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武汉大学学报（医学版） 2006年第4期27卷 425-428,F0002页

作者：汪艳易有荣崔冶建董长垣武汉大学医学院病毒学国家重点实验室武汉430071 武汉大学医学结构生物学研究中心武汉430071

目的:探讨BTV-HbC3对人肝癌Hep-3B细胞线粒体功能和膜电位的影响及其与细胞凋亡关系。方法:利用透射电镜和荧光显微镜观察Hep-3B细胞感染BTV-HbC3在24,36,48 h的凋亡情况与其线粒体形态变化;噻唑蓝(MTT)法检测其线粒体功能;流式细胞仪... 详细信息

目的:探讨BTV-HbC3对人肝癌Hep-3B细胞线粒体功能和膜电位的影响及其与细胞凋亡关系。方法:利用透射电镜和荧光显微镜观察Hep-3B细胞感染BTV-HbC3在24,36,48 h的凋亡情况与其线粒体形态变化;噻唑蓝(MTT)法检测其线粒体功能;流式细胞仪检测经Rh123/PI染色的BTV-HbC3诱导该细胞线粒体跨膜电位(△Ψm)和Annexin V/PI染色的细胞凋亡率。结果:Hep-3B细胞感染病毒在24,36,48 h时可导致线粒体功能下降,同时使线粒体膜电位显著降低,细胞凋亡率显著增加。结论:BTV-HbC3通过诱导凋亡来抑制人肝癌细胞的生长,其机制与线粒体跨膜电位下降有关。

关键词：蓝舌病毒HbC3 细胞凋亡线粒体膜电位人肝癌细胞

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发热患者SARS冠状病毒抗体分析

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中国公共卫生 2006年第4期22卷 441-442页

作者：褚小刚龚作炯黄书岚刘建军王鲁文孙小梅叶林柏武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室武汉430071 武汉大学人民医院武汉大学生命科学院

目的了解临床发热患者中是否存在严重急性呼吸综合征（SARS）冠状病毒（SARS-CoV）隐性感染或亚临床感染。方法对2003年5月～7月，SARS流行期间湖北地区临床发热患者373例血清进行SARS冠状病毒（SARS-CoV）抗体（IgG、IgM、N蛋白抗体）... 详细信息

目的了解临床发热患者中是否存在严重急性呼吸综合征（SARS）冠状病毒（SARS-CoV）隐性感染或亚临床感染。方法对2003年5月～7月，SARS流行期间湖北地区临床发热患者373例血清进行SARS冠状病毒（SARS-CoV）抗体（IgG、IgM、N蛋白抗体）酶联免疫吸附法（ELISA）检测和分子生物学（RT—PCR）检测。结果373例发热患者中，检出冠状病毒抗体阳性者24例，阳性率6．43％（24／373），其中SARSIgG抗体、IgM抗体、N蛋白抗体阳性率分别为0．54％，1．34％和5．09％，但SARS-CoVRT—PCR检测均为阴性。结论临床发热患者可能存在SARS-CoV隐性或亚临床感染，患者体内产生针对SARS-CoV的保护性抗体，应具有免疫力和抵抗力。

关键词：严重急性呼吸综合征(SARS) SARS冠状病毒隐性感染 SARS抗体

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中国湖北汉族人群HLA-DRB1基因多态性研究

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武汉大学学报（医学版） 2006年第6期27卷 748-752页

作者：孙孝云侯炜罗凡丁晓华杨光锡谷达夫石罔贤杨占秋武汉大学期刊社武汉4300722 武汉大学医学院病毒学国家重点实验室/病毒学研究所武汉430071 日本福岛县立医科大学微生物系

目的:调查湖北汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DRB1基因多态性,获得完整准确的遗传学数据。方法:应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法对213名随机选取无亲缘关系的湖北籍汉族健康体检者或健康献血员进行HLA-PDRB1基因型检测。结... 详细信息

目的:调查湖北汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DRB1基因多态性,获得完整准确的遗传学数据。方法:应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法对213名随机选取无亲缘关系的湖北籍汉族健康体检者或健康献血员进行HLA-PDRB1基因型检测。结果:在213名正常个体中,发现基因频率(GF)较高的有DRB1*1501-1502(GF=11.0%)、*1101-1105(GF=8.5%)、*0901(GF=6.8%)、*1301-1302(GF=6.6%)、DRB4*0101(GF=19.0%)、DRB5*0101(GF=16.9%),低频率等位基因是DRB1*04、*1001和*0101-0103。结论:从基因水平分析了HLA-DRB1基因在湖北汉族群体中的分布特征,提供了一套比较完整准确的DRB1基因频率,为人类学和疾病相关性等研究提供了重要的参考数据。

关键词：遗传多态性 HLA—DRB1基因基因频率等位基因

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人肝癌细胞感染蓝舌病毒HbC_3株超微结构的动态观察

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肿瘤防治研究 2006年第12期33卷 856-858页

