检索结果-内蒙古大学图书馆

CRMP1基因慢病毒干扰质粒构建及其对SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体蛋白表达的影响

中国免疫学杂志 2025年第2期41卷 433-438页

作者：王松豪秦坤韩雨张微微徐绍业邵晓云桂林医学院人体解剖学教研室桂林541199 桂林医学院科学实验中心桂林541199

目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构... 详细信息

目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构建CRMP1重组干扰质粒。将重组正确的shCRMP1质粒转染HEK-293T细胞进行慢病毒包装,获得的慢病毒上清浓缩后感染SH-SY5Y细胞,Western blot检测SH-SY5Y细胞内CRMP1的干扰效果及其对NLRP3炎症小体各组分蛋白表达的影响。结果:DNA测序结果显示,pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒构建成功;转染HEK-293T细胞包装慢病毒后,细胞内CRMP1蛋白表达下降;慢病毒浓缩液感染SH-SY5Y细胞经嘌呤霉素筛选,Western blot发现shCRMP1慢病毒能显著下调SH-SY5Y细胞中CRMP1蛋白表达。同时稳定敲减CRMP1的SH-SY5Y细胞系中发现,MPP^(+)诱导下,抑制CRMP1表达可有效抑制NLRP3炎症小体活化。结论:成功构建pLKO.1-shCRMP1慢病毒干扰质粒,且干扰CRMP1可抑制MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体活化,为进一步研究CRMP1在帕金森病等神经退行性疾病中的发生机制奠定基础。

关键词：坍塌反应调节蛋白1 慢病毒干扰人神经母细胞瘤细胞 NLRP3炎症小体

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Hippo通路核心蛋白在小鼠出生后不同时间点脑皮质中的表达变化

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中国临床解剖学杂志 2022年第5期40卷 575-580页

作者：陈禹李希凡李凯璇陈晨黄希仕方方桂林医学院人体解剖学教研室桂林541004 桂林医学院科学实验中心桂林541004

目的探究Hippo信号通路核心蛋白在小鼠出生后不同时间点皮质中的表达变化。方法在C57BL/6小鼠出生后(postnatal,P)3 d、6 d、9 d、3周和8周,通过测量脑重及脑横径来检测小鼠脑组织生长发育情况;通过Western Blot检测小鼠皮质中MST1、LA... 详细信息

目的探究Hippo信号通路核心蛋白在小鼠出生后不同时间点皮质中的表达变化。方法在C57BL/6小鼠出生后(postnatal,P)3 d、6 d、9 d、3周和8周,通过测量脑重及脑横径来检测小鼠脑组织生长发育情况;通过Western Blot检测小鼠皮质中MST1、LATS1的表达;通过酪酰胺信号放大技术检测小鼠皮质中小胶质细胞在小鼠出生后五个不同时间点的数目变化以及Yes-相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)在小胶质细胞中的定位情况。结果小鼠出生后早期脑重、脑横径增速显著;MST1和LATS1从P9d开始极显著降低,P3周与P8周相比无统计学意义;皮质中IBA1阳性小胶质细胞数目占比随鼠龄上升,出生后早期增速显著,伴随小胶质细胞数目增多的是YAP从核外转向核内聚集。结论Hippo信号通路在出生后早期的小鼠皮质中被激活,可能参与出生后脑发育时体积调控。

关键词： Hippo信号通路小胶质细胞 C57BL/6小鼠

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慢病毒敲减质粒pLKO.1-shDAPK1的构建及其对细胞凋亡的影响

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实用医学杂志 2022年第6期38卷 715-720页

作者：秦坤徐绍业韩雨闫建国夏春波邵晓云桂林医学院人体解剖学教研室广西桂林541100 桂林医学院科学实验中心广西桂林541100 桂林医学院生理学教研室广西桂林541100

目的构建敲减死亡相关蛋白激酶1(shDAPK1)基因的慢病毒质粒及稳转神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y),并检测SH-SY5Y细胞中DAPK1敲减后对细胞凋亡的影响。方法设计并合成特异性敲减DAPK1基因的上下游引物,将引物退火后与双酶切PLKO.1载体经T... 详细信息

