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作者：黄碧海谢敏赵静雅张志凌王汉中庞代文生物医学分析化学教育部重点实验室武汉大学化学与分子科学学院病毒学国家重点实验室武汉 430072 中国科学院武汉病毒研究所武汉 430071

究以PRV (pseudorabies virus，猪伪狂犬病毒)病毒为模式病毒，利用囊膜病毒使用宿主细胞的膜系统构建其自身囊膜的特点，先构建一种生物素化的宿主细胞，然后再以这种生物素化细胞为宿主细胞扩增病毒，从而得到带有生物素标签的病毒。... 详细信息

究以PRV (pseudorabies virus，猪伪狂犬病毒)病毒为模式病毒，利用囊膜病毒使用宿主细胞的膜系统构建其自身囊膜的特点，先构建一种生物素化的宿主细胞，然后再以这种生物素化细胞为宿主细胞扩增病毒，从而得到带有生物素标签的病毒。通过这种生物素标签，可以方便的将偶联了SA的染料或者纳米材料等标记到病毒表面。

关键词：囊膜病毒宿主细胞生物素标记纳米材料猪伪狂犬病毒

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黑色素及谷胱甘肽通过抑制NF-κB途径的激活可有效抑制H_5N_1禽流感病毒感染

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中国生物化学与分子生物学报 2009年第4期25卷 364-372页

作者：张晓玲杨桥代俊顾潮江许振辉焦炳华中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室上海200433 病毒学国家重点实验室武汉大学生命科学学院湖北武汉430072 哥伦比亚大学病理与细胞生物学系

我国是H5N1高致病性禽流感频发区.为筛选天然药物用于H5N1禽流感的防治并研究其抗病毒感染的作用机制,本研究选取黑色素及谷胱甘肽(GSH)为候选药物,通过Hoechst33258荧光染色,观察了禽流感病毒(AIV)感染后的细胞形态变化;细胞凋亡流式... 详细信息

我国是H5N1高致病性禽流感频发区.为筛选天然药物用于H5N1禽流感的防治并研究其抗病毒感染的作用机制,本研究选取黑色素及谷胱甘肽(GSH)为候选药物,通过Hoechst33258荧光染色,观察了禽流感病毒(AIV)感染后的细胞形态变化;细胞凋亡流式细胞术定量分析表明,H5N1AIV感染可诱导宿主狗肾上皮细胞(MDCK)凋亡,而黑色素及GSH对其具有显著抑制作用(P<0.01);当20μg/ml黑色素及10mmol/LGSH共同作用时,抑制率高达89%(P<0.01);采用MTT法检测,黑色素及GSH可增强AIV感染后的宿主细胞存活率;病毒血凝素(Ha)基因的RT-PCR检测结果表明,黑色素及GSH可显著降低AIV在宿主细胞内的增殖(P<0.01);一氧化氮(NO)毛细管电泳(CE)激光诱导荧光检测显示,黑色素及GSH均可显著降低病毒感染诱导宿主细胞内的NO释放量(P<0.05);RT-PCR技术结合ELISA方法,分别分析了病毒感染后宿主细胞的诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧化酶(cyclooxygenase-2,COX-2)及核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在mRNA和蛋白水平表达的差异.结果表明,黑色素及GSH可抑制病毒感染诱导的iNOS与COX-2的基因及蛋白的表达(P<0.05),并进而抑制NF-κB途径的激活(P<0.01),从而可有效抑制HNAIV感染.

关键词： H5N1 禽流感病毒病毒感染黑色素谷胱甘肽 NF—κB途径

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面向现场的活病毒高灵敏检测

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分析化学 2009年第S1期37卷 828-828页

作者：赵蔚张万坡谢敏张志凌李津王汉中庞代文武汉大学化学与分子科学学院生物医学分析化学教育部重点实验室病毒学国家重点实验室武汉430072 中国科学院武汉病毒研究所武汉430071

禽流感病毒因为其高传染性,易致病性以及对人和禽类带来的危害,得到越来越多的关注.目前检测禽流感病毒方法主要有核酸检测,鸡胚病原分离等~([1]).

关键词：现场禽流感病毒核酸检测病原分离致病性传染性危害禽类鸡胚方法

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囊膜病毒的生物素标记

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分析化学 2009年第S1期37卷 439-439页

作者：黄碧海谢敏赵静雅张志凌王汉中庞代文生物医学分析化学教育部重点实验室武汉大学化学与分子科学学院病毒学国家重点实验室武汉430072 中国科学院武汉病毒研究所武汉430071

随着近年来多起突发性病毒疫情爆发,使人们对病毒的基础性研究工作越来越关注,而病毒的动态可视化分析作为一种直观,活体,实时的分析手段成为病毒研究领域的新热点.

