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CRMP1基因慢病毒干扰质粒构建及其对SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体蛋白表达的影响

中国免疫学杂志 2025年第2期41卷 433-438页

作者：王松豪秦坤韩雨张微微徐绍业邵晓云桂林医学院人体解剖学教研室桂林541199 桂林医学院科学实验中心桂林541199

目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构... 详细信息

目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构建CRMP1重组干扰质粒。将重组正确的shCRMP1质粒转染HEK-293T细胞进行慢病毒包装,获得的慢病毒上清浓缩后感染SH-SY5Y细胞,Western blot检测SH-SY5Y细胞内CRMP1的干扰效果及其对NLRP3炎症小体各组分蛋白表达的影响。结果:DNA测序结果显示,pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒构建成功;转染HEK-293T细胞包装慢病毒后,细胞内CRMP1蛋白表达下降;慢病毒浓缩液感染SH-SY5Y细胞经嘌呤霉素筛选,Western blot发现shCRMP1慢病毒能显著下调SH-SY5Y细胞中CRMP1蛋白表达。同时稳定敲减CRMP1的SH-SY5Y细胞系中发现,MPP^(+)诱导下,抑制CRMP1表达可有效抑制NLRP3炎症小体活化。结论:成功构建pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒,且干扰CRMP1可抑制MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体活化,为进一步研究CRMP1在帕金森病等神经退行性疾病中的发生机制奠定基础。

关键词：坍塌反应调节蛋白1 慢病毒干扰人神经母细胞瘤细胞 NLRP3炎症小体

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基于fMOST高分辨率3D重建系统的C57BL/6小鼠模型内脏神经系统的形态学观察

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解剖学报 2025年第1期56卷 114-119页

作者：冷历歌杨冠雄王泽恩陈椅乔治良胡庆中王明炎田风厦门大学医学院解剖学教研室厦门361102

目的应用荧光显微光学切片断层成像(fMOST)高分辨率3D重建系统,探讨其用于肠道神经系统形态学研究的可能性,建立该系统进行肠道神经系统形态学研究的方法。方法应用fMOST高分辨率3D重建系统对C57BL/6小鼠肠神经系统进行了详细的形态学研... 详细信息

目的应用荧光显微光学切片断层成像(fMOST)高分辨率3D重建系统,探讨其用于肠道神经系统形态学研究的可能性,建立该系统进行肠道神经系统形态学研究的方法。方法应用fMOST高分辨率3D重建系统对C57BL/6小鼠肠神经系统进行了详细的形态学研究,基于此方法探索单细胞水平的小动物模型内脏神经系统形态学研究方法。结果小鼠的小肠和大肠具有较为丰富的肠神经系统,但小鼠小肠的肠神经系统不同于大肠,缺乏典型的肌间(Auerbach)神经丛,黏膜深层(Henley)神经丛和黏膜下浅(Meissner)神经丛。结论为C57BL/6小鼠肠道神经系统的解剖结构提供了更加清晰的展示,更加明确了该动物模型的肠道神经系统与人类解剖结构的异同,为其在消化系统疾病研究中的合理应用提供了实验依据。基于fMOST高分辨率3D重建系统的形态学研究可以不局限于中枢神经系统,完全可以扩展到多个内脏神经系统的形态学研究中。

关键词：肠神经系统黏膜层肌间神经丛黏膜下神经丛荧光显微光学切片断层成像技术小鼠

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糖脂转运蛋白对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制

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吉林大学学报(医学版) 2025年第2期51卷 284-295页

作者：卢梦云韩语诚胡溢洪何旻蕙张艳群邹先琼桂林医学院科学实验中心桂林医学院基础医学院免疫学教研室中南大学湘雅医院肿瘤科

目的:探讨人类糖脂转运蛋白(GLTP)对胰腺癌(PC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并阐明其作用机制。方法:采用阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析平台(UALCAN)数据库分析PC组织和正常胰腺组织中GLTP蛋白表达差异,以及不同临床病理特征PC患... 详细信息

