检索结果-内蒙古大学图书馆

国际免疫学杂志 2009年第1期32卷 31-34页

作者：蔡鹏程胡丽华华中科技大学附属协和医院检验科武汉430022

T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域家族是一个影响Th1／Th2细胞分化的基因家族。T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白4（TIM4）是TIM家族的一个成员，主要表达于树突状细胞和巨噬细胞。TIM4与TIM1结合后参与对Th2细胞的激活，影响机体的免疫功能：T... 详细信息

T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域家族是一个影响Th1／Th2细胞分化的基因家族。T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白4（TIM4）是TIM家族的一个成员，主要表达于树突状细胞和巨噬细胞。TIM4与TIM1结合后参与对Th2细胞的激活，影响机体的免疫功能：TIM4同时是一个黏附分子，其与磷脂酰丝氨酸结合后可介导巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬。另外，TIM4与儿童过敏性鼻炎，过敏性哮喘之间存在着遗传相关性，

关键词： T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域蛋白4 Th细胞哮喘

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三种自身抗体联合检测在老年起病类风湿关节炎诊断中的作用

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中华老年医学杂志 2008年第9期27卷 676-678页

作者：刘燕婕胡丽华徐磊华中科技大学协和医院检验科武汉市430032

目的研究抗环瓜氨酸肽（cyclic citrulinated peptid，CCP）抗体、抗角蛋白抗体（antikeratin antibody，AKA）和抗RA33抗体在老年起病的类风湿关节炎（EORA）中的临床意义，探讨3种自身抗体联合检测在EORA诊断中的作用。方法检测69例E... 详细信息

目的研究抗环瓜氨酸肽（cyclic citrulinated peptid，CCP）抗体、抗角蛋白抗体（antikeratin antibody，AKA）和抗RA33抗体在老年起病的类风湿关节炎（EORA）中的临床意义，探讨3种自身抗体联合检测在EORA诊断中的作用。方法检测69例EORA、73例风湿性多肌痛（PMR）和65例老年骨关节炎（OA）患者体内3种抗体水平，抗CCP抗体和抗RA33抗体采用酶联免疫吸附试验法（ELISA），AKA采用间接免疫荧光法（IIF）检测。结果EORA患者3种抗体的敏感性和特异性分别为55．1％和94．3％、31．3％和91．5％、36．2％和95．4％，显著高于其他两组（P〈0．05）。3种抗体串联检测，EORA组的阳性率显著高于PMR组和OA组（均为P〈0．05），3种抗体串联检测敏感性降低，但其特异性提高至100．0％，且有更高的阳性预测值。结论抗CCP抗体、AKA和抗RA33抗体在EORA患者中均可检出，抗CCP抗体有较高的敏感性和特异性，3种抗体联合检测有更高的特异性和阳性预测值；结合临床症状、影像学改变，3种抗体联合检测对EORA的诊断具有较高的临床应用价值。

关键词：关节炎,类风湿风湿性多肌痛骨关节炎

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survivin及其选择性剪接变体在胃癌中的表达及意义

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中华病理学杂志 2008年第2期37卷 130-131页

作者：程正江胡丽华付文荣张勤华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022 附属襄樊医院病理科

survivin基因有4个外显子和3个隐含外显子（2α、2B和3B），同一个基因的转录产物通过选择性剪接方式产生多种成熟mRNA。目前发现人类存在5种不同剪接变体。我们分别设计了5种survivin剪接变体特异引物，即时荧光定量检测其在胃癌中的... 详细信息

survivin基因有4个外显子和3个隐含外显子（2α、2B和3B），同一个基因的转录产物通过选择性剪接方式产生多种成熟mRNA。目前发现人类存在5种不同剪接变体。我们分别设计了5种survivin剪接变体特异引物，即时荧光定量检测其在胃癌中的表达，同时分析各种变体之间以及其表达水平与临床病理资料之间的相关性。

关键词： survivin基因剪接变体胃癌荧光定量检测临床病理资料选择性剪接 mRNA 转录产物

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抗环瓜氨酸肽抗体和抗角蛋白抗体在老年发病类风湿关节炎诊断中的意义

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中国老年学杂志 2009年第7期29卷 860-861页

