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中国免疫学杂志 2003年第8期19卷 565-569页

作者：刘艳玲熊艳吴健民华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的 :探讨中性粒细胞活性氧的产生及小GTP结合蛋白Rac2和RhoGDI的差异性表达在冠心病 (GHD)发生发展中的作用。方法 :采用化学发光法检测活性氧 ,适时定量RT PCR检测调控中性粒细胞活性氧产生的两种小GTP结合蛋白Rac2和RhoGDImRNA表达... 详细信息

目的 :探讨中性粒细胞活性氧的产生及小GTP结合蛋白Rac2和RhoGDI的差异性表达在冠心病 (GHD)发生发展中的作用。方法 :采用化学发光法检测活性氧 ,适时定量RT PCR检测调控中性粒细胞活性氧产生的两种小GTP结合蛋白Rac2和RhoGDImRNA表达量的变化。结果 :冠心病组中性粒细胞产生活性氧显著增多 ,冠心病人血清中各种炎性因子有促进中性粒细胞产生活性氧的作用 ;Rac2mRNA在冠心病组表达量显著性高于正常对照组 ,而RhoGDImRNA的表达量在两组中无显著区别 ,Rac2mRNA和RhoGDImRNA表达量的比值与中性粒细胞产生活性氧的峰值呈正相关。结论 :中性粒细胞通过产生活性氧参与冠心病的发生发展 ,冠心病病人中性粒细胞Rac2和RhoGDImRNA表达量比例失调是导致活性氧产生增多的重要因素。

关键词：中性粒细胞 GTP结合蛋白表达冠心病活性氧

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白细胞介素4及肿瘤坏死因子-α基因多态性与湖北汉族儿童哮喘相关性研究

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华中科技大学学报（医学版） 2004年第2期33卷 196-198页

作者：刘东方刘日明崔天盆吴健民华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的　探讨白细胞介素 (IL) 4基因启动子区C +33T及肿瘤坏死因子 α (TNF α) 30 8位基因多态性与湖北汉族儿童哮喘的易感性的关系。方法　用聚合酶链反应和限制片段长度多态性 (PCR/RFLP)的方法对湖北汉族115例哮喘患儿及 75例健康... 详细信息

目的　探讨白细胞介素 (IL) 4基因启动子区C +33T及肿瘤坏死因子 α (TNF α) 30 8位基因多态性与湖北汉族儿童哮喘的易感性的关系。方法　用聚合酶链反应和限制片段长度多态性 (PCR/RFLP)的方法对湖北汉族115例哮喘患儿及 75例健康儿童进行IL 4启动子的 +33位点多态性分析 ,对 113例哮喘患儿及 12 6例健康儿童进行TNF α的 30 8位点多态性分析。结果　哮喘患儿与健康对照组IL 4基因启动子C +33T位点的基因型频率和等位基因频率CC、CT、TT之间有显著性差异 (P <0 0 0 1)。TNF α的 30 8位点的基因型频率和等位基因频率在两组的比较中无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　IL 4启动子 +33位点基因多态性与湖北汉族儿童哮喘易感性相关 ,TNF α 30

关键词：白细胞介素4 肿瘤坏死因子-α 基因多态性湖北汉族儿童哮喘易感性

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脂蛋白相关磷脂酶A2在2型糖尿病周围血管病变中的临床预测价值

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临床血液学杂志 2023年第6期36卷 387-392页