目的:探讨人类糖脂转运蛋白(GLTP)对胰腺癌(PC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并阐明其作用机制。方法:采用阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析平台(UALCAN)数据库分析PC组织和正常胰腺组织中GLTP蛋白表达差异,以及不同临床病理特征PC患者PC组织和正常胰腺组织中GLTP蛋白表达的差异。体外培养人PC细胞PANC-1细胞,分为对照组(转染pFLAG-CMV4质粒)和GLTP过表达(GLTP-OE)组(转染pFLAG-GLTP质粒),采用抗生素筛选法建立稳定转染GLTP的细胞;敲低实验采用非特异siRNA转染PANC-1细胞作为对照组,si-GLTP转染PANC-1细胞作为si-GLTP组。采用Western blotting法检测细胞中GLTP蛋白表达情况,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测PANC-1细胞的增殖活性,克隆形成实验检测PANC-1细胞克隆形成数,Transwell小室实验检测PANC-1细胞的迁移及侵袭细胞数;转录组测序分析GLTP影响PANC-1细胞的潜在作用机制;Western blotting法检测各组PANC-1细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B (Akt)和磷酸化Akt (p-Akt)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR (RTqPCR)法检测各组细胞中双调蛋白(AREG)和激酶插入域受体(KDR) mRNA表达水平。小鼠随机分为对照组(注射pFLAG-CMV4转染的PANC-1细胞)和实验组(注射pFLAG-GLTP稳定转染的PANC-1细胞),制备小鼠皮下移植瘤模型,检测2组小鼠移植瘤体积和质量。结果:UALCAN数据库分析,PC组织中GLTP蛋白表达水平低于正常胰腺组织(P<0.01),且不同癌症分期(P<0.05)、肿瘤分级(P<0.05)、年龄(P<0.001)和性别(P<0.05) PC患者PC组织与正常胰腺组织中GLTP蛋白表达水平比较差异有统计学意义。与对照组比较,GLTP-OE组细胞增殖活性(P<0.01)和克隆形成数(P<0.001)明显降低,迁移细胞数(P<0.001)和侵袭细胞数(P<0.01)明显降低。敲低实验,与对照组比较,si-GLTP组细胞增殖活性(P<0.01)和克隆形成数(P<0.05)明显升高,迁移细胞数(P<0.001)和侵袭细胞数(P<0.001)明显升高。与对照组比较,实验组小鼠注入肿瘤细胞4周后,肿瘤质量和体积降低(P<0.01)。过表达实验,与对照组比较,GLTP-OE组细胞中p-PI3K (P<0.01)、p-Akt-S473 (P<0.01)和p-Akt-T308 (P<0.05)蛋白表达水平降低,AREG (P<0.01)和KDR (P<0.01) mRNA表达水平降低。敲低实验,与对照组比较,si-GLTP组细胞中p-PI3K (P<0.01)、p-Akt-S473 (P<0.01)和p-Akt-T308 (P<0.01)蛋白表达水平升高,AREG (P<0.01)和KDR (P<0.05) mRNA表达水平升高。结论:GLTP在PC组织中呈低表达。GLTP过表达能抑制PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力,并抑制裸鼠皮下移植瘤生长,其可能的作用机制与降低PI3K/Akt信号通路活性有关。

关键词：糖脂转运蛋白胰腺肿瘤人胰腺癌细胞细胞增殖磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B

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线粒体自噬在动脉粥样硬化中作用的研究进展

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中国病理生理杂志 2025年第3期41卷 585-592页

作者：郑标王琼肖玉波谢远杰莫中成广西糖尿病系统医学重点实验室桂林医学院组织学与胚胎学教研室广西桂林541199 湖南医药学院公共卫生与检验医学院湖南怀化418000

线粒体自噬作为一种特殊的选择性自噬,通过调控细胞脂质代谢、炎症反应、氧化应激等过程参与动脉粥样硬化的发生发展。近年来的研究发现,许多药物及中草药成分通过调控巨噬细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞的线粒体自噬,影响动脉粥... 详细信息