关键词：囊膜病毒可视化分析基础性研究疫情爆发研究领域新热点突发性直观实时活体动态

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表没食子儿茶素没食子酸酯抗流感病毒作用的研究

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中国中药杂志 2008年第22期33卷 2678-2682页

作者：肖潇杨占秋石丽桥刘婧陈文武汉大学医学病毒学研究所病毒学国家重点实验室湖北武汉430071

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在体内外抗甲型流感病毒的作用。方法:在体外用MTT法检测EGCG对狗肾传代MDCK细胞的毒性浓度,用CPE法观察EGCG抑制甲型流感病毒的致细胞病变作用;在体内建立流感病毒感染小鼠模型,通过观察小鼠... 详细信息

目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)在体内外抗甲型流感病毒的作用。方法:在体外用MTT法检测EGCG对狗肾传代MDCK细胞的毒性浓度,用CPE法观察EGCG抑制甲型流感病毒的致细胞病变作用;在体内建立流感病毒感染小鼠模型,通过观察小鼠病死率、生命延长率及肺病变程度指标判定其对小鼠肺炎的抑制作用和染毒小鼠的死亡保护作用。结果:EGCG在体外能有效抑制甲型流感病毒CPE的产生;口服EGCG能减少流感病毒A H1N1病毒株感染小鼠的病死率,延长存活时间,减轻小鼠肺组织病变程度。结论:EGCG具有很好的抗甲型流感病毒的作用,呈剂量效应关系。

关键词： EGCG 流感病毒抗病毒作用

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湖北地区HFRS患者血清与欧洲汉坦病毒重组核抗原的反应性研究

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中华流行病学杂志 2008年第6期29卷 577-580页

作者：李晴陈文杨占秋厦门大学医学院基础医学部 361005 武汉大学医学病毒学研究所病毒学国家重点实验室

目的用欧洲汉坦病毒流行株制备重组核抗原，检测湖北地区HFRS患者血清中汉坦病毒特异性抗体，观察流行于不同地区汉坦病毒的相关性。方法收集湖北地区34例HFRS患者急性／恢复期血清，以ELISA法检测血清标本对欧洲汉坦病毒重组核抗原（... 详细信息

目的用欧洲汉坦病毒流行株制备重组核抗原，检测湖北地区HFRS患者血清中汉坦病毒特异性抗体，观察流行于不同地区汉坦病毒的相关性。方法收集湖北地区34例HFRS患者急性／恢复期血清，以ELISA法检测血清标本对欧洲汉坦病毒重组核抗原（rNP）的反应性。结果多不拉伐病毒（DOBV）-rNP对IgA抗体检出率最高，汉滩病毒（HTNV）-rNP对IgG抗体检出率最高，两者对IgM抗体检出率的差异无统计学意义；普马拉病毒（PUUV）-rNP对各种抗体检出率均低，但有3例患者急性期和恢复期标本对3种PUUV-rNP均有很强反应性。定量分析结果发现，IgM抗体水平急性期较高，IgA抗体水平急性期、恢复期均较高；IgA、IgG抗体水平恢复期均显著升高。结论 DOBV-rNP对湖北地区HFRS患者血清检出率高，IgA抗体水平在急性期和恢复期均较高，对疾病的监测具有重要意义；湖北地区可能存在PUU型和DOB型汉坦病毒流行。

关键词：肾综合征出血热汉坦病毒抗体水平

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核苷酸结合寡聚蛋白2在胃腺癌及其相关疾病组织中的表达及意义

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中华消化杂志 2008年第9期28卷 636-637页

作者：魏柏朱尤庆汤晓燕侯炜赵颖岚武汉大学中南医院消化科 430071 武汉大学医学病毒学研究所病毒学国家重点实验室

核苷酸结合寡聚域蛋白质家族（NOD）广泛存在于植物、线虫、脊椎动物和人类的细胞内，在遗传上高度保守。其中NOD2基因是第一个被发现的人类克罗恩病（CD）易感基因，随着分子生物学和遗传学研究的深入，已被认为是肠道上皮细胞的细菌... 详细信息

核苷酸结合寡聚域蛋白质家族（NOD）广泛存在于植物、线虫、脊椎动物和人类的细胞内，在遗传上高度保守。其中NOD2基因是第一个被发现的人类克罗恩病（CD）易感基因，随着分子生物学和遗传学研究的深入，已被认为是肠道上皮细胞的细菌识别感受分子。本实验旨在探讨NOD2蛋白在胃腺癌及其相关疾病中的表达及幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）感染对其表达的影响。

关键词：相关疾病胃腺癌核苷酸蛋白2 NOD2基因分子生物学组织肠道上皮细胞

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胃癌及癌前病变组织中幽门螺杆菌感染与NOD2和TLR9蛋白表达的相关性

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中华普通外科杂志 2008年第11期23卷 866-868页

作者：魏柏朱尤庆汤晓燕侯炜赵颖岚武汉大学中南医院消化内科 430071 武汉大学医学病毒学研究所病毒学国家重点实验室

目的研究NOD2和TLR9蛋白在胃癌及癌前病变组织中的表达情况以及幽门螺杆菌（Hp）感染对陔蛋白表达的影响。方法用C13呼气试验和快速尿素酶试验确定感染情况，用免疫组化法测定40例慢性浅表性胃肖炎，84例慢性萎缩性胃炎，48例胃溃疡，8... 详细信息

