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和厚朴酚抑制结肠癌SW620细胞增殖与TGF-β1/p38 MAPK/Hippo信号传导的关系

中国药理学通报 2021年第11期37卷 1577-1584页

作者：刘晓璐马妍刘荣兴李沁孙文娟何百成重庆市生物化学与分子药理学重点实验室重庆400016 重庆医科大学药理学教研室重庆400016 武汉大学基础医学院药理学教研室湖北武汉430072

目的研究和厚朴酚(honokiol,HNK)对结肠癌SW620细胞的增殖抑制作用及其机制。方法采用结晶紫染色法、流式细胞术和Western blot等检测HNK抑制结肠癌SW620细胞增殖的作用,以及HNK对TGF-β1表达的影响;采用Western blot分析HNK对p38 MAPK... 详细信息

目的研究和厚朴酚(honokiol,HNK)对结肠癌SW620细胞的增殖抑制作用及其机制。方法采用结晶紫染色法、流式细胞术和Western blot等检测HNK抑制结肠癌SW620细胞增殖的作用,以及HNK对TGF-β1表达的影响;采用Western blot分析HNK对p38 MAPK磷酸化的影响,以及HNK联合应用过表达TGF-β1腺病毒与TGF-β1抑制剂对p38 MAPK磷酸化的影响;Western blot分析HNK对YAP磷酸化的影响,并分析HNK磷酸化p38 MAPK的作用与YAP的可能关系。结果HNK对SW620细胞增殖具有抑制作用,并能上调TGF-β1的蛋白表达;同时,HNK可以上调SW620细胞中p38 MAPK的磷酸化;过表达TGF-β1腺病毒能够促进p38 MAPK的磷酸化,而TGF-β1抑制剂能够抑制结论HNK能够抑制SW620细胞的增殖,其作用机制可能是通过上调TGF-β1并激活p38 MAPK信号通路来促进YAP磷酸化。

关键词：和厚朴酚结肠癌凋亡 TGF-β1 p38 MAPK Hippo

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hUC-MSC在成神经分化过程中的趋化迁移研究

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癫痫与神经电生理学杂志 2021年第1期30卷 25-31页

作者：李晨卞凯鹏熊英张丽娟匡梦岚王岚王恒许键炜长江航运总医院肿瘤科湖北武汉430000 苏州克睿基因生物科技有限公司贵州医科大学基础医学院机能学实验室贵州医科大学护理学院贵州医科大学药学院贵州医科大学医学科学研究所黔南民族医学高等专科学校药理学教研室贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室组织工程与干细胞实验中心贵州省再生医学重点实验室贵州医科大学基础医学院药理学教研室

目的探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSC)向神经样细胞的分化,并对其分化的神经样细胞的趋化作用进行研究。方法检测hUC-MSC细胞表面的标记;无血清的诱导培养基[含2%二甲基亚砜(DMSO)和200μm... 详细信息

目的探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSC)向神经样细胞的分化,并对其分化的神经样细胞的趋化作用进行研究。方法检测hUC-MSC细胞表面的标记;无血清的诱导培养基[含2%二甲基亚砜(DMSO)和200μmol/L丁羟基茴香醚(BHA)]诱导其向神经细胞分化,并进行神经细胞特异性标志物神经上皮干细胞蛋白(nestin)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫荧光染色检测,并对分化的成神经诱导过程中的形态变化进行鉴定。此外,不同分化状态的hUC-MSC,在加入500μL含有20 ng/mL浓度的基质细胞衍生因子(stromal Cell-derived Factor-1α,SDF-1α)的不含血清的L-DMEM培养基,利用倒置相差显微镜下拍照,统计迁移至室膜下方的细胞数。结果成功分离出hUC-MSC,行流式细胞仪检测结果显示MSC:CD71+、CD29+,而CD34-、CD45-符合MSC的生物学特征。对不同诱导时间的hUC-MSC免疫荧光结果的统计学分析,nestin的表达呈现出先增高后降低的趋势,NSE在诱导期和维持前期均为阴性,在整个过程中末期才开始表达,到维持48 h时有62.5%的细胞表达,维持72 h时有76.5%的细胞表达。不同成神经分化状态的hUC-MSC迁移能力不同,诱导30 h,细胞向SDF-1α的趋化迁移能力达到最强。结论hUC-MSC具有易分离并扩增培养的生物特性,能诱导分化成为成神经细胞,并且具有一定的迁移能力,该研究能为中枢神经系统细胞的移植提供理论基础。

关键词：人脐带间充质干细胞(hUC-MSC) 成神经细胞诱导分化荧光检测趋化迁移

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PKC-β抑制剂LY333531对糖尿病肾脏NADPH氧化酶与SOD蛋白表达的影响

