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武汉大学学报（医学版） 2023年第2期44卷 127-131,168页

作者：牟晓丽侯炜陈述亮病毒学国家重点实验室/武汉大学基础医学院医学病毒学研究所湖北武汉430071

猴痘(MPX)是由猴痘病毒(MPXV)引起的一种人兽共患病,猴痘病毒因分离于1958年丹麦哥本哈根实验室发热和痘疹的猕猴体内而得名。猴痘早期散发于中、西非洲人烟稀少的雨林地带,后多发生于刚果民主共和国,近年来,西非和中非人类感染猴痘病... 详细信息

猴痘(MPX)是由猴痘病毒(MPXV)引起的一种人兽共患病,猴痘病毒因分离于1958年丹麦哥本哈根实验室发热和痘疹的猕猴体内而得名。猴痘早期散发于中、西非洲人烟稀少的雨林地带,后多发生于刚果民主共和国,近年来,西非和中非人类感染猴痘病例的频率和地理分布有所增加。其主要临床表现为起病突然、发热和全身不适,伴以皮肤出疹,但不易与天花、轻型水痘鉴别。除猴子外,其他灵长类动物和啮齿动物都可感染猴痘病毒。本综述旨在对猴痘病毒的病原学、流行病学以及病毒感染后的诊断、治疗和防治措施进行详细介绍,为积极防范和应对猴痘病毒的流行提供帮助。

关键词：正痘病毒猴痘猴痘病毒新发传染病人畜共患病

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噬菌体裂解酶LysP53漱口水的制备与评价

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口腔医学研究 2023年第6期39卷 553-557页

作者：赵晓苇陈方圆危宏平李宇红湖北省口腔基础医学重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地口腔生物医学教育部重点实验室(武汉大学) 武汉大学口腔医(学)院湖北武汉430079 中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071

目的:开发一种含有噬菌体裂解酶LysP53的漱口水,并在体外评价其抗菌活性、细胞毒性和稳定性。方法:体外克隆、表达和纯化噬菌体裂解酶LysP53并制备成漱口水。通过杀菌活性测定、结晶紫染色试验、扫描电子显微镜等评价LysP53漱口水的杀... 详细信息

目的:开发一种含有噬菌体裂解酶LysP53的漱口水,并在体外评价其抗菌活性、细胞毒性和稳定性。方法:体外克隆、表达和纯化噬菌体裂解酶LysP53并制备成漱口水。通过杀菌活性测定、结晶紫染色试验、扫描电子显微镜等评价LysP53漱口水的杀菌效果,细胞计数试剂盒-8试验(CCK-8)对其安全性进行体外评估,不同温度条件下对LysP53活性的影响评价其稳定性。结果:8μmol/L LysP53漱口水对主要致龋菌变形链球菌、远缘链球菌、内氏放线菌有杀菌效果(P<0.05),而对常见共生菌口链球菌、轻链球菌、血链球菌抗菌活性较差(P>0.05)。在已形成的生物膜中应用LysP53漱口水,可使生物膜结构崩解,并有效减少活菌数量(P<0.05)。CCK-8显示各组之间细胞活性无统计学差异(P>0.05),LysP53漱口水分别储存于4、37、43、60、95℃1 h后的杀菌效率无差异,且仍显示出优良的杀菌活性。结论:LysP53漱口水表现出良好的抗菌、特异性、稳定性和生物相容性,作为常规口腔卫生措施,在预防龋齿方面具有巨大的潜力。

关键词：龋病变形链球菌噬菌体裂解酶漱口水

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乙型肝炎抗病毒药物研究进展

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科学通报 2019年第30期64卷 3123-3141页

作者：徐在超赵凯涛江应安夏宇尘武汉大学基础医学院医学病毒学研究所病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室武汉430071 武汉大学人民医院感染科武汉430071

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)在世界范围内流行,能够引起急、慢性肝炎,其中长期慢性感染可增加肝硬化及肝癌的发病风险.抗病毒药物治疗是控制HBV慢性感染的有效方法.目前应用于临床的抗HBV药物主要有两类:α干扰素和核苷(酸)类... 详细信息