作者：梁涛刘凤吴苏源袁易龙张德太胡丽华王琳华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的:探讨血清脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2)与2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)周围血管病变(peripheral vascular disease,PVD)发生风险的关系,并进一步分析Lp-PLA2在T2DM并发PVD中的临床预测价值。方法:收集2021年6月至2022年3月确诊为T2DM的住院患者188例作为病例组。根据血管彩超结果,将T2DM患者分为单纯性T2DM组88例,T2DM并发PVD组100例。选择同期健康体检者70例作为对照组。采用全自动生化分析仪检测所有研究对象的血清Lp-PLA2水平及临床常规生化指标,并对结果进行分析比较。应用单因素和多因素logistic回归分析法分析Lp-PLA2与T2DM并发PVD的关系。采用Spearman相关性分析法分析Lp-PLA2与T2DM并发PVD各临床生化常规指标之间的相关性。采用受试者工作特征曲线进一步分析Lp-PLA2在T2DM并发PVD中的预测价值。结果:T2DM并发PVD组和T2DM组BUN、CysC、Glu、TG、sdLDL、Lp(a)及Lp-PLA2水平均显著高于对照组(P<0.05),而HDL及ApoA水平均显著低于对照组(P<0.05)。与T2DM组比较,T2DM并发PVD组仅ApoA和Lp-PLA2水平显著升高(P<0.05)。单因素logistic回归分析结果显示,病程、高血脂、Lp-PLA2是T2DM并发PVD的独立危险因素(P<0.05)。进一步进行多因素logistic回归分析显示,病程、高血脂和Lp-PLA2导致T2DM并发PVD发生风险分别为(OR=1.053,95%CI 1.007~1.101,P=0.023)、(OR=3.284,95%CI 1.715~6.288,P<0.001)和(OR=1.003,95%CI 1.000~1.006,P=0.033)。Spearman相关性分析仅发现Lp-PLA2与sdLDL存在显著正相关性。Lp-PLA2对T2DM并发PVD患病预测的曲线下面积为0.599,敏感度为66.0%,特异度为52.3%,约登指数为0.183,最佳诊断值为425.5 U/L。结论:Lp-PLA2与T2DM并发PVD密切相关,Lp-PLA2是T2DM并发PVD的独立危险因素。通过监测T2DM患者血清中Lp-PLA2水平的变化,对预防和治疗T2DM并发外周血管病变有一定的临床指导价值。

关键词： 2型糖尿病周围血管病变脂蛋白相关磷脂酶A2

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转酮醇酶1在人结肠癌细胞株LoVo增殖中的作用

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华中科技大学学报（医学版） 2008年第3期37卷 347-350页

作者：杨菊红胡丽华张德太蔡鹏程华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的探讨转酮醇酶1(TKTL1)在体外培养的人类结肠癌细胞株(LoVo)生长增殖中的作用。方法构建针对TKTL1 mRNA的小干扰RNA(siRNA)质粒,将该质粒转染LoVo细胞;采用实时定量RT-PCR检测转染前后LoVo细胞转酮醇酶基因家族中转酮醇酶(TKT)、TKTL... 详细信息

目的探讨转酮醇酶1(TKTL1)在体外培养的人类结肠癌细胞株(LoVo)生长增殖中的作用。方法构建针对TKTL1 mRNA的小干扰RNA(siRNA)质粒,将该质粒转染LoVo细胞;采用实时定量RT-PCR检测转染前后LoVo细胞转酮醇酶基因家族中转酮醇酶(TKT)、TKTL1、转酮醇酶2(TKTL2)mRNA表达水平的变化,通过流式细胞术和MTT法检测转染前后LoVo细胞周期和细胞增殖的改变。结果转染组(携带有pEGFP-C1-U6/TKTL1)、质粒对照组(携带有pEGFP-C1-U6/UC)和未转染组(未转染细胞)中TKT和TKTL2 mRNA的表达水平差异无显著性意义(P>0.05)。转染组细胞中TKTL1的表达水平与质粒对照组和未转染组相比,明显下调,且转染组LoVo细胞总转酮醇酶活性明显下降,细胞增殖明显被抑制,LoVo细胞被阻滞在G0/G1期。结论TKTL1在人类结肠癌细胞(LoVo细胞系)的生长增殖中起重要作用,TKTL1可能成为肿瘤治疗的新靶点。

关键词：转酮醇酶转酮醇酶1 小干扰RNA 转酮醇酶活性 LoVo细胞

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慢性乙肝患者HBV核心基因一组单核苷酸多态性与血清HBVDNA水平的相关性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2011年第5期31卷 443-447页