线粒体自噬作为一种特殊的选择性自噬,通过调控细胞脂质代谢、炎症反应、氧化应激等过程参与动脉粥样硬化的发生发展。近年来的研究发现,许多药物及中草药成分通过调控巨噬细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞的线粒体自噬,影响动脉粥样硬化的进程。本文围绕线粒体自噬调控细胞功能进而影响动脉粥样硬化进展的分子机制,总结了近年来通过靶向调控线粒体自噬抗动脉粥样硬化的治疗药物相关研究进展,为寻求靶向调控线粒体自噬改善动脉粥样硬化的防治新策略提供新的思路。

关键词：动脉粥样硬化线粒体自噬巨噬细胞血管内皮细胞血管平滑肌细胞

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咬肌各层对面侧区骨性结构的影响

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解剖学报 2025年第2期56卷 208-213页

作者：赵宇琦蒋金锐陈劲燃王泽川周厚恩许雯娣雍刘军成都医学院临床医学系成都医学院人体解剖学教研室成都610500

目的通过成人面侧区大体解剖,观测浅、中、深层咬肌与相关骨性结构的形态,探讨咬肌各层对面侧区骨性结构的影响。方法对12具成人尸体的双侧咬肌进行暴露,分离浅、中、深层咬肌,分别测量肌长、肌腱长度、肌腹长度;剥离咬肌后测量总厚度,... 详细信息

目的通过成人面侧区大体解剖,观测浅、中、深层咬肌与相关骨性结构的形态,探讨咬肌各层对面侧区骨性结构的影响。方法对12具成人尸体的双侧咬肌进行暴露,分离浅、中、深层咬肌,分别测量肌长、肌腱长度、肌腹长度;剥离咬肌后测量总厚度,暴露下颌骨、颧弓,测量下颌角角度、颧弓厚度、颧弓宽度,观察咬肌粗隆,并对其之间的相关关系进行统计学分析。结果颧弓厚度与浅、中、深层咬肌肌长及浅、中层肌腹长度成正相关(r浅层肌长=0.624、r中层肌长=0.787、r深层肌长=0.423、r浅层肌腹长度=0.493、r中层肌腹长度=0.548),颧弓宽度与浅、中层咬肌肌长、中层肌腹长度成正相关(r浅层肌长=0.527、r中层肌长=0.521、r中层肌腹长度=0.437),下颌角角度仅与中层肌腹长度成负相关(r=-0.422),浅、中层咬肌粗隆不受相关层次咬肌影响;深层咬肌粗隆与深层肌长、深层肌腱长度成负相关(r深层肌长=-0.543、r深层肌腱长度=-0.443)。结论在国人咬肌层次中,浅、中层咬肌对面侧区骨性结构的影响最大,其对面侧区结构的重塑具有指导意义。

关键词：咬肌分层下颌角颧弓咬肌粗隆应用解剖学成人

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椎动脉V_(3)段与第2颈神经毗邻关系的解剖学观测及其临床意义

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中国临床解剖学杂志 2025年第1期43卷 9-13页

作者：安雷雷孔祥玉刘鹏飞张宾马真杜心如新乡医学院三全学院人体解剖学教研室河南新乡453003 承德医学院人体解剖学教研室河北承德067000 首都医科大学附属北京朝阳医院北京100020

目的观察椎动脉第3段垂直段(V_(3)v)与第2颈神经(C_(2N))毗邻关系,为椎动脉型颈椎病(Cervical spondylotic arteriopathy,CSA)及枕颈痛合并眩晕的发生机制提供形态学依据。方法头颈标本33侧,解剖剥离法显露C_(2N)和V_(3)v及其相邻的结构... 详细信息