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)在世界范围内流行,能够引起急、慢性肝炎,其中长期慢性感染可增加肝硬化及肝癌的发病风险.抗病毒药物治疗是控制HBV慢性感染的有效方法.目前应用于临床的抗HBV药物主要有两类:α干扰素和核苷(酸)类似物.这两种药物虽然可以抑制病毒复制,减轻或消除肝脏病理损害并有效阻止病情向肝硬化和肝癌发展,但并不能有效地达到HBV表面抗原(HBV surface antigen,HBsAg)使其转阴并清除病毒共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),所以HBV慢性感染很难治愈.近年来,随着人们对HBV研究的深入,针对其复杂的感染机制及病毒与宿主免疫系统之间相互作用的不同靶点药物被相继开发出来.本文对近年来在病毒直接靶向和宿主靶向药物(一些目前正处于临床试验阶段),以及免疫治疗药物研发方面所取得的进展进行综述.此外,还对高通量筛选技术(unbiased high-throughput screens)寻找新的抗病毒化合物,以及老药新用的策略用于抑制HBV进行了探讨.

关键词：乙型肝炎病毒药物直接抗病毒药物免疫疗法药物筛选

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武汉地区107例重症新型冠状病毒肺炎患者的预后危险因素分析

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中华临床感染病杂志 2020年第4期13卷 257-263页

作者：戴锴包安裕叶鹏徐铭张钦然周宇江万里江吴边王慧敏朱梦飞汤灵玲祝成亮夏宇尘江应安邹秀芬李兰娟武汉大学人民医院感染科 430060 武汉大学人民医院检验科 430060 武汉大学人民医院药学部 430060 武汉大学数学与统计学院 430072 武汉大学人民医院胸外科 430060 武汉大学人民医院门诊管理服务部 430060 武汉大学基础医学院病理与病理生理学系 430071 树兰(杭州)医院 330103 武汉大学基础医学院医学病毒学研究所、病毒学国家重点实验室 430071 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室国家感染性疾病临床医学研究中心杭州310003

目的分析影响重症新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者死亡的危险因素。方法回顾性分析2020年2月12日至3月12日在武汉大学人民医院住院治疗的107例重症COVID-19患者的临床特征,根据患者预后将其分为存活组(n=58)和死亡组(n=49),先对两组患... 详细信息

目的分析影响重症新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者死亡的危险因素。方法回顾性分析2020年2月12日至3月12日在武汉大学人民医院住院治疗的107例重症COVID-19患者的临床特征,根据患者预后将其分为存活组(n=58)和死亡组(n=49),先对两组患者的基线临床特征、实验室检查结果进行单因素分析。为了排除混杂因素,应用随机森林模型筛选出变量重要性排序,再纳入二分类Logistic回归模型,分析患者死亡的独立危险因素。结果单因素分析显示,两组在年龄、临床分型、干咳、呼吸困难及实验室检查指标方面比较,差异均具有统计学意义(P<0.05或<0.01)。应用随机森林模型对单因素分析有统计学意义的变量筛选进行重要性排序,将筛选的变量纳入二分类Logistic回归模型,经逐步回归分析,患者临床分型、年龄、中性粒细胞计数和CD3+T淋巴细胞比例是重症COVID-19患者死亡的独立危险因素。干咳是重症COVID-19患者死亡的独立保护因素。结论COVID-19死亡患者更多出现免疫功能受抑制、继发感染和炎性因子风暴,这些因素可能共同作用于重症患者,最终出现顽固性的低氧血症和多器官功能障碍而导致患者死亡,密切监测上述指标并及时干预可能是挽救重症COVID-19患者生命的有效策略。

关键词：新型冠状病毒肺炎重症患者死亡危险因素

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穿心莲内酯及其衍生物抗肠道病毒效果评价

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中国药师 2019年第4期22卷 635-639页

作者：陈田毛夷冬马年沈梦欣曾君南蒋春红刘媛媛刘东瀛熊海蓉杨占秋武汉大学医学病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071 江西青峰制药有限公司