作者：李一荣王雪平陈凤花袁琳马荣红温晓波周志明华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022 临床免疫教研室

目的研究慢性乙肝患者HBV核心基因的单核苷酸多态性（SNP）与血清HBVDNA水平的相关关系。方法采用PCR-RFLP和限制性内切酶Tsp509I榆测HBV核心基闪的SNP，采用双脱氧终止法对核心基因进行序列测定，实时荧光PCR技术用于HBVDNA水平的定量... 详细信息

目的研究慢性乙肝患者HBV核心基因的单核苷酸多态性（SNP）与血清HBVDNA水平的相关关系。方法采用PCR-RFLP和限制性内切酶Tsp509I榆测HBV核心基闪的SNP，采用双脱氧终止法对核心基因进行序列测定，实时荧光PCR技术用于HBVDNA水平的定量检测。结果慢性乙肝人群中发现5种典型的PCR-RFLP图谱，分别是RFLP－C、RFLP－D、RFLP－E、RFLP—G和RFLP—C／G，各种RFLPL图谱的分布频率依次为61．5％、2．6％、9．6％、16．7％和9．6％。A165T、A336C、A336T、T337C和T385C等5种SNP与RFLP图谱的变化有关，但是只有SNPA336C和A336T会导致HBcAg第83位的Glu被Asp所替代。RFLP-C组患者的血清HBV DNA水平显著高于RFLP—G组（P=0．02）和RFLP—C／G组（P=0．006），而且RFLP—C／G组患者血清ALT的阳性率显著低于RFLP—C、RFLP—E和RFLP—G组；当HBeAg阳性时，RFLP—C组患者的血清HBVDNA水平显著高于RFLP－G组（P=0．015）和RFLP—C／G组（P=0．008）。结论本研究中使用的PCR—RFLP能够用于检测核心基因的SNP，RFLP—C组患者的血清HBVDNA水平显著高于RFLP—G组和RFLP—C／G组，叮能与Glu83Asp突变有关。

关键词：乙型肝炎病毒基因型聚合酶链反应多态性

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中南地区金黄色葡萄球菌流行病学及耐药性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2013年第6期33卷 410-415页

作者：刘彩林陈中举孙自镛曹伟冯羡菊王山梅曾吉邹明祥汪明孙明月侯红艳华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科武汉430030 中南大学湘雅二医院检验科郑州大学第一附属医院检验科河南省人民医院检验科华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科中南大学湘雅医院检验科

目的研究中南地区2011年6月至2012年5月金黄色葡萄球菌的耐药情况及基因型分布。方法采用琼脂稀释法检测金黄色葡萄球菌对临床常用抗菌药物的最小抑菌浓度（MIC），多重PCR方法对MRSA菌株进行SCCmec（staphylococcalcassettechromosome... 详细信息

目的研究中南地区2011年6月至2012年5月金黄色葡萄球菌的耐药情况及基因型分布。方法采用琼脂稀释法检测金黄色葡萄球菌对临床常用抗菌药物的最小抑菌浓度（MIC），多重PCR方法对MRSA菌株进行SCCmec（staphylococcalcassettechromosomemec）和agr（accessorygeneregulator）分型。用MHAST（含有5μg／ml替考拉宁的M—H琼脂）初筛hVISA（heterogeneousvall-comycin—intermediateStapylococcusaarells）菌株，MHAST初筛阳性的菌株用金标准PAP／AUC法（popu—lationanalysisprofile／areaunderthecurve）进行确证。结果352株金黄色葡萄球菌主要分离自血液标本（40．1％）和分泌物标本（24．7％），其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）118株，检出率为33．5％。MRSA菌株对头孢菌素类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、氟喹诺酮类、利福平、克林霉素、红霉素和四环素等抗菌药物耐药率均显著高于MSSA，差异有统计学意义（P〈0．05）。MRSA对氯霉素和甲氧苄啶／磺胺甲嗯唑耐药率较低，分别为10．2％和7．4％，未发现万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、达托霉素及替加环素耐药的菌株。118株MRSA中共检测出hVISA20株，检出率为16．9％。MRSA菌株主要为SCCmecⅢ型，占80．5％；其次是Ⅳ型占8．5％。agr分型主要为agr．1型，占81．4％；其次为agr-2型，占15．3％。结论中南地区金黄色葡萄球菌耐药现象严重，MRSA基因型主要为SCCmecllI型和agr-1型，hVISA流行率极高，达16．9％，应引起临床高度重视，合理使用抗菌药物尤其是糖肽类药物，以避免VISA和VRSA（vancomycin—resistantStapylococcusattreus）株的产生，致使临床治疗失败。

