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急性淋巴细胞白血病CD34~＋CD38^-细胞在NOD/SCID小鼠体内的自我更新与增殖能力

中国实验动物学报 2012年第2期20卷 1-5,I0001页

作者：周晓燕龙娟谭俊杰邹琳重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地重庆400014

目的探索急性淋巴细胞白血病(ALL)患者CD34+CD38-细胞移植到NOD/SCID小鼠体内建立白血病的可行性、自我更新与增殖潜能。方法分选并鉴定ALL患者骨髓CD34+CD38-细胞及对照CD34-CD38+细胞后,经尾静脉分别注射104个细胞于亚致死剂量射线照... 详细信息

目的探索急性淋巴细胞白血病(ALL)患者CD34+CD38-细胞移植到NOD/SCID小鼠体内建立白血病的可行性、自我更新与增殖潜能。方法分选并鉴定ALL患者骨髓CD34+CD38-细胞及对照CD34-CD38+细胞后,经尾静脉分别注射104个细胞于亚致死剂量射线照射的NOD/SCID小鼠体内,连续监测小鼠状态以及外周血血象改变,对濒死或死亡小鼠进行骨髓检查、肝脾病理学检查。结果接种从ALL患者分选的CD34+CD38-细胞到NOD/SCID小鼠体内后4周,小鼠外周血白细胞上升,到8周左右达高峰,约15×109～20×109/L,原始及幼稚淋巴细胞明显增多。骨髓象显示以原始及幼稚淋巴细胞增生为主,约为40%,且肝脾组织也有白细胞浸润,明显高于接种了对照组CD34-CD38+细胞的NOD/SCID小鼠。结论 ALL患者CD34+CD38-细胞可以成功移植NOD/SCID小鼠,在小鼠体内增殖形成白血病,说明该群细胞具有自我更新和增殖的潜能,可作为探索白血病起始细胞研究的重要载体。

关键词：白血病起始细胞单个核细胞自我更新 NOD/SCID鼠

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球囊扩张术建立幼兔动脉狭窄模型的可行性研究

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中国医科大学学报 2012年第5期41卷 418-421页

作者：郭军计晓娟余更生吴春潘征夏白永虹王宇杨汝铃重庆医科大学附属儿童医院心脏中心儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆市(儿童发育重大疾病诊治与预防)国际科技合作基地重庆400014 重庆医科大学药学院重庆400014

目的建立幼兔髂动脉狭窄模型。方法新西兰大白兔70只,(60±15)d,随机分为手术组、假手术组、正常组。手术组采用球囊扩张损伤髂动脉内皮,观察其术后管腔面积,内、中膜面积变化情况,并计算其术后狭窄率。结果与正常组相比,手术组术后... 详细信息

目的建立幼兔髂动脉狭窄模型。方法新西兰大白兔70只,(60±15)d,随机分为手术组、假手术组、正常组。手术组采用球囊扩张损伤髂动脉内皮,观察其术后管腔面积,内、中膜面积变化情况,并计算其术后狭窄率。结果与正常组相比,手术组术后4周狭窄率高达80.24%。术后内膜、中膜面积显著高于正常组(P<0.001)。假手术组与正常组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论球囊损伤可用于建立幼兔髂动脉狭窄模型,为进一步临床研究提供实验基础。

关键词：髂动脉狭窄动物模型新西兰大白兔幼兔球囊扩张

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酿酒酵母组蛋白变体Htz1调控基因转录的作用机制

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中国生物化学与分子生物学报 2012年第2期28卷 121-126页

作者：陈慧颖张家瑱万亚坤东南大学生命科学研究院"发育与疾病相关基因"教育部重点实验室南京210000 美国普度大学生物化学系

在真核生物染色质中,作为核心组蛋白的H2A是构成核小体重要组分,其变体之一H2A.Z高度保守,对真核细胞生物的生命活动有重要意义.模式生物酿酒酵母中的H2A.Z被称作Htz1.在对多种生物H2A.Z的研究中,以对酿酒酵母组蛋白变体Htz1的探讨最为... 详细信息

