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中国病理生理杂志 2011年第9期27卷 1811-1815页

作者：刘宇孟然吉训明王晓英北京大学第九临床医学院首都医科大学附属北京世纪坛医院神经内科首都医科大学附属宣武医院脑血管病研究所神经变性疾病教育部重点实验室 Department of Neurology Massachusetts General HospitalHarvard Medical SchoolBostonMassachusetts 02114USA

目的:用激光多普勒血流仪动态观察硫酸镁对局灶性大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠模型缺血/再灌注损伤的保护作用。方法:体重280-300 g的雄性SD大鼠24只,传统线栓法制作单侧MCAO模型后根据硫酸镁处理时间不同分为4组,每组6只,分别为:缺血20 mi... 详细信息

目的:用激光多普勒血流仪动态观察硫酸镁对局灶性大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠模型缺血/再灌注损伤的保护作用。方法:体重280-300 g的雄性SD大鼠24只,传统线栓法制作单侧MCAO模型后根据硫酸镁处理时间不同分为4组,每组6只,分别为:缺血20 min、30 min、40 min硫酸镁处理组(25%硫酸镁160 mg/kg腹腔注射)和对照组(等体积生理盐水腹腔注射),激光多普勒血流仪实时动态监测各组不同时段的脑血流变化。4组动物模型均于缺血2 h+再灌注24 h后进行神经功能缺损评分,断头取脑,TTC染色观测脑片梗死灶体积。结果:再灌注后硫酸镁处理的各组脑血流均缓慢恢复至基线而后保持稳定,对照组脑血流随心跳波动明显,平均血流变化幅度有明显差异。平均脑梗死体积为:硫酸镁组26.5%、36.5%和24.5%,对照组为54.0%。神经功能缺损评分:硫酸镁组5.670±1.003、8.670±1.211和7.170±1.472,对照组11.170±0.983。结论:缺血早期给予硫酸镁对脑缺血和再灌注损伤具有一定的保护作用,其机制可能是通过改善脑血管的自动调节功能来实现的。

关键词：硫酸镁脑缺血再灌注

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组织因子途径抑制物-1血管条件性基因敲除小鼠表型和功能分析

组织因子途径抑制物-1血管条件性基因敲除小鼠表型和功能分析

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2011中国遗传学会大会

作者：温丹萍王际平王慧君张进梁菲杨晓费俭王铸钢马端复旦大学上海医学院分子医学教育部重点实验室上海 200032 复旦大学附属儿科医院上海 201102 解放军总医院北京 100853 上海南方模式动物中心上海 201203 复旦大学上海医学院分子医学教育部重点实验室上海 200032 复旦大学生物医学研究院出生缺陷研究中心上海 200032

组织因子途径抑制物-1(TFPI-1)主要由微血管内皮细胞表达，其基本生理功能足能阻断TF启动的凝血途径。此外，在肿瘤转移、炎症、动脉粥样硬化、心脑血管疾病及弥漫性血管内皮凝血中扮演重要角色。但是，由于传统敲除TFPI-1小鼠纯合子胚... 详细信息

组织因子途径抑制物-1(TFPI-1)主要由微血管内皮细胞表达，其基本生理功能足能阻断TF启动的凝血途径。此外，在肿瘤转移、炎症、动脉粥样硬化、心脑血管疾病及弥漫性血管内皮凝血中扮演重要角色。但是，由于传统敲除TFPI-1小鼠纯合子胚胎致死，无法进行表型研究。我们采用Cre-mLoxP(突变LoxP)系统研制了TFPI-1的内皮(Tek)和平滑肌(sma)细胞条件敲除小鼠，研究TFPI-1除了抗凝以外的其他生理功能。

关键词：组织因子途径抑制物基因敲除细胞凋亡血管内皮细胞生理功能

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中国大陆EV71病毒分离株的分子流行病学研究

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热带医学杂志 2011年第12期11卷 1341-1345,1353页

