检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2008年第8期24卷 721-724页

作者：武其文胡丽华蔡鹏程华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的:检测湖北汉族人群Tim-3基因启动子区和编码区的单核苷酸多态性,寻找Tim-3基因的遗传标记。方法:采用分段扩增直接测序的方法检测60名湖北汉族人Tim-3基因的启动子区、全部的外显子区及部分内含子区,将测序结果与NCBI及HapMap计划... 详细信息

目的:检测湖北汉族人群Tim-3基因启动子区和编码区的单核苷酸多态性,寻找Tim-3基因的遗传标记。方法:采用分段扩增直接测序的方法检测60名湖北汉族人Tim-3基因的启动子区、全部的外显子区及部分内含子区,将测序结果与NCBI及HapMap计划库中其他人种的数据进行对比,确定湖北汉族人群Tim-3基因突变的位置、类型和频率。结果:在Tim-3基因启动子区和外显子区共发现9个SNPs,包含5个已报道的SNPs和4个新发现的突变位点。湖北汉族人群中检出的4个SNPs rs4704853、rs10515746、rs4704846、rs9313439与日本人分布相似(P>0.05),与欧洲人及非洲人的分布则有统计学意义(P<0.01)。结论:湖北汉族人群Tim-3基因的SNPs分布有别于其他人种,可为在汉族人群中研究Tim-3基因与疾病关联提供依据。

关键词： Tim-3基因单核苷酸多态性汉族人群

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Eotaxin-3基因多态性与变应性哮喘相关研究

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临床检验杂志 2006年第2期24卷 128-130页

作者：高贵民吴健民崔天盆张继成华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的研究湖北地区汉族成人+2497T/G单核苷酸多态性与哮喘易感性、嗜酸性粒细胞计数以及血浆总IgE水平相关性。方法用聚合酶链反应-单链构象多态性-4引物聚合酶链反应的方法进行分析。结果eotaxin-3+2497位G等位基因的频率在哮喘组与对... 详细信息

目的研究湖北地区汉族成人+2497T/G单核苷酸多态性与哮喘易感性、嗜酸性粒细胞计数以及血浆总IgE水平相关性。方法用聚合酶链反应-单链构象多态性-4引物聚合酶链反应的方法进行分析。结果eotaxin-3+2497位G等位基因的频率在哮喘组与对照组、哮喘组中TT、TG基因型的IgE浓度及EOS数量差异有显著性,P值分别为0.011,0.021和0.029。结论eotaxin-3+2497T/G多态性与哮喘易感性、EOS数量及IgE水平相关。

关键词：嗜酸性粒细胞趋化因子-3 基因多态性变应性哮喘

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脑转移瘤患者脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂C变化的临床意义

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临床检验杂志 2004年第5期22卷 375-376页

作者：马荣红温小波崔天盆吴健民华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的　探讨脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂 (cystatinC)对脑转移瘤的诊断价值。方法　采用速率散射比浊法对 2 7例脑转移瘤患者和 2 0例正常对照进行脑脊液中cystatinC、β2 微球蛋白 (β2 MG)和白蛋白 (Alb)含量测定。结果　患者组脑脊... 详细信息

目的　探讨脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂 (cystatinC)对脑转移瘤的诊断价值。方法　采用速率散射比浊法对 2 7例脑转移瘤患者和 2 0例正常对照进行脑脊液中cystatinC、β2 微球蛋白 (β2 MG)和白蛋白 (Alb)含量测定。结果　患者组脑脊液中cystatinC浓度 [(1.2 5± 0 .4 3)mg/L]显著低于对照组 [(2 .81± 0 .77)mg/L](P <0 0 5 ) ,β2 MG浓度 [(3.18± 0 .6 7)mg/L]显著高于对照组 [(1.0 1± 0 .32 )mg/L](P <0 0 5 ) ,Alb浓度 [(32 5 .7± 4 1.5 )mg/L]显著高于对照组 [(185 .5± 2 5 .8)mg/L](P <0 0 1) ;三项检测指标的特异性无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,cystatinC、Alb检测的敏感性均显著高于 β2 MG(P <0 0 5 ) ,cystatinC与Alb检测的敏感性无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　脑脊液cystatinC浓度检测对于脑转移瘤的诊断是一个较好的指标。

关键词：脑脊液脑转移瘤患者对照组 β2-MG 半胱氨酸蛋白酶抑制剂C 临床意义结论显著性差异变化

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靶向转酮醇酶样基因1 siRNA表达载体的构建及鉴定

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临床检验杂志 2010年第2期28卷 128-130页

作者：张德太杨菊红胡丽华蔡鹏程华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的构建针对转酮醇酶样基因1(TKTL1)特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并检测其沉默效应。方法采用人U6 SnRNA启动子,分别把被9 bp序列间隔的19 bp长短的TKTL1靶序列的反向重复序列,置于pEGFP-C1-U6质粒载体中,构建成TKTL1短发夹环R... 详细信息

