检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2007年第8期37卷 675-678页

作者：孙瑜隆柳纪省魏虎来李学瑞兰州大学医学试验中心甘肃兰州730000 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

根据猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白基因(mrp)的序列,设计并合成了1对特异性引物,以青海株的基因组DNA为模板扩增了mrp基因ORF1序列。将PCR产物进行了T/A克隆,转化大肠杆菌,鉴定成功获得目的片段后,将其定向亚克隆到pET-28a(+)中,构建了原... 详细信息

根据猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白基因(mrp)的序列,设计并合成了1对特异性引物,以青海株的基因组DNA为模板扩增了mrp基因ORF1序列。将PCR产物进行了T/A克隆,转化大肠杆菌,鉴定成功获得目的片段后,将其定向亚克隆到pET-28a(+)中,构建了原核表达质粒pET-28a-mrp,并将其转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,出现了与预期目的蛋白一致的外源蛋白带(27.0 ku)。Western-blot分析表明,该融合蛋白具有MRP的抗原表位。研究结果为今后开展该病的免疫学研究奠定了一定基础。

关键词：猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白融合表达

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男性不育症患者X染色体雄激素受体基因外显子1、3、4状态筛选研究

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中国优生与遗传杂志 2007年第6期15卷 15-17,24页

作者：魏魏董长垣刘军苗聪秀长治市妇幼保健院 046011 武汉大学医学院病毒学国家重点实验室长治医学院生殖研究所

目的研究雄激素受体（androgen receptor,AR）基因与特发无精症之间的关系。方法运用分子生物学方法分别检测35名无精症患者和20名对照组正常男性雄激素受体基因的3个功能区的DNA片段,结果实验组患者和正常男性AR外显子1中（CAG）n重复... 详细信息

目的研究雄激素受体（androgen receptor,AR）基因与特发无精症之间的关系。方法运用分子生物学方法分别检测35名无精症患者和20名对照组正常男性雄激素受体基因的3个功能区的DNA片段,结果实验组患者和正常男性AR外显子1中（CAG）n重复数在11~27之间,两组无显著差别,35例无精症患者用PCR扩增出雄激素受体外显子3（exon3）片段35例（100%）和外显子4（exon4）片段34例（97.15%）,20名正常已生育男性扩增出AR外显子3（exon3）片段20例（100%）和外显子4（exon4）片段20例（100%）。结论（CAG）n基因多态性与男性精子生成障碍无相关性,exon4缺失通过影响靶细胞核的类固醇激素-受体结合物数量在精子发生中的作用需进一步探讨。

关键词：男性不育症雄激素受体基因 (CAG)n多态性外显子3 外显子4

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武汉地区人群A组轮状病毒感染的分子流行病学监测

武汉地区人群A组轮状病毒感染的分子流行病学监测

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：杨占秋王远虹小林宣道周敦金周璇朱泽荣刘满清彭劲松病毒学国家重点实验室武汉大学医学病毒研究所日本札幌医科大学卫生系武汉市疾病预防控制中心

目的:比较武汉地区成人和儿童腹泻患者中 A 组轮状病毒的流行特征和基因型分布,对成人和儿童腹泻患者中 A 组轮状病毒的关联作些探讨,并对轮状疫苗 LLR 投入使用前后轮状病毒流行情况作初步分析。材料:2000.12—2006.12采集武

关键词：

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2000-2007武汉市A组轮状病毒分子流行病学监测及疫苗LLR使用后的流行趋势初步分析

2000-2007武汉市A组轮状病毒分子流行病学监测及疫苗LLR使用后的...

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第七届全国病毒学学术研讨会暨第二届武汉现代病毒学国际研讨会

作者：王远虹杨占秋小林宣道周敦金周璇朱泽荣刘满清彭劲松武汉市疾病预防控制中心武汉大学医学院病毒研究所病毒学国家重点实验室日本札幌医科大学卫生系

目的:比较成人和儿童腹泻患者中 A 组轮状病毒的流行特征和基因型分布,对成人和儿童腹泻患者中 A 组轮状病毒的关联作些探讨。并对轮状疫苗 LLR 投入使用前后轮状病毒流行情况作初步分析。材料:2000.12—2006.12采集武汉市8家医

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空心莲子草类盐抗汉坦病毒作用研究

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中国药学杂志 2006年第22期41卷 1713-1715页

作者：侯炜杨占秋毛琳李晶晶肖红程丽文利周俊武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071

目的明确空心莲子草类盐抗汉坦病毒（HV）的作用机制。方法采用噻唑兰（MTT）比色法检测细胞活性、免疫荧光法（IFA）和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测病毒滴度和病毒核酸，以确定空心莲子草类盐细胞内抗HV作用。结果空心莲子草... 详细信息