作者：江丽凤叶鹏凌高风华冯谦谨郭中敏陆家海中山大学公共卫生学院广东广州510080 热带病防治研究教育部重点实验室广东省重大传染病预防和控制技术研究中心广东广州510080 中山大学实验动物中心广东广州510080

目的了解1987-2010年中国大陆肠道病毒71型(EV71)分离株的分子流行病学特点及其种系进化、基因分型和遗传变异性。方法从GenBank/NCBI上获得中国大陆来源的具有完整VP1或近似完整VP1基因的核苷酸序列信息的413株EV71毒株进行分析,采用ME... 详细信息

目的了解1987-2010年中国大陆肠道病毒71型(EV71)分离株的分子流行病学特点及其种系进化、基因分型和遗传变异性。方法从GenBank/NCBI上获得中国大陆来源的具有完整VP1或近似完整VP1基因的核苷酸序列信息的413株EV71毒株进行分析,采用MEGA5.0软件,构建系统进化树,计算相同或不同基因型及基因亚型毒株的核苷酸与氨基酸的相似性。结果 1987-2010年,中国大陆20个省、市或地区均分离到具有完整VP1序列的毒株,且2008年以来数量陡增;中国大陆流行的主要是C型,只有2008年安徽和2009年湖北发现了A型;各基因型在43、58、142、164、167、184、240、249、292等氨基酸位点发生了特异性变异;从健康人体内分离的HQ129932毒株与其他序列比较,氨基酸无特异性变异。结论 C型株可能具有更强的传染力;氨基酸位点变异对于EV71病毒进化有重要意义;VP1基因与疾病的严重程度无明显关联;应加强C4a亚型疫苗候选疫苗株对其他基因型毒株的交叉保护作用研究。

关键词： EV71病毒分离株氨基酸 VP1基因

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组织因子途径抑制物-1血管条件性基因敲除小鼠表型和功能分析

组织因子途径抑制物-1血管条件性基因敲除小鼠表型和功能分析

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中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会

作者：温丹萍王际平王慧君张进梁菲杨晓费俭王铸钢马端复旦大学上海医学院分子医学教育部重点实验室复旦大学附属儿科医院解放军总医院上海南方模式动物中心复旦大学生物医学研究院出生缺陷研究中心

目的:组织因子途径抑制物-1(TFPI-1)主要由微血管内皮细胞表达,其基本生理功能是能阻断TF启动的凝血途径。此外,在肿瘤转移、炎症、动脉粥样硬化、心脑血管疾病及弥漫性血管内皮凝血中扮演重要角色。但是,由于传统敲除TFPI-1小鼠纯合子... 详细信息

目的:组织因子途径抑制物-1(TFPI-1)主要由微血管内皮细胞表达,其基本生理功能是能阻断TF启动的凝血途径。此外,在肿瘤转移、炎症、动脉粥样硬化、心脑血管疾病及弥漫性血管内皮凝血中扮演重要角色。但是,由于传统敲除TFPI-1小鼠纯合子胚胎致死,无法进行表型研究。我们采用Cre-mLoxP(突变LoxP)系统研制了TFPI-1的内皮(Tek)和平滑肌

关键词：组织因子途径抑制物-1(TFPI-1) 条件性基因敲除凋亡血管内皮细胞平滑肌细胞

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活血化瘀类方抗肝纤维化疗效比较

活血化瘀类方抗肝纤维化疗效比较

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第二十次全国中西医结合肝病学术会议

作者：赵韦赵志敏任红旭鲁艳平陶艳艳刘成海上海中医药大学附属曙光医院肝病研究所深圳市中医院上海高校中医内科学E-研究院上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室

背景与目的:肝纤维化是慢性肝病过程中共性的病理变化,阻断、抑制或逆转肝纤维化是治疗慢性肝病的重要目标。中医药在逆转肝纤维化及改善临床症状上展示了良好的前景。本实验用方为上海中医药大学方证信息中心基于"中医方证相对的... 详细信息

