜苷V人工抗原免疫原性检测法的建立与评价

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免疫学杂志 2011年第10期27卷 850-852页

作者：李丽李勇文段小群陈旭杨新平梁成钦卢曦李梅广西医科大学药理学教研室南宁530021 桂林医学院药学院 541004

目的制备罗汉果甜苷V(mogroside V,MogV)-载体蛋白复合物人工抗原及抗血清,建立抗血清与MogV特异性反应的检测方法,为进一步制备MogV的单克隆抗体、建立快速检测MogV的ELISA法提供技术基础。方法将MogV与丁二酸酐、载体蛋白牛血清蛋白(B... 详细信息

目的制备罗汉果甜苷V(mogroside V,MogV)-载体蛋白复合物人工抗原及抗血清,建立抗血清与MogV特异性反应的检测方法,为进一步制备MogV的单克隆抗体、建立快速检测MogV的ELISA法提供技术基础。方法将MogV与丁二酸酐、载体蛋白牛血清蛋白(BSA)和人血清蛋白(HSA)反应偶联,制得半抗原-载体蛋白复合物后,通过紫外扫描光谱计算出结合的半抗原数目;以此抗原免疫Balb/c小鼠,制备抗血清,并通过ELISA法检测效价和特异性。结果合成的人工抗原MogV-HS-BSA结合比约为44∶1,MogV-HS-HSA结合比约为64∶1;通过免疫小鼠得到特异性针对MogV的抗血清,血清效价较高。结论 MogV人工抗原有较好的免疫原性,建立的免疫原性检测方法简便可行。

关键词：罗汉果甜苷V 人工抗原免疫原性酶联免疫吸附检测法

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依那普利拉抗心肌成纤维细胞增殖的分子机制

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吉林大学学报（医学版） 2009年第4期35卷 591-594,F0002页

作者：孙红霞杨世杰吉林大学基础医学院药理学教研室吉林长春130021 北华大学药学院药理学教研室吉林吉林132013

目的:观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)依那普利拉(Ena)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂白屈菜红(Chele)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生鼠心肌成纤维细胞(CFb)增殖、细胞周期、Ⅰ型胶原纤维(collagenⅠ)、PKC和细胞周期蛋白cyclinD1蛋白表达... 详细信息

目的:观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)依那普利拉(Ena)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂白屈菜红(Chele)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的新生鼠心肌成纤维细胞(CFb)增殖、细胞周期、Ⅰ型胶原纤维(collagenⅠ)、PKC和细胞周期蛋白cyclinD1蛋白表达的影响,阐明Ena抗CFb增殖的分子机制。方法:培养的新生Wistar大鼠CFb分为对照组、AngⅡ组、Chele+AngⅡ组、Chele+AngⅡ+Ena组和AngⅡ+Ena组,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFb,四氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖;免疫细胞化学染色(IC)法测定collagenⅠ含量;流式细胞术(FCM)检测细胞周期;免疫印迹法检测PKC和细胞周期蛋白cyclinD1表达。结果:与AngⅡ组比较,Chele和Ena组及Chele+AngⅡ+Ena组CFb增殖率均显著降低(P<0.05或P<0.001),collagenⅠ含量降低(P<0.05或P<0.01),CFb G0/G1期细胞百分率升高,S期细胞百分率降低(P<0.05或P<0.01),PKC和cyclinD1蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论:Ena和Chele能抑制AngⅡ诱导的CFb增殖和胶原蛋白分泌,其机制可能是通过抑制PKC-cyclinD1转导通路实现的。

关键词：依那普利拉白屈菜红 cyclinD1 心肌成纤维细胞

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苦碟子总黄酮对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

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中国药理学通报 2010年第2期26卷 276-277页

作者：翟玉荣于小风曲绍春徐华丽睢大筼吉林大学药学院药理学教研室吉林长春130021 遵义医学院珠海校区药理学教研室广东珠海519041

以菊科植物抱茎苦荬菜[Ixeris sonchifolia(Bge.)Hance]全草为原料研制开发的苦碟子注射液已广泛应用于临床,在治疗冠心病心绞痛等方面收到了较好的疗效。为全面提高苦碟子注射液药品质量标准,降低生产成本,将苦碟子注射液按中药五类新... 详细信息

以菊科植物抱茎苦荬菜[Ixeris sonchifolia(Bge.)Hance]全草为原料研制开发的苦碟子注射液已广泛应用于临床,在治疗冠心病心绞痛等方面收到了较好的疗效。为全面提高苦碟子注射液药品质量标准,降低生产成本,将苦碟子注射液按中药五类新药(冻干粉针剂)开发,[第一段]

关键词：苦碟子总黄酮心肌缺血再灌注损伤脂质过氧化超氧化物歧化酶前列环素血栓素A2 游离脂肪酸

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依那普利抗异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化作用及机制

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中国药理学通报 2009年第8期25卷 1060-1064页

作者：孙红霞杨世杰北华大学药学院药理学教研室吉林吉林132013 吉林大学基础医学院药理学教研室吉林长春132001

目的观察依那普利(enalapril,Ena)抗异丙肾上腺素(Isoprenaline,Iso)诱导的心肌纤维化作用并探讨其作用机制。方法异丙肾上腺素皮下注射致心肌纤维化模型,经Ena低、中、高(2.5、5.0、10.0 ***-1)3个剂量组和阳性对照药卡托普利(100.0 **... 详细信息

目的观察依那普利(enalapril,Ena)抗异丙肾上腺素(Isoprenaline,Iso)诱导的心肌纤维化作用并探讨其作用机制。方法异丙肾上腺素皮下注射致心肌纤维化模型,经Ena低、中、高(2.5、5.0、10.0 ***-1)3个剂量组和阳性对照药卡托普利(100.0 ***-1)治疗后观察其对心肌组织胶原变化、心室重量(HW/BW)和心室重量指数(LVI)、羟脯氨酸含量及免疫组化和Western blot检测TGF-β1表达的影响。结果Ena不同剂量组均能够降低心肌组织胶原含量(P<0.05或P<0.01),降低HW/BW和LVI(P<0.05或P<0.01),降低羟脯氨酸含量(P<0.05或P<0.01),减少TGF-β1在心肌组织中的表达(P<0.05或P<0.01),减轻心肌纤维化。结论Ena通过抑制TGF-β1表达抗Iso诱导的心肌纤维化。

关键词：依那普利异丙肾上腺素心肌纤维化转化生长因子-β1

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