目的构建针对转酮醇酶样基因1(TKTL1)特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并检测其沉默效应。方法采用人U6 SnRNA启动子,分别把被9 bp序列间隔的19 bp长短的TKTL1靶序列的反向重复序列,置于pEGFP-C1-U6质粒载体中,构建成TKTL1短发夹环RNA,产生重组质粒pEGFP-C1-U6/TKTL1,分别用PstⅠ和SalⅠ酶切鉴定及测序分析,并将重组质粒转染人结肠癌细胞株LoVo,通过RT-PCR检测TKTL1基因表达水平的变化。结果酶切鉴定与DNA测序分析证明,TKTL1基因的siRNA表达载体构建正确,RT-PCR结果表明转染重组质粒的LoVo细胞TKTL1基因的表达水平明显降低。结论成功构建了针对TKTL1基因的siRNA表达载体,转染LoVo细胞后可显著抑制TKTL1基因表达。

关键词： siRNA 转酮醇酶转酮醇酶样基因1 人结肠癌细胞株LoVo

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人T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4 cDNA全长真核表达载体的构建及其在16HBE细胞中的表达

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免疫学杂志 2010年第4期26卷 304-308页

作者：吴小慧李一荣陈凤花王琳胡丽华华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的克隆人T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4(TIM-4)基因cDNA,构建其真核表达载体pEGFP-C2-TIM-4,并转染16HBE细胞。方法根据GeneBank中人TIM-4 cDNA序列(编号:NM-138379.2),设计出带有EcoRI和BamHI的上下游引物,应用RT-PCR技术,从人骨髓中扩增出TIM-4基因编码区序列,克隆到pMD18-T载体,形成pMD18-T-TIM-4重组质粒,经菌落PCR,双酶切,测序鉴定获得人TIM-4基因cDNA片段,然后将其亚克隆入pEGFP-C2绿色荧光载体中,并通过菌落PCR,双酶切,测序鉴定其重组体。将测序正确的pEGFP-C2-TIM-4质粒转染人气道上皮细胞(16HBE),用实时定量PCR检测目的基因的表达。结果成功扩增出人TIM-4 cDNA全长1134 bp,经T-A克隆构建的pMD18-T-TIM-4重组质粒经菌落PCR,双酶切,测序证实载体中含有正确的TIM-4编码区片段。由此构建的真核表达载体pEGFP-C2-TIM-4,经菌落PCR扩增出1134 bp左右的片段,经双酶切后产生4.7 kb和1134 bp左右的2条带,DNA测序显示与GeneBank中人TIM-4 cDNA序列一致。重组质粒转染16HBE细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光,经实时定量PCR分析,转染细胞TIM-4基因的表达显著增加。结论首次从人骨髓中扩增出TIM-4基因cDNA全长,构建了其真核表达载体pEGFP-C2-TIM-4,并在16HBE细胞内成功高表达,为进一步研究TIM-4的生物学功能奠定了基础。

关键词： T细胞免疫球蛋白黏蛋白-4(TIM-4) 基因克隆真核表达载体聚合酶链反应(PCR) 转染

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自身免疫调节因子促进THP-1细胞的自噬性凋亡

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华中科技大学学报（医学版） 2010年第4期39卷 461-465页

作者：石亮李一荣胡丽华华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的探讨自身免疫调节因子(AIRE)对THP-1单核细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将THP-1细胞以佛波醇酯(PMA)诱导分化后,进行瞬时转染。免疫荧光和Western blot法检测转染效率。通过AnnexinⅤ-FITC、PI双染色法和流式细胞仪检测过... 详细信息

目的探讨自身免疫调节因子(AIRE)对THP-1单核细胞凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将THP-1细胞以佛波醇酯(PMA)诱导分化后,进行瞬时转染。免疫荧光和Western blot法检测转染效率。通过AnnexinⅤ-FITC、PI双染色法和流式细胞仪检测过表达AIRE的THP-1细胞凋亡率。通过间接免疫荧光染色和Western blot检测自噬蛋白LC3B的表达。结果 PMA诱导后,THP-1细胞贴壁生长,形态多样,胞质内可见空泡、吞噬细胞碎片等典型成熟分化形态。转染48 h后,THP-1细胞的AIRE蛋白呈现明显高表达。对比空载体转染和阴性对照,过表达AIRE使THP-1细胞的凋亡率上升;同时,Western blot显示LC3B-Ⅱ的蛋白水平也较空载体转染组增高,且间接免疫荧光染色提示单个细胞的阳性LC3B-Ⅱ斑点数目较空载体转染组明显增加(P<0.05)。结论 AIRE可能通过上调THP-1细胞的自噬促进其凋亡。

关键词：细胞凋亡自噬自身免疫调节因子 LC3B蛋白

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冠心病患者中性粒细胞氧化代谢指标的检测及意义

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中华检验医学杂志 2003年第7期26卷 407-410页

作者：刘艳玲吴健民华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的　探讨中性粒细胞活化在冠心病发生发展中的病理作用和意义。方法　利用化学发光法检测活性氧 ,膜片钳技术检测中性粒细胞脱颗粒 ,分光光度计比色法检测血浆和中性粒细胞内髓过氧化物酶 (MPO)活性。结果　不稳定性心绞痛组和稳定性... 详细信息