背景与目的:肝纤维化是慢性肝病过程中共性的病理变化,阻断、抑制或逆转肝纤维化是治疗慢性肝病的重要目标。中医药在逆转肝纤维化及改善临床症状上展示了良好的前景。本实验用方为上海中医药大学方证信息中心基于"中医方证相对的中医专病新药研发信息化处理技术"筛选出临床应用广泛的活血化瘀类抗肝纤维化古方和现代方,选择其中的膈下逐瘀汤、复肝丸、燮枢汤、鳖甲丸,比较4方及对DMN肝纤维化模型大鼠的疗效。方法:Wistar雄性大鼠105只,清洁级,随机分为正常组(N)15只、模组型(M)15只、膈下逐瘀汤组(G)15只、复肝丸组(F)15只、燮枢汤组(X)15只、鳖甲丸组(B)15只、N-乙酰半胱氨酸组(Y),其中Y组阳性对照药组。除正常组外,其他各组大鼠均以DMN 10μg/kg大鼠体重腹腔注射,首次给予2/3剂量,每天1次,每周连续3天,共4周,造模。自造模后第3周开始至第6周末分别灌胃相应药物:膈下逐瘀汤7.03g/kg、复肝丸6.43g/kg、燮枢汤12.51g/kg、鳖甲丸5.40g/kg,剂量均为70kg成人体重的6倍量,每天1次,连续7天,共4周。正常组与模型对照组灌胃等量生理盐水。6周末处死所有大鼠。观察不同药物对肝纤维化实验动物的血清肝功能(ALT、AST、Alb、TBil、γ-GT)、肝组织病理(天狼猩红染色、HE染色)、羟脯氨酸(HYP)含量的影响,比较各方剂抗肝纤维化疗效。结果:与正常组相比,模型组大鼠体重明显降低,脾体比明显升高,腹水产生;肝组织病理HE染色可见大量炎性细胞浸润,天狼猩红染色可见胶原纤维沉积明显,部分形成纤维间隔,严重者假小叶形成;血清ALT、肝组织Hyp含量明显升高:血清ALB明显降低。膈下逐淤汤组脾体比、ALT、Hyp含量等显著降低,肝细胞变性和炎症坏死有所减轻,胶原沉积有所减少;复肝丸组脾体比、ALT、Hyp含量显著降低,肝细胞变性和炎症坏死有所减轻,胶原沉积显著减少;燮枢汤组脾体比降低,Hyp含量降低,但胶原沉积未减轻:鳖甲丸组脾体比降低,ALT、Hyp含量有所降低,但肝细胞变性、炎症坏死和胶原沉积没有明显减少:N-乙酰半胱氨酸组脾体比、ALT、Hyp含量等显著降低,肝细胞变性和炎症坏死明显减轻,胶原沉积明显减少。结论:膈下逐瘀汤、复肝丸有较好的抗DMN大鼠肝纤维化作用。

关键词：活血化瘀肝纤维化疗效比较

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能量代谢调节激素对离子通道和突触可塑性的作用及其机制

能量代谢调节激素对离子通道和突触可塑性的作用及其机制

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中国药理学会第十一次全国学术会议

作者：陈建国王芳胡壮丽王伟吴文宁华中科技大学同济医学院基础医学院药理学系华中科技大学生物医药研究院教育部神经系统重大疾病重点实验室

下丘脑是神经-内分泌两大机能系统的结合点,在维持机体生命活动和内环境恒定中起重要的作用。许多能量代谢调节激素如瘦素(leptin)、胰岛素(insulin)和开胃素(orexin)等对离子通道的调节,影响影响突触传递,递质释放和信号转导过程,介导&... 详细信息