作者：汪艳雷森林郭淑芳易有荣董长垣武汉大学医学院病毒学国家重点实验室 430071 武汉大学医学院结构生物学研究中心 430071

目的探讨蓝舌病毒靶向抗肿瘤的细胞生物学机制。方法利用透射电镜观察蓝舌病毒HbC3株感染人肝癌细胞Hety-3B的形态发生学以及该病毒引起的细胞的病理改变。结果 BTV-HbC3以受体介导的胞饮作用穿入细胞，溶酶体水解病毒外衣壳，使之成... 详细信息

目的探讨蓝舌病毒靶向抗肿瘤的细胞生物学机制。方法利用透射电镜观察蓝舌病毒HbC3株感染人肝癌细胞Hety-3B的形态发生学以及该病毒引起的细胞的病理改变。结果 BTV-HbC3以受体介导的胞饮作用穿入细胞，溶酶体水解病毒外衣壳，使之成为亚病毒粒子，胞浆内有病毒包涵体及未装配成熟的亚病毒颗粒。随后亚病毒颗粒装配上外层蛋白结构，形成成熟的病毒粒子。病毒感染细胞12～18h时，细胞以挤出的方式释放病毒并达到高峰。18-48h时，病毒进入超感染期，大量细胞发生病变，出现细胞凋亡和溶解。结论一旦蓝舌病毒感染Hep-3B肿瘤细胞即可在细胞内增殖并诱导该肿瘤细胞进入凋亡，死亡的肿瘤细胞释放出的病毒粒子并再次感染其他肿瘤细胞，直至将全部肿瘤细胞杀灭，其溶瘤方式为链式反应。

关键词：蓝舌病毒HbG(BTV-HbC3) 人肝癌细胞(Hep-3B) 形态发生学溶癌病毒

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草血竭抗流感病毒的研究

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武汉大学学报（医学版） 2006年第1期27卷 72-74页

作者：罗凡侯炜杨占秋郝建新锡谷达夫森修一武汉大学医学院病毒学研究所/病毒学国家重点实验室武汉430071 湖北中医学院药学系武汉430061 日本福岛县立医科大学微生物系

目的:为研究草血竭体外抗流感病毒作用机理。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性及空斑减数实验测定病毒滴度,以确定草血竭两个有效成分细胞内抗流感病毒的作用。结果:实验发现草血竭水煮醇沉干浸膏和草血竭纯化部分既不能阻断流... 详细信息

目的:为研究草血竭体外抗流感病毒作用机理。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性及空斑减数实验测定病毒滴度,以确定草血竭两个有效成分细胞内抗流感病毒的作用。结果:实验发现草血竭水煮醇沉干浸膏和草血竭纯化部分既不能阻断流感病毒侵入细胞,也不能抑制流感病毒的生物合成,且各药物浓度组均出现典型的细胞病变效应(CPE);但草血竭水煮醇沉干浸膏与草血竭纯化部分能够明显杀灭病毒,即随药物浓度的增加,CPE特征逐渐减弱,病毒滴度也逐渐降低,而空斑减数率明显升高。结论:草血竭在体外通过直接灭活作用发挥抗流感病毒作用。

关键词：草血竭流感病毒抗病毒作用

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基因芯片技术在病毒诊断中的应用

基因芯片技术在病毒诊断中的应用

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湖北省微生物学会第十届理事会分析微生物专业委员会第四次学术会议

作者：杨占秋梁雨武汉大学医学部病毒学研究所／病毒学国家重点实验室武汉大学医学部病毒学研究所／病毒学国家重点实验室

随着人类基因组(测序)计划(Human genome project)的逐步实施以及分子生物学相关学科的迅猛发展,越来越多的动植物、微生物基因组序列得以测定,基因序列数据正在以前所未有的速度迅速增长。然而,怎样去研究如此众多基因在生命过程中所... 详细信息

随着人类基因组(测序)计划(Human genome project)的逐步实施以及分子生物学相关学科的迅猛发展,越来越多的动植物、微生物基因组序列得以测定,基因序列数据正在以前所未有的速度迅速增长。然而,怎样去研究如此众多基因在生命过程中所担负的功能就成了全世界生命科学工作者共同的课题。为此,建立新型杂交和测序方法以对大量的遗传信息进行高效、快速的检测、分析就显得格外重要了,基因芯片技术就应运而生。

关键词：基因芯片技术冠状病毒平行检测病毒诊断

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乙肝病毒X基因真核表达的载体构建及对人肝癌Hep-3B细胞的作用

乙肝病毒X基因真核表达的载体构建及对人肝癌Hep-3B细胞的作用

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2006年度学术研讨会

作者：刘军朱珺胡俊张蔚英高平董长垣武汉大学医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室武汉大学医学院病毒学国家重点实验室分子病毒与癌研究室