目的观察椎动脉第3段垂直段(V_(3)v)与第2颈神经(C_(2N))毗邻关系,为椎动脉型颈椎病(Cervical spondylotic arteriopathy,CSA)及枕颈痛合并眩晕的发生机制提供形态学依据。方法头颈标本33侧,解剖剥离法显露C_(2N)和V_(3)v及其相邻的结构,观测V_(3)v与C_(2N)交叉部位,范围及形态。结果所有标本中V_(3)v与C_(2N)前支均为横向交叉,跨越椎动脉后方(33/33,100%)。依据其接触程度可分为3种类型:①接触性交叉:C_(2N)的前支依其条索状原形与V_(3)v横向交叉,共6侧占18.2%;②压痕性交叉:C_(2N)横跨V_(3)v段呈扁带状或纵向凹痕状,共7侧占21.2%;③半缠绕压扁带性交叉:C_(2N)前支呈扁带状横向半环形缠绕V_(3)v,共20侧占60.6%。交叉处呈直角交叉16侧占48.5%。V_(3)v交叉前和交叉处管径分别为(3.82±0.07)mm、(3.35±0.05)mm;交叉前和交叉处C_(2N)前支宽径为(2.38±0.05)mm、(3.53±0.09)mm。交叉处距中线距离(23.25±0.39)mm;交叉处距同侧寰枢外侧关节囊距离(6.26±0.2)mm;距同侧C2-3关节突关节距离(11.78±0.3)mm。结论V_(3)v与C_(2N)前支形成横向交叉性接触,其中以半缠绕压扁带性交叉为主,这种毗邻关系可能使C_(2N)前支压迫V_(3)v使大脑供血减少,可能是CSA发生机制之一和/或高血压合并枕颈痛的形态学基础。

关键词：椎动脉第3段第2颈神经枕颈痛椎动脉型颈椎病解剖剥离标本

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小胶质细胞介导的铁死亡在缺氧缺血性脑损伤中的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2025年

作者：郭涛左涵珺匡显锋张树坤陈柏霖罗李兴杨逍王朝李娟娟昆明医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系昆明理工大学医学部基础医学院解剖学教研室

在缺氧缺血性脑损伤（HIBD）中，程序性细胞死亡方式——铁死亡现象被严重激活，而小胶质细胞对铁的积累具有高度敏感性。研究如何调控小胶质细胞在HIBD中的双重作用，转变为适度可控的铁死亡，对HIBD关于小胶质细胞铁死亡的靶向治疗具... 详细信息

在缺氧缺血性脑损伤（HIBD）中，程序性细胞死亡方式——铁死亡现象被严重激活，而小胶质细胞对铁的积累具有高度敏感性。研究如何调控小胶质细胞在HIBD中的双重作用，转变为适度可控的铁死亡，对HIBD关于小胶质细胞铁死亡的靶向治疗具有较大意义。本文以HIBD为疾病模型，围绕小胶质细胞，分别从病理生理机制、小胶质细胞的极化和功能、铁死亡的分子机制、信号通路和治疗策略等方面，对小胶质细胞介导的铁死亡在HIBD中的研究作一综述。为小胶质细胞中铁死亡的研究提供参考。

关键词：缺氧缺血性脑损伤(HIBD) 小胶质细胞铁死亡信号机制综述

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左侧椎动脉合并脑膜中动脉变异1例

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中华解剖与临床杂志 2025年第2期30卷 131-132页

作者：刘燕欣曾饴宣赵馨乐林伊雯高俊彦长治医学院第一临床学院临床医学系长治046000 长治医学院人体解剖学教研室长治046000

笔者在解剖一具成年尸体(来源于长治医学院人体解剖教研室)时,观察到尸体标本左锁骨下动脉分支之一的左椎动脉在起点、走行位置、颅内部外径方面存在变异,脑膜中动脉的起点存在变异。查阅国内外文献,少见此类变异报道。为积累国人椎动... 详细信息

笔者在解剖一具成年尸体(来源于长治医学院人体解剖教研室)时,观察到尸体标本左锁骨下动脉分支之一的左椎动脉在起点、走行位置、颅内部外径方面存在变异,脑膜中动脉的起点存在变异。查阅国内外文献,少见此类变异报道。为积累国人椎动脉、脑膜中动脉变异解剖学资料,报道如下。