目的明确空心莲子草类盐抗汉坦病毒（HV）的作用机制。方法采用噻唑兰（MTT）比色法检测细胞活性、免疫荧光法（IFA）和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测病毒滴度和病毒核酸，以确定空心莲子草类盐细胞内抗HV作用。结果空心莲子草类盐对HV无直接灭活作用，也不能阻止HV的吸附，这表现在各药物浓度组病毒滴度均在5．7以上；空心莲子草类盐有抑制HV生物合成作用，在质量浓度为40-320mg·L^-1内，随着药物质量浓度的增加，病毒滴度、细胞培养液中病毒核酸的阳性稀释度逐渐降低，抗病毒指数逐渐增加，并表现出量效关系，药物治疗组的病毒滴度明显低于病毒对照组（P〈0.05）。结论空心莲子草类盐在体外通过抑制病毒生物合成而发挥抗HV作用。

关键词：汉坦病毒空心莲子草体外抗病毒实验

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盐酸阿比朵尔抗腺病毒7型的实验研究

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武汉大学学报（医学版） 2006年第1期27卷 66-68页

作者：石丽桥杨占秋何静刘媛媛肖红武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071

目的:明确抗病毒新药盐酸阿比朵尔体外抗腺病毒7型(ADV-7)的作用方式。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性、病毒滴定3种方法从药物抗病毒生物合成、药物直接杀伤病毒以及药物抗病毒吸附3方面检测盐酸... 详细信息

目的:明确抗病毒新药盐酸阿比朵尔体外抗腺病毒7型(ADV-7)的作用方式。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性、病毒滴定3种方法从药物抗病毒生物合成、药物直接杀伤病毒以及药物抗病毒吸附3方面检测盐酸阿比朵尔的作用方式。结果:盐酸阿比朵尔对ADV-7无直接杀伤作用,也不能阻止ADV-7的吸附和穿入,各用药组均出现典型的CPE,但盐酸阿比朵尔能明显抑制ADV-7的生物合成作用,对细胞的半数毒性浓度(CC50)为85.37 mg/L,对ADV-7的半数有效浓度(IC50)为15.39 mg/L,治疗指数(TI)为5.55,且随着药物浓度的增加,病毒所致的CPE效应逐渐减弱,培养液中的病毒滴度也逐渐降低,而病毒抑制率则明显升高。结论:盐酸阿比朵尔在体外通过抑制病毒生物合成而发挥抗ADV-7的作用,其具体作用机制有待进一步研究。

关键词：盐酸阿比朵尔腺病毒7型药物抗病毒

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盐酸阿比朵尔抗呼吸道合胞病毒机制初探

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武汉大学学报（医学版） 2006年第1期27卷 69-71页

作者：何静杨占秋石丽桥刘媛媛肖红武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071

目的:明确盐酸阿比朵尔抗吸道合胞病毒(RSV)Long株的活性并探讨其抗病毒机制。方法:通过细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,观察盐酸阿比朵尔抗RSV的作用。结果:盐酸阿比朵尔的半数毒性浓度(TD50)为85.39 mg/L,当该药... 详细信息

目的:明确盐酸阿比朵尔抗吸道合胞病毒(RSV)Long株的活性并探讨其抗病毒机制。方法:通过细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,观察盐酸阿比朵尔抗RSV的作用。结果:盐酸阿比朵尔的半数毒性浓度(TD50)为85.39 mg/L,当该药浓度为25 mg/L时,药物抗病毒生物合成组、药物直接作用组、药物抗吸附4 h组、药物抗病毒吸附8 h组的病毒抑制率分别能达到81.61%,79.57%,40.39%和78.60%。4组相应的药物半数有效浓度(ED50)为11.52,8.74,25.36和10.40 mg/L。结论:盐酸阿比朵尔在体外能明显抑制RSV引起的CPE效应,病毒抑制率随药物浓度的增加而增高,盐酸阿比朵尔能通过多种途径发挥抗RSV的作用。

关键词：盐酸阿比朵尔呼吸道合胞病毒抗病毒作用

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蓝舌病毒HbC_3株致人宫颈癌HeLa细胞死亡方式的研究

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武汉大学学报（医学版） 2006年第5期27卷 553-555,563,i0001页