目的研究NOD2和TLR9蛋白在胃癌及癌前病变组织中的表达情况以及幽门螺杆菌（Hp）感染对陔蛋白表达的影响。方法用C13呼气试验和快速尿素酶试验确定感染情况，用免疫组化法测定40例慢性浅表性胃肖炎，84例慢性萎缩性胃炎，48例胃溃疡，80例胃腺癌组织中NOD2和TLR9蛋白的表达情况。结果在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃溃疡、胃腺癌中NOD2阳性表达率分别为35％、21％、33％、40％，TLR9刚性表达率分别为15％、12％、21％、22％。在同一病变中Hp阳性组NOD2及TLR9表达强于Hp阴性组，其中Hp阳性的慢怍浅表性胃炎、胃溃疡、肠上皮化生、中再度小典型增生和胃癌组织中NOD2表达与Hp阴性组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论胃腺癌、癌前病变以及幽门螺杆菌感染能增强胃上皮细胞中NOD2和TLR9蛋白的表达，提示二者存胃黏膜天然免疫过程中可能起到重要作用。

关键词：胃肿瘤螺杆菌,幽门胃溃疡胃炎,萎缩性

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湖北地区汉滩病毒与普马拉病毒及多布拉伐病毒的血清学交叉反应研究

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免疫学杂志 2008年第4期24卷 438-441页

作者：李晴罗凡杨占秋厦门大学医学院基础医学部福建厦门361005 武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

目的研究湖北地区汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)与普马拉病毒(Puumala virus,PUUV)、多布拉伐病毒(Dobrava virus,DOBV)血清学交叉反应。方法以酵母菌表达的PUUV、DOBV、HTNV重组核衣壳蛋白(recombinant nucleocapsid protein,rNP)为包被抗原,ELISA法定性、定量分析湖北地区HTN型急性/恢复期血清中IgA、IgG、IgM抗体,比较疾病早晚期血清学交叉反应变化。结果DOB-rNP与HTN型血清中IgA、IgG、IgM抗体交叉反应性较高,PUU-rNp对HTN型血清交叉反应很低;IgA、IgG抗体交叉反应在恢复期血清中均增高,且IgA抗体交叉反应更多更强。结论湖北地区HTN型血清与DOBV存在广泛交叉反应,与PUUV交叉反应少。各交叉反应在恢复期增高对汉滩病毒血清学研究具重要意义。

关键词：汉滩病毒普马拉病毒多布拉伐病毒 ELISA 血清学交叉反应

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异源蓝舌病毒dsRNA与PolyI：C诱导人源体细胞产生IFN-β的比较研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第3期28卷 217-220页

作者：戴莹陈冬娥高婧胡俊董长垣武汉大学医学病毒研究所武汉大学病毒学国家重点实验室 430071 武汉大学公共卫生学院流行病学和统计学系

目的探讨异源动物蓝舌病毒dsRNA诱导人源细胞产生干扰素（IFN）的能力。方法借助体外培养系统，利用ELISA技术检测IFN诱导剂多聚次黄苷酸-胞苷酸（PolyI：C）、蓝舌病毒（BTV）及BTV dsRNA3种不同处理因素作用后，培养细胞上清液中IFN-... 详细信息

目的探讨异源动物蓝舌病毒dsRNA诱导人源细胞产生干扰素（IFN）的能力。方法借助体外培养系统，利用ELISA技术检测IFN诱导剂多聚次黄苷酸-胞苷酸（PolyI：C）、蓝舌病毒（BTV）及BTV dsRNA3种不同处理因素作用后，培养细胞上清液中IFN-β的含量，以比较研究其诱导人肺癌细胞A549和人胚肺细胞HEL产生IFN-β的能力和特征。结果这3种因子均能诱导人肺癌A549细胞和人正常肺细胞HEL产生IFN-β，BTVdsRNA诱导IFN-β产生的能力显著高于PolyI：C和BTV。浓度高的BTVdsRNA诱导细胞产生的IFN-β水平高，说明二者之间存在剂量依赖性。BTVdsRNA对不同性质的人源细胞（人肺癌A549细胞、人正常肺细胞HEL）具有不同的诱导产生IFN-β的能力，诱导人正常肺细胞HEL产生IFN-β的能力显著地高于诱导人肺癌细胞A549产生IFN-β的能力（P〈0．05）。结论裸露的BTVdsRNA分子能有效地诱导人源细胞产生IFN-β；结合BTV和dsRNA对人的安全性以及人类正在努力寻找新的内源性IFN诱导剂的事实，可以推断BTV dsRNA具有发展成内源性IFN诱导剂之潜能。

关键词：蓝舌病毒 BTV dsRNA 多聚次黄苷酸-胞苷酸干扰素

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