作者：刘燕婕胡丽华徐磊华中科技大学协和医院检验科湖北武汉430022

目的研究抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗角蛋白抗体(AKA)在老年发病类风湿关节炎(EORA)中的临床意义。方法检测69例EORA患者和42例风湿性多肌痛(PMR)患者中的两种抗体,其中抗CCP抗体采用ELISA法,AKA采用间接免疫荧光(IIF)法检测。结果EORA... 详细信息

目的研究抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、抗角蛋白抗体(AKA)在老年发病类风湿关节炎(EORA)中的临床意义。方法检测69例EORA患者和42例风湿性多肌痛(PMR)患者中的两种抗体,其中抗CCP抗体采用ELISA法,AKA采用间接免疫荧光(IIF)法检测。结果EORA组两种抗体的阳性率显著高于PMR组(P<0.05),两种抗体诊断EORA的敏感性和特异性分别为:抗CCP抗体(55.1%、94.3%)、AKA(33.3%、91.5%),抗CCP抗体和AKA合用敏感性有所降低,但能使特异性增高至98.3%。结论抗CCP抗体有很高的敏感性和特异性,抗CCP抗体和AKA在EORA组中的阳性率明显高于PMR组,两种抗体联合检测使特异性提高近100%,有利于EORA的鉴别诊断,结合影像学改变,对提高EORA的诊断率也有临床应用价值。

关键词：老年发病类风湿关节炎抗环瓜氨酸肽抗体抗角蛋白抗体

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人类SUZ12基因实时荧光定量PCR检测方法的建立

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世界华人消化杂志 2007年第20期15卷 2220-2224页

作者：陈凤花胡丽华王琳李一荣周志明华中科技大学附属协和医院检验科湖北省武汉市430022

目的：建立SYBR GreenI实时荧光PCR定量检测人类SUZ12基因的方法．方法：将SUZ12RT-PCR扩增片段克隆入载体pGEM—T后，经测序鉴定正确后，进行纯化和定量及系列稀释，应用SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测Suz12，建立标准曲线，熔解曲线... 详细信息

目的：建立SYBR GreenI实时荧光PCR定量检测人类SUZ12基因的方法．方法：将SUZ12RT-PCR扩增片段克隆入载体pGEM—T后，经测序鉴定正确后，进行纯化和定量及系列稀释，应用SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测Suz12，建立标准曲线，熔解曲线分析产物的特异性．结果：该法检测的最低拷贝数为14．2，线性范围为1．42× 10^-1．42× 10^8拷贝，相关系数7为-1．00，1．42× 10^7拷贝／L标本的批内变异系数（CV）和日间CV分别为1．8％和2．8％．熔解曲线分析显示单一的峰，熔解温度（meltingtemperature，Tm）为（81．37±0．16）℃．结论：实时荧光定量PCR方法检测SUZ12基因，快速有效、灵敏度高、特异性好．

关键词： SUZ12 SYBR Green I 实时荧光定量PCR

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应用噬菌体展示技术筛选血型A抗原表位的模拟多肽

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中华检验医学杂志 2008年第4期31卷 440-445页

作者：汤兆明胡丽华李一荣崔天盆熊娟华中科技大学同济医学院协和医院检验科武汉430022

目的筛选血型A抗原表位的模拟多肽，探讨其在血型A抗体检测中的应用价值。方法用血型A抗原特异性单克隆抗体NaM87-1F6从噬菌体随机12肽库中筛选能与之结合的噬菌体展示肽。采用噬菌体ELISA、噬菌体微筛选试验鉴定噬菌体与抗体的结合力... 详细信息