关键词：金黄色葡萄球菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 hVISA SCCmec

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不同商品化试剂对临床血清样本HBV DNA定量检测结果的影响

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临床血液学杂志 2021年第6期34卷 379-384,389页

作者：耿帜肖圣达徐远东陈凤花华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

目的:评价不同商品化试剂定量检测临床血清样本乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)性能的差异。方法:(1)应用5种商品化HBV DNA定量试剂(2种进口试剂A和B,3种国产试剂C、D和E)分别对6例混合血清样本进行检测,并对结果进行比较;3种国产试剂对6例混... 详细信息

目的:评价不同商品化试剂定量检测临床血清样本乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)性能的差异。方法:(1)应用5种商品化HBV DNA定量试剂(2种进口试剂A和B,3种国产试剂C、D和E)分别对6例混合血清样本进行检测,并对结果进行比较;3种国产试剂对6例混合血清样本以及103和106两个水平的HBV DNA国家标准物质GBW(E)090137和GBW(E)090139分3个批次检测,分析其精密度和正确度。(2)采用3种国产试剂定量检测43例慢性乙型肝炎患者血清样本HBV DNA,并分析其相关性和一致性。结果:(1)定量检测6例混合血清样本中HBV DNA,试剂B、C与A的检测结果差异均无统计学意义(P>0.05),而试剂D、E的检测结果均显著低于试剂A(P<0.05)。(2)定量检测6例混合血清样本以及103和106两个水平的HBV DNA国家标准物质,3种国产试剂的CV均小于5%,国家标准物质的实际检测值与靶值的差值绝对值均小于0.4 log10 IU/mL,精密度和正确度满足行业标准。(3)对于43例临床血清样本,试剂C、D和E的阳性检出率分别为95.35%(41/43)、95.35%(41/43)、86.05%(37/43);对于检测结果均在3种试剂定量范围内的24例临床血清样本,HBV DNA定量检测结果为C>D>E(P<0.05),3种试剂的检测结果两两间均呈线性相关(C vs D:R^(2)=0.93,Y=0.973X-0.164;C vs E:R2=0.61,Y=0.770X+0.210;D vs E:R2=0.69,Y=0.809X+0.270),试剂C和D、C和E、D和E的Bland-Altman分析发现其检测结果差值平均值分别为0.28、0.80和0.51 log10 IU/mL,相应的95%一致性界限分别为(-0.30,0.86)、(-0.62,2.21)、(-0.74,1.77),相应的95%一致性界限以内的点分别占95.83%(23/24)、95.83%(23/24)和91.67%(22/24),其一致性界限范围内检测值的最大差异分别为0.85、1.96和1.25 log10IU/mL。试剂C和D、C和E、D和E的检测结果差值>1.0 log10 IU/mL的血清样本分别占0(0/24)、33.33%(8/24)和25.00%(6/24)。结论:满足行业标准的不同商品化国产试剂定量检测临床血清样本HBV DNA的性能存在显著差异,在常规临床实践中互换用于临床决策时务必慎重。