目的构建敲减死亡相关蛋白激酶1(shDAPK1)基因的慢病毒质粒及稳转神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y),并检测SH-SY5Y细胞中DAPK1敲减后对细胞凋亡的影响。方法设计并合成特异性敲减DAPK1基因的上下游引物,将引物退火后与双酶切PLKO.1载体经T4连接酶连接、转化、提取质粒并进行DNA测序,获得重组正确的慢病毒干扰质粒pLKO.1-shDAPK1。将该重组的质粒与辅助质粒psPAX2和pMD2.G共转染HEK293T细胞,72 h后收集慢病毒上清液,感染SH-SY5Y细胞,利用嘌呤霉素进行阳性筛选,得到稳定敲减DAPK1的SH-SY5Y细胞系。利用Western blot检测SH-SY5Y稳转细胞系中DAPK1蛋白以及用1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)处理后的Bax、Bcl-2及Caspase-3的蛋白表达水平,并应用流式细胞术检测SH-SY5Y细胞的凋亡情况。结果重组pLKO.1-shDAPK1质粒的测序比对结果正确,嘌呤霉素筛选后获得shDAPK1稳转SH-SY5Y细胞系(shDAPK1-SY5Y),该稳转细胞系中DAPK1蛋白表达水平与对照组相比显著下降,此外还上调了Bcl-2蛋白的表达,下调Bax、Caspase-3蛋白的表达且流式检测结果显示该细胞系凋亡发生率明显下降。结论成功构建了慢病毒敲减质粒pLKO.1-shDAPK1,并建立了DAPK1低表达的SH-SY5Y稳定感染细胞系,明显抑制了细胞凋亡。

关键词：死亡相关蛋白激酶1 慢病毒质粒构建人骨髓神经母细胞瘤细胞细胞凋亡

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巨噬细胞铁死亡与动脉粥样硬化

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中国动脉硬化杂志 2024年第3期32卷 257-262页

作者：王琼冯安妮牙侯弟陈玉华郑标莫中成广西糖尿病系统医学重点实验室桂林医学院组织学与胚胎学教研室广西桂林市541199 桂林医学院-明舜制药慢性病防治研究联合实验室湖南省邵阳市422800

动脉粥样硬化是多种心血管疾病的病理基础,其导致的心血管疾病仍然是全球人类死亡的主要原因。铁死亡是一种铁离子依赖性非凋亡形式的细胞死亡方式,与多种生理机制密切相关。近些年来研究发现巨噬细胞铁死亡对于动脉粥样硬化的发生发展... 详细信息

动脉粥样硬化是多种心血管疾病的病理基础,其导致的心血管疾病仍然是全球人类死亡的主要原因。铁死亡是一种铁离子依赖性非凋亡形式的细胞死亡方式,与多种生理机制密切相关。近些年来研究发现巨噬细胞铁死亡对于动脉粥样硬化的发生发展具有十分重要的作用。文章从巨噬细胞铁代谢水平失衡出发,就巨噬细胞铁死亡与脂质过氧化、炎症、氧化应激等方面的相互作用,综述了巨噬细胞铁死亡与动脉粥样硬化之间的关系,以期为动脉粥样硬化发病机制的研究提供新的思路。

关键词：巨噬细胞铁死亡动脉粥样硬化脂质过氧化氧化应激

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甲状腺素信号通路调控自噬机制研究进展

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陕西医学杂志 2023年第6期52卷 764-767页

作者：戴松松刘昉桂林医学院基础医学院解剖学教研室广西桂林541199

甲状腺素是机体发育和维持正常生理活动不可缺少的激素之一,其通过与甲状腺素核受体(TRs)等相结合发挥作用,参与了机体大部分的生命活动。自噬作为一种在进化上相对保守的机制,广泛存在于不同类型的细胞中。在营养物质缺乏及面临外界压... 详细信息

甲状腺素是机体发育和维持正常生理活动不可缺少的激素之一,其通过与甲状腺素核受体(TRs)等相结合发挥作用,参与了机体大部分的生命活动。自噬作为一种在进化上相对保守的机制,广泛存在于不同类型的细胞中。在营养物质缺乏及面临外界压力的情况下,自噬发挥着清除受损细胞器并提供代谢底物的作用。虽然有大量文献分别对甲状腺素信号通路和自噬机制进行了深入的研究,但两者的关系尚不明确。现对近年来在不同系统性疾病中甲状腺素信号通路对自噬影响的研究进行总结,以阐明两者间复杂的作用关系。