目的筛选血型A抗原表位的模拟多肽，探讨其在血型A抗体检测中的应用价值。方法用血型A抗原特异性单克隆抗体NaM87-1F6从噬菌体随机12肽库中筛选能与之结合的噬菌体展示肽。采用噬菌体ELISA、噬菌体微筛选试验鉴定噬菌体与抗体的结合力。DNA测定并推断特异性噬菌体克隆展示的多肽序列。凝集抑制试验检测单克隆噬菌体对抗体凝集红细胞的抑制作用，ABO-ELISA初步分析噬菌体展示多肽检测血型抗体的效能。结果经筛选和鉴定后得到7个阳性克隆，其中6个展示多肽序列为EYWYCGMNRTGC（C5），1个为QIWYERTLPFTF（C17）。凝集抑制试验提示2个噬菌体展示多肽可以特异性抑制NaM87-1F6对A型红细胞的凝集作用。基于噬菌体多肽C5、C17的ABO-ELISA检测血浆抗A抗体试验的受试者操作特性曲线下面积分别为0．889（P=0．000）和0．751（P=0．000），ABO-ELISA值与凝集试验抗体滴度间的Spearman相关系数分别为0．743（P〈0．01）和0．664（P〈0．01）。基于C5的ABO-ELISA在临界值为0．300时其敏感度、特异度分别为82．2％和83．3％；基于C17的ABO-ELISA在临界值为0．250时其敏感度、特异度分别为68．9％和63．3％。结论多肽EYWYCGMNRTGC，QIWYERTLPFTF可以模拟血型A抗原的表位。基于这些多肽的ABO-ELISA方法具有检测血型A抗原特异性抗体的潜能。

关键词： ABO血型系统血型抗原表位肽库酶联免疫吸附测定

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SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测生存素基因的方法建立及条件优化

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中华检验医学杂志 2007年第12期30卷 1364-1367页

作者：胡丽华程正江李一荣黄少军华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属襄樊医院检验科

目的建立SYBRGreenⅠ染料实时定量PCR检测生存素（Survivin）基因定量的方法。方法根据PCR产物荧光强度、循环阈值（Ct值）、标准曲线斜率、相关系数和熔解曲线优化反应体系中各组分的量及反应条件，对引物二聚体消除策略和Ct值获取方... 详细信息

目的建立SYBRGreenⅠ染料实时定量PCR检测生存素（Survivin）基因定量的方法。方法根据PCR产物荧光强度、循环阈值（Ct值）、标准曲线斜率、相关系数和熔解曲线优化反应体系中各组分的量及反应条件，对引物二聚体消除策略和Ct值获取方式进行评价。并用该方法检测43份胃癌组织Survivin基因扩增情况。结果SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR体系扩增Survivin的最佳组成和条件是：Taq酶2．5U／100μl、MsCl2 2mmol／L、引物浓度0．2μmol／L和退火温度58℃；在PCR循环延伸结束后设置1个低于特异产物退火温度值2℃的荧光读取温度，能有效消除引物二聚体对定量检测的影响；以二次倒数最大值方式确定Ct值，能避免主观因素所致误差。研究建立的SYBRGreenⅠ染料实时定量PCR检测Survivin基因含量方法的灵敏度为10拷贝／μl，线性范围10^1～10^4拷贝μl（r=0．9997），批内变异系数（CV）1．13％-1．91％，批间CV3．31％-4．50％；胃癌组织中Sttrvivin基因扩增率为13．9％（6／43）。结论优化后的SYBRGreenI实时定量PCR方法具有方便、经济、灵敏度高和重复好等特性，可用于Survivin基因含量分析。

关键词：聚合酶链反应基因生存素

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转基因联合抑制小鼠心脏CaMKII与I_(k1)的初步研究

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生理学报 2015年第2期67卷 201-206页

作者：黄芸戴淼杜以梅姚雨峰张家明苏冠华舒砚文崔天盆杜心灵李景东华中科技大学附属协和医院老年病科武汉430022 华中科技大学附属协和医院心内科武汉430022 华中科技大学生命科学院武汉430022 武汉市第一医院检验中心武汉430022 武汉市第一医院附属协和医院心外科武汉430022

本文旨在建立转基因联合抑制心脏钙/钙调素依赖性蛋白激酶II(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II,Ca MKII)及内向整流性钾电流(Ik1)小鼠模型,初步探讨该联合抑制在基础和应激状态下对小鼠心脏电生理、结构与功能重构的影响。... 详细信息