作者：陈杰董长垣胡俊张蔚英朱珺武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071

目的:研究蓝舌病毒湖北株致人宫颈癌HeLa细胞死亡方式及其作用机制。方法:原位末端标记(TUNEL法)观察病毒诱导细胞凋亡情况;激光扫描共聚焦显微镜检测荧光标记的细胞核及内质网变化;萤光照度仪检测病毒诱导细胞Caspase-3/7,Caspase-8,Ca... 详细信息

目的:研究蓝舌病毒湖北株致人宫颈癌HeLa细胞死亡方式及其作用机制。方法:原位末端标记(TUNEL法)观察病毒诱导细胞凋亡情况;激光扫描共聚焦显微镜检测荧光标记的细胞核及内质网变化;萤光照度仪检测病毒诱导细胞Caspase-3/7,Caspase-8,Caspase-9活性变化。结果:凋亡染色未见明显凋亡细胞,共聚焦检测见细胞核膜不完整,染色质分散,有的凝集在核膜周围,部分染色质外溢,内质网分散,混浊不清,细胞与细胞之间分界不清;萤光照度仪检测酶活性可见Caspase-3/7,Caspase-8,Caspase-9活性均无明显变化。结论:蓝舌病毒湖北株诱导HeLa细胞胀亡而发挥其抑瘤作用。

关键词：溶癌病毒蓝舌病毒湖北株胀亡人宫颈癌HeLa细胞

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蓝舌病毒HbC_3株诱导人肝癌细胞Hep-3B的凋亡

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中国病毒学 2006年第6期21卷 556-559页

作者：汪艳雷森林郭淑芳高婧戴莹董长垣武汉大学医学院病毒学国家重点实验室湖北武汉430071 武汉大学医学结构生物学研究中心湖北武汉430071

采用MTT法检测BTV-HbC3对Hep-3B细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测BTV-HbC3诱导Hep-3B细胞的凋亡情况,透射电镜观察感染BTV-HbC3的Hep-3B细胞超微结构变化。结果表明BTV-HbC3对Hep-3B细胞具有抑制效应,并呈浓度和时间依赖性;BTV-HbC3... 详细信息

采用MTT法检测BTV-HbC3对Hep-3B细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测BTV-HbC3诱导Hep-3B细胞的凋亡情况,透射电镜观察感染BTV-HbC3的Hep-3B细胞超微结构变化。结果表明BTV-HbC3对Hep-3B细胞具有抑制效应,并呈浓度和时间依赖性;BTV-HbC3作用下Hep-3B细胞呈现凋亡特征;BTV-HbC3能有效感染人肝癌细胞株Hep-3B,并在其中有限地复制,同时抑制该细胞增殖,诱导其进入凋亡。本研究证实了蓝舌病毒HbC3株对人肝癌细胞Hep-3B的杀伤及其诱导凋亡作用,结合本室已反复证实该病毒不感染人源正常细胞的事实,提示了该病毒具有抗人肝癌之潜能。

关键词：蓝舌病毒HbC3(BTV-HbC3) 人肝癌细胞(Hep-3B) 凋亡溶癌病毒

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线粒体在蓝舌病毒HbC_3株诱导人肝癌细胞凋亡中的作用

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武汉大学学报（医学版） 2006年第4期27卷 425-428,F0002页

作者：汪艳易有荣崔冶建董长垣武汉大学医学院病毒学国家重点实验室武汉430071 武汉大学医学结构生物学研究中心武汉430071

目的:探讨BTV-HbC3对人肝癌Hep-3B细胞线粒体功能和膜电位的影响及其与细胞凋亡关系。方法:利用透射电镜和荧光显微镜观察Hep-3B细胞感染BTV-HbC3在24,36,48 h的凋亡情况与其线粒体形态变化;噻唑蓝(MTT)法检测其线粒体功能;流式细胞仪... 详细信息

目的:探讨BTV-HbC3对人肝癌Hep-3B细胞线粒体功能和膜电位的影响及其与细胞凋亡关系。方法:利用透射电镜和荧光显微镜观察Hep-3B细胞感染BTV-HbC3在24,36,48 h的凋亡情况与其线粒体形态变化;噻唑蓝(MTT)法检测其线粒体功能;流式细胞仪检测经Rh123/PI染色的BTV-HbC3诱导该细胞线粒体跨膜电位(△Ψm)和Annexin V/PI染色的细胞凋亡率。结果:Hep-3B细胞感染病毒在24,36,48 h时可导致线粒体功能下降,同时使线粒体膜电位显著降低,细胞凋亡率显著增加。结论:BTV-HbC3通过诱导凋亡来抑制人肝癌细胞的生长,其机制与线粒体跨膜电位下降有关。

关键词：蓝舌病毒HbC3 细胞凋亡线粒体膜电位人肝癌细胞

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