目的:评价穿心莲内酯及其衍生物(XYP-1、XYP-2及XYP-3)抑制柯萨奇病毒B3型(CVB3)感染MA104细胞的效果。方法:采用MTT法检测3种中药注射液对MA-104细胞的细胞毒性,并通过感染阻断、直接杀伤、增殖抑制3种不同作用方式评价药物对CVB3感染... 详细信息

目的:评价穿心莲内酯及其衍生物(XYP-1、XYP-2及XYP-3)抑制柯萨奇病毒B3型(CVB3)感染MA104细胞的效果。方法:采用MTT法检测3种中药注射液对MA-104细胞的细胞毒性,并通过感染阻断、直接杀伤、增殖抑制3种不同作用方式评价药物对CVB3感染细胞的体外抗病毒效果。结果:穿心莲内酯及其衍生物在阻断病毒感染细胞作用中,对CVB3的治疗指数(TI)分别为15.29,6.76,1.86;在阻止病毒增殖抑制作用中,对CVB3的TI分别为20.00,50.00,1.67;在直接杀伤病毒作用中,对CVB3的TI分别为7.65,25.00,1.83。结论:穿心莲内酯及其衍生物在不同作用方式下,对CVB3病毒具有不同程度的抑制效果,XYP-1主要阻断病毒的感染并抑制病毒增殖,XYP-2则能抑制病毒增殖并对病毒有杀伤作用,而XYP-3抗病毒效果较差。

关键词：穿心莲内酯柯萨奇病毒体外药效抗病毒治疗指数

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两种结核分枝杆菌培养法在结核小鼠感染模型实验中的应用对比

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中国比较医学杂志 2019年第5期29卷 104-108页

作者：刘志昊穆大业占玲俊章晓联武汉大学基础医学院免疫学系病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室和医学研究院武汉430071 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的采用两种结核分枝杆菌培养法(BACTEC MGIT 960培养法与罗氏(L?wenstein-Jensen,L-J)培养法)同时验证利福平(rifampin,RIF)在结核感染小鼠模型中的治疗效果,探讨采用BACTEC MGIT 960培养系统在结核感染的小鼠模型中的应用价值。方法... 详细信息

目的采用两种结核分枝杆菌培养法(BACTEC MGIT 960培养法与罗氏(L?wenstein-Jensen,L-J)培养法)同时验证利福平(rifampin,RIF)在结核感染小鼠模型中的治疗效果,探讨采用BACTEC MGIT 960培养系统在结核感染的小鼠模型中的应用价值。方法实验分为BACTEC MGIT 960培养组与L-J培养组,经尾静脉注射1.0×10~6 CFU/mL H37Rv菌液感染36只C57BL/6雌性小鼠,感染一周后18只小鼠采用利福平治疗四周,18只小鼠注射等量磷酸缓冲液(PBS)作为对照,用BACTEC MGIT 960快速培养与罗氏培养法对36只小鼠肺、脾及肝组织匀浆液进行培养。结果采用BACTEC MGIT 960培养法,RIF治疗组中肝、肺及脾组织培养物的报阳时间分别为(187.11±10.20) h、(347.22±12.70) h、(276.39±13.09) h,对照组为(142.50±11.70) h、(251.67±16.63) h、(230.28±7.22) h,组间对比差异有显著性(P<0.001);罗氏培养法,RIF治疗组中肝、肺及脾组织荷菌量分别为(5.15±0.15) log_(10) CFU、(3.30±0.23) log_(10) CFU、(3.40±0.25) log_(10) CFU,对照组荷菌量分别为(5.90±0.25) log_(10) CFU、(3.88±0.31) log_(10) CFU、(4.15±0.30) log_(10) CFU,组间对比差异有显著性(P<0.001)。结论采用BACTEC MGIT 960培养法和罗氏培养法进行荷菌量检测,其培养结果相符,但是前者检测出阳性结果时间平均缩短一半,并且区分度也较高,说明BACTEC MGIT 960培养法在动物模型的荷菌量检测中更有优势,可运用于结核感染动物模型中荷菌量的检测。