本文旨在建立转基因联合抑制心脏钙/钙调素依赖性蛋白激酶II(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase II,Ca MKII)及内向整流性钾电流(Ik1)小鼠模型,初步探讨该联合抑制在基础和应激状态下对小鼠心脏电生理、结构与功能重构的影响。将动物分为4组:野生组(WT),转基因Ca MKII抑制组(AC3-I),转基因Ik1抑制组(Kir2.1-AAA),转基因联合抑制组(AC3-I+Kir2.1-AAA)。记录各组动物在基础状态下及注射异丙肾上腺素后的心电图;同时分别对各组动物进行心脏超声检查,以了解心脏重构情况;在酶解法分离单个左室心肌细胞后,采用全细胞膜片钳法记录心肌细胞Ik1和瞬间外向钾电流(Ito)。实验结果显示:在基础状态下,心电图显示各组动物之间的心率、PR间期和QRS间期均无显著差别;注射异丙基肾上腺素后,上述心电图指标和小鼠发生室性心律失常的情况在各组间也无显著差别;4组小鼠间M型(Motion-mode)和二维超声检测的各项指标无显著差异;全细胞膜片钳实验结果表明,AC3-I组动物心肌细胞的Ik1电流密度最大(P<0.01),WT组的次之(P<0.01),其他两组较WT组显著降低(P<0.01);同时,AC3-I组Ito电流密度显著高于其他三组(P<0.01),而其他三组间无明显差异。上述结果提示:转基因联合抑制Ca MKII和Ik1可使Ca MKII抑制的小鼠Ik1下调,在基础状态下不影响心脏的结构和功能变化,在注射异丙基肾上腺素后心律失常的发生亦无明显差别。本结果为进一步探讨联合抑制Ca MKII与Ik1在各种心脏疾病状态下能否更有效地拮抗心肌的不利重构打下了基础。

关键词：钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ 内向整流性钾电流心脏重构心律失常

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多肿瘤标志物蛋白质芯片在检测胆管癌中的应用

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华中科技大学学报（医学版） 2005年第2期34卷 220-221,228页

作者：尚丹熊俊郑启昌胡俊华郭兴军华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的　研究多肿瘤标志物蛋白质芯片在检测胆管癌中的应用。方法　对60 例梗阻性黄疸患者于手术前采集静脉血2 ml进行多肿瘤标志物蛋白质芯片诊断系统检测。经手术及病理学证实, 其中胆管癌32 例、胆管良性病变28例。结果　60例患者中, ... 详细信息

目的　研究多肿瘤标志物蛋白质芯片在检测胆管癌中的应用。方法　对60 例梗阻性黄疸患者于手术前采集静脉血2 ml进行多肿瘤标志物蛋白质芯片诊断系统检测。经手术及病理学证实, 其中胆管癌32 例、胆管良性病变28例。结果　60例患者中, 糖类抗原19 -9 (CA19- 9) 和糖类抗原242 (CA242) 同时阳性者31 例, 其中胆管癌患者26例, 其CA19- 9大于500 U/ml者23 例; 胆管良性病变者5 例, 其中1 例CA19- 9 大于500 U/ml。当CA19- 9 和CA242同时阳性时, 诊断胆管癌敏感性为81. 3%, 特异性为82. 1%。结论　应用多肿瘤标志物蛋白质芯片诊断系统检测胆管癌, 当CA19 -9和CA242同时阳性时, 敏感性和特异性均较好, 可作为临床诊断胆管癌的筛查指标。关键词　多肿瘤标志物; 　胆管癌;

关键词：多肿瘤标志物胆管癌蛋白质芯片胆管良性病变

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长距离等位特异性PCR法直接分析T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白-3基因-574和-4529位点分子单体型

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中华检验医学杂志 2008年第11期31卷 1224-1226页

作者：陈治中胡丽华华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

单体型为位于1条染色体上或某一区域的一组相关联单核苷酸多态性（SNPs）等位位点的集合。它在基因作图研究中，特别是复杂性疾病相关研究中比单个SNP可提供更多的信息。常规基因分型工具不能在1个二倍体细胞提供单体型信息，因此，单... 详细信息

单体型为位于1条染色体上或某一区域的一组相关联单核苷酸多态性（SNPs）等位位点的集合。它在基因作图研究中，特别是复杂性疾病相关研究中比单个SNP可提供更多的信息。常规基因分型工具不能在1个二倍体细胞提供单体型信息，因此，单体型分析已经成为疾病相关性研究中的一个普通工具。2001年McIntire等鉴定的1个新基因家族——T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白（TIM）基因家族在人类Th1／Th2细胞上有不同的表达，

关键词：细胞免疫球蛋白单体型分析基因作图特异性PCR法黏蛋白淋巴 Th1/Th2细胞单核苷酸多态性

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