下丘脑是神经-内分泌两大机能系统的结合点,在维持机体生命活动和内环境恒定中起重要的作用。许多能量代谢调节激素如瘦素(leptin)、胰岛素(insulin)和开胃素(orexin)等对离子通道的调节,影响影响突触传递,递质释放和信号转导过程,介导"能量代谢-神经内分泌"的联动调控过程,也参与调节其他的中枢神经系统功能。本实验室研究发现,orexin-A增加下丘脑NPY神经元L-型钙电流,进而钙依赖性地激活下丘脑AMPK,影响食欲行为。L-型钙通道阻断剂也能抑制orexin-A诱导的AMPK激活、摄食增加。Leptin通过不同的受体后信号级联通路差异性地调节下丘脑NPY神经元和POMC神经元钙电流及BK电流。进一步实验发现,leptin的作用不只是局限于能量代谢调控,还可减少动物基础状态下以及应激状态下焦虑样行为,该作用与其激活杏仁核区域NMDA受体,削弱杏仁核突触传递易化,促进恐惧记忆消散有关。因此,通过调节能量代谢激素及其信号通路有望成为干预衰老发生发展和治疗情感障碍性疾病的新策略。

关键词：能量代谢调节激素离子通道突触可塑性

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犏牛及其亲本睾丸组织中印记基因SNRPN DMR甲基化与mRNA表达差异研究

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中国农业科学 2010年第22期43卷 4709-4716页

作者：潘增祥刘振山李隐侠于莎莉李明桂谢庄李齐发南京农业大学动物科技学院东南大学发育与疾病相关基因教育部重点实验室

【目的】研究犏牛与黄牛、牦牛睾丸组织SNRPN基因DMR甲基化状态、mRNA表达水平的差异,为揭示犏牛雄性不育的表观遗传机制提供依据。【方法】根据黄牛SNRPN基因序列设计引物,通过克隆测序获得牦牛SNRPN基因5’端序列,采用亚硫酸氢钠测序... 详细信息

【目的】研究犏牛与黄牛、牦牛睾丸组织SNRPN基因DMR甲基化状态、mRNA表达水平的差异,为揭示犏牛雄性不育的表观遗传机制提供依据。【方法】根据黄牛SNRPN基因序列设计引物,通过克隆测序获得牦牛SNRPN基因5’端序列,采用亚硫酸氢钠测序法检测犏牛及其亲本睾丸组织中SNRPN基因5’端DMR的甲基化状态,并采用Real-time PCR检测犏牛及其亲本睾丸组织中SNRPN基因的表达水平。【结果】牦牛SNRPN基因5’端序列长为1137bp,与黄牛的同源性达98.2%;生物信息学分析发现含有YY1和SP1等甲基化敏感位点。犏牛SNRPN基因DMR的甲基化水平(42.22%)极显著高于黄牛(21.08%)和牦牛(20.81%)(P<0.01)。黄牛和牦牛睾丸组织中SNRPN基因mRNA表达水平高于犏牛,但未达到显著水平(P>0.05)。【结论】犏牛睾丸组织SNRPN基因DMR的甲基化水平极显著高于黄牛和牦牛,且mRNA表达水平低于黄牛和牦牛,说明犏牛SNRPN基因可能是通过DMR区的高甲基化抑制其mRNA表达来阻滞精子发生减数分裂过程。

关键词：犏牛 SNRPN基因甲基化表达水平

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液相色谱-串联质谱法测定鸡组织中的三聚氰胺和三聚氰酸

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食品科学 2010年第12期31卷 185-192页

作者：吴彩梅白洁贾刚张克英丁雪梅白世平陈代文吴秀群四川农业大学动物营养研究所教育部抗病营养重点实验室四川雅安625014

通过对提取溶剂、净化方法及色谱质谱条件的优化建立鸡组织样品中的三聚氰胺和三聚氰酸同时测定的HPLC-MS/MS法。样品经乙腈水溶液(70:30,V/V)超声提取,正己烷脱脂,7000r/min离心后取上清液与乙腈(1:1,V/V)混匀,10000r/min离心沉淀蛋白... 详细信息