目的　探讨中性粒细胞活化在冠心病发生发展中的病理作用和意义。方法　利用化学发光法检测活性氧 ,膜片钳技术检测中性粒细胞脱颗粒 ,分光光度计比色法检测血浆和中性粒细胞内髓过氧化物酶 (MPO)活性。结果　不稳定性心绞痛组和稳定性心绞痛组中性粒细胞产生活性氧的峰值均显著高于对照组 ,分别为 343 2 1± 6 6 4 ,32 5 6 5± 6 5 1和 2 71 5 3± 5 6 2 (P <0 0 1)。不稳定性心绞痛组高钙刺激膜电容最大变化值显著低于稳定性心绞痛组和对照组 ,分别为 (3 6 2± 0 31)pF ,(6 94± 0 4 3) pF和 (6 87± 0 36 ) pF(P <0 0 1)。不稳定性心绞痛组血浆和中性粒细胞内MPO活性均降低 ,稳定性心绞痛组血浆MPO降低 ,但细胞内MPO活性与对照组差别无显著意义。结论　中性粒细胞氧化和抗氧化代谢失衡可能参与了冠心病的发生发展 ,尤其在不稳定性心绞痛发病过程中起到重要作用。

关键词：冠心病中性粒细胞氧化代谢指标检测分光光度计比色法

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eotaxin-3基因多态性与变应性哮喘的相关性

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中华医学遗传学杂志 2006年第2期23卷 169-172页

作者：高贵民吴健民崔天盆贺竹泉华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的研究eotaxin-3基因多态性与变应性哮喘的相关性。方法用聚合酶链反应-单链构象多态性-四引物聚合酶链反应-限制性酶切的方法对湖北地区汉族成人eotaxin-3+77C/T和+2497T/G单核苷酸多态性与哮喘易感性、嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS... 详细信息

目的研究eotaxin-3基因多态性与变应性哮喘的相关性。方法用聚合酶链反应-单链构象多态性-四引物聚合酶链反应-限制性酶切的方法对湖北地区汉族成人eotaxin-3+77C/T和+2497T/G单核苷酸多态性与哮喘易感性、嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)计数以及血浆总IgE水平的相关性进行了分析。结果eotaxin-3+2497位哮喘组与对照组G等位基因的频率,哮喘组IgE浓度及EOS数量差异有统计学意义,P值分别为0.011、0.021和0.029;+77位哮喘组与对照组T等位基因的频率,哮喘组IgE浓度差异无统计学意义,P值分别为0.824和0.473;+77位哮喘组EOS数量差异有统计学意义,P值为0.044。结论eotaxin-3+2497T/G多态性与哮喘易感性、EOS数量及IgE水平相关,+77位C/T基因多态性与哮喘EOS数量相关。

关键词： eotaxin-3基因单核苷酸多态性变应性哮喘

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内皮细胞蛋白C受体基因多态性与湖北地区汉族人群冠状动脉粥样硬化性心脏病的相关性研究

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中华检验医学杂志 2008年第12期31卷 1376-1377页

作者：王晓蓓胡丽华华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

蛋白C系统是人体三大抗凝系统中主要组成成分之一，内皮细胞蛋白C受体（endothelial protein Creceptor，EPCR）是1994年发现的该系统的一个新成员，主要表达于大血管的内皮细胞上。因金属蛋白酶的作用，EPCR从细胞膜上脱落下来形成可... 详细信息

蛋白C系统是人体三大抗凝系统中主要组成成分之一，内皮细胞蛋白C受体（endothelial protein Creceptor，EPCR）是1994年发现的该系统的一个新成员，主要表达于大血管的内皮细胞上。因金属蛋白酶的作用，EPCR从细胞膜上脱落下来形成可溶性内皮细胞蛋白C受体（soluble endothelial cell protein C receptor，sEPCR），以相同的亲和力与蛋白C和活化蛋白C（APC）结合，抑制蛋白C的活化和APC的抗凝活性。EPCR基因存在几种变异，

关键词：内皮细胞蛋白C受体冠状动脉粥样硬化性心脏病蛋白C系统受体基因多态性汉族人群湖北地区 protein receptor

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抗核小体抗体对系统性红斑狼疮诊断的意义

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临床检验杂志 2006年第1期24卷 59-59,65页

作者：谢俊丽胡丽华崔天盆刘燕婕袁琳华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种病因复杂的慢性全身性自身免疫病。近年来，发现抗核小体抗体（AnuA）对SLE具有满意的敏感性和极高的特异性。我们对健康体检者、SLE患者和其他自身免疫病患者血清中的AnuA... 详细信息

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种病因复杂的慢性全身性自身免疫病。近年来，发现抗核小体抗体（AnuA）对SLE具有满意的敏感性和极高的特异性。我们对健康体检者、SLE患者和其他自身免疫病患者血清中的AnuA和其他4种自身抗体进行检测与分析。

关键词：抗核小体抗体系统性红斑狼疮免疫印迹试验

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