关键词：乙型肝炎病毒DNA定量试剂比对检测性能临床性能血清

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吡啰红B-过氧化氢-碘化钾法髓过氧化物酶快速染色及应用

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临床检验杂志 2004年第2期22卷 139-140页

作者：陈万新吴健民华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

Pereira于1984年提出了碘化钾髓过氧化物酶(MPO)染色法，因不需使用有潜在致癌作用的联苯胺而深受欢迎。国内学者还对其进行了许多改进。我们发现以吡啰红B(pyronine B，PyB)代替原法中的Lishiman染料能更好地显示MPO，从而建立了吡啰... 详细信息

Pereira于1984年提出了碘化钾髓过氧化物酶(MPO)染色法，因不需使用有潜在致癌作用的联苯胺而深受欢迎。国内学者还对其进行了许多改进。我们发现以吡啰红B(pyronine B，PyB)代替原法中的Lishiman染料能更好地显示MPO，从而建立了吡啰红B-过氧化氢-碘化钾MPO染色法(简称PyB—KI法)，其阳性反应呈鲜红色颗粒状，十分醒目，并且染色时间短，效果良好。

关键词：吡啰红B 过氧化氢碘化钾髓过氧化物酶快速染色细胞化学

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氧化吡啰红G-碘化钾法在血细胞髓过氧化物酶快速染色中的应用

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中华医学杂志 2003年第22期83卷 2009-2010页

作者：陈万新吴健民华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科武汉430022

Pereira于1984年提出了碘化钾髓过氧化物酶(MPO)染色法，由于不需要使用有潜在致癌作用的联苯胺，而深受欢迎。我们在试用多种显色剂取代Pereira原法中的Lishiman染料时，发现以吡?红G(Pyronine G)为显色剂能很好地显示MPO，并采用人工... 详细信息

Pereira于1984年提出了碘化钾髓过氧化物酶(MPO)染色法，由于不需要使用有潜在致癌作用的联苯胺，而深受欢迎。我们在试用多种显色剂取代Pereira原法中的Lishiman染料时，发现以吡?红G(Pyronine G)为显色剂能很好地显示MPO，并采用人工预先氧化吡噣红G(PyG)溶液的新方法，使其一步到位达到最佳氧化成熟程度，以后每次配制MPO染色工作液时不必加H_2O_2，从而建立了氧化吡啰红G-碘化钾MPO染色法(简称氧化PyG-KI法)，此法染色时间短，灵敏度高，效果良好。

关键词：氧化吡哕红G 碘化钾法血细胞髓过氧化物酶快速染色显色剂

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经皮肾造瘘治疗移植肾积水的疗效观察

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介入放射学杂志 2008年第12期17卷 865-867页

作者：任建庄梁惠民吴汉平郑传胜周国锋夏向文武汉华中科技大学附属协和医院放射科 430022

目的探讨移植肾积水介入治疗的方法及疗效。方法收集16例右髂窝肾移植术后肾积水患者,B超和X线透视导向下,采用同轴穿刺法进行肾造瘘,然后根据病情选用不同的介入处理。术后观察尿液颜色、尿量,并复查尿常规、肾功能。结果16例患者造影... 详细信息

目的探讨移植肾积水介入治疗的方法及疗效。方法收集16例右髂窝肾移植术后肾积水患者,B超和X线透视导向下,采用同轴穿刺法进行肾造瘘,然后根据病情选用不同的介入处理。术后观察尿液颜色、尿量,并复查尿常规、肾功能。结果16例患者造影均显示不同程度肾积水和输尿管梗阻,其中输尿管完全梗阻7例,不完全梗阻9例。行经皮肾外引流术3例,经皮穿刺肾输尿管狭窄段球囊扩张联合内外引流术13例。患者血清尿素氮和肌酐平均水平术前分别为28.3mmol/L和537.7μmol/L,术后1周分别下降至9.7mmol/L和148.6μmol/L。术后B超检查示移植肾积水消失。随访4～48个月,除1例患者术后2个月因双J管引流不畅复发肾积水而行外引流术外,其余患者均无肾积水复发。结果介入治疗具有操作简便、创伤小和并发症少的特点,是移植肾积水安全和有效的治疗方法。

关键词：介入治疗输尿管梗阻肾移植肾积水

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