关键词：遗传变异脑膜中动脉椎动脉

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左肺心切迹壁胸膜至心包心尖部条索结构1例

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解剖学研究 2025年第2期47卷 192-193页

作者：刘晓娜屈飞飞李东禄甘肃医学院人体解剖学教研室甘肃医学院基础医学院

在局部解剖学教学中，发现1例成年男尸有一连于左肺心切迹壁胸膜至心尖之间的异常条索状结构，现将该变异报道如下。10%福尔马林固定成年男尸1具，年龄约60岁，身高约165 cm，外观发育基本正常，来源于甘肃医学院人体解剖学教研室。正... 详细信息

在局部解剖学教学中，发现1例成年男尸有一连于左肺心切迹壁胸膜至心尖之间的异常条索状结构，现将该变异报道如下。10%福尔马林固定成年男尸1具，年龄约60岁，身高约165 cm，外观发育基本正常，来源于甘肃医学院人体解剖学教研室。正常肺位于胸腔内，借肺根和肺韧带固定于纵隔两侧；左肺由斜裂分为上、下2个肺叶，右肺除斜裂外，还有一水平裂将其分为上、中、下3个肺叶[1]。正常肺与心包之间无条索状结构。

关键词：左肺心切迹心尖异常条索状结构壁胸膜变异

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低氧环境对妊娠大鼠胎盘组织TNF-α、IL-10的表达及其生殖功能、胚胎发育的影响

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解剖学杂志 2025年第1期48卷 7-11,F0002页

作者：李丹李建华许佳佳青海大学医学院人体解剖学教研室西宁810016

目的:探讨高原低氧环境下妊娠大鼠体内,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素10(IL-10)在胎盘中的表达及对生殖功能、子代发育的影响。方法:将20只雌鼠、10只雄鼠以2∶1为一笼随机分为低氧组(低压氧舱,模拟6000 m海拔)和常氧组(青海省西宁市... 详细信息

目的:探讨高原低氧环境下妊娠大鼠体内,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素10(IL-10)在胎盘中的表达及对生殖功能、子代发育的影响。方法:将20只雌鼠、10只雄鼠以2∶1为一笼随机分为低氧组(低压氧舱,模拟6000 m海拔)和常氧组(青海省西宁市,平均2200 m海拔)饲养,记录每组雌鼠受孕率,直至妊娠第20天,2组妊娠大鼠禁食12h后,尾部采血测量空腹血糖,采取腹主动脉血液、取整个子宫,并剥离胎盘和胎鼠。记录2组妊娠大鼠子宫质量、胎鼠数量,计算2组妊娠大鼠子代畸形率。ELISA检测妊娠大鼠血清空腹胰岛素水平,H-E染色观察低氧下胎盘组织结构的改变,免疫组织化学染色检测妊娠大鼠胎盘组织TNF-α、IL-10阳性表达情况,RT-qPCR及免疫印迹检测妊娠大鼠胎盘组织TNF-α、IL-10mRNA及蛋白表达。结果:与常氧组相比,低氧组妊娠大鼠孕晚期子宫质量较轻;低氧组妊娠大鼠空腹血糖降低、空腹胰岛素水平升高;低氧组妊娠大鼠受孕率降低,胎鼠数量减少,胎鼠畸形率升高。低氧组妊娠大鼠胎盘结构不完整,血管分布增多,管壁增厚,绒毛发育缓慢且数目减少,绒毛间质血管分布密集,基底膜增厚,可见少量炎症细胞,合体滋养层增厚界限模糊。与常氧组比较,低氧组胎盘组织中TNF-α、IL-10 mRNA和蛋白表达均上调。结论:低氧环境下胎盘组织中的TNF-α、IL-10表达上调,可能与雌性大鼠生殖功能下降、不良妊娠有关。

关键词：高原低氧妊娠大鼠肿瘤坏死因子α 白介素10 生殖功能胎盘

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