通过对提取溶剂、净化方法及色谱质谱条件的优化建立鸡组织样品中的三聚氰胺和三聚氰酸同时测定的HPLC-MS/MS法。样品经乙腈水溶液(70:30,V/V)超声提取,正己烷脱脂,7000r/min离心后取上清液与乙腈(1:1,V/V)混匀,10000r/min离心沉淀蛋白,过滤后无需净化即可上机测定,大大缩短了样品处理时间。使用MRM模式检测和同位素内标稀释法定量,进一步提高了方法的准确性和定量线性。在1～500ng/mL范围内,目标物的峰面积与其质量浓度的线性关系良好(R2>0.999);在0.1、1、5mg/kg的添加水平,鸡组织样品三聚氰胺回收率为87.76%～107.89%,三聚氰酸回收率为87.31%～106.05%,相对标准偏差(RSD)分别为0.58%～2.78%和1.26%～4.33%;三聚氰胺和三聚氰酸的检测限(LOD)分别为4ng/g和2ng/g。结果表明,该方法简便、快速、准确,适合鸡组织中三聚氰胺和三聚氰酸的确证和定量测定。

关键词：液相色谱-串联质谱三聚氰胺三聚氰酸鸡组织

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PRDM16的研究进展

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动物营养学报 2010年第6期22卷 1477-1481页

作者：杨雪蓉陈代文余冰黄志清四川农业大学动物营养研究所教育部动物抗病营养重点实验室雅安625014

PR结构域家族的第16个成员PRDM16是近年来发现的调控肌肉脂肪代谢的蛋白。在人类和小鼠器官组织中均能够检测到PRDM16的基因mRNA的表达,在棕色脂肪组织-白色脂肪组织、棕色脂肪组织-骨骼肌肌肉组织转化过程中特异基因表达起着"开关... 详细信息

PR结构域家族的第16个成员PRDM16是近年来发现的调控肌肉脂肪代谢的蛋白。在人类和小鼠器官组织中均能够检测到PRDM16的基因mRNA的表达,在棕色脂肪组织-白色脂肪组织、棕色脂肪组织-骨骼肌肌肉组织转化过程中特异基因表达起着"开关"作用。PRDM16的作用机制主要包括:促进重要的活性蛋白(如过氧化物酶体增生物激活受体γ、转录因子激活蛋白-2等)的基因表达;抑制肌分化因子(MyoD)、肌形成蛋白(MyoG)及相关蛋白的基因表达;通过转录复合物(PRDM16/CtBP和PRDM16-C/EBP-β)调控BAT-WAT和WAT-SMT选择性基因表达程序;调控脂肪和骨骼肌的形成,诱导线粒体的生物合成和解偶联呼吸作用。PRDM16对脂肪和肌肉细胞的分化和发育的调控,为深入探讨肌肉、脂肪形成机理及能量代谢调控途径提供理论基础,为在畜牧学上改善肌肉品质提供新的思路。本文综述了PRDM16基因的表达模式、PRDM16蛋白的结构和生物学作用以及在畜禽肉质调控中的可能作用。

关键词： PRDM16 棕色脂肪白色脂肪骨骼肌代谢调控

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砷的生殖发育毒性及雌激素效应研究进展

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中国地方病学杂志 2010年第1期29卷 112-115页

作者：夏雅娟(综述) 旭日干刘东军(审校) 内蒙古大学实验动物研究中心哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室呼和浩特010021

砷作为一种环境毒物，对健康的损害是全身性的、多系统的。人暴露于无机砷，可引起膀胱癌、肺癌、皮肤癌、肝癌、肾癌以及许多其他非癌毒性效应，如皮肤损害、心脑血管疾病、糖尿病、神经系统效应及生殖毒性效应等。多年来．有关砷中毒... 详细信息

砷作为一种环境毒物，对健康的损害是全身性的、多系统的。人暴露于无机砷，可引起膀胱癌、肺癌、皮肤癌、肝癌、肾癌以及许多其他非癌毒性效应，如皮肤损害、心脑血管疾病、糖尿病、神经系统效应及生殖毒性效应等。多年来．有关砷中毒的发病机制提出了多种假说。然而，迄今为止，还没有一个被广泛认可、具有说服力并且符合砷的生物效应的机制学说。特别是砷的致癌作用还未复制出一个理想的砷致癌动物模型。

关键词：砷环境暴露生殖毒性内分泌干扰物雌激素效应

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