关键词：甲状腺素自噬甲状腺素核受体甲状腺激素反应元件线粒体溶酶体

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谷胱甘肽在肿瘤细胞发生铁死亡过程中的作用研究

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世界华人消化杂志 2021年第15期29卷 901-907页

作者：杨凤娟谭宁张天禹程潭桂林医学院基础医学院人体解剖学教研室广西壮族自治区桂林市541199 桂林医学院科学实验中心桂林医学院基础医学院人体解剖学教研室广西壮族自治区桂林市541199 桂林医学院附属医院泌尿外科广西壮族自治区桂林市541004

铁死亡是近年发现的一种铁依赖性脂质过氧化和活性氧(reactive oxygen species,ROS)诱导的调节性细胞死亡,其发生过程中伴有ROS水平升高和抗氧化系统的下降--如酶抗氧化剂中谷胱甘肽过氧化物酶和非酶抗氧化剂中谷胱甘肽等.谷胱甘肽是细... 详细信息

铁死亡是近年发现的一种铁依赖性脂质过氧化和活性氧(reactive oxygen species,ROS)诱导的调节性细胞死亡,其发生过程中伴有ROS水平升高和抗氧化系统的下降--如酶抗氧化剂中谷胱甘肽过氧化物酶和非酶抗氧化剂中谷胱甘肽等.谷胱甘肽是细胞内普遍存在的低分子量抗氧化剂,其稳态水平依赖于所需氨基酸前体吸收速率、酶活性、谷胱甘肽二硫化物的回收以及氧化还原之间的平衡等.目前,靶向谷胱甘肽代谢已被广泛研究用于癌症治疗,与组合疗法相比,作为单一治疗策略的谷胱甘肽耗竭产生了显著的治疗效果.因此,深入认识谷胱甘肽在铁死亡发生过程中的作用,将为癌症治疗提供新的思路和方向.

关键词：铁死亡活性氧谷胱甘肽过氧化物酶谷胱甘肽

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微视频结合数字人体解剖软件在护理专业人体解剖学教学中的应用

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华夏医学 2022年第4期35卷 172-176页

作者：范晓明于兰方方王俊锋彭云滔李厚忠桂林医学院人体解剖学教研室广西桂林541199

目的:探讨微视频结合数字人体解剖软件在护理专业人体解剖学教学中的应用效果。方法:采用随机数字表法将240名护理学本科生分为对照组和观察组,每组120名。对照组采用桂林医学院人体解剖学教研室的常规教学方法;观察组在常规教学方法基... 详细信息

目的:探讨微视频结合数字人体解剖软件在护理专业人体解剖学教学中的应用效果。方法:采用随机数字表法将240名护理学本科生分为对照组和观察组,每组120名。对照组采用桂林医学院人体解剖学教研室的常规教学方法;观察组在常规教学方法基础上,引入微视频结合数字人体解剖软件教学法。比较两组的考核成绩、两组对教学效果的满意度及任课教师对两组教学效果的评价。结果:观察组的考核成绩、对教学的满意度以及教师对观察组的教学效果评价均高于对照组(P<0.05)。结论:微视频结合数字人体解剖软件教学可提高护理专业学生学习人体解剖学的兴趣,有良好的教学效果。

关键词：人体解剖学微视频数字人体解剖软件

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金匮肾气丸与补中益气丸联用对自然衰老C57小鼠运动及代谢的影响

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中国老年学杂志 2021年第3期41卷 600-603页

作者：叶蓉唐春凤刘道光朱明慧姚薇田顺亮刘承伟于兰桂林医学院基础医学院人体解剖学教研室广西桂林541004 柳州市中医医院桂林医学院临床医学院菏泽医学专科学校人体解剖学教研室桂林医学院药学院桂林医学院附属医院

目的观察金匮肾气丸与补中益气丸联用对老年C57小鼠运动能力及体重、血糖和不同部位体温的调节作用。方法以自然衰老小鼠为模型,将其分为实验组和对照组。实验组给予金匮肾气丸10 mg和补中益气丸5 mg,对照组给予同等剂量的纯净水。4 w后... 详细信息