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首都医科大学学报 2011年第3期32卷 392-396页

作者：高霞叶凤周赤燕刘慧敏徐援夏正远雷少青首都医科大学附属北京朝阳医院内分泌科北京100020 武汉大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室武汉430071 武汉大学人民医院麻醉科武汉430060 武汉大学基础医学院药理学教研室武汉430071

目的研究蛋白激酶C（protein kinase,PKC）-β抑制剂LY333531对糖尿病肾脏尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide dinucleotide phosphate,NADPH）氧化酶与超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的影响。方法 24只SD雄性大鼠（240~260 g）,采用抽签法随机分为正常对照组（normal control,NC）、糖尿病组（diabetes mellitus,DM）及LY333531（LY）治疗组。LY组灌胃给予PKC-β抑制剂LY333531〔1 mg/（kg.d）〕治疗4周后测量血糖、肾质量/体质量、24 h尿蛋白、内生肌酐清除率（creatinine clearance rate,Ccr）、游离15-F2t-Isoprostane、总抗氧化浓度及SOD活性。Western blotting分析NADPH氧化酶亚基P22phox与P67phox,SOD亚型Cu/Zn-SOD与Mn-SOD蛋白改变。结果与NC组比较,DM组血糖、肾质量/体质量、24 h尿蛋白、Ccr、血浆与肾脏中15-F2t-Isoprostane、血浆总抗氧化浓度及P22phox与P67phox表达明显增加,而肾脏总抗氧化物浓度、血浆与肾脏SOD活性、Cu/Zn-SOD及Mn-SOD蛋白表达明显减少（P〈0.05）。LY333531除对血糖与Mn-SOD的表达无显著影响外,均能显著逆转上述变化。结论 LY333531通过抑制糖尿病肾脏NADPH氧化酶的活化与表达,及促进Cu/Zn-SOD的表达而恢复SOD活性,以减少早期糖尿病肾脏的氧化损伤,从而发挥其保护肾脏作用。

关键词：蛋白激酶C-β抑制剂 LY333531 糖尿病性肾病尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶超氧化物歧化酶

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活性氧对神经母细胞株SH-SY5Y细胞L型钙通道电流的影响

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中风与神经疾病杂志 2002年第2期19卷 73-75页

作者：杜怡峰孙兆林李泱韩仲岩盛树力首都医科大学宣武医院北京脑老化研究实验室北京100053 青岛医学院附属医院神经内科山东青岛266003 同济医科大学基础医学院药理教研室湖北武汉430030

目的　探讨氧自由基导致神经元钙超载的发生机制。方法　在神经母细胞株 SH- SY5 Y细胞体外培养的基础上 ,采用全细胞膜片钳技术 ,观察 H2 O2 对 SH- SY5 Y细胞 L 型钙电流 (ICa,L)的影响。结果　 (1) H2 O2 能够明显增加峰值 ICa,L,且... 详细信息

目的　探讨氧自由基导致神经元钙超载的发生机制。方法　在神经母细胞株 SH- SY5 Y细胞体外培养的基础上 ,采用全细胞膜片钳技术 ,观察 H2 O2 对 SH- SY5 Y细胞 L 型钙电流 (ICa,L)的影响。结果　 (1) H2 O2 能够明显增加峰值 ICa,L,且该作用具有浓度依赖性。 (2 ) H2 O2 使 ICa,L的 I- V相关曲线下移 ,但对其形状和最大激活电位无明显影响。结论　 H2 O2 对 L 型钙通道有明显的增强作用 ,此可能是其导致神经元钙超载的机制之一。

关键词： H2O2 膜片钳神经母细胞瘤细胞钙通道 SH-SY5Y细胞脑缺血

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DDPH对大鼠弥漫性不完全性脑缺血的保护作用

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中国药理学通报 2001年第3期17卷 345-347页

作者：李笑萍王维亭喻培先郭莲军钱家庆武汉科技大学医学院药理学教研室武汉430080 同济医科大学基础医学院药理学教研室武汉430030

目的　为研究 1 (2 ,6 二甲基苯氧基 ) 2 (3,4 二甲氧基苯乙氨基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对脑缺血的保护作用。方法　采用大鼠弥漫性不完全性脑缺血模型 ,观察其对海马血流量 ,皮层与海马MDA、SOD含量 ,及病理性改变的影响。结果　DDPH 1... 详细信息

目的　为研究 1 (2 ,6 二甲基苯氧基 ) 2 (3,4 二甲氧基苯乙氨基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对脑缺血的保护作用。方法　采用大鼠弥漫性不完全性脑缺血模型 ,观察其对海马血流量 ,皮层与海马MDA、SOD含量 ,及病理性改变的影响。结果　DDPH 10mg·kg-1iv可显著提高大鼠缺血 10min、30min时的海马血流量 ,降低MDA含量且提高SOD活力 ,减轻病理性损伤。结论　DDPH可增加大鼠脑缺血时海马部位的血流量 ,提示该药对缺血性脑损伤具体一定的保护作用。