关键词：结核分枝杆菌 BACTEC MGIT 960 罗氏培养法小鼠模型

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人博卡病毒微滴数字PCR定量方法的建立

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中南民族大学学报（自然科学版） 2018年第3期37卷 32-36页

作者：邓幼平刘颖娟王笑臣刘佳明杨占秋赵东赤武汉大学中南医院儿科武汉430071 武汉大学中南医院检验科武汉430071 武汉大学医学院医学病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

为准确、快速地从临床鼻咽拭子样本中筛选出人博卡病毒(HBoV)感染的阳性样本,以HBoV-sh9基因的保守区序列为检测靶标合成引物和探针,建立了微滴数字PCR(dd PCR)检测HBoV的方法.结果表明:HBoV dd PCR方法具有较高的特异性,在(0.5~6.8)... 详细信息

为准确、快速地从临床鼻咽拭子样本中筛选出人博卡病毒(HBoV)感染的阳性样本,以HBoV-sh9基因的保守区序列为检测靶标合成引物和探针,建立了微滴数字PCR(dd PCR)检测HBoV的方法.结果表明:HBoV dd PCR方法具有较高的特异性,在(0.5~6.8)×10~3copies/μL HBoV DNA浓度范围内,具有良好的线性和精确度,定量限低至0.5 copies/μL.182份临床样本检测结果显示:HBoV感染的阳性率为8.24%.此建立的HBoV dd PCR方法在定量限、准确性和重复性上较常规PCR优势明显,不受样品基质和扩增效率的影响.

关键词：微滴数字聚合酶链式反应人博卡病毒拷贝数阳性率

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病毒与宿主细胞的糖基化修饰及相关功能

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生物化学与生物物理进展 2017年第10期44卷 898-907页

作者：向田章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室武汉大学医学研究院武汉大学基础医学院免疫学系武汉430071

病毒的复制和对宿主的入侵与自身结构蛋白的糖基化修饰密切相关.对于宿主而言,在病毒感染宿主和宿主抗病毒的过程中,宿主的糖基化过程一方面可抑制病毒的复制和入侵,另一方面可促进病毒对宿主的感染,抑制宿主糖苷酶可抑制病毒的复制.从... 详细信息

病毒的复制和对宿主的入侵与自身结构蛋白的糖基化修饰密切相关.对于宿主而言,在病毒感染宿主和宿主抗病毒的过程中,宿主的糖基化过程一方面可抑制病毒的复制和入侵,另一方面可促进病毒对宿主的感染,抑制宿主糖苷酶可抑制病毒的复制.从病毒方面来看,由于病毒自身缺乏糖基化修饰系统,病毒的糖基化过程是借宿主细胞内的合成系统对自身进行糖基化修饰.病毒的糖基化过程对病毒蛋白的折叠与稳定、病毒的感染和入侵、参与识别宿主细胞受体和参与病毒的免疫逃逸等过程起着重要的作用.随着糖基化研究技术的发展,以糖基化为基础的功能应用也越来越深入:如新型病毒疫苗和新型抗病毒药物的研制,以糖蛋白质组学研究为基础的质谱技术和生物信息学方法的发展,以及利用糖基化对病毒性疾病的诊断和治疗等,这些均为糖基化深入研究发展奠定了基础.本文就病毒与宿主细胞糖基化过程、相关功能以及研究应用等进展作一综述.

关键词：糖基化修饰病毒宿主

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HCV感染人肝癌Huh7.5.1细胞后差异表达的lncRNA及其对细胞增殖的影响

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病毒学报 2017年第2期33卷 192-199页

作者：付忠晓李舒向田谢焱章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室/湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室/武汉大学医学研究院/武汉大学基础医学院免疫学系武汉430071

丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是导致人类肝脏疾病的重要病原体。长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)参与了许多疾病和生物过程的调控,但是lncRNA在HCV感染中的作用还了解很少。本研究旨在筛选HCV感染人肝癌细胞系Huh7.5.... 详细信息

丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是导致人类肝脏疾病的重要病原体。长链非编码RNA(Long noncoding RNA,lncRNA)参与了许多疾病和生物过程的调控,但是lncRNA在HCV感染中的作用还了解很少。本研究旨在筛选HCV感染人肝癌细胞系Huh7.5.1后差异表达的长链非编码RNA(lncRNA),并研究相关lncRNA对细胞增殖及周期相关基因表达的影响。首先,分析HCV感染Huh7.5.1细胞72h前后lncRNA芯片表达谱;然后采用实时荧光定量PCR(Reverse tanscription-quantitative real time PCR,RT-qPCR)的方法对芯片中差异表达明显的17条lncRNA进行细胞水平验证;进一步采用CCK8以及ki67细胞增殖实验研究差异表达最明显的lncRNA对细胞增殖的影响;最后采用RT-qPCR探讨lncRNA对细胞周期蛋白基因cyclin B1/D1/E1的mRNA表达的影响。lncRNA芯片检测结果与RT-qPCR验证的相符的lncRNA中,发现HCV感染Huh7.5.1细胞后上调和下调最明显的两条lncRNA分别是RP11-288L9.1与ADAM20P1,而沉默RP11-288L9.1能抑制细胞周期蛋白基因cyclin B1/D1/E1的表达水平,并抑制Huh7.5.1细胞增殖。首次发现HCV感染后上调的RP11-288L9.1能促进细胞周期蛋白基因的表达水平和Huh7.5.1细胞增殖,另一种下调的ADAM20P1对细胞增殖影响不大。研究结果为HCV感染及肝癌细胞增殖提供了潜在的诊断标志物和治疗的新型靶点,具有一定的参考价值。

关键词：丙型肝炎病毒(HCV) 长链非编码RNA 细胞增殖细胞周期相关基因

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结核分枝杆菌Rv2645刺激ISG15的表达上升促进体外丙型肝炎病毒的增殖

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病毒学报 2017年第3期33卷 372-379页

作者：卢芳芳谭杨付忠晓刘鹏章晓联武汉大学病毒学国家重点实验室湖北省过敏及免疫相关疾病重点实验室武汉大学医学研究院武汉大学基础医学院免疫学系武汉430071

为研究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,***)与丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)感染之间的相关关系,本文研究毒性毒株*** H37Rv的RD13区中的Rv2645基因对免疫细胞中干扰素刺激基因(Interferonstimulated gene 15,ISG15)表达的影响,进而探讨ISG15的表达与HCV感染之间的相关性。利用携带Rv2645基因的无毒牛结核分枝杆菌卡介苗(Bacille calmette guerin,BCG)(即rBCG::Rv2645,rBCG)与亲本BCG分别感染小鼠或刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7,运用RT-qPCR以及蛋白印迹的方法检测,比较rBCG与BCG感染对小鼠CD4+T细胞及RAW264.7细胞中ISG15的mRNA及蛋白质表达的影响。同时克隆ISG15真核表达质粒和ISG15的沉默表达质粒-ISG15-shRNA,运用RT-qPCR及蛋白印迹分别检测ISG15过表达及沉默后,对HCV感染的人肝癌细胞系Huh7.5.1中HCV的mRNA、HCV非结构蛋白NS3及核心蛋白Core的表达。我们发现相对于BCG,携带Rv2645的BCG感染之后脾脏CD4+T细胞及体外RAW264.7中ISG15的mRNA及蛋白质的水平明显升高。此外,ISG15过表达导致Huh7.5.1中HCV的mRNA、NS3蛋白及Core蛋白的水平明显升高,而ISG15沉默后ISG15和HCV的mRNA的水平明显下调。本研究首次发现*** Rv2645能上调小鼠CD4+T细胞及巨噬细胞中ISG15的表达;而ISG15能促进Huh7.5.1中HCV增殖。本研究对阐明***毒性菌株H37Rv的Rv2645基因的功能,以及为研究MTB感染与HCV感染的分子机制提供参考依据。

关键词：结核分枝杆菌-M.tb Rv2645 丙型肝炎病毒(HCV) BCG::Rv2645 ISG15

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