在真核生物染色质中,作为核心组蛋白的H2A是构成核小体重要组分,其变体之一H2A.Z高度保守,对真核细胞生物的生命活动有重要意义.模式生物酿酒酵母中的H2A.Z被称作Htz1.在对多种生物H2A.Z的研究中,以对酿酒酵母组蛋白变体Htz1的探讨最为深入全面.本文将从多个方面详细介绍酿酒酵母Htz1对基因表达调控的作用机制,涵盖其蛋白结构、染色质上的定位、翻译后修饰、结合机制、生物功能及其分子伴侣的作用等,并对未来该领域需要解决的重要科学问题进行了展望.

关键词：酿酒酵母组蛋白变体Htz1 表观遗传学转录调控分子伴侣

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新生期小鼠非致死性肺炎链球菌感染模型的建立

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中国生物制品学杂志 2012年第7期25卷 905-908页

作者：杨婷罗征秀符州刘昌林王莉佳罗健刘恩梅儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆市(儿童发育重大疾病诊治与预防)国际科技合作基地重庆医科大学附属儿童医院呼吸一病房重庆400014 重庆医科大学附属儿童医院临床检验中心重庆400014

目的探讨建立新生期BALB/c小鼠非致死性肺炎链球菌感染模型的方法。方法将新生期BALB/c小鼠随机分为肺炎链球菌感染1次组(于新生期第7天分别经鼻腔滴注肺炎链球菌D39株107、108、109、1010CFU菌液各10μl)、感染2次组(于新生期第6、7天... 详细信息

目的探讨建立新生期BALB/c小鼠非致死性肺炎链球菌感染模型的方法。方法将新生期BALB/c小鼠随机分为肺炎链球菌感染1次组(于新生期第7天分别经鼻腔滴注肺炎链球菌D39株107、108、109、1010CFU菌液各10μl)、感染2次组(于新生期第6、7天连续2 d经鼻腔滴注肺炎链球菌D39株107、108、109、1010CFU菌液各10μl)和对照1、2组(于第7天和第6、7天分别经鼻腔滴注PBS液10μl),每组20只。最后1次鼻腔滴注后24 h随机抽取10只小鼠处死,取肺组织匀浆,进行细菌培养及鉴定,HE染色观察肺组织病理改变。剩余10只观察感染后5 d的体重变化及存活情况。结果感染2次109CFU肺炎链球菌组小鼠出现安静少动,皮肤苍白,体重增长下降;感染率与存活率均>85%;病理显示肺部出现炎症改变,肺泡间隔增厚,血管周围和支气管周围有一定程度的炎症细胞浸润,以中性粒细胞为主。结论新生期第6、7天感染109CFU肺炎链球菌可能是成功建立新生期BALB/c小鼠非致死性肺炎链球菌感染模型的较好方法。

关键词：肺炎球菌感染动物,新生小鼠模型,动物

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胃癌中Pitx1低表达的miRNA调控机制研究

胃癌中Pitx1低表达的miRNA调控机制研究

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：乔凤昌张坤王玲胡姣姣陆森樊红 “发育与疾病相关基因”教育部重点实验室东南大学生命科学研究院哈尔滨医科大学附属第三医院(哈尔滨医科大学附属肿瘤医院) 南京医科大学第一附属医院东南大学医学院遗传与发育生物学系

Pitxl为同源盒基因家族的成员,在个体发育过程中参与肢体及器官的发育和生物体左右对称的维持。近年研究发现,Pitxl与一些肿瘤的发生发展有一定的关系,尤其在膀胱癌、前列腺癌组织(细胞)、肝癌、肺癌细胞中Pitxl为低表达模式,提示其在... 详细信息