关键词：脑缺血脑血流丙烷盐酸盐保护作用丙二醛超氧化物歧化酶

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4-氨基吡啶对豚鼠心室肌钙和钠电流的影响

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药学学报 2001年第4期36卷 250-253页

作者：傅丽英李泱夏国瑾姚伟星江明性同济医科大学基础医学院药理教研室湖北武汉430030

目的　研究 4 氨基吡啶 ( 4 AP)对心肌细胞L型钙通道和钠通道的影响。方法　用全细胞膜片钳技术考察 4 AP对豚鼠心室肌细胞L型钙电流和钠电流的作用。结果　 4 AP 0 1,0 5 ,1 0mmol·L-1浓度依赖性地抑制L型钙电流 (ICa,L)和钠电... 详细信息

目的　研究 4 氨基吡啶 ( 4 AP)对心肌细胞L型钙通道和钠通道的影响。方法　用全细胞膜片钳技术考察 4 AP对豚鼠心室肌细胞L型钙电流和钠电流的作用。结果　 4 AP 0 1,0 5 ,1 0mmol·L-1浓度依赖性地抑制L型钙电流 (ICa,L)和钠电流 (INa) ,抑制率分别为 ( 11 6± 1 7) % ,( 37 5± 8 3) %和 ( 5 4 5± 6 9) %以及 ( 2 2 1±14 3) % ,( 39 4± 8 8) %和 ( 6 2 3± 6 8) %。 0 5mmol·L-14 AP使ICa ,L和INaI -V曲线均上移。结论　 4

关键词： 4-氨基吡啶心肌细胞钙电流钠电流膜片钳豚鼠

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1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐对肺血管周细胞增殖与免疫表型的影响

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中华结核和呼吸杂志 2001年第2期24卷 101-104页

作者：袁永辉车东媛熊密同济医科大学基础医学院病理学教研室武汉430030

目的　观察具有抗高血压作用新药 1 (2 ,6 二甲基苯氧基 ) 2 (3,4 二甲氧基苯乙氨基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对低氧内皮细胞条件培养液 (HECCM)诱导的大鼠肺血管周细胞 (PC)增殖和免疫表型转化有无抑制作用 ,为开发具有降压和防止肺血管... 详细信息

目的　观察具有抗高血压作用新药 1 (2 ,6 二甲基苯氧基 ) 2 (3,4 二甲氧基苯乙氨基 )丙烷盐酸盐 (DDPH)对低氧内皮细胞条件培养液 (HECCM)诱导的大鼠肺血管周细胞 (PC)增殖和免疫表型转化有无抑制作用 ,为开发具有降压和防止肺血管构型重建新药物提供实验依据。方法　实验根据不同条件培养液分为 4组 :常氧内皮细胞条件培养液 (NECCM)组 ,NECCM +DDPH组 ,HECCM组和HECCM +DDPH组。应用细胞培养、免疫细胞化学染色、图像分析及流式细胞术观察HECCM和DDPH对PC平滑肌肌动蛋白 (α SM actin)和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达及细胞周期的影响。结果　①HECCM组PCα SM actin呈强阳性表达 ,CD34 和S 10 0呈阴性反应 ,而其它各组PCα SM actin、CD34及S 10 0均呈阳性表达 ;②HECCM组PCα SM actin和PCNA的表达量分别是NECCM组的 1 32倍 (F=11 0 9,P =0 0 0 0 1)和 1 2 4倍 (F =2 89,P =0 0 2 5 7) ,是HECCM +DDPH组的 1 30倍 (F =3 6 5 ,P =0 0 0 70 )和 1 2 1倍 (F =2 6 3,P =0 0 414) ;③HECCM组PC的G0 G1期细胞百分率分别比NECCM组和HECCM +DDPH组低 11 7%和 9 1% ,S期细胞百分率分别高 5 6 %和 4 2 % ,G2 M期细胞百分率分别高 6 1%和 4 9% ;④DDPH对HECCM引起的PCs合成α SM actin和PCNA增高?