目的观察金匮肾气丸与补中益气丸联用对老年C57小鼠运动能力及体重、血糖和不同部位体温的调节作用。方法以自然衰老小鼠为模型,将其分为实验组和对照组。实验组给予金匮肾气丸10 mg和补中益气丸5 mg,对照组给予同等剂量的纯净水。4 w后,通过平衡杆、爬杆、悬挂和旷场试验观察老年小鼠运动能力变化,检测小鼠体重、血糖和不同部位体温的变化情况。结果随着年龄的增长,对照组体重下降,血糖升高,四肢体温逐渐降低;而金贵肾气丸与补中益气丸联用能维持体重和血糖恒定,四肢体温明显提高,存活时间明显延长(P<0.05)。结论金匮肾气丸与补中益气丸联用可提高小鼠的运动能力及代谢水平,延长小鼠的寿命。

关键词：金匮肾气丸补中益气丸运动能力代谢水平

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噬菌体溶素的研究与应用进展

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临床合理用药杂志 2023年第18期16卷 170-175页

作者：赵沛松何玉林乔冠华桂林医学院病原生物学重点实验室广西壮族自治区桂林市541199 桂林医学院基础医学院微生物教研室广西壮族自治区桂林市541199

耐多药病原菌的大量出现严重削弱了传统抗生素的治疗效果,带来了高病发率、死亡率以及高昂的经济成本,逐渐成为威胁全球居民健康的问题。溶素是噬菌体编码的肽聚糖水解酶的总称,具有靶向破坏细菌细胞壁的能力,是噬菌体主要的杀菌功能蛋... 详细信息

耐多药病原菌的大量出现严重削弱了传统抗生素的治疗效果,带来了高病发率、死亡率以及高昂的经济成本,逐渐成为威胁全球居民健康的问题。溶素是噬菌体编码的肽聚糖水解酶的总称,具有靶向破坏细菌细胞壁的能力,是噬菌体主要的杀菌功能蛋白。研究发现工程溶素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌等多种病原菌具有杀灭作用,且能与抗生素发挥协同杀菌作用。近年来,溶素因其杀菌活性、靶向特异性、不易产生耐药性、良好的工程改造潜力等特点和在细菌控制领域的广泛应用前景而受到研究者们越来越多的关注。本文就溶素的结构分类、杀菌特性、工程改造潜力以及应用研究的最新进展进行综述,展望其在细菌控制领域的应用前景。

关键词：溶素噬菌体结构域基因工程噬菌体疗法

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癌症进展 2023年第9期21卷 955-960页

作者：杨姝娅刘文娟骆耐香韦冉王鑫峰刘文慧桂林医学院基础医学院免疫学教研室广西桂林541001 成武县人民医院病理科山东菏泽27420003 桂林医学院第二附属医院检验科广西桂林541001 桂林医学院基础医学院人体解剖学教研室广西桂林541001 中南大学湘雅医院临床药理研究所长沙4100080

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌相关基因1(UCA1)在乳腺癌细胞中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测UCA1在正常乳腺上皮细胞株MCF-10A和乳腺癌细胞株MCF-7、SK-BR-3... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌相关基因1(UCA1)在乳腺癌细胞中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测UCA1在正常乳腺上皮细胞株MCF-10A和乳腺癌细胞株MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231中的表达.通过小干扰RNA(siRNA)构建UCA1低表达细胞株,质粒构建UCA1过表达细胞株,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、平板克隆法检测细胞增殖能力,qRT-PCR和蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)基因和蛋白表达量以及基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白表达情况,细胞划痕和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力.结果与正常乳腺上皮细胞株MCF-10A相比,UCA1在乳腺癌细胞株中的表达均升高,以MCF-7细胞株最高;敲低UCA1可抑制MCF-7细胞的增殖、集落形成、细胞划痕愈合、迁移和侵袭(P﹤0.05),且cyclin D1基因和蛋白水平以及MMP2蛋白表达量均下调.过表达UCA1可促进MCF-7细胞的增殖、集落形成、细胞划痕愈合、迁移和侵袭(P﹤0.05),且cyclin D1基因和蛋白水平以及MMP2蛋白表达量均上调.结论 UCA1在乳腺癌细胞中表达升高,可能是通过调控cyclin D1和MMP2促进乳腺癌的增殖、迁移和侵袭.

关键词：乳腺癌长链非编码RNA 尿路上皮癌相关基因1 增殖迁移侵袭

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