Pitxl为同源盒基因家族的成员,在个体发育过程中参与肢体及器官的发育和生物体左右对称的维持。近年研究发现,Pitxl与一些肿瘤的发生发展有一定的关系,尤其在膀胱癌、前列腺癌组织(细胞)、肝癌、肺癌细胞中Pitxl为低表达模式,提示其在肿瘤发生中的重要作用。我们的研究发现Pitxl在胃癌组织中低表达率达43.75%,Pitxl的低表达与其启动子区DNA甲基化无关。Pitxl基因的导入能明显抑制胃癌细胞的增殖,并阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡。作为候选的抑痛基因,研究其在胃癌中的表达模式、失活机制将对胃癌的发生发展机制有更深入的认识。近年研究发现,在肿瘤的发生、发展中除了蛋白质功能紊乱、DNA突变之外,还存在着大量RNA的异常,包括异常的microRNA(miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,IncRNA)、循环RNA等。miRNA参与个体发育的时序调控、细胞增殖与分化、凋亡、器官发育、脂肪代谢、神经系统的发育的调控,并与包括肿瘤等多种疾病的发生密切相关。本研究结合miRNA靶标预测软件TargetScan、PicTar、miRanda及胃癌组织miRNA microarray,获得可能调摔Pitxl的候选miRNA:miR-30a-5p、miR-30b-5p、miR-19a-3p和miR-19b-3p。实时定量PCR检测miR-30a/b-5p在胃癌组织中表达及与PITXl表达的相关性,结果显示miR-30a-5p的低表达率为60%,与Pitxl的表达水平没有明显的相关性:miR-30b-5p的低表达率为61.2%,与Pitxl的表达呈正相关;胃癌细胞系中miR-30a/b-5p与PITX1表达的相关性的结果与胃癌组织中所获结果一致。基于miRNA与靶基因的靶向负调控关系,本研究结果未提示miR-30a/b-5p与Pitxl存任靶向关系。双荧光素酶报告系统分析了候选miRNA分子miR-19a/b-3p与PITXl的靶向关系。分别构建PITXl的3'-UTR区及突变体的载体,转染胃癌细胞系并测定荧光素酶活性,结果显示miR-19a-3p能靶巴向结合PITXl的3'-UTR区使荧光素酶活性明显降低。qPCR/western blot检测Pitxl mRNA和蛋白水平的表达发现miR-19a-3p能明显降低Pitxl的mRNA和蛋白水平的表达,提示miR-19a-3p不仅在转录水平降解了Pitxl的mRNA,同时在翻译水平亦抑制其蛋白表达。miR-19b-3p靶向结合PITXl的3'-UTR区能力较弱,提示miR-19b-3p不能单独抑制Pitxl的表达。本研究发现Pitxl在胃癌中低表达且与DNA甲基化无关,与miR-19a-3p的表达有关。双荧光素酶报告系统分析显示miR-19a-3p参与调控胃癌中Pitxl的表达,这一结果尚需在大样本胃癌病例中进一步验证。

关键词：胃癌 Pitx1 miRNAs DNA甲基化

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产前使用地塞米松对坏死性小肠结肠炎新生鼠Toll样受体4表达的影响

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第三军医大学学报 2012年第2期34卷 145-149页

作者：郝静梅韦红张晓萍刘玮重庆医科大学附属儿童医院:儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆市(儿童发育重大疾病诊治与预防)国际科技合作基地新生儿诊治中心重庆400014 重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所重庆400014

目的观察产前使用地塞米松(dexamethasone,DEX)对新生大鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocoli-tis,NEC)发生率及肠道Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)表达的影响,探讨其对NEC的保护作用及可能的机制。方法实验分为正常对... 详细信息