关键词：丙烷盐酸盐周细胞高血压降压作用肺动脉高压

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槟榔碱对离体钉螺足平滑肌的收缩活动与[Ca^(2+)]_i和[Ca^(2+)]_o的关系

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中国人兽共患病杂志 2001年第5期17卷 111-111,99页

作者：王宏翔夏国瑾张爱华何昌浩武汉市卫生学校武汉430030 同济医科大学基础医学院药理教研室湖北省职工医学院同济医科大学基础医学院寄生虫教研室

槟榔碱(Arecoline,Are)是棕榈科植物槟榔种子(Areca catechu L.)中提取的生物碱. 新近报道,它具有降低钉螺附壁上爬、灭螺增效作用,对胆碱能受体有激动作用以及阻滞Ca 2+的作用[1-3].为了阐明槟榔碱的阻滞Ca2+作用,本实验采用离体钉螺... 详细信息

槟榔碱(Arecoline,Are)是棕榈科植物槟榔种子(Areca catechu L.)中提取的生物碱. 新近报道,它具有降低钉螺附壁上爬、灭螺增效作用,对胆碱能受体有激动作用以及阻滞Ca 2+的作用[1-3].为了阐明槟榔碱的阻滞Ca2+作用,本实验采用离体钉螺足平滑肌为标本,进一步研究Are阻滞Ca2+作用与细胞内钙离子([Ca2+ ]i)和细胞外钙离子([Ca2+]o)的关系.

关键词：槟榔碱灭钉螺足Zhi平滑肌收缩活动钙离子

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乙酸β-哌啶乙酯的灭螺作用与钙离子的关系

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中国寄生虫病防治杂志 2001年第3期14卷 219-220页

作者：王少林夏国瑾李桂玲吴世玉田先翔郧阳医学院药理学教研室同济医科大学基础医学院药理学教研室湖北武汉430030 湖北中医学院

目的　研究乙酸 β-哌啶乙酯 (Ape)的杀螺作用与 Ca2 +的关系。　方法　采用完全浸泡和离体钉螺足平滑肌的实验方法 ,研究 Ape杀螺效果及其对 Ca2 +的影响。　结果　 0 .1mg/ L和 0 .5 mg/ L Ape均有杀螺作用 (P均 <0 .0 5 ) ,且呈... 详细信息

目的　研究乙酸 β-哌啶乙酯 (Ape)的杀螺作用与 Ca2 +的关系。　方法　采用完全浸泡和离体钉螺足平滑肌的实验方法 ,研究 Ape杀螺效果及其对 Ca2 +的影响。　结果　 0 .1mg/ L和 0 .5 mg/ L Ape均有杀螺作用 (P均 <0 .0 5 ) ,且呈浓度依赖性。不同浓度的 Ape对钉螺足平滑肌的收缩效应曲线呈双相性。低浓度时 (10 - 7～ 3× 10 - 6 mol/ L)可增强其收缩幅度 ,且能被钙通道阻滞剂维拉帕米所拮抗 ;高浓度时 (10 - 5～ 10 - 4 mol/ L)则能拮抗钙通道激动剂 Bay K86 44增强钉螺足平滑肌的收缩幅度。　结论　Ape具有一定的杀螺作用 ,其影响平滑肌收缩的结果表明 ,高浓度有阻 Ca2 +作用。

关键词：乙酸β-哌啶乙酯钉螺钙离子灭钉螺

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乙酸β-哌啶乙酯与钉螺足平滑肌M胆碱能受体的量效关系

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中国寄生虫病防治杂志 2001年第4期14卷 297-298页

作者：王少林夏国瑾吴世玉郧阳医学院药理学教研室湖北十堰442000 同济医科大学基础医学院药理学教研室湖北武汉430030

目的　研究乙酸 β-哌啶乙酯 (Ape)与钉螺足平滑肌 M胆碱能受体的量效关系。　方法　采用离体钉螺足平滑肌收缩活动的实验方法。　结果　不同浓度的 Ape对钉螺足平滑肌的收缩力呈双相性反应 ;Ape10 - 7～ 3× 10 - 6mol/L使钉螺足... 详细信息

目的　研究乙酸 β-哌啶乙酯 (Ape)与钉螺足平滑肌 M胆碱能受体的量效关系。　方法　采用离体钉螺足平滑肌收缩活动的实验方法。　结果　不同浓度的 Ape对钉螺足平滑肌的收缩力呈双相性反应 ;Ape10 - 7～ 3× 10 - 6mol/L使钉螺足平滑肌收缩力增加 ,10 - 5～ 10 - 4 mol/L 则使钉螺足平滑肌收缩力减弱 ,均呈浓度依赖性。低浓度的 Ape有增强钉螺足平滑肌收缩力的作用 ,可被阿托品所阻断 ;高浓度的 Ape则可拮抗氨甲酰胆碱增强足平滑肌的收缩力。　结论　Ape对钉螺足平滑肌收缩曲线呈双相性 ,且与 M胆碱能受体有关。提示大剂量的 Ape有拮抗 M胆碱能受体的作用 ,可能是其杀螺作用的机理之一。

关键词：乙酸β-哌啶乙酯钉螺平滑肌胆碱能受体

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