本文拟以乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)X基因与原发性肝癌Hep-3B细胞作模型系统,探讨乙型肝炎病毒HBV X基因致原发性肝细胞癌(Primary Hepatocellular Carcinoma,PHCC)的细胞和分子机理研究,亦为后续的肝癌基因治疗提供理论依据。

关键词： HBV X基因真核表达载体pCDNA3．1 人肝癌Hep-3B细胞

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湖北地区肾综合征出血热患者HLA-DRB基因多态性研究

湖北地区肾综合征出血热患者HLA-DRB基因多态性研究

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2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会

作者：侯炜杨占秋丁晓华锡谷达夫石罔贤罗凡病毒学国家重点实验室/武汉大学医学部医学病毒研究所病毒学国家重点实验室/武汉大学医学部医学病毒研究所病毒学国家重点实验室/武汉大学医学部医学病毒研究所日本福岛医科大学微生物系日本福岛医科大学微生物系病毒学国家重点实验室/武汉大学医学部医学病毒研究所

目的探讨人类白细胞抗原复合体(HLA)-DRB基因多态性与肾综合征出血热(HFRS) 之间的关联性。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)DNA分型技术对湖北地区汉族1 14例HFRS患者和2 13例健康对照进行HLA-DRB基因分型,同时应用RT-PC... 详细信息

目的探讨人类白细胞抗原复合体(HLA)-DRB基因多态性与肾综合征出血热(HFRS) 之间的关联性。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)DNA分型技术对湖北地区汉族1 14例HFRS患者和2 13例健康对照进行HLA-DRB基因分型,同时应用RT-PCR方法对湖北地区HFRS患者所感染的汉坦病毒(HV)进行病毒分型。结果DRB1*0401-0411、*1001、 *1101-1105基因频率在HFRS患者组较正常对照组明显升高(RR=13．87、9．72、2．00,x

关键词：肾综合征出血热 DRB HLA-DRB 基因多态性湖北地区

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快速检测伪狂犬病毒荧光定量PCR技术建立及应用

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中国病毒学 2006年第5期21卷 485-489页

作者：万超温国元潘兹书张楚瑜熊中良杨峻艾地云武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室湖北武汉430072 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所湖北武汉430209

以伪狂犬病毒(PRV)保守的gE基因序列为参考,设计、优化出一对特异的PCR引物和一条TaqMan荧光探针,结合RotorGene检测系统,建立一种快速定量检测伪狂犬病毒的荧光定量PCR技术。该方法线形范围为1.0×102-1.0×107拷贝/μL,灵敏度... 详细信息

以伪狂犬病毒(PRV)保守的gE基因序列为参考,设计、优化出一对特异的PCR引物和一条TaqMan荧光探针,结合RotorGene检测系统,建立一种快速定量检测伪狂犬病毒的荧光定量PCR技术。该方法线形范围为1.0×102-1.0×107拷贝/μL,灵敏度达102拷贝/μLDNA,比常规PCR高10倍。检测的特异性明显高于常规PCR,同时避免了常规PCR因电泳造成的污染。应用该技术检测66例猪组织或鼻咽拭子样品,阳性42份,阳性检出率为63.6%(42/66)。与病毒分离培养、常规PCR相比较结果显示,该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能定量检测等优点,该方法可用于猪场PRV感染的快速定量检测和肉类食品进出口检疫。

关键词：伪狂犬病毒荧光定量PCR 定量检测

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季德胜蛇药片体外抗疱疹病毒的药效学研究

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山东中医药大学学报 2006年第3期30卷 258-259页

作者：何静杨占秋刘媛媛肖红梁桃圣武汉大学医学院病毒学研究所病毒学国家重点实验室湖北武汉430071 江苏南通精华制药有限公司江苏南通226005

季德胜蛇药片是一种传统的中成药,由重楼、地锦草、蟾酥皮等10多味中草药组成,具有清热解毒、活血化瘀、消肿止痛等功效,主治毒蛇、毒虫咬伤。近年来临床研究发现,该药还具有治疗带状疱疹等疾病的功效…1,提示该药具有抗疱疹病毒的作用... 详细信息

季德胜蛇药片是一种传统的中成药,由重楼、地锦草、蟾酥皮等10多味中草药组成,具有清热解毒、活血化瘀、消肿止痛等功效,主治毒蛇、毒虫咬伤。近年来临床研究发现,该药还具有治疗带状疱疹等疾病的功效…1,提示该药具有抗疱疹病毒的作用。我们选择临床上常见、人群中多发的单纯疱疹病毒(herpes simplexvirus,HSV)和水痘带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)作为研究对象,通过细胞内抗病毒实验,研究该药在体外抗HSV和VZV的作用,为这两种病毒感染的治疗提供新的实验依据。[第一段]

关键词：季德胜蛇药片单纯疱疹病毒Ⅰ型水痘带状疱疹病毒抗病毒作用

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