目的观察产前使用地塞米松(dexamethasone,DEX)对新生大鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocoli-tis,NEC)发生率及肠道Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)表达的影响,探讨其对NEC的保护作用及可能的机制。方法实验分为正常对照组、产前地塞米松干预组(DEX组)、产前生理盐水干预组(normal saline,NS组)3组,于孕16、17、18 d时DEX组孕鼠肌肉注射DEX 0.5 mg/(kg.d),NS组每天注射NS 0.3 ml。DEX组及NS组所生新生鼠建立NEC动物模型。正常对照组不予处理。于第5天处死新生鼠,观察近回盲部肠组织病理变化并做评分;免疫组化法检测TLR4蛋白的表达;其余小肠部分Q-PCR法检测TLR4 mRNA的表达。结果与NS组相比,DEX组新生鼠NEC发生率明显降低(P<0.01)。正常对照组未出现NEC症状,NS组新生鼠出现典型的NEC症状,DEX组NEC症状比NS组出现得更晚、更轻;与正常对照组相比,DEX组和NS组肠组织病理学评分及TLR4表达显著增高(P<0.05);与NS组相比,DEX组肠组织病理学评分及TLR4表达显著降低(P<0.05)。结论产前使用DEX对NEC大鼠具有保护作用,其机制可能是通过降低TLR4的表达从而发挥抗炎效应。

关键词：坏死性小肠结肠炎地塞米松产前给药 Toll样受体4 新生鼠

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卡氏肺孢子菌肺炎动物模型建立及其病原体的超微结构观察

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重庆医学 2012年第28期41卷 2907-2910页

作者：郑玉强蔡辉武卫华叶彬重庆医科大学附属儿童医院临检中心/儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室/儿科学重庆市重点实验室/重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地 400014 重庆医科大学病原生物教研室 400016

目的建立SD大鼠的卡氏肺孢子菌肺炎(PCP)的实验动物模型,观察肺组织病理变化特点和卡氏肺孢子菌(Pc)的超微结构特征,探讨其致病机制。方法地塞米松皮下注射诱导SD大鼠PCP,肺印片吉姆萨染色检测Pc滋养体,GMS染色检测Pc包囊,肺组织切片HE... 详细信息

目的建立SD大鼠的卡氏肺孢子菌肺炎(PCP)的实验动物模型,观察肺组织病理变化特点和卡氏肺孢子菌(Pc)的超微结构特征,探讨其致病机制。方法地塞米松皮下注射诱导SD大鼠PCP,肺印片吉姆萨染色检测Pc滋养体,GMS染色检测Pc包囊,肺组织切片HE染色观察肺组织病理变化,透射电镜观察Pc超微结构。结果地塞米松诱导6周后,大鼠肺印片可见少许Pc滋养体和少许包囊,第9周肺泡腔内可见大量滋养体和包囊;PCP肺泡腔变小,肺泡上皮增生,间隔增宽,肺间质内有以淋巴细胞、嗜酸性粒细胞为主的细胞浸润并伴炎性物质渗出,并随病程时间延长炎症进行性加重;透射电镜显示,Pc黏附在肺Ⅰ型上皮细胞,滋养体形态多样,表面有管状突出和伪足样结构,内部含有丰富的线粒体、内质网、管状小体、囊内小体、高密度特殊颗粒等超微结构;包囊表面有皱褶但未见管状突起,囊内有数个囊内小体,具有滋养体样特征。结论 Pc对肺Ⅰ型上皮细胞的黏附和过度繁殖增生以及刺激肺间质大量炎性细胞浸润和炎性物质渗出是引发PCP不可逆肺损伤的重要因素。

关键词：卡氏肺孢子菌肺炎超微结构模型动物大鼠

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微孔板Alamar Blue显色法检测结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼耐药性研究

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中国人兽共患病学报 2012年第4期28卷 319-322,326页

作者：李桂莲张敬蕊赵秀芹杨骜连璐璐万康林中国疾病预防控制中心传染病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京102206 温州医学院医学检验省部共建教育部重点实验室温州325035 南华大学病原生物学研究所衡阳421001

目的评价微孔板Alamar Blue显色法检测结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼耐药性的可行性。方法用微孔板Alamar Blue显色法对41株和70株结核分枝杆菌临床分离株分别检测利福平和异烟肼的最小抑菌浓度,记录获得结果时间,利用ROC曲线... 详细信息

目的评价微孔板Alamar Blue显色法检测结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼耐药性的可行性。方法用微孔板Alamar Blue显色法对41株和70株结核分枝杆菌临床分离株分别检测利福平和异烟肼的最小抑菌浓度,记录获得结果时间,利用ROC曲线确定利福平和异烟肼的最佳耐药阈值,并和传统的药物敏感性实验罗氏比例法进行比较。结果微孔板Alamar Blue显色法获得结果平均时间为8d,利福平和异烟肼的最佳耐药阈值均为0.5μg/mL,以罗氏比例法为金标准,利福平的灵敏度和特异度均为100.0%,异烟肼的灵敏度和特异度分别为96.6%和100.0%。结论微孔板Alamar Blue显色法是一种简便、敏感、快速的药物敏感性检测方法,可用于结核分枝杆菌临床分离株利福平和异烟肼耐药性的快速检测。

关键词：结核分枝杆菌利福平异烟肼耐药性 Alamar Blue显色法

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新生大鼠持续缺氧条件下水通道蛋白4与脑水肿的关系

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重庆医学 2012年第28期41卷 2959-2961,2963页

作者：贾佳余加林孙善全重庆医科大学附属儿童医院新生儿科/儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室/儿科学重庆市重点实验室/重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地 400014 重庆医科大学神经科学研究中心 400016

目的探讨水通道蛋白4(AQP4)在新生大鼠持续缺氧过程中与脑水肿的关系。方法健康10d龄SD大鼠,随机分为对照组和实验组。实验组结扎右侧颈总动脉,然后缺氧不同时间分为缺氧缺血(HI)2h组、HI 4h组、HI 8h组、HI 16h组4个亚组,对照组行假手... 详细信息

目的探讨水通道蛋白4(AQP4)在新生大鼠持续缺氧过程中与脑水肿的关系。方法健康10d龄SD大鼠,随机分为对照组和实验组。实验组结扎右侧颈总动脉,然后缺氧不同时间分为缺氧缺血(HI)2h组、HI 4h组、HI 8h组、HI 16h组4个亚组,对照组行假手术。观察每组动物神经行为学改变,各组实验取脑组织,行苏木精伊红(HE)染色、免疫组织化学染色、荧光定量PCR,观察新生大鼠海马CA1区形态变化和AQP4表达水平。结果实验组均出现不同程度的缺氧症状;实验组与对照组比较,有不同程度的水肿,且随着时间的延长,水肿加重,神经元呈现不可逆损伤;AQP4蛋白和RNA的表达水平呈下降趋势。结论 AQP4表达水平下降参与新生大鼠持续缺氧缺血条件下脑水肿的形成。

关键词：水通道蛋白4 新生大鼠缺氧缺血脑脑水肿

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猪抗病营养理念及研究进展

猪抗病营养理念及研究进展

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作者：陈代文余冰吴德张克英贾刚田刚丁雪梅曾秋凤何军郑萍毛湘冰虞洁四川农业大学动物营养研究所教育部动物抗病营养重点实验室

抗病营养是研究营养与健康关系的交叉领域,以揭示动物健康的营养调控规律与机制,建立营养抗病原理和技术,提高动物对应激和疾病的抵抗力。抗病营养研究内容包括营养与免疫、营养与肠道健康、营养与抗病基因、营养与应激、营养与疾病、... 详细信息

抗病营养是研究营养与健康关系的交叉领域,以揭示动物健康的营养调控规律与机制,建立营养抗病原理和技术,提高动物对应激和疾病的抵抗力。抗病营养研究内容包括营养与免疫、营养与肠道健康、营养与抗病基因、营养与应激、营养与疾病、营养与抗营养因子等六个方面。本文在构建抗病营养理论体系和研究内容基础上,综述了四川农业大学近几年在猪抗病营养方面的研究进展。结果显示,适宜的营养素、营养源和营养水平及其组合可以明显增强猪的抗病力,提高健康水平。

关键词